微生物检验实验室微球菌属检验标准操作规程

微生物限度检查仪操作规程一、目的本操作规程旨在规范微生物限度检查仪的使用，确保检查结果的准确性和可靠性。

二、适用范围本操作规程适用于所有使用微生物限度检查仪进行微生物检测的实验室。

三、设备准备1.检查仪器：确保检查仪器处于正常工作状态，且已经进行了日常的校准和验证。

2.试剂准备：准备好所需要的试剂和培养基，并按照说明书进行储存和使用。

四、操作流程1.样品准备-将待测样品进行预处理，如稀释、过滤等操作，以确保检测结果的准确性。

-按照要求取样品，确保样品的代表性，并且避免外部污染。

-将样品转移至无菌容器中，避免交叉污染。

2.检测操作-打开检查仪器的电源，确保所有参数显示正常。

-设置检测参数，包括样品体积、培养基类型等。

-在无菌条件下，将样品转移到培养基中，确保样品均匀分布。

-在培养基上绘制分类孔，确保每个样品有足够的空间生长。

-关闭培养皿，确保培养皿与培养基接触紧密，并有利于微生物的生长。

-将培养皿放入检查仪器中，确保培养皿的摆放位置正确。

-启动检查仪器，按照仪器的要求进行检测。

-检测结束后，关闭检查仪器，将培养皿取出并妥善处理。

五、数据分析与记录1.对于生长的微生物，根据标准方法进行鉴定，并记录鉴定结果。

2.对于未生长的微生物，根据标准方法进行计数，并记录计数结果。

3.对于得到的结果，根据相关标准进行数据分析，并判断样品是否符合微生物限度要求。

4.将检测结果和分析记录在相关的数据表格或文件中，确保数据的可追溯性。

六、设备维护与清洁1.检查仪器的日常维护工作包括：定期校准、保养和维修。

2.定期清洁检查仪器的内部和外部部件，确保检查仪器的清洁和卫生。

3.根据仪器的使用说明书，进行规定的维护和保养工作。

七、风险控制1.在操作过程中，严格遵守相应的操作规程和安全要求，确保个人和环境安全。

2.如发现异常情况或设备故障，应立即停止操作，并及时报告相关人员进行处理。

3.定期开展培训和教育，提高操作人员的专业知识和操作技能。

建立微生物限度检查法标准操作规程，规范操作，保证结果的准确性。

成品、辅料、内包装袋及纯化水的检验。

微生物限度检验人员本检验操作规程依据中国药典 2022 年版四部《通则 1105 非无菌产品微生物 限度检查：微生物计数法》和《通则 1106 非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查 法》进行检查。

1、微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。

2、计数方法 本法包括平皿法、薄膜过滤法。

3、计数培养基合用性检查和供试品计数方法合用性检查 供试品微生物计数中所 使用的培养基应进行合用性检查。

供试品的微生物计数方法应进行方法合用性试验， 以确定采用的方法适合于该产品的微生物计数。

4、菌种及菌液的制备4.1 试验用菌株的传代次数不得超过 5 代(从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第 0 袋)，并采用适宜的菌种保藏技术进行保藏。

计数培养基合用性检查和计数方法合用 性试验。

4.2 菌液制备 按规定培养各试验菌株。

取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽 孢杆菌、 白色念珠菌的新鲜培养物， 用 PH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或者 0.9%无菌 氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入 3-5ml 含 0.05% (ml/ml )聚山梨酯 80 的 PH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或者 0.9%无菌氯化钠溶液， 将孢子洗脱。

采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管中，用含 0.05% (ml/ml )聚xxxxxxx 中药饮片厂ZL ·SOP ·05 ·062-01 页 数 制定日期 年 月 日 修订日期 审核日期 年 月 日 颁发部门 批准日期 年 月 日 生效日期 质量管理部、质量控制科 编号制定人审核人批准人分发部门 共 9 页 年 月 日 年 月 日质量管理部山梨酯80 的PH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或者0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。

