植物组织培养培养基
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植物组织培养的培养基中,需要添加糖类作为碳源物质,因此糖类是影响植物组织培养成功与否的关键之一。
高中生物教材中明确指出,植物组织培养的培养基中添加的糖类是蔗糖。
那么为什么不添加葡萄糖呢?很多资料上解释为蔗糖较葡萄糖便宜,易被植物细胞吸收。
其实并非如此。
之所以以蔗糖作为碳源,主要有三个方面的原因:(1)同样作为碳源为植物细胞提供能量来源,蔗糖较葡萄糖能更好地调节培养基内的渗透压。
配制相同质量分数的培养基,蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖,因此若采用葡萄糖作为碳源,易使植物细胞脱水而生长不良。
同时,植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率,所以蔗糖形成的渗透压可相对长期的保持稳定。
(2)植物组织培养过程中,要时刻注意防止培养基受到微生物的污染。
微生物生长所需的碳源最常用的是葡萄糖,一般很少利用蔗糖。
因此,采用蔗糖作为培养基的碳源,可一定程度上减少微生物的污染。
(3)诱导作用。
在培养基成分中,增加生长素的浓度,导致木质部形成,增加蔗糖浓度则导致韧皮部形成。
当生长素水平恒定时,2%蔗糖使分化出的全部是木质部,4%蔗糖使分化出的几乎全部是韧皮部,3%蔗糖则可以分化出两者。
所以,生长素和蔗糖浓度决定愈伤组织中维管束的类型与数量。
因此,在植物组培中要选用蔗糖而不选用葡萄糖。
通过细胞膜内外的液体的浓度差来调节当细胞膜内的浓度小于细胞膜外的时候蔗糖救能进入细胞中了植物细胞培养中最常用的培养基的碳源是蔗糖,已知葡萄糖和果糖也能使某些植物生长得很好。
植物细胞可以分解蔗糖,蔗糖是由一分子果糖和一分子葡萄糖组成的,蔗糖是可以直接进入细胞的,蔗糖跨质膜从质外体进入细胞是由载体介导并需要消耗能量的质子-蔗糖共运输机制进行的,另外,植物能够利用的某些其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖等。
葡萄糖更不稳定,培养基需添加葡萄糖一般都在灭菌后再兑换。
实在要添加葡萄糖那么灭菌温度一般控制在108~110左右,120度灭出来的就有一定程度的碳化了。
★植物组织培养培养基的主要成分1.无机营养物:无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素主要包括氮、磷、钾、钙、镁和硫六种,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁,这些元素有的对生命活动的某个过程十分有用,有的对蛋白质或酶的生物活性十分重要,有的是参与某些生物过程的调节。
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
2.碳源:培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。
因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖或D-葡萄糖,用量通常为2%-4%,高者可达5%,亦可用市售的白糖所代替,但一般应增加用量,而且最好用比较固定的厂家生产的产品,以保证实验的稳定性。
3.有机营养成分:包括人工合成或天然的有机附加物(包括维生素,氨基酸及其它有机物质等)。
最常用的有酪朊水解物(水解乳蛋白、水解酪蛋白CH)、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽浸出物、西红柿汁、椰子汁(CM)及各种氨基酸如甘氨酸(氨基乙酸)等。
维生素:在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B族维生素,其中效果最佳的有硫氨素(维生素B1)、盐酸吡哆醇(维生素B6)和维生素H(生物素)、泛酸钙等、肌醇(环己六醇)、烟酸。
在部分培养基中还添加维生素BX(氨酰苯甲酸)、维生素C(抗坏血酸)、维生素E(生育酚)、、维生素B12(氰钴胺酸)、维生素BC(叶酸)、维生素B2(核黄素)和氯化胆碱等维生素。
这些可能对某些植物或植物的某些代谢过程有重要作用,如肌醇主要以磷酸肌醇和磷脂酰肌醇的形式参与由Ca介导的信号转导。
植物组织培养MS培养基配方MS培养基主要包括两部分:无机盐和有机物。
