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培训课件年月目录……..液相色谱的理论部分……..液相色谱的操作部分（三聚氰胺的检测）……..色谱柱的安装…….. 三聚氰胺检测卡的使用…….. 水解蛋白的检测.…….灰分的测定…….马弗炉的使用……..食品中蛋白质的测定……仪器回收率的测定……的使用……..塑化剂的检测一、高效液相色谱的理论部分一、色谱定义1、色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术。
2、流动相：携带样品流过整个系统的流体。
3、固定相：静止不动的一相，色谱柱。
二、色谱的分类1、高效液相色谱。
、气相色谱。
、薄层色谱。
、毛细管电泳。
三、色谱优点1、同时分析。
、分离性能好。
、灵敏度高（—）。
、进样量小（—μ）。
四、色谱要求1、水：专门的纯水机或超纯水机，理想的用水应为18.2MΩ超纯水，并通过μ的滤膜，除去热源、有机物、无机离子等。
不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水。
2、有机溶剂：色谱纯，用前需要有机膜过滤，超声。
3、缓冲盐：水系膜过滤，超声，冷藏，易长菌。
使用前后必需要用：的甲醇水过渡，不能直接使用纯有机溶剂。
否则会造成腐蚀、磨损、阻塞等现象。
使用前后，需要用纯水冲洗泵头清洗管路，易受细菌和霉菌的影响。
4、脱气（超声）：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡。
泵中气泡使液流波动，改变保留时间各峰面积；柱中气泡使流动相绕流，峰变形；检测器中的气泡产生基线波动。
五、高压梯度洗脱：用两台高压输液泵将两种溶剂输入。
避免分析时间长，分离度差，在最短时间内获得最佳的分离。
六、柱温箱，我们设定的柱温为40℃，这样是为了分析结果重现性好，提高柱效，降低柱压，保证检测稳定性。
七、分析柱的维护1、在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下（）冲洗，长时间未用的分析柱也要同样处理。
2、定期作用强溶剂冲洗柱子。
3、我们使用的流动相主要是缓冲盐，要先用：的甲醇水溶液冲洗，再用有机溶剂冲洗。
4、净化样品。
5、分离条件。
6、不使用时，要盖上盖子，避免固定相干涸。
（１）高效液相色谱分析的流程由泵将贮液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。
被测物则由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。
废液流入废液瓶。
遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器做梯度洗脱。
这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而ＨＰＬＣ改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。
（２）高效液相色谱的分离过程同其他色谱过程一样，ＨＰＬＣ也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。
它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。
开始样品加在柱头上，假设样品中含有３个组分，Ａ、Ｂ和Ｃ，随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。
分配系数小的组分Ａ不易被固定相阻留，较早地流出色谱柱。
分配系数大的组分Ｃ在固定相上滞留时间长，较晚流出色谱柱。
组分Ｂ的分配系数介于Ａ和Ｃ之间，第二个流出色谱柱。
（２）高效液相色谱的分离过程若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流出色谱柱，达到分离的目的。
不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。
其次，当不同组分在色谱柱中运动时，谱带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。
所以分离最终效果则是热力学与动力学两方面的综合效应。
（３）高效液相色谱的分类①液－固色谱法：液－固色谱法（液－固吸附色谱法）的固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的，液－固色谱法常用于分离极性不同的化合物、含有不同类型或数量官能团的有机化合物，以及有机化合物的不同异构体，但不宜用于分离同系物。