微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。

本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤，确保检查结果的准确性和可靠性。

二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品，包括食品、医药和化妆品等。

三、操作步骤1. 准备工作：清洁实验室工作台面和仪器设备，准备所需的培养基和试剂，并确保仪器设备的正常运转。

2. 取样：按照产品的取样标准，从不同批次或不同位置进行取样，并确保取样的代表性。

3. 样品制备：将取样的产品进行样品制备，包括稀释、搅拌和过滤等步骤，以便于后续的微生物检查。

4. 培养：将样品接种在适当的培养基上，根据不同的微生物种类和要求进行培养，并进行恒温培养一定时间。

5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数，并按照标准方法进行结果的记录和确认。

6. 结果判定：将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对，根据结果作出是否合格的判定。

7. 结果记录：将微生物限度检查的结果进行记录，包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息，并将结果报告给相关部门或供应商。

四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能，严格按照操作规程执行。

2. 实验室应保持清洁、卫生，并进行定期消毒和验证。

3. 实验室设备应定期维护和校准，确保设备的准确性和可靠性。

4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准，存放在干燥、阴凉、避光的环境中。

5. 检查结果应及时报告，并根据结果采取相应的控制措施。

以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容，希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查，确保产品质量和安全。

微生物限度检品送检标准操作规程
一、目的：为使需要进行微生物检查的样品免受污染，保证检查结果的准确性，特制定本操作规程。

二、适用范围：适用于需要进行微生物检查的样品。

三、责任者：品质管理部微生物检验人员。

四、正文：
1、进行微生物检查的样品是指产品成品、生产用水、净化区沉降菌检查
后的平皿，
生产工人手检查后的试管等。

2、取样方法：
2.1 产品成品：直接取样，包装在进行菌检时方可打开；
2.2 生产用水：用灭菌后的三角瓶装取适量；
2.3 平皿及试管：密封后用牛皮纸包好；
3、送检：用车送至菌检室，时间不得超过取样后的 4 小时。

4、检验人员尽快进行菌检，并出具检验报告。

微生物操作规程
《微生物操作规程》
微生物操作是实验室中常见的操作，但由于微生物具有一定的危害性，因此对微生物操作有严格的规程。

以下是对微生物操作规程的一些要点：
1. 穿着适当的防护装备：在进行微生物操作时，实验人员应该穿着适当的防护装备，包括实验服、手套、口罩和护目镜等。

这可以有效预防微生物和其代谢产物对皮肤和呼吸系统造成危害。

2. 操作实验室的卫生消毒：在进行微生物操作前，需要对实验室进行必要的卫生消毒，确保操作环境的清洁与无菌环境。

3. 严格的操作流程：在进行微生物操作时，需要严格按照规程进行操作，避免出现操作失误导致微生物泄漏或污染的情况发生。

4. 正确处理微生物废弃物：在微生物操作结束后，实验人员需要将微生物废弃物进行正确处理，避免对环境和人体造成危害。

5. 定期进行培训和检查：对从事微生物操作的实验人员需要进行定期的培训和检查，以提高其微生物操作的安全性和准确性。

总之，微生物操作规程是保证微生物操作安全的基础，严格遵
守微生物操作规程可以有效预防微生物的危害，并保障实验人员和环境的安全。

临床微生物实验室细菌鉴定指南（上）录入时间:2010-11-22 10:40:51 来源：温州医学院附属医院一．细菌的鉴定步骤1．鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。

2．对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。

（我们这里一般都是预先纯化培养）3．对待鉴定的菌种进行革兰染色，观察形态（G+c，G–b，G–c，G+b），做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。

要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好，参考鉴定质控单。

4．按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。

另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。

5．复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。

⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。

首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变细菌对染料的通透性）。

第一步：以结晶紫初染（染色液Ⅰ）第二步：以卢戈氏碘液媒染（染色液Ⅱ）第三步：用95%乙醇脱色（染色液Ⅲ）第四步：最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ）⑵．触酶实验(H2O2实验)：a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。