无机盐部分的配方如下:1.氮源:氮源通常由硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钾(KNO3)和硫酸铵((NH4)2SO4)组成。
氮源的浓度通常为20-30mM。
2.磷酸盐:磷酸盐通常由二氢二钠磷酸盐(NaH2PO4)组成,浓度为10mM。
3.钠盐:MS培养基中含有钠盐,通常由硝酸钠(NaNO3)和硝酸钾(KNO3)组成。
钙盐的浓度为2.0mM,钾盐的浓度为1.0mM。
4.钠盐:MS培养基中含有钠盐,通常由硝酸钠(NaNO3)和硝酸钾(KNO3)组成。
钙盐的浓度为2.0mM,钾盐的浓度为1.0mM。
5.硫酸镁:硫酸镁(MgSO4)的浓度为1.0mM。
6.磷酸铵铁:磷酸铵铁(FeSO4·(NH4)2SO4)的浓度为27.8μM。
7.各种微量元素:包括锌、铜、锰、硼、钼、钴和镍等微量元素。
这些微量元素的浓度通常在微摩尔(μM)级别。
有机物部分的配方如下:1.蔗糖:蔗糖是植物培养基中最常用的碳源,浓度通常为30g/L。
2. 维生素:通常使用的维生素有二硝基地巴泼甲素(2,4-D)和吲哚-3-乙酸(IAA)。
它们的浓度通常在0.1-2.0 mg/L之间。
3. 激素:常用的激素包括植物生长素(BA)和乙烯利(2,4-D)。
它们的浓度通常在1.0-10.0 mg/L之间。
4.混合物:还可以加入一些有机物混合物,如胆固醇、烟酸和核酸酸等。
值得注意的是,这只是MS培养基的一个基本配方,根据具体的研究目的和植物种类的不同,还可以对该配方进行一些调整和优化。
总结起来,MS培养基是一种常用的植物组织培养基,主要用于植物生长和增殖。
其配方包括无机盐和有机物两部分,无机盐包括氮源、磷酸盐、钙盐、镁盐、磷酸铵铁和微量元素等;有机物包括蔗糖、维生素和激素等。
通过适当调整这些配方的浓度和比例,可以实现不同植物的生长和增殖需求。
★★★★★实验二植物组织培养培养基的配制与灭菌一、实验目的1.培养基能够提供植物生长、繁殖所必须的各类营养物质,以及生长因子,是开展植物组织培养研究的基础和前提。
植物的种类不同,研究的目的不同,所需要的培养基的种类也各不相同。
2.学习并掌握植物组织常用培养基的组成、配制与灭菌方法。
二、实验用具和药品1. 实验用具:电子天平(1/10、1/1000)、烧杯(100ml、1000ml)、量筒(50ml、100ml)三角瓶或培养瓶、移液管、药匙、玻棒、pH试纸、吸耳球、牛皮纸、皮筋等。
2. 药品:蔗糖、琼脂、0.1mol/L NaOH、 0.1mol/L HCl、各种培养基母液、激素母液三、实验内容与步骤(一)分组配制培养基。
各类培养基组成如下:1. 水琼培养基。
2. MS0培养基。
3. 1/2MS培养基。
4. MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L。
5. MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L。
6. MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 2.0mg/L。
7. MS+KT 0.5mg/L+6-BA0.5mg/L。
8. MS+NAA 1.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L。
(二)湿热灭菌培养基1.称取规定数量的琼脂,加水到培养基最终容积的3/4,水浴或电炉使之加热溶解。
2.根据配方要求,把按顺序量取的各种母液以及称取的蔗糖,都加入煮好的琼脂中,然后加水定容。
3.用0.1mol/L的NaOH或者HCl调pH。
4.分装培养基,包好或盖好,标明编号。
5.121℃(103kPa)灭菌15-20min。
(三)作好植物组织培养的各项准备工作1. 制备无菌水:121℃(103kPa)灭菌40min 。
2. 配制 0.1%HgCl2溶液(放置棕色瓶中)。
3. 准备接种用培养皿、金属器械等用具。
四、注意事项1. 实验中所用的各种容器一定要洗净、烘干。
2. 用电子天平称量药品时,一定要用称量纸,对于有腐蚀性的药品,应将其放置在小烧杯中称量。
培养基的配制植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
MS培养基的配制包括以下步骤。
培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O 分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。
