masson三色染色液是什么
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Masson 三色染色试剂盒(甲苯胺蓝)说明书修订日期:2018.07.31Cat number:KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only(科研专用)【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。
用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况,以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分;如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。
尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。
【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。
2、滴加 1 滴(50-100µl)苏木素染色液(试剂 A)染色 5-10 分钟。
蒸馏水冲掉染液。
3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。
4、滴加 1 滴(50-100µl)复合染色液(试剂 B)染色 5 分钟。
5、蒸馏水或自来水冲洗一下(2-3 秒,冲掉染液即可)。
6、滴加 1 滴(50-100µl)磷钼酸(试剂 C)染色 1 分钟。
7、甩干或自然晾干。
8、滴加 1 滴(50-100µl)甲苯胺蓝染色液(试剂 D)染色 5min 左右。
9、蒸馏水或自来水冲洗一下(2-3 秒,冲掉染液即可)。
10、放入烘箱(50-60 摄氏度)烘干。
中性树胶封片。
【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色;肌肉、弹力纤维呈红色;神经轴索呈粉红色;纤维素呈紫红色;红血球呈橘红色。
细胞核呈蓝紫色。
【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织,染色效果可有差异,要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。
2、染色液必须充分淹盖组织。
3、每次染色宜用阳性切片作对照。
【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书(南京森贝伽生物科技有限公司)【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色,胶原纤维绿色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定;②分化时间短,1~2 分钟;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定:甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片:所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126(7×50ml)SBJ0126(7×100ml)SBJ0126(7×500ml)Storage试剂(A)A1:苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2:三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合,成为试剂(A),不可预先配制后放置,因染色液的色素根与铁会化合,形成不容性沉淀,等量混合后,一般24h 后失去染色力。
试剂(B): 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂(C): 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(D): 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂(E): 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(F): 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(G): 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂(A)染色5min~10min。
3、试剂(B)分化、水洗,试剂(C)返蓝、水洗。
Masso n三色染色:主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
Mass on染色是最为常用的结
缔组织染色法,此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布,纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。
对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增
生程度的差别具有重要价值。
Masso n染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存
在嗜复红蛋白的沉积,对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
天狼星红染色(Sirius red ):由于胶原呈碱性,与酸性染料起强烈反应。
天狼星红就是一种很强的酸性染料,它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。
天狼星红染色胶原纤维呈红色,胞核呈绿色,余呈黄色。
偏光显微镜可以分辨不同的纤维类型,
HE染色:又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,
简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。
这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色,
油红0脂肪染色法:显示组织内的脂肪,油红0为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色,。
Masson 三色染色液30ml+20ml*5RT产品简介:由Mallory 三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
包装内容:产品货号产品名称规格G1006-1重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4丽春红酸性品红染液20ml G1006-5磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml保存条件:室温保存,有效期1年。
操作说明:1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ,自来水洗。