b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。

要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进行实验。

c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。

d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，链球菌属阴性。

临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。

微⽣物检验标准操作规程1 ⽬的建⽴微⽣物限度检查的操作规程，为微⽣物检查⼈员提供正确的标准操作⽅法。

2 范围适⽤于原辅材料、内包装材料、半成品、成品的微⽣物限度检查。

3 责任QA对本规程的有效执⾏承担监督检查责任，QC对本规程的实施负责。

4 程序4.1 简述: 微⽣物限度检查法系指检查⾮规定灭菌制剂及其原、辅料受到微⽣物污染程度的⼀种检查⽅法，包括染菌量及控制菌的检查。

螨，属于节肢动物门，蛛形纲，蜱螨⽬。

种类繁多，分布甚⼴。

其⽣活习性各异，分为⾃由⽣活和寄⽣⽣活两种类型。

在⼟壤、池沼、江河和湖海⾥，动、植物体上，贮藏⾷品和药品中，都可能有它们的存在。

药品可因其原料、⽣产过程或包装、运输、贮存、销售等条件不良，受到螨的污染。

螨可蛀蚀损坏药品，使药品变质失效，并可直接危害⼈体健康或传播疾病。

能引起⽪炎及消化系统、泌尿系统、呼吸系统等的疾病。

因此，药品特别是中成药，必须进⾏活螨检查。

4.2 器⽫、仪器及⽤具。

4.2.1 玻璃器⽫：250ml锥形瓶、250ml具塞三⾓烧瓶、研钵（陶瓷制，直径10-12cm）、培养⽫（90mm）、量筒（100ml）、试管（18×180mm）及塞、吸管（1ml分度0.01,10ml 分度0.1）、注射器(20或30ml)、注射针头、载玻⽚、盖玻⽚、玻璃消毒缸（带盖）。

4.2.2 ⽤具：⼤、⼩橡⽪乳头（放于⼲净带盖的容器中，并应定期⽤70%-75%⼄醇溶液浸泡）,⽆菌⾐、帽、⼝罩、⼿套灭菌，备⽤, 显微镜、放⼤镜（5-10倍）、实体显微镜、解剖针（尖端宜尖细且粗糙，否则不易挑取体表光滑的螨体）、发丝针（由⼀根长约10cm的⼩⾦属棒，将其⼀端磨成细尖，另取长约1.5cm的头发⼀根，以其长度的⼀半紧贴在⾦属棒的尖端上，⽤细线将其缠紧，然后粘上加拿⼤树胶或油漆，即得。