植物组织培养培养基组成植物组织培养,这可是个超有趣的领域呢!那植物组织培养的培养基到底是由什么组成的呀?这就好比是植物的“营养餐”。
首先呢,有水。
水就像是我们人类每天都要喝的水一样,对植物来说那可是至关重要的呀!没有水,植物怎么能好好生长呢?然后就是大量元素啦。
这些大量元素就好像是我们吃的主食,能提供植物生长所需的基本“能量”。
氮、磷、钾等元素都在其中,它们对植物的生长和发育起着关键的作用。
氮能让植物长得壮壮的,磷能帮助植物开花结果,钾呢,可以让植物更健康、更有抵抗力,就像我们有了强壮的身体才能抵御各种疾病一样。
微量元素也不能少呀!它们虽然需要的量不多,但也是必不可少的呢。
就像我们身体需要一些微量的营养物质来保持健康一样。
铁、锰、锌等微量元素,各自有着独特的作用,缺少了它们,植物可就不能正常生长啦。
还有碳源呢!这就像是植物的“糖果”,给它们提供能量。
一般常用的就是蔗糖啦,蔗糖能让植物“吃得饱饱的”,有力气去生长。
植物激素也是很重要的一部分哟!这就像是植物的“生长调节剂”。
比如生长素能促进植物生长,细胞分裂素能让植物细胞分裂得更活跃。
这多神奇呀!有机物质也在培养基里占有一席之地呢。
像氨基酸、维生素这些,能给植物提供更全面的营养,让它们长得更好。
除此之外,还有琼脂等凝固剂。
它就像是让培养基变成了一个“小床”,让植物可以稳稳地生长在上面。
总之,植物组织培养培养基的组成可真是丰富多样呀!就像一个精心调配的“营养大礼包”,为植物的生长和发育提供了全方位的支持。
没有这些组成部分,植物组织培养可就没办法成功啦!这就是植物组织培养培养基的神奇之处呀,是不是超级有趣呢?。
植物组织培养名词解释植物组织培养是指将植物体的一部分或细胞外植体(包括种子、芽、刺、茎尖、叶尖等)在无菌条件下培养和繁殖,以便快速、大规模地繁殖植物。
植物组织培养是一项重要的生物技术,可应用于种苗繁殖、植物改良、品种保存和组织工程等领域。
植物组织培养涉及许多名词,下面对其中一些常见的名词进行解释。
1. 细胞分裂:细胞分裂是指细胞分裂成两个或多个细胞的过程。
细胞分裂是植物组织培养中细胞增殖的基础。
2. 培养基:培养基是提供植物组织或细胞生长所需的营养物质和植物激素的培养介质。
培养基可以根据不同的植物种类和培养目的进行调配。
3. 愈伤组织:愈伤组织是植物在外界刺激下形成的生长异常组织,具有无定向分裂和再生能力。
愈伤组织培养能够实现无性繁殖,即从愈伤组织中培养出整个植株。
4. 植株再生:植株再生是指在培养基上通过愈伤组织培养得到新的植株。
植株再生可以通过不同的途径实现,如愈伤组织诱导再生、原球茎诱导再生等。
5. 轮回:轮回是指将植物体分离为单细胞再进行培养和繁殖的过程。
轮回可以大大提高植物的繁殖速度和效率。
6. 培养器:培养器是植物组织培养过程中用于装载培养基和植物细胞的容器。
常见的培养器有试管、培养瓶和培养皿等。
7. 无菌技术:无菌技术是一种用于消灭或控制培养中的微生物污染的方法。
无菌技术在植物组织培养中非常重要,可以确保培养体系的纯净性和成功的培养结果。
8. 再生植株硬化:再生植株硬化是指通过逐渐减少对植物的外界保护和提供适宜的环境条件,使得再生植株逐渐适应自然条件。
再生植株硬化是植物组织培养最后一个重要环节,可以确保再生植株的生长和生产力。
总之,植物组织培养是利用植物细胞的再生分裂能力进行无性繁殖和植物改良的生物技术。
在植物组织培养过程中,一系列名词的应用和理解对于成功进行培养和繁殖非常重要。
植物组织培养用的原理
植物组织培养是一种无性繁殖的方法,通过体外培养植物组织和细胞,使其不断分裂和再生,最终形成完整的植株。
它的原理主要包括组织培养基、激素和外界环境等因素。
1. 组织培养基:植物组织培养基是一种含有多种营养物质的培养基,提供了植物生长所需的各种养分。
培养基中通常含有碳源、氮源、矿质盐等物质,这些物质能够提供植物正常生长所需的能量和元素。
2. 激素:植物组织培养中常常会添加一些植物激素,如生长素、细胞分裂素、愈伤组织素等。
这些激素能够调节细胞的分化和再生,促进植物组织的生长和扩增。
3. 外界环境:植物组织培养需要提供适宜的培养条件,包括适宜的温度、光照、湿度和气体氛围等。
这些环境因素能够影响植物细胞的生长和分化,进而影响植物组织培养的成功率。
通过合理地控制以上因素,植物组织培养可以实现对植物组织的再生和快速繁殖。
这种方法可以用于植物病毒检测、新品种选育、基因转化等领域,具有重要的科研和应用价值。
植物组织培养基的配制一、母液的配制和保存在植物组织培养工作中,配制培养基是日常必备的工作。
为简便起见,通常先配制一系列母液(stockso1utlon),即贮备液。