2、重铬酸钾染色:切片入重铬酸钾浸泡过夜,自来水洗。
3、铁苏木素染色:铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液,切片入铁苏木素3min ,自来水洗,盐酸酒精溶液分化,自来水冲洗。
4、丽春红酸性品红染色:切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ,自来水漂洗。
5、磷钼酸染色:磷钼酸水溶液浸染1-3min 。
6、苯胺蓝染色:磷钼酸之后不用水洗,直接入苯胺蓝染液染3-6min 。
7、分化:切片用1%冰醋酸分化,两缸无水乙醇脱水。
8、透明封片:切片放入第三缸无水乙醇5min ,二甲苯5min 透明,中性树胶封片。
9、显微镜镜检,图像采集分析。
染色结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。
弹力纤维呈棕色。
肌纤维、纤维素和红细胞染红色。
细胞核染蓝黑色。
G 1006注意事项:1、Weigert铁苏木素分A、B两液,临用前将两液等比例混合使用。
不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而失去染色力。
2、重铬酸钾染完后水洗要稍快,切片洗干净即可。
3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换,也可以现配现用;4、丽春红的染色程度要控制好,胶原部分不能是红色或者太红,会影响后续苯胺蓝的着色;5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中,若是分化过度,胶原蓝色太浅,若分化不足,易与丽春红的颜色叠加呈紫蓝色。
Masson复合染色液的配制:酸性复红1 g丽春红2 g橘黄G 2 g0.25%醋酸300 ml混匀,过滤后备用。
亮绿染色液的配制:亮绿干粉0.1 g0.2%醋酸100 ml充分混匀,过滤后备用。
Masson染色(1)常规脱蜡至水:二甲苯Ⅰ10 min→二甲苯Ⅱ10 min→100%酒精Ⅰ5 min→100%酒精Ⅱ5 min→95%酒精3 min→90%酒精3 min→80%酒精3 min→70%酒精3 min→蒸馏水1 min(2)Masson染色:Masson复合液5 min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次→1%磷钨酸6 min→自来水过洗1次→亮绿15min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次(3)常规脱水透明:70%酒精30 s→80%酒精30 s→90%酒精30 s→95%酒精30 s→100%酒精Ⅰ5 min →100%酒精Ⅱ5 min→二甲苯Ⅰ5 min→二甲苯Ⅱ10 min→中性树胶封片至于操作要点的话觉得就是在masson复合液和亮绿的染色时间得摸索一下,还有就是70,80酒精时间尽量短,脱色很厉害,不过要是实在脱得严重的话,还可以倒回来重新染色附图一张,心肌梗死masson染色,肌纤维红色,胶原绿色,红细胞橘黄色高倍镜下•脱水4%多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋切片;切片脱蜡至水后入重铬酸钾—醋酸液或3%升汞处理1小时;水洗后染Regaud氏苏木素10分钟;自来水充分洗后,用2%盐酸酒精分化;流水冲洗到蓝黑色;1%丽春红酸性品红液中染5分钟;蒸馏水洗;1%磷钼酸水溶液媒染5分钟;不经水洗入2%淡绿液3分钟;1%醋酸液分色1分钟;脱水、透明、中性树胶封固。
结果:细胞核染黑蓝色,胶原纤维呈绿色,神经胶质纤维、肌纤维、红细胞呈红色。
Masson三色法(根据Masson,1929)一、试剂配制(一)Weigert氏铁苏木素液(可用Herris苏木素代替)甲液:苏木素1g无水酒精(或95%酒精)100ml乙液:29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml)盐酸1ml临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
(二)丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R)0.7g酸性品红(acid fuchsin)0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml(三)1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid)1g蒸馏水加至100ml(四)2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue)2g冰醋酸(glacial acetic acid )2ml蒸馏水加至100ml(五)亮绿液亮绿(light green)1g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid )1ml(六)Bouin氏液苦味酸饱和液(1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1.组织固定于Bouin氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2.切片脱蜡至水:(1)二甲苯中脱蜡10分钟×3次,用吸水纸吸干液体;(2)100%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;(3)95%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;;(4)流水2分钟,用吸水纸吸干水分;3.Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
广州市外显子生物技术有限公司
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苯胺蓝染色液
产品说明:
苯胺蓝染色液是 Masson 三色染色试剂盒的组成之一。
苯胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成,呈酸性,常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品组成:
货号 产品 规格 储存条件 S-1528 苯胺蓝染液 100ml
2-4℃ -- 说明书
1份
有效期:12个月 操作步骤(仅供参考): 以Masson 三色染色为例 1.切片脱蜡至水。
2.Weigert 铁苏木素使用前(Weigert 铁苏木素 A 、 B 液等比例混合)。
染 10-20 分钟,流水稍洗。
3.盐酸酒精分化,流水冲洗数分钟。
4.丽春红酸性品红染液染 5-10 分钟,蒸馏水稍冲 洗。
5.磷钼酸溶液处理约 5 分钟,去掉溶液,不用水洗, 直接用苯胺蓝染液复染 5 分钟。
6.1%冰醋酸处理 1 分钟,95%酒精脱水。
7.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树脂封固。
注意事项:
1. 切片脱蜡应尽量干净。
2. 切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗,否则可能出现不着色。
