细菌耐药性与病原学检查

如何进行医院感染的病原学检测（病原学检测包括病原体培养分子生物学检测和抗药性检测等）医院感染是指在医疗机构内接受诊疗的患者在入院48小时后，出现并非由入院时已有的、也并非在患者入院时暴露的、在出院后还在担负着健康保健任务的医务人员、患者及其家属中发生的、由社区中其他感染者或病原体引入的感染。

医院感染对患者的健康构成严重威胁，因此，对医院感染的病原体进行病原学检测是非常重要的。

医院感染的病原学检测包括病原体培养分子生物学检测和抗药性检测等。

病原体培养是目前最常用的病原学检测方法之一。

它通过将样本（如血液、尿液、呼吸道分泌物等）接种于含有丰富营养成分的培养基上，利用适宜的温度、湿度和气体条件，使病原体在培养基上生长和繁殖。

通过观察培养基上是否出现细菌或真菌的生长，可以确定感染的病原体种类，从而进行有针对性的治疗。

在进行病原体培养之前，需要采集合适的样本。

不同类型的医院感染需要采集不同的样本，如血液感染需要进行血液培养，呼吸道感染需要进行痰液培养等。

样本的采集需要严格按照规范操作，以确保样本的准确性和有效性。

另一种常用的病原学检测方法是分子生物学检测。

分子生物学检测利用核酸扩增技术，通过扩增病原体的特定基因片段，来检测病原体的存在。

与病原体培养相比，分子生物学检测具有更高的敏感性和特异性，可以检测到一些难于培养的病原体，并且可以在较短的时间内得到结果。

目前，PCR（聚合酶链式反应）是最常用的核酸扩增技术之一。

抗药性检测是评估病原体对抗生素药物的耐药性的方法。

它可以帮助医生选择合适的抗生素治疗方案，以提高治疗的效果。

目前，常用的抗药性检测方法包括最小抑制浓度法（MIC法）、分子生物学检测和快速检测方法等。

最小抑制浓度法通过测定不同抗生素对病原体的最低有效浓度，来评估其对抗生素的敏感性。

分子生物学检测可以检测病原体的抗药基因，从而判断其抗药性水平。

快速检测方法利用了一些高通量技术，可以在较短的时间内对大量抗生素和病原体进行耐药性检测。

临床微生物检验和细菌耐药性检测分析
临床微生物检验是一项非常重要的检查项目，可以帮助医生确定病人是否感染了微生物，如何治疗，以及如何预防传染。

临床微生物检验包括血液、尿液、呼吸道标本、皮肤
和软组织标本，以及其他体液标本。

微生物检验的第一步是收集样品。

这个过程需要非常谨慎，避免污染和误差。

收集样
品的方式取决于标本类型，例如，血液标本需要专业技术人员进行采血，呼吸道标本需要
患者进行咳嗽或使用吸痰器进行采集。

收集标本后，标本将送往实验室进行检查。

在实验室中，技术人员将对标本进行分离和培养。

这个过程需要一定的时间，通常需
要几天或几周。

分离和培养的目的是分离和生长微生物，使其形成可以观察的集落。

技术
人员还需要确定微生物的种类，这可以通过显微镜和生化试剂等工具来完成。

除了确定微生物种类之外，临床微生物检验还可以通过细菌耐药性检测来确定微生物
的耐药性。

细菌耐药性是指微生物对某些药物的抵抗力。

细菌耐药性通常是由一些基因突
变引起的，这些基因突变可以通过基因测序技术来检测。

如果微生物具有细菌耐药性，那么医生就需要考虑使用其他药物来治疗病人。

此外，
医生还需要考虑如何防止细菌的传播，例如，在医院环境中采取预防措施，如使用洗手液、穿戴防护装备等。

总之，临床微生物检验和细菌耐药性检测是诊断和治疗感染疾病的重要步骤。

这些过
程需要专业技术人员进行，需要严格遵守操作规程，确保结果的准确性和可靠性。

细菌耐药性检测方法 Prepared on 22 November 2020细菌耐药性检测方法1、细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS标准，通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。

也可通过以下方法进行检测：（1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、万古霉素中介的葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌及氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌等。

（2）折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点MIC），而不使用测定MIC时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感试验。

（3）双纸片协同试验：双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。

若指示药敏纸片在朝向阿莫西林/克拉维酸方向有抑菌圈扩大现象（协同），说明测试菌产生超广谱β-内酰胺酶（4）药敏试验的仪器化和自动化：全自动细菌鉴定及药敏分析仪如：Vitek-2、BD-Pheonix、Microscan等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的MIC值。

2．β-内酰胺酶检测：主要有碘淀粉测定法（iodometric test）和头孢硝噻吩纸片法（nitrocefin test）。

临床常用头孢硝噻吩纸片法，β-内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。

如β-内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药；表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素（包括氨基、羧基和脲基青霉素）耐药。