所谓母液是欲配制液的浓缩液,这样不但刊以侏让各物质成分的精确性及配制时的迅速移取,而且还便于低温收藏。
普通母液配成比所需浓度高10~100倍。
母液配制时可分离配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。
配制时注重一些离子之间易发生沉淀,如Ca2+和S042-、Ca2+、Mg2+和PO43-一起溶解后,会产生沉淀,一定要充分溶解再放入母液中。
配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水。
药品应选职等级较高的化学纯或分析纯。
药品的称量及定容都要精确。
各种药品先以少量水让其充分溶解,然后依次混合。
普通配成大量元素、微量元素、铁盐、维生索等母液,其中维生素、氨基酸类可以分离配制,也可以混在一起。
母液配好后放入冰箱内低温保存,用时再按比例稀释。
下面以MS培养基制备为例,概述其制备办法,为MS基本培养基4种母液成分配制。
(1)大量元素母液可配成浓度10倍母液。
用分析天平按表25称取药品,分离加100mL左右蒸馏水溶解后,再用磁力搅拌器搅拌,促进溶解。
注重Ca2+和PO3-4易发生沉淀。
然后倒入1000mL定容瓶中,再加水定容至刻度,成为10倍母液。
(2)微量元素母液可配成100倍的母液。
用分析天平按表精确称取药品后,分离溶解,混合后加水定容至1000mL。
(3)铁盐母液可配成100倍的母液,按表称取药品,可加热溶解,混合后加水定容至1000mL。
(4)有机物母液可配成l00倍的母液。
按表分离称取药品,溶解,混合后加水定容至1000mL。
(5)激素母液每种激素必需单独配成母液,浓度普通配成1mg/mL。
用时按照需要取用。
由于激素用量较少,一次可配成50mL或100mL。
另外,多数激素难溶于水,要先溶于可溶物质,然后才干加水定容。
激素的配法如下:将IAA、IBA、GA等先溶于少量的95%的酒精中,再加水定容至一定浓度。
植物组织培养培养基的配制步骤嘿,咱今儿个就来讲讲植物组织培养培养基的配制步骤,这可真是个有趣又神奇的事儿呢!你想想看,那些小小的植物组织,就像是一个个小生命等待着被唤醒和滋养。
要配制出适合它们生长的培养基,就像是给它们打造一个温馨舒适的家。
首先,咱得准备好各种材料。
就好比建房子得有砖头、水泥一样,培养基也需要各种“建筑材料”。
什么大量元素啦、微量元素啦、有机成分啦等等。
这些东西就像是房子的根基和框架,可不能马虎。
然后呢,把这些材料按照一定的比例混合起来。
这就像是做菜,调料放多了或少了味道可就不对啦!得精确地称量,小心翼翼地搅拌均匀,让它们完美融合。
接下来,调节酸碱度也是很关键的一步。
植物们也有自己喜欢的“居住环境”呢,太酸太碱可都不行。
就像咱人一样,喜欢不冷不热、舒舒服服的环境。
在这个过程中,可不能粗心大意哦!要是弄错了一点,那可能就会影响到植物组织的生长发育啦。
你说这像不像照顾一个小婴儿,得处处精心呵护呀。
再然后,把配好的培养基进行灭菌处理。
这就好比给家里来个彻底的大扫除,把那些有害的细菌、病毒啥的都消灭掉,给植物们一个干净、安全的生长空间。
等一切都准备好了,就可以把植物组织放进去啦。
看着它们在培养基里一点点生长、分化,那种感觉真的是太棒啦!就好像看着自己精心培育的花朵慢慢绽放一样。
哎呀呀,植物组织培养培养基的配制步骤虽然不复杂,但每一步都很重要呢!要是有一步没做好,可能就会前功尽弃呀。
所以啊,咱可得认真对待,就像对待自己最宝贝的东西一样。
总之呢,植物组织培养培养基的配制就是这么一回事儿,有趣又充满挑战。
只要咱用心去做,就一定能让那些小植物们茁壮成长,给我们带来惊喜呢!你说是不是呀?。
★植物组织培养培养基的主要成分 1.无机营养物无机营养物
主要由大量元素和微量元素两部分组成大量元素主要包括氮、
磷、钾、钙、镁和硫六种氮源通常有硝态氮或铵态氮但在培养
基中用硝态氮的较多也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子在近代的培养基中其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁这些元素有的对生命活动的某个过程十分有用有的对蛋白质或
酶的生物活性十分重要有的是参与某些生物过程的调节。
培养基中的铁离子大多以螯合铁的形式存在即FeSO4与
Na2—EDTA螯合剂的混合。
2.碳源培养的植物组织或细胞它
们的光合作用较弱。
因此需要在培养基中附加一些碳水化合物
以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖或D-葡萄糖用量通常为2-4高者可达5亦可用市售的白糖所代替但一般应增
