结核病诊断 T-SPOT 实验

结核感染T细胞（T-SPOT.TB）一、名称结核感染T细胞（T-SPOT.TB）二、项目简介、临床意义及收费标准T-SPOT.TB是一种记数单个结核特异的效应T细胞的酶联免疫斑点（ELISPOT）检测方法，其灵敏高于ELISA方法。

该检测通过检测受结核分枝杆菌抗原刺激而活化的效应T细胞来诊断结核感染。

该检测适用于所有具有结核潜伏感染风险或怀疑是结核病的人群，无论年龄、性别、种族、治疗还是免疫状况，其诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。

对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。

收费标准：740元/人份，收费依据：混合淋巴细胞培养（W0309050020）（250元）×2次；干扰素测定（W0309060008）（120元）×2种抗原。

三、标本采取1.静脉血：肝素锂（绿头管）抗凝管采集静脉血4ml，立即颠倒数次，充分混匀，以免血液凝固。

采血后向试管中注入血液时请缓慢进行，避免用力过猛造成细胞破坏影响检测结果。

2.脑脊液：无菌小瓶留取4ml以上，每毫升加125IU肝素（0.02ml）抗凝并立即混匀。

3.浆膜腔积液（胸水、腹水、心包积液）：无菌密闭容器留取50ml以上，每100毫升加2500IU（0.4ml）抗凝并立即混匀。

4.关节液：无菌小瓶留取4ml以上，每毫升加125IU肝素（0.02ml）抗凝并立即混匀。

四、检测时间、报告时间检测时间：每周二（节假日除外）进行检测，标本必须在上午9点前送达实验室。

报告时间：周三出报告。

五、注意事项1.标本采集后4小时内必须送到实验室进行检测，标本采集后如果超过4小时未送检将严重影响检测结果。

2.检测脑脊液、浆膜腔积液、关节液，须同时送检静脉血。

3.冬季运送标本时注意保温，避免冷冻。

六、联系科室和电话检验科微生物室(TeL：84205491)。

探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值引言：结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，全球范围内仍然是重大公共卫生问题之一。

早期和准确的结核病诊断对于控制疾病的传播和提供有效的治疗举措至关重要。

近年来，结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）逐渐成为结核病的主要诊断工具之一，本文将探讨T-SPOT.TB在结核病中的诊断价值。

一、T-SPOT.TB的原理与技术：T-SPOT.TB是一种利用酶联免疫斑点法检测结核分枝杆菌特异性T细胞反应的技术。

该方法基于测量体外T细胞的干预和测量干预期间T细胞产生的干预细胞因子的原理，通过寻找和计数结核分枝杆菌特异性T细胞的干预斑点来判断人体是否感染了结核分枝杆菌。

二、T-SPOT.TB的优势：与传统的结核诊断方法相比，T-SPOT.TB具有以下显著的优势：1. 高度特异性：T-SPOT.TB能有效区分结核病与非结核分枝杆菌感染，降低了假阳性率，提高了诊断的准确性。

2. 高敏感性：T-SPOT.TB能更早地检测出结核感染，尤其是对于免疫缺陷患者和隐性感染者具有更高的敏感性。

3. 快速结果：T-SPOT.TB的检测结果通常在24小时内可得，对于紧急情况和迅速诊断起到了关键作用。

4. 无交叉反应：T-SPOT.TB不受BCG疫苗和其他非结核分枝杆菌感染因素的影响，避免了传统诊断方法的交叉反应。

三、T-SPOT.TB在结核病中的诊断价值：1. 早期诊断：由于T-SPOT.TB的高敏感性，它能够早期检测出结核感染，避免了疾病的进一步传播，为尽早治疗提供了依据。

2. 预测疾病进展：通过监测T细胞反应的变化，T-SPOT.TB可以评估结核感染的严重程度和预测患者的疾病进展，以便采取及时的干预措施。

3. 监测治疗效果：T-SPOT.TB可以用于评估结核患者的治疗效果，及时调整治疗方案，提高治疗的效果。

4. 作为筛查工具：T-SPOT.TB可以作为结核病的筛查工具，在高感染风险群体中进行广泛的应用，以便早期发现结核感染，减少疾病传播。

QB—SPOT结核实验
结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）是一种运用IGRA技术，检测被结核分枝杆菌特异的早期分泌靶抗原6（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP 10）分别刺激后释放γ-干扰素的效应T淋巴细胞，以辅助诊断结核感染的实验室检测技术。