3．耐药基因检测：临床可检测的耐药基因主要有：葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的MecA基因,大肠埃希菌与β-内酰胺类耐药有关的blaTEM、blaSHV、blaOXA基因，肠球菌与万古霉素耐药有关的vanA、vanB、vanC、vanD基因。

检测抗菌药物耐药基因的方法主要有：PCR扩增、PCR-RFLP分析、PCR-SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动DNA 测序4．特殊耐药菌检测（1）耐甲氧西林葡萄球菌检测：对 1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10㎜，或其MIC≥4цg/ml 的金黄色葡萄球菌和对1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤17㎜，或MIC≥цg/ml的凝固酶阴性葡萄球菌被称为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）。

患者住院期间抗菌药物治疗前的病原学送检概况概述本文档旨在总结患者住院期间抗菌药物治疗前的病原学送检概况。

通过进行病原学送检，可以确定患者体内存在的病原微生物种类及其对抗菌药物的敏感性，为临床医生合理选择抗菌药物提供依据。

病原学送检流程1. 病史采集：医生在了解患者病情后，将采集相关的病史信息，包括就诊前的病情、用药史、暴露史等。

2. 标本采集：根据患者的具体病情，医生会选择合适的标本进行采集，如血液、尿液、呼吸道分泌物、伤口分泌物等。

3. 标本处理：采集到的标本需要经过一系列的处理步骤，如离心、培养基接种等，以分离纯种的病原微生物。

4. 菌种鉴定：通过对分离得到的纯种菌株进行形态学、生理生化等实验，确定病原微生物的种类。

5. 药敏试验：将已鉴定的病原微生物与不同的抗菌药物进行接触，观察其对药物的敏感性，从而为临床医生选择合适的抗菌药物提供指导。

病原学送检的意义1. 指导临床用药：通过病原学送检，可以明确患者感染的具体病原微生物种类及其对抗菌药物的敏感性，为临床医生选择合适的抗菌药物提供科学依据，提高治疗效果。

2. 防止抗菌药物滥用：病原学送检结果可以帮助医生避免盲目使用广谱抗生素，减少抗菌药物滥用，降低细菌耐药性的风险。

3. 优化医疗资源利用：合理使用抗菌药物可以减少不必要的药物费用支出，提高医疗资源的利用效率。

送检注意事项1. 及时采集标本：在患者住院前或抗菌药物使用前尽早采集标本，以提高送检结果的准确性。

2. 标本采集技术：标本采集时要遵循无菌操作原则，避免污染和误诊。

3. 送检要求明确：在送检时，需明确要求进行病原学鉴定和药敏试验，以获取更全面的结果。

结论患者住院期间抗菌药物治疗前的病原学送检是一项重要的临床实践，通过该检查可以明确患者感染的病原微生物种类及其对抗菌药物的敏感性，为临床医生选择合适的抗菌药物提供科学依据，从而提高治疗效果，减少抗菌药物滥用，并优化医疗资源的利用。

在进行病原学送检时，需要注意及时采集标本、正确采集技术和明确送检要求。

细菌耐药性监测制度1.当病人可疑或诊断为细菌性感染时，主管医师应尽早地开展病原学检查及药物敏感试验，力争明确病原菌。

2.病原学检查应争取在使用抗菌药物之前留取标本，如果已经使用抗菌药物则在下一次用药前留取。

3.通常采取的标本有血液、尿液、呼吸道分泌物、粪便、手术伤口或创面的分泌物等。

采取标本时必须按照相应的要求进行，以获得合格的标本，同时注意防止标本的污染。

采取标本后立即送微生物室处理，若暂时未能送检，血标本、脓液等标本则需室温保存，禁止放入冰箱内保存；尿、痰液、皮肤组织（损伤、脓肿、烧伤、渗出液）等标本则需冷藏（但不能超过24小时）。

4.微生物室接收标本时必须按要求进行查对，不合格标本及时退回。

对接收的标本及时进行细菌培养、分离、鉴定及药物敏感试验，对检查结果核对无误后方能签发报告。

5.微生物室按要求做好室内质控及室间质控，以保证实验的准确性。

当分离到MDRO菌株（如多重耐药鲍曼不动杆菌、多重耐药铜绿假单胞菌）或少见菌株（如耐万古霉素肠球菌/金葡菌）时应及时报告医院感染管理科和相关临床科室，并根据情况保留菌株用于鉴定。

6.临床各科室应关注本地区、本医院和本科室的细菌耐药监测结果，根据细菌耐药性监测结果合理选用抗菌药物。

7.医院感染管理科协同微生物室、药剂科对细菌耐药性监测结果进行统计分析，至少每季度进行一次细菌耐药性综合分析，将主要目标细菌对抗菌药物的敏感、耐药情况做季度、年度总结分析，必要时将细菌耐药情况与抗菌药物使用情况进行关联分析，将统计分析结果向分管院长、业务院长、药事管理委员会以及抗菌药物管理工作组报告，向各临床科室反馈。