适⽤于挑取⾏⾛缓慢且体表刚⽑较多的螨体）、⼩⽑笔（即绘图⽑笔。

适⽤于挑取活动快的螨类，笔锋宜尖细，以免螨体夹在笔⽑之间）、载玻⽚、盖玻⽚、酒精灯、培养⽫或⼩搪瓷盘（内衬⿊⾊纸⽚）、扁形称量瓶（⾼3cm、宽6cm）。

食品微生物实验室操作规程1. 实验室介绍本实验室是专门进行食品微生物研究的实验室，主要用于检测食品中的微生物污染程度、菌落计数和微生物鉴定等工作。

为保障实验结果的准确性和实验人员的安全，制定了以下实验室操作规程。

2. 实验前准备2.1 实验人员在进入实验室前应穿戴实验服，并佩戴帽子、口罩和手套，尽量减少污染源的产生。

2.2 实验前需要检查实验室的消毒情况，确保操作台、试验器具和其他设备的清洁度满足实验要求。

2.3 实验前需要准备好所需的培养基、试剂和实验器具，并进行必要的消毒处理，以防止外源性微生物的污染。

3. 样品处理3.1 样品采集：在进行实验前，实验人员需要根据实验要求，选取符合要求的食品样品进行采集。

采集时需要注意避免外界环境污染，并尽快将样品送到实验室进行处理。

3.2 样品预处理：根据实验项目要求，对样品进行以下处理：去除外表污物、切碎或研磨等。

3.3 样品稀释：根据实验要求，将样品进行适当的稀释，以保证实验所需的微生物数量在可计数范围内。

4. 细菌培养与计数4.1 培养基制备：根据实验要求准备所需的培养基，并按照说明书配制培养基的浓度和pH值。

4.2 细菌分离：将样品中的微生物进行分离培养。

根据实验要求，将适量的样品接种到培养基中，并进行相应的温度和时间培养。

4.3 细菌计数：通过落菌计数法或涂布平板法，对细菌进行计数。

根据实验要求，在培养基上进行菌落计数，并记录结果。

5. 微生物鉴定5.1 细菌鉴定：根据细菌的形态、生理和生化特性，进行细菌的初步鉴定。

通过显微镜观察菌落形态和细胞形态，以及进行相关的生理和生化试验，进行进一步的鉴定。

5.2 真菌鉴定：根据真菌的产孢器、菌丝和孢子形态等特征，进行真菌的初步鉴定。

通过显微镜观察菌落形态和微观形态，以及进行相关的生理和生化试验，进行进一步的鉴定。

5.3 结果验证：对鉴定结果进行复核和验证。

通过对鉴定结果进行交叉验证和对照，确保鉴定结果的准确性。

微生物检验操作规程微生物检验操作规程一、实验室的准备工作1.确保实验室环境整洁卫生，空气流通。

2.检查实验室设备及试剂的完好性，如有损坏或过期的试剂应予以更换。

3.准备所需的培养基、试剂和培养器具，并确保其质量符合要求。

4.准备好必要的个人防护用品，如实验手套、口罩、护目镜、实验服等。

二、标本采集和处理1.标本的采集应遵循无菌操作的原则，采集器具需经过高温高压消毒处理。

2.将采集的标本迅速送至实验室，避免暴露于空气中。

3.对于液体标本，如尿液、血液等，应进行无菌操作并进行适当的稀释。

4.对于固体标本，如组织、分泌物等，应进行无菌取样，并进行适当的处理。

三、培养基的准备和使用1.根据需要，准备所需的培养基，并按照说明书进行正确的配制。

2.确保培养基的无菌性，防止细菌、真菌等污染。

3.使用培养基前应进行质控试验，确保培养基的质量符合要求。

4.在使用培养基前，要检查培养基是否出现变质、褪色等异常情况，若有发现，应立即更换。

四、微生物的分离和培养1.将标本取适量，在无菌条件下均匀涂抹于培养基表面，避免重叠。

2.将涂抹好的培养基置于细菌培养箱中，设置适当的温度和湿度，促使微生物的生长。

3.培养箱内不宜存放过多的培养基，以免影响空气流通和温度控制。

4.定期观察培养基的生长情况，并进行记录，一般培养时间为24小时至48小时。

五、微生物的鉴定和鉴定1.根据菌落的形态、大小、颜色等特征，初步判断微生物的种类。

2.利用显微镜观察菌液或菌落的形态、数量、运动性等特征，进一步鉴定微生物。

3.对于不易鉴定的微生物，可使用生化试剂或分子生物学方法进行鉴定。

4.鉴定微生物的结果应进行记录，并与对应的标准对照互相核对。

六、微生物的灭活和处理1.工作台和实验器具在使用前后应进行消毒，以防止微生物的传播。

2.将已鉴定的微生物进行灭活处理，可使用高温高压或化学消毒剂。

3.遵循规定将已处理的微生物进行妥善的处置，防止对环境和人员造成污染和危害。

QW-8.2.3-04
微生物检验操作规程
1、实验前用0.2%过氧乙酸擦净台面及四周，放好需用的实验器材
及各种溶液，开紫外灯消毒40-60分钟。

2、进入无菌室前应用肥皂洗手，然后用75%酒精球棉将手擦干净。

3、进入无菌间必须穿的专用工作服、帽及拖鞋、口罩，应放在无
菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。

4、使用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使
用的器皿，不能放置再用，消毒用器皿放置不得超过一周。

5、从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位及试管或平
皿边。

6、接种样品必须在酒精灯前操作，接种样品时，吸管从包装中取
出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。

7、实验完毕，清洁瓷砖台面。

8、用过的器材进行整理，污染细菌的器材需经高压灭菌或煮沸消
毒。

9、实验者在实验后用肥皂清洗双手或将双手浸泡于0.2%过氧乙
酸溶液中3分钟，用清水冲洗，再用肥皂清洗双手。

10、换下的隔离衣、帽等进行高压消毒，拖鞋放回原处。

11、用毕，再开紫外灯消毒40—60分钟。

12、无菌室和缓冲间每周大扫除一次，保持整洁。

13、每月进行一次紫外线对空气消毒效果测定，如灯管发黑，超过
使用期限，及时更换紫外灯管。

微球菌属检验标准操作规程1.概述微球菌属包括藤黄微球菌、玫瑰色微球菌、里拉微球菌、西宫微球菌、卡氏微球菌、活跃微球菌和易变微球菌等9个菌种。

藤黄微球菌是微球菌属中的代表种。

2.标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3.鉴定3.1形态与染色：革兰阳性球菌，菌体比葡萄球菌大，单个、成双、四联排列或立体包裹状不规则团块。