3. 不同染色参照具体的实验要求。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作 染色结果:
神经节组织×400 结果判定:主要用于神经组织、细胞、结缔组织的染色,使胶原纤维呈蓝色。
masson三色染色原理马森三色染色的原理马森三色染色是一种组织学染色技术,用于区分神经组织的不同成分。
它基于通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色,这赋予神经元不同的颜色。
磷钨酸-血红素溶液的染色原理磷钨酸-血红素溶液是一种呈酸性的溶液,含有磷钨酸和血红素。
磷钨酸是一种多价阴离子,对组织中的碱性成分,如细胞核和细胞质,具有亲和力。
血红素是一种铁卟啉分子,与氧气结合形成稳定的络合物。
当磷钨酸-血红素溶液应用于组织时,磷钨酸会与细胞核和细胞质中的碱性成分结合,形成不溶性沉淀。
血红素与氧气结合,形成棕红色的血红素氧络合物,沉积于这些碱性成分上。
因此,细胞核和细胞质被染成深棕色。
靛胭脂溶液的染色原理靛胭脂是一种阳离子染料,对组织中的酸性成分,如细胞外基质和神经胶质纤维,具有亲和力。
当靛胭脂溶液应用于组织时,它会与这些酸性成分结合,形成不溶性蓝紫色沉淀。
神经胶质纤维是神经胶质细胞产生的长而细的纤维,它们包裹着神经元并提供支持。
通过与靛胭脂结合,这些纤维被染成蓝色。
神经元的染色神经元的细胞体主要由细胞核和细胞质组成,它们富含碱性成分。
因此,它们在磷钨酸-血红素溶液中被染成深棕色。
神经元的轴突和树突是神经元的细胞突起,它们由神经胶质细胞包裹。
神经胶质细胞产生的神经胶质纤维含有酸性成分,因此它们在靛胭脂溶液中被染成蓝色。
通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色,马森三色染色可以区分神经元的不同成分:细胞核和细胞质呈深棕色,神经胶质纤维呈蓝色。
这种差异允许在显微镜下对神经组织进行详细的观察和分析。
Masson三色染色:主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
Masson染色是最为常用的结缔组织染色法,此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布,纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。
对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增生程度的差别具有重要价值。
Masson染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存在嗜复红蛋白的沉积,对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
天狼星红染色(Sirius red):由于胶原呈碱性,与酸性染料起强烈反应。
天狼星红就是一种很强的酸性染料,它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。
天狼星红染色胶原纤维呈红色,胞核呈绿色,余呈黄色。
偏光显微镜可以分辨不同的纤维类型,
HE染色:又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。
这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色,
油红O脂肪染色法:显示组织内的脂肪,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色,。
Masson三色染色液说明书
【产品名称】
Masson三色染色液
【包装规格】
货号:DC0032
套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒
【预期用途】
主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】
Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、Weigert铁苏木素A液苏木素
2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁
3、酸性乙醇分化液乙醇
4、蓝化液碳酸盐
5、丽春红品红染色液丽春红、品红
6、乙酸溶液乙酸
7、磷钼酸溶液磷钼酸
8、苯胺蓝染色液苯胺蓝
【储存条件及有效期】
5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】
组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】
1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;
2、切片常规脱蜡至水;
3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;
4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;
5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;
6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;
7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;
8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);
9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);
10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);
11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
【检验结果的解释】
胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,肌纤维、纤维素和红细胞呈红色,细胞核呈蓝黑色。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物染色观察。
【注意事项】
1、酸性乙醇分化液分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
2、如蓝化液使用量较大,可自行配制Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液予以替代。
3、磷钼酸处理时最好在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可,分化时间根据染色深浅而定。
4、部分组织脱水时容易造成脱色过度,应注意肉眼控制。
5、本产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司
住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。