加用量而且最好用比较固定的厂家生产的产品以保证实验的
稳定性。
3.有机营养成分包括人工合成或天然的有机附加物
包括维生素氨基酸及其它有机物质等。
最常用的有酪朊水解物水解乳蛋白、水解酪蛋白CH、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽
浸出物、西红柿汁、椰子汁CM及各种氨基酸如甘氨酸氨基乙
酸等。
维生素在培养基中加入维生素常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B族维生素其中效果最佳的有硫氨素。
植物组培培养基的成分培养基是人工配制的,满足不同材料生长,繁殖或积累代谢产物的营养物质。
在离体培养条件下,不同种类植物对营养的要求不同,甚至同一种植物不同部位的组织以及不同培养阶段对营养要求也不相同。
筛选合适的培养基是植物组织培养极其重要的内容,是决定成败的关键因素之一。
大多数植物组织培养基的主要成分是无机营养物质(大量营养元素和微量营养元素)、碳源、有机添加物、植物生长调节剂和凝胶剂。
一些组织可以生长在简单的培养基上,这些培养基只含无机盐和可利用的碳源(蔗糖),但大多数组织必须在培养基中添加维生素、氨基酸和生长物质,而且经常还将一些复合的营养物质加入到培养基中,这种由“化学定义”的化合物组成的培养基称为“合成”培养基。
人们已设计了许多培养基用于特殊组织和器官的培养。
怀特培养基是最早的植物组织培养基之一,最初作为根培养的培养基。
为了诱导培养组织器官发生和再生植株,广泛使用含有大量无机盐成分的MS(Murashige和Skoog,1962)和LS(Linsmaier和Skoog,1965)培养基。
原本为细胞悬液或愈伤组织培养而设计的B5培养基,经过改良后,被证实有利于原生质体培养。
同时,B5培养基也被用于诱导原生质体再生植株。
尽管Nitshch(1969)为花药培养设计的培养基仍然使用频繁,但另一个称为N6的培养基,专门用于禾谷类花药培养和其他组织培养。
类似的,N6培养基越来越多地用于大豆、红三叶草和其他豆科植物的培养。
该培养基营养成分促进胚性细胞和原生质体再生细胞快速生长。
使用这些培养基成功的原因很可能是营养元素的比例和浓度基本上满足不同培养体系中细胞或组织生长和分化的最适需要。
植物组织培养基中无机和有机成分的浓度用质量浓度(mg/L或ppm,但现在习惯用mg/L)或物质的量浓度(mol/L)表示。
按照国际植物生理学协会的推荐,应该用mol/L表示大量营养元素和有机营养成分浓度,用μmol/L表示微量营养元素、激素、维生素和有机成分浓度。
植物组培培养基及其配制培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。
因此,在组织培养基的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成和配制方法。
一、组成培养基的五类成分目前,大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
1.无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
2.碳源培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。
因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。
蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起重要作用。
3.维生素在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B 族维生素,其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。
4.有机附加物包括人工合成或天然的有机附加物。
最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。
另外,琼脂也是最常用的有机附加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于各种外植体的培养。
5.生长调节物质常用的生长调节物质大致包括以下三类:(1)植物生长素类。
如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。