3.2 培养特性：藤黄微球菌在血琼脂平板上菌落小于葡萄球菌，呈圆形、突起、光滑、不透明、黄色菌落；在营养琼脂上菌落呈黄色。

3.3 生化反应：触酶、氧化酶试验阳性，胆汁七叶苷、精氨酸双水解酶、枸橼酸盐和硝酸盐还原试验均为阴性。

3.4 鉴别要点3.4.1 革兰阳性球菌，菌体较大，菌落呈黄色，触酶试验阳性。

3.4.2 微球菌属各菌种间的鉴别：见表5-323.4.3 与葡萄球菌的鉴别：见表5-33表5-32 微球菌属各菌种的生物学特性生化反应藤黄微球菌里拉微球菌易变微球菌玫瑰色微球菌活跃微球菌卡氏微球菌西宫微球菌不动微球菌盐生微球菌色素黄乳白黄粉红红浅橙桔黄乳白无葡萄糖O/F - - + + - + V - + 甘油- - - - - + - - +胆汁七叶苷- - - - + + - - - 精氨酸- - - - - - - + -硝酸盐- - + + - - V - -37℃中生长+ + + + - + + + + 65g/L氯化钠+ + + + - + - + + 枸橼酸盐- - + - - - - - - 动力- - - - + - - - -注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴性，“V”为11%~89%菌株阳性。

表5-33 微球菌属与葡萄球菌的鉴别方法微球菌葡萄球菌葡萄糖O/F氧化发酵氧化酶试验+ -杆菌肽试验+ -呋喃唑酮抑制试验- +注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴性，“V”为11%~89%菌株阳性。

4.操作步骤4.1涂片染色观察菌落特征，在血平板上挑取可以菌落，涂片染色镜检。

微生物实验操作规程
1. 实验目的
本操作规程旨在确保微生物实验的安全进行，并保证实验结果的准确性和可靠性。

2. 实验器材准备
- 高温灭菌器
- 密封培养皿
- 不锈钢接种环
- 培养基
- 显微镜
- 实验台
3. 实验步骤
3.1. 准备工作
1. 确保实验台面干净整洁，并消毒实验器材。

2. 检查培养基是否符合要求，如有需要，根据实验要求进行调配。

3.2. 培养菌种
1. 使用无菌的不锈钢接种环在培养基表面划线，接种菌种。

避
免污染其他区域。

2. 密封培养皿，标记上菌种信息和日期，放入高温灭菌器中进
行培养。

3.3. 现场观察
1. 从高温灭菌器取出培养皿，置于实验台上。

2. 使用显微镜观察菌落的形态和生长情况。

记录实验结果。

3.4. 数据处理
1. 将观察到的数据整理成表格或图表。

2. 分析数据并得出结论。

4. 实验注意事项
- 操作过程中要佩戴实验手套，避免污染。

- 实验器材要经过高温灭菌处理，确保无菌状态。

- 实验完毕后及时清理实验台面和器材，保持实验环境的卫生。

- 严格遵守实验操作规程，避免操作失误和意外发生。

5. 实验结果分析
根据实验结果分析，我们可以得出结论并进一步探索微生物的特性和应用领域。

以上为微生物实验操作规程，详细描述了实验的步骤和注意事项，希望能对实验操作提供指导和帮助。

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> 注：以上内容仅供参考，实际操作请根据实验要求和实验室安全规定进行。

微生物限度检查标准操作规程正文：一、目的：规范微生物限度检查的标准操作，确保所采用的微生物限度检验方法准确，试验结果可靠。

二、范围：适用于本公司各种样品的微生物限度检查。

三、职责：质量中心化验员负责本规程的执行。

质量中心管理人员负责本规程执行情况的监督检查。

四、内容：1.试验条件1.1试验环境检验必须在环境洁净度C级下的局部A级的单向流空气区域内进行。

1.2试验仪器、用具、培养基按照3.1.1 与3.2.1项下准备。

2.供试液的制备供试液若需加热时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。

供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。

常用供试液制备方法如下：2.1.液体供试品取供试品10ml，加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。

