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Agilent 1200 LC[Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、 目录二、 培训目的 (3)三、 培训准备 (3)1. 仪器准备 (3)2. 溶剂准备 (3)四、 方法建立 (3)1. 开机准备 (3)2. 数据采集方法编辑 (5)9 G1310A(单元泵) (5)9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7)9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)9 G1328A(手动进样器) (11)9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15)9 G1362A(示差检测器) (17)9 G1321A(荧光检测器) (19)9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)3. 数据分析方法编辑 (25)9 谱图优化 (25)9 积分参数优化 (25)9 校正 (27)9 打印报告 (28)9 光谱 (29)4. 建立全新完整方法向导 (31)9 新建完整方法： (32)9 保存方法： (36)9 保存即时改变的方法 (36)9 调用方法： (36)5. 进样 (36)9 单针进样 (36)9 序列进样 (37)五、 关机 (37)1. 关闭检测器的灯 (41)2. 冲洗系统 (41)3. 封存色谱柱 (41)4. 关闭电脑 (41)5. 关闭模块 (41)六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)七、 Agilent 1200保养维护 (43)八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)二、 培训目的9基本了解1200LC硬件操作。
高效液相色谱操作知识（一）高压恒流泵的维护注意事项泵的密封圈是最易磨损的部件，密封圈的损坏可引起系统的许多故障，要注意保养和定期更换。
应采取下列措施以延长使用寿命：绝对不允许在没有流动相的或流动相还没有进入泵头的情况下启动泵而造成柱塞杆的干磨。
每天使用后应将整个系统管路中的缓冲液体冲洗干净，防止盐沉积，整个管路要浸在无缓冲的溶液或有机溶剂中。
长期不用也要定期开泵冲洗整个管路。
要用HPLC级试剂输液管前端要用烧结不锈钢沉子过滤流动相。
要注意防止管路阻塞造成压力过高而损坏仪器。
压力下限应设置在0.5~1MPa，以防止储液器中的流动相被抽干或严重渗漏而引起柱塞的干磨有柱后清洗功能的高压恒流泵还要注意保持清洗液，否则将失去柱后清洗效果。
(二)流动相使用的注意事项必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相，并要先经0.45?m薄膜过滤。
过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体（如02），如不脱气易产生气泡，增加基线噪声，造成灵敏度下降，甚至无法分析。
几种脱气方法比较：1、氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好但成本高。
2、加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。
3、抽真空脱气法：易抽走有机相4、超声脱气法：一种较为常见的脱气法。
流动相放在超声波容器中，用超声波震荡10~15 分钟，此法效果并不太好但操作简单。
如果管路中使用peek树脂部件，请不要使用下列流动相：浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜特别注意HPLC使用过后的系统清洗：含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法：1、先用100%的纯水冲洗，打开排放阀，用3~5ml/min的流量，洗二十分钟左右后停泵。
此举主要是针对吸液系统、泵头、进出口单向阀等体积较大的空间的清洗2、再用5：95的甲醇/水清洗整个系统，关闭排放阀，用1ml/min的流量，洗30~60分钟后停泵。
此举主要是用水清洗整个系统中的盐，用5%的甲醇主要是为了保护色谱柱。
安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训作为一种重要的分析技术，高效液相色谱（HPLC）在实验室中被广泛应用于各种化学、生物和环境领域的分析。
而安捷伦高效液相色谱工作站作为常用的HPLC设备，其高级操作技巧的掌握对于提高实验效率和结果的准确性至关重要。
以下是安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训的主要内容：1.仪器介绍：详细介绍设备的基本结构和主要部件，包括进样器、分离柱、检测器等，并对各个部件的功能和操作方法进行说明。
2.方法开发：介绍如何根据实验需求选择合适的柱和流动相，调整流速、梯度程序、温度等参数，以达到最佳的分离效果和分析结果。
3.样品处理：讲解样品的前处理方法，如提取、净化、稀释等，以及常用的样品制备技巧，如固相萃取、离心等，以确保样品的准确性和稳定性。
4.数据处理：教授如何使用工作站软件进行数据采集、分析和处理，包括峰识别、峰面积计算、定量分析等，以及如何导出和保存数据结果。
5.故障排除：介绍常见的仪器故障及其解决方法，如柱堵塞、泵压不稳定、峰形不对称等，提供具体的故障诊断和维修指南。
6.方法验证：讲解常用的方法验证和质量控制技巧，包括标准曲线的建立和验证、精密度和准确度的评估等，以确保实验结果的可靠性和准确性。
该培训旨在使参与者掌握安捷伦高效液相色谱工作站的高级操作技巧，提高实验效率和分析结果的准确性。
通过实践操作和案例分析，培训参与者将能够熟练使用工作站进行方法开发、样品处理、数据处理和故障排除，并能够进行方法验证和质量控制。
总结：安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训是一项重要的培训活动，对于提高实验效率、保证实验结果的准确性和可靠性具有重要意义。
通过该培训，参与者将能够全面掌握安捷伦高效液相色谱工作站的操作技巧，并能够独立开展高效液相色谱分析实验。
考核及格标准：80分,且带*的必须正确。
精密仪器组培训考核试题集部门：姓名：成绩：一、填空题（66分，每题6分）1、流动相的pH值应控制在之间，当色谱系统中需使用pH值大于8的流动相时，应选用；当色谱系统中需使用pH值小于2的流动相时，应选用。
2、剩余检品按月存放，暂存期至少为个月。
3、HPLC法中，除另有规定外，流速一般为。
4、对照品或标准品自冰箱中取出后，必须放置至，然后才可以在分之一天平上称量，新开启的在使用后，必须标注。
5、对照或标准溶液需要保存的，其有效性必须经，确定后方可使用。
6、在系统适用性试验中：分离度除另有规定外，待测组分与相邻共存物之间的分离度应；拖尾因子除另有规定外，应在之间。
7、对于要求梯度洗脱的样品，在样品分析前必须进行，以辨认杂质峰，如洗脱过程中基线漂移较大，亦可对色谱图进行处理。
8、配制好的流动相应通过 um滤膜滤过，用前必须，否则容易在系统内，影响泵的工作、、检测器的灵敏度以及等。
对于规定pH值的流动相，应使用进行调节，除另有规定外，偏差一般不超过 pH单位。
*9、当两份平行测试样品检验结果一份合格、另一份不合格时，不得将其，应视为。
两份平行测试样品检验结果相对偏差应。
10、在出现检验结果、检验结果时应启动OOS。
11、配制好的流动相应及时记录，记录应包括：、、、、等，配制好的流动相应储存于中，避免直射，有效期一般为。
*12、外标法求组分含量计算公式：。
*13、内标法求组分含量计算公式：。
14、相对偏差计算公式：。
*15、相对标准偏差计算公式：。
16、调整流动相组分比例时，以组分比例较低者（小于或等于50%）相对改变量不超过 %且绝对改变量不超过 %为限，如 %相对改变的数值超过10%，则改变量以 %为限。
17、一般情况下，对于反相色谱柱，如使用缓冲液或含盐溶液作为流动相，在试验结束后，应用 %的甲醇/乙腈-水溶液冲洗，使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出。
如色谱柱需长期保存，反相柱可以贮存于中，并将色谱柱两端，以免干燥，保存。