8.药事管理委员会和抗菌药物管理工作组根据细菌耐药监测情况责成药剂科对相关抗菌药物品种进行重点监控，必要时对医院用药情况进行干预和调整（如停用某些耐药性高的药物），保证患者用药安全、有效、经济。

9.信息报告、反馈或通报采用简报进行传阅，相关科室及时传达学习，并将传阅内容以纸质方式保存。

抗菌药物病原学送检项目抗菌药物病原学送检项目有很多，常见的主要包括对菌株的培养、鉴定以及对药敏试验。

下面是相关参考内容：1. 菌株的培养对于送检的菌株，首先需要进行培养，以便进行后续的鉴定和药敏试验。

常见的培养基包括血琼脂和MacConkey琼脂等。

在培养过程中，需要注意菌落的形态、色素产生、生长速度等特征，以便进行鉴定。

2. 菌株的鉴定菌株的鉴定是确定病原菌种类的重要步骤。

常见的鉴定方法包括形态学特征观察、生化试验、免疫学试验以及分子生物学方法。

形态学特征观察包括菌落形态、孢子形态、细胞形态等。

生化试验包括氧化酶试验、淀粉酶试验、葡萄糖发酵试验等。

免疫学试验包括血清凝集试验、免疫荧光试验等。

分子生物学方法可以使用PCR、16S rRNA序列分析等。

3. 药敏试验药敏试验是对病原菌对抗菌药物的敏感性进行检测，以便选择合适的药物治疗。

常见的药敏试验方法包括纸片扩散法、肉汤稀释法以及自动化系统等。

纸片扩散法是将各种抗菌药物的纸片放置在琼脂平板上，观察菌落的抑制圈直径。

肉汤稀释法是通过将菌株与不同浓度的抗菌药物共同培养，观察菌落的生长情况，从而确定抗菌药物的最低抑菌浓度。

自动化系统则是利用机器自动进行药敏试验。

4. 耐药基因检测耐药基因检测是对病原菌耐药性的基因进行检测，以便预测耐药菌株的发生和传播趋势。

耐药基因检测方法包括聚合酶链反应（PCR）、DNA测序、DNA芯片和质谱等。

通过对耐药基因的检测，可以了解菌株的耐药机制，并制定更合理的用药策略。

总结起来，抗菌药物病原学送检项目包括菌株的培养、鉴定，药敏试验以及耐药基因检测。

通过这些项目的实施，可以准确鉴定病原菌种类，了解其对不同抗菌药物的敏感性，以便选择合适的药物治疗。

同时，还可以对耐药基因进行检测，预测和监测耐药菌株的发生和传播趋势，为临床用药提供参考依据。

医院合理使用抗菌药物治疗及治疗前病原学送检管理制度第一章总则第一条为规范我院抗菌药物的使用，提高抗菌药物治疗效果，降低耐药性，根据《抗菌药物临床应用管理办法》、《医疗机构抗菌药物临床应用管理规范》等相关规定，制定本制度。

第二条本制度适用于我院全体医务人员及相关部门在使用抗菌药物进行治疗及治疗前病原学送检的管理。

第三条我院应建立健全抗菌药物管理制度，确保抗菌药物的合理、安全、有效使用，提高医疗质量，保障患者权益。

第二章抗菌药物合理使用第四条抗菌药物是指对细菌具有抑制或杀灭作用的药物，主要用于细菌、真菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体及部分原虫等病原微生物所致的感染性疾病。

缺乏上述病原微生物感染依据的，原则上不使用抗菌药物。

第五条在使用抗菌药物治疗前，应尽可能正确采集有关标本，及时送病原学检查及药敏试验，作为选用药物的依据。

如病情紧急，可在耒茯结果前根据临床诊断推断最可能的病原菌，选择抗菌药物进行治疗。

一旦明确病原菌，应根据临床用药效果并参考药敏试验结果，选用合适的抗菌药物治疗。

第六条对轻症社区茯得性感染或初治患者，可选用常用抗菌药物。

对医院获得性感染、重症感染、难治性感染患者应根据临，禾表现及感染部位，推断可能的病原菌及其耐药状况，选用抗菌活性及针对性强、安全性好的抗菌药，必要时可以联合用药。

第七条临床医帅选择抗菌药物时，应综合考虑以下因素：（一）患者的疾病状况：感染严重程度、机体病理生理、免疫功能等；（二）病原菌种类及耐药状况：根据病原菌种类及其耐药状况，选择敏感的抗菌药物；（三）药物安全性：考虑药物的副作用、药物相互作用、患者过敏史等；（四）药物经济学：权衡药物的成本、疗效、耐药性等因素，选择经济合理的抗菌药物。

第八条我院应建立健全抗菌药物使用监测制度，定期评估抗菌药物使用情况，对抗菌药物使用率、耐药率等指标进行监测，采取有效措施，确保抗菌药物的合理使用。

第三章治疗前病原学送检第九条病原学送检是指在抗菌药物治疗前，对感染标本进行细菌学、真菌学、支原体等检测，以确定病原菌种类及耐药状况，为选用合适的抗菌药物提供依据。