油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。

水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液，例如：纯化水、注射用水、饮用水、药液类、各验证项下微生物样品。

2.2.固体、半固体或黏稠性供试品取供试品10g，加入PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。

必要时加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀(例如无水葡萄糖、氯化钠、乳酸钠溶液等)。

2.3内包材供试品供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。

2.3.1内包膜、塑料输液袋取单层膜50cm2，剪碎，置于无菌锥形瓶内，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇1分钟，静置10分钟，即得供试液。

2.3.2 软管取软管26cm（表面积100cm2），剪碎，置于无菌锥形瓶内，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇1分钟，静置10分钟，即得供试液。

2.3.3加药塞、输液塞、口管、口盖、聚异戊二烯塞芯取供试品按表面积100cm2（加药塞9个、输液塞4个、口管4个、口盖9个、聚异戊二烯塞芯17个），置于无菌锥形瓶内，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇1分钟，静置10分钟，即得供试液。

微生物室操作规程
《微生物室操作规程》
一、微生物室操作规程的目的
微生物室是进行微生物实验的重要场所，为了保障实验室人员的安全和实验结果的准确性，制定并严格执行微生物室操作规程是必不可少的。

二、微生物室操作规程的适用范围
本规程适用于所有进入微生物室进行操作的人员，包括实验室技术人员、研究人员以及实习生等。

三、微生物室操作规程的要求
1. 进入微生物室前，必须穿戴好实验服、手套、口罩等个人防护用具，并进行必要的消毒处理。

2. 操作前，必须对所需使用的实验器材进行必要的消毒或灭菌处理。

3. 在进行微生物实验时，必须遵守无菌操作的原则，避免污染。

4. 实验结束后，必须对操作台面、实验器材等进行必要的清洁和消毒处理。

5. 微生物室内严禁食品饮料，严禁随意乱丢杂物。

6. 实验室人员必须严格遵守微生物废弃物的处理要求，确保微生物废弃物不对外泄露。

四、微生物室操作规程的实施
1. 实验室负责人应该对微生物室操作规程进行充分的宣传和培训，并确保所有操作人员能够严格遵守规程。

2. 实验室负责人应定期进行微生物室操作规程的检查和复核，发现问题及时进行整改。

3. 实验室负责人应建立微生物室操作规程的记录和档案，并保留一定的时限。

五、微生物室操作规程的违反处理
对于违反微生物室操作规程的人员，实验室负责人应及时进行处罚和教育，严肃处理违规行为，以确保实验室的安全和秩序。

六、微生物室操作规程的总结
微生物室操作规程的制定和执行不仅是一项管理工作，更是对实验室安全和实验结果准确性的保障。

只有所有操作人员能够严格遵守规程，才能确保微生物实验的顺利进行和实验结果的准确性。

微生物检验操作规程1.0目的建立微生物检验标准操作规程，保证检验操作规范化。

2.0适用范围适用于本公司相关的微生物检验活动的全过程。

3.0职责3.1 微生物检验员负责微生物检验的全过程；3.2 QC主管负责监督检查本规程的有效实施。

4.0作业内容4.1无菌操作要求4.1.1 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。

4.1.2专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。

4.1.3 接种样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。

4.1.4 进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。

4.1.5 从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。

4.1.6 接种样品、转种细菌必须在酒精灯旁操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞（即硅氟胶塞）都要通过火焰消毒。

4.1.7 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处。

4.1.8 吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。

4.2无菌间使用要求4.2.1 无菌间内应保持清洁，工作后用消毒溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。

