This Document can only be used in JingDeZhen FuXiang Pharm.Co., Ltd. Any unauthorized use
and copy is forbidden .
标
准文件
Standard document
文件编号
Document No.
SOP-LOP-790-8/00
高效液相色谱仪校验规程
Calibration SOP for HPLC
页
码
Page
1 / 9
状
态Status
正式
Formal
备份号
Control No.
起草人
Written by
起草日期
Written date
年月日颁发部门
Issued department
质量管理部
Quality department
审核人
Reviewed by
审核日期
Reviewed date
年月日批准人
Approved by
批准日期
Approved date
年
月
日
生效日期
Effective date
年月日
分发部门Distributed department ：质量负责人质量管理部QA QC
1、目的Objective ：建立高效液相色谱仪内部校验规程，确保校验工作规范、顺利进行。
2、范围Scope ：本规程适用于本公司使用的高效液相色谱仪（紫外-可见光检测器/二极
管阵列检测器）的校验。3、职责Responsibilities
：
3.1 培训职责：本文件起草人或审核人或批准人负责对质量管理部全体人员培训。3.2 QC ：负责制定本规程，并对本规程的实施负责。3.3 QA ：负责监督和检查本规程的实施。4、定义Definition ：无。5、程序Procedures ：5.1 依据
国家计量校验规程JJG 705-2002液相色谱仪，安捷伦液相说明书，岛津液相说明书。5.2 备件及材料5.2.1水：HPLC 级水。
5.2.2化学试剂：乙腈（HPLC ）、丙酮（分析纯）。5.2.3咖啡因标准品。5.2.4咖啡因标样。
0.005 mg/ml, 0.010 mg/ml, 0.025 mg/ml,0.050 mg/ml,0.125 mg/ml 和0.250 mg/ml 咖啡
因水溶液。
5.2.5色谱柱： 4.6mm ×250mm ，C18，5μm 。5.2.6 容量瓶：10ml 。
5.2.7玻璃注射器。
5.2.8 限流阻尼管。
5.2.9 分析天平。
5.2.10 秒表。
5.2.11 热电偶
5.3 校验项目及技术指标
5.3.1泵性能的测试
表1
校验项目指标
流量设定值(ml/min) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 流量设定值误差，|S S |＜5% 2% 2% 2% 2% 流量稳定性误差，S R ＜3% 2% 2% 2% 2% 5.3.2柱温箱温度稳定性测试*
表2
校验项目指标
温度设定值(℃) 20 25 30 35 40
温度设定值误差|△T|＜2℃
控温稳定性误差T C≤１℃
备注：如药典专论规定的特定柱温，不在以上温度范围之内，则对分析该品种的仪器增加该温度点校验，校验项目和可接受指标相同。
5.3.3 检测器性能测试
表3
校验项目指标基线噪声：≤5×10-4AU
基线漂移：≤5×10-3AU/h
波长准确度：|△λ|≤2nm
线性测试：相关系数R
响应因子f的RSD ≥0.999 ≤5.0%
5.3.4进样器性能测试
校验项目指标进样器精密度测试：
定性重复性(Rt)RSD定性≤ 1.0%
定量重复性(峰面积) RSD定量≤ 2.0%
自动进样器线性测试*：相关系数R 响应因子f的RSD ≥0.999 ≤5.0%
5.3.5梯度组成的测试*
表5
校验项目指标
梯度准确度|TSH-MSH|≤2%
梯度准确度的精密度≤0.5%
注：*表示该项目的内部校验取决于仪器的配置，有该配置则为必检项目。
5.4 校验方法
5.4.1校验通则
5.4.1.1 HPLC的内部校验由仪器所属部门经培训的使用者按本规程进行校验，其校验项
目依仪器配置和使用范围而定。
5.4.1.2 政府部门每一年对HPLC进行校验，每六个月内部对HPLC进行一次校验；仪器配置的关键部件大修或更换后，可参考本规程对该部件相关的项目进行校验，以对仪器的性能进行确认。
5.4.1.3 校验时，同时检查、确认仪器的安装，使用环境符合要求，仪器处于正常的状态
下，并检查、确认仪器的接线牢固，接地良好。
5.4.1.4 不同配置的仪器，须按照规定的校验项目及指标进行内部校验，以保证该仪器的
所有使用功能均进行了校验。
5.4.2 泵性能的测试－S S和S R的测定
5.4.2.1 测试条件：
流动相：水；
色谱柱：限流阻尼管。
5.4.2.2 测试：
分别设定流速为0.5ml/min，1.0ml/min，1.5ml/min，2.0ml/min，2.5ml/min等值进行校验，这些流速覆盖了实验室使用的流速范围。待流速稳定后，在流动相流出口处用容量瓶准确地收集流动相10.0ml，同时用秒表计时，各测量3次，按公式(1)、(2)计算S S 和S R，并以下表所列内容记录测试数据和结果。