TBspot试验通常指T-SPOT试验，即结核杆菌感染T细胞斑点试验，又称为结核菌感染干扰素释放试验，是利用结核特异性抗原，通过酶联免疫斑点技术，检测受试者体内是否存在结核效应的T淋巴细胞，从而判断被检查者是否感染结核杆菌。

该检查的原理是结核杆菌感染之后，T淋巴细胞会形成免疫记忆。

通常在体外分离到T淋巴细胞之后，培养增殖T细胞的同时，用相应的特异性抗原，进行刺激，激活T细胞记忆，有记忆的细胞则会分泌大量的干扰素。

结核T-SPOT检查即为结核菌T细胞斑点检测，是临床用于诊断结核病的新型检查方法。

通过检测干扰素的量，判断该细胞是否存在结核感染形成的记忆，进而通过进一步的反应判断是否存在结核菌感染。

但它的结果不能作为单独或决定性诊断活动性结核的证据，阳性结果仅提示患者体内存在结核杆菌特异性的效应T细胞。

但是否为活动性结核，则需要结合患者的临床症状及其他检测指标，进行综合判断。

现在已经有多项研究的结果显示，T-SPOT试验只能判断是否感染过结核，但无法鉴别活动性结核与潜伏性结核，因此对于活动性结核的诊断价值有限。

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1520文档结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)
一.临床意义：
结核病临床表现复杂多样，可累及全身各个系统，给临床诊断带来很大困难。

本项目检测通过将分离标本中的单个核细胞加入结核分枝杆菌特异性抗原A、B分别进行细胞培养后，分别检测分泌γ干扰素的特异性淋巴细胞的数量诊断结核感染。

本检测诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。

对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。

二.标本类型、采集及运送要求：
1.采集要求：标本采集后4小时内必须送到实验室，标本采集后如果超过4小时未送检将严重影响检测结果。

2.静脉血：肝素钠（绿头管）抗凝管采集静脉血4ml，立即颠倒数次，充分混匀，以免血液凝固。

采血后向试管中注入血液时请缓慢进行，避免用力过猛造成细胞破坏影响检测结果。

三．标本采集时间、结果发放时间及检测频率
1.标本采集时间：每周一上午12点之前采血；并于4小时之内送到临床微生物实验室。

（必要时可与临床微生物实验室联系）
2.结果发放时间：周二下午4点半检验报告发出。

3.检测频率：暂定每周检测一次。

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结核T-SPOT传统手段：结核菌素皮试：低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。

低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易造成“假阳性”结果。

细菌学检查：常规培养：2月；快速培养：1周。

阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。

病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。

结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，感染者体内存在特异的效应T淋巴细胞，效应T 淋巴细胞再次受到结核抗原刺激时会分泌多种细胞因子（IFN-γ），因此，检测效应T淋巴细胞可用于结核病或结核潜伏感染者的诊断。

由于效应T细胞存活时间很短，而且具有特异性，因此可以作为机体是否正处于被感染的指标，无论是否有临床症状。

T-SPOT.TB 高特异性ESAT-6（早期靶原6）&CFP10（培养滤液蛋白10）均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域。

仅结核分枝杆菌复合群（人型，牛型，非洲型）存在RD1区基因。

卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因。

T-SPOT.TB 不会受卡介苗接种影响。

通常阴性对照没有或仅有很少斑点。

根据抗原A或/和抗原B孔的反应判断结果；阴性对照孔斑点数为0-5，阳性样本应为：（抗原A或抗原B斑点数）-（阴性对照孔斑点数）≥6.当阴性对照孔斑点数≥6 spot，阳性样本应为（抗原A或抗原B斑点数）≥2×（阴性对照孔斑点数）如果阳性对照孔结果良好，但抗原A或抗原B均达不到阳性样本判断标准，则结果为阴性。

阳性结果说明患者体内存在针对结核杆菌的效应T淋巴细胞。

阴性结果提示患者可能不含针对结核杆菌的效应T淋巴细胞。

T-SPOT.TB 检测单个反应细胞可以检测样品中每一个反应的T细胞即使在免疫功能低下的患者，只要单个的T淋巴细胞有反应，也同样可以被检出。

T-SPOT.TB 检测所有类型的T细胞亚型CD4和CD8T细胞均被检测即使HIV患者中CD4T细胞被清除，只要CD8细胞有针对抗原的反应，也同样被检出。