4.2.2无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。

4.2.3处理和接种样品时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。

4.3消毒灭菌要求4.3.1灭菌前准备（1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。

（2）装培养基的三角瓶，内容物不应超过总体积的2/3（例如500mL的三角瓶最好装300～350mL培养基，以防再次加热融化时爆沸）。

微生物限度检验操作规程微生物限度检验操作规程1.目的：建立微生物限度检验的基本操作，为检查人员提供正确的操作规程。

2.范围：本标准适用于化验室微生物限度检查。

3.责任：化验室检验操作人员对本规程的执行负责。

目录5.1实验条件 (2)5.2操作步骤 (2)5.2.1培养基的制备 (2)5.2.2实验前准备 (2)5.2.3供试品溶液的制备 (2)5.2.4检验方法 (3)5.2.5擦拭样的微生物限度检验 (4)5.2.6纯化水、注射用水的微生物限度检验 (4)5.3培养 (4)5.4菌落计数 (4)5.5菌数报告规则 (5)5.6控制菌检查 (5)5.6.1耐胆盐革兰阴性菌 (6)5.6.2大肠埃希菌 (6)5.6.3沙门菌 (6)5.6.4铜绿假单胞菌 (7)5.6.5金黄色葡萄球菌 (8)5.6.6梭菌 (8)5.6.7白色念珠菌 (9)5.7注意事项 (9)4.定义：4.1供试品：待测定微生物限度的样品包括原料、辅料、中间产品、包装材料等。

4.2CFU：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。

5.内容：5.1实验条件微生物限度检查应在环境洁净度C级下的局部洁净度A级的单向空气区域内进行，检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止交叉污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。

5.2操作步骤5.2.1培养基的制备按《微生物培养基管理规程》的要求准备相应的培养基，也可用市售成品预灌装培养基。

5.2.2实验前准备操作人员按《物料进出洁净区卫生管理规程》的要求将物品、物料传入QC实验室洁净区。

5.2.3供试品溶液的制备5.2.3.1水溶性供试品无特殊规定时取10g或10mL供试品，加入适量pH 7.0无菌氯化钠蛋白胨溶液或者其他合适的灭菌溶液，配制为1：10 的供试品溶液，也可以使用其他的配制比率。

如果样品具有抗菌活性，可以将灭活剂添加到稀释剂中。

如果供试品含菌量较大，则用相同的稀释剂按10倍递增稀释法准备1：10、1：102、 1：103等稀释级的供试液。

1 目的规范微生物限度检验操作，确保检验结果准确、可靠。

2 依据《中国药典》2010版。

3 范围本标准适用于微生物限度检验。

4 责任中心化验室负责人：对本规程的实施负责。

中心化验室检验人员：严格按照本规程执行检验操作。

5 程序5.1 执行标准：《中国药典》2010版。

5.2 抽样：照《取样标准操作规程》进行。

6 细菌、霉菌及酵母菌计数计数方法包括平皿法和薄膜过滤法。

检查时，按已验证的计数方法进行供试品的细菌、霉菌及酵母菌菌数的测定。

6.1 设备、仪器及用具6.1.1 设备微生物限度检测室室、净化工作台、生化培养箱（30-350C）、生化培养箱（23-280C）、电热恒温水浴锅、烘箱、电冰箱、灭菌柜、紫外灯等。

6.1.2 仪器及器皿显微镜、托盘天平、锥形瓶、研钵、培养皿、量筒、试管及塞、吸管、薄膜过滤器等。

6.1.3 用具大、小橡皮乳头，洁净工作服、口罩、医用手套、接种环、酒精灯、酒精棉球、灭菌剪刀、灭菌镊子、不锈钢药匙、试管架、火柴、记号笔、薄膜过滤膜等。

6.2 试液6.2.1 消毒液A．0.1% 新洁尔灭溶液：供手消毒、擦拭操作台面用。

B．75%乙醇溶液6.2.2 稀释液、试剂及配制A．PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.3g、蛋白胨1.0g，加纯化水1000ml，微温溶解，滤清，分装，1210C灭菌15分钟。

B．聚山梨酯80C．吐温80D．单硬脂酸甘油酯6.3 培养基营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基6.4 操作方法6.4.1 试验前准备6.4.1.1 将供试品及所有已灭菌的平皿、锥形瓶、试管、吸管（1ml、10ml）、量筒、稀释剂等移至传递窗内。

每次试验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中出入操作间。

6.4.1.2 开启微生物检测室紫外灯和空调净化系统，并使其工作不低于30min。

6.4.1.3 操作人员进入一更，用洗手液或肥皂洗手，烘干。