(2)细胞分裂素。
如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。
(3)赤霉素。
组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。
二、常用培养基配方及其特点1.常用培养基配方组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。
★植物组织培养培养基的主要成分1.无机营养物:无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素主要包括氮、磷、钾、钙、镁和硫六种,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁,这些元素有的对生命活动的某个过程十分有用,有的对蛋白质或酶的生物活性十分重要,有的是参与某些生物过程的调节。
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
2.碳源:培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。
因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖或D-葡萄糖,用量通常为2%-4%,高者可达5%,亦可用市售的白糖所代替,但一般应增加用量,而且最好用比较固定的厂家生产的产品,以保证实验的稳定性。
3.有机营养成分:包括人工合成或天然的有机附加物(包括维生素,氨基酸及其它有机物质等)。
最常用的有酪朊水解物(水解乳蛋白、水解酪蛋白CH)、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽浸出物、西红柿汁、椰子汁(CM)及各种氨基酸如甘氨酸(氨基乙酸)等。
维生素:在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B族维生素,其中效果最佳的有硫氨素(维生素B1)、盐酸吡哆醇(维生素B6)和维生素H(生物素)、泛酸钙等、肌醇(环己六醇)、烟酸。
在部分培养基中还添加维生素BX(氨酰苯甲酸)、维生素C(抗坏血酸)、维生素E(生育酚)、、维生素B12(氰钴胺酸)、维生素BC(叶酸)、维生素B2(核黄素)和氯化胆碱等维生素。
这些可能对某些植物或植物的某些代谢过程有重要作用,如肌醇主要以磷酸肌醇和磷脂酰肌醇的形式参与由Ca介导的信号转导。
植物组织培养基的组成植物组织培养基啊,就像是植物宝宝们专属的超级豪华大餐。
这里面的成分那可是相当的丰富多样,每一种都有着独特的作用,就像超级英雄团队里的每个成员都不可或缺。
先说碳源,这可是培养基里的“能量大boss”。
就好比是给植物细胞提供源源不断能量的超级电池,蔗糖就是这个能量大boss的常见形态。
没有了它,植物细胞就像没了油的汽车,只能干瞪眼,根本没法活力满满地分裂、生长。
氮源则是培养基里的“建筑小能手”。
它就像一个个小小的建筑砖块,为植物细胞构建起它们的“身体大厦”。
氨基酸和硝酸盐这些氮源就忙着到处给细胞添砖加瓦,要是缺了它们,植物细胞的“房子”可就盖得歪歪扭扭,不成样子了。
再瞧瞧那些植物生长调节剂,这可都是“魔法小精灵”啊。
生长素就像一个热心的成长小助手,它总是催促着植物细胞快快伸长,像个调皮的小鬼在后面推着细胞往前走。
而细胞分裂素呢,它就像是细胞世界里的社交达人,让细胞们多多分裂,就像它在组织一场细胞的大聚会,让细胞家族不断壮大。
这两个小精灵要是配合不好,植物细胞的生长就会乱成一锅粥。
还有琼脂,这个家伙可不得了,它是培养基里的“凝固大师”。
把整个培养基变得像果冻一样,稳稳地固定在那里。
如果没有琼脂,培养基就会像一滩稀泥,植物细胞在里面就像在沼泽里挣扎的小虫子,根本找不到自己的立足之地。
微量元素在培养基里就像神秘的“小调料”。
虽然量很少,但就像做菜时那一点点盐和味精一样,缺了它们,培养基就像没放盐的菜,淡而无味,植物细胞吃起来也不香,生长起来就没劲儿。
水分呢,那就是培养基里的“生命源泉”。
它像一个温柔的妈妈,包裹着所有的成分,让一切都能顺畅地进行。
没有水,整个培养基就变成了干枯的沙漠,植物细胞就会渴死。
维生素在这个培养基大家庭里就像一群“健康小卫士”。
它们默默地守护着植物细胞的健康,让细胞们有足够的抵抗力,就像给细胞们穿上了一层隐形的铠甲。
而有机附加物就像是培养基里的“小惊喜”。
它们给植物细胞带来额外的滋养,就像偶尔给孩子吃的小零食,虽然不是主食,但也能让细胞们欢呼雀跃,生长得更带劲。