PH0622 Masson三色染色液(马松染色)使用手册
- 格式:pdf
- 大小:571.30 KB
- 文档页数:3
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书(南京森贝伽生物科技有限公司)【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色,胶原纤维绿色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定;②分化时间短,1~2 分钟;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定:甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片:所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126(7×50ml)SBJ0126(7×100ml)SBJ0126(7×500ml)Storage试剂(A)A1:苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2:三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合,成为试剂(A),不可预先配制后放置,因染色液的色素根与铁会化合,形成不容性沉淀,等量混合后,一般24h 后失去染色力。
试剂(B): 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂(C): 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(D): 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂(E): 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(F): 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(G): 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂(A)染色5min~10min。
3、试剂(B)分化、水洗,试剂(C)返蓝、水洗。
广州市外显子生物技术有限公司Http//Masson染色液说明书货号:S-1518规格:20ml产品组成:名称规格保存Weigert铁苏木素A液20ml RT避光Weigert铁苏木素B液20ml RT避光丽春红酸性品红染液20ml 2-4℃低温环境磷钼酸溶液20ml 2-4℃低温环境苯胺蓝染液20ml 2-4℃低温环境盐酸酒精分化液1%冰醋酸溶液20ml 2-4℃低温环境20ml 2-4℃低温环境简介:利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关,根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
储存条件:本试剂盒应贮存于2-4℃低温环境。
有效期:原包装未开封试剂有效期为12 个月,在有效期内的已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
操作步骤:1.切片脱蜡至水。
2.Weigert铁苏木素使用前Weigert铁苏木素A、B 液等比例混合。
染10-20分钟,流水稍洗。
3.盐酸酒精分化,流水冲洗数分钟。
4.丽春红酸性品红染液染5-10分钟,蒸馏水稍冲洗。
5.磷钼酸溶液处理约5分钟,去掉溶液,不用水洗,直接用苯胺蓝染液复染5分钟。
6.1%冰醋酸处理1分钟,95%酒精脱水。
7.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树脂封固。
注意事项:1.Weigert铁苏木素分A、B两液,应于临用前将两液等份混合使用,而不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。
2.磷钼酸处理时可在镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。
染色结果:骨组织×200 结果判定:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,弹力纤维呈棕色,肌纤维、纤维素和红细胞染红色,细胞核染蓝黑色。
Masson染色,操作规程实验目的: Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一实验原理:Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。
孔隙的大小,决定了组织的渗透性。
如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。
如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。
由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.而染料分子的大小,主要由其分子量来体现。
小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。
一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。
试剂仪器:Harris 氏苏木精:苏木精0.4g,硫酸铝钾6g,黄色氧化汞0.16g,蒸馏水80ml。
将蒸馏水预热,预热过程中加入硫酸铝钾,沸腾后拔下电源,加入苏木精,接通电源再度沸腾后,拔掉电源,缓慢加入氧化汞,搅拌混匀,冷却后第二天加入5%比例的冰醋酸即可用。
透明玻璃瓶装缓慢氧化可省略冰醋酸,长期有效。
Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。
1%冰醋酸水溶液:冰醋酸1 ml,蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml。
1%苯胺蓝水溶液:苯胺蓝1g,蒸馏水100 ml,冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml实验操作程序:1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson三色染色液【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色,流水稍冲洗;7、按蒸馏水和乙酸溶液按比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水3次,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson三色染色液染色步骤及注意事项步骤一:预处理1. 切片:将需要染色的组织标本切成厚度约为5um的切片,将切片均匀地放置在已经预先烘干和标记好的玻片上。
2.固定:用10%中性缓冲福尔马林固定切片,固定时间约为24小时。
步骤二:染色1. 染色剂的准备:将Masson三色染色液购买回来后,根据品牌推荐比例稀释至适当浓度。
不同品牌染色液稀释比例可能有所不同,因此以具体品牌的说明为准。
2.染色操作:(1)将切片放入染色盒中,并将染色盒放入水浴中加热,温度为60-70摄氏度,时间为20-30分钟。
(2)将加热后的染色盒取出,用水冲洗2-3分钟,直至明显的污染物被冲走。
(3)将切片置于70%酒精中,时间为5分钟。
(4)在20%盐酸酒精中浸泡1-2秒钟,然后立即将切片漂洗至酸性的第一盐酸酒精。
(5)在酸性的第一盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟,然后漂洗至酸性的第二盐酸酒精中。
(6)在酸性的第二盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟,然后漂洗至蒸馏水中。
(7)转移到可溶性亮蓝GR中染色5分钟。
(8)快速漂洗后,放入蒸馏水中清洗1-2分钟。
(9)再次转移到1%醋酸中染色1分钟。
(10)最后,在6%石蜡溶液中浸泡5-10分钟。
步骤三:封片1.脱水:将切片放入95%乙醇中,时间为1-2分钟,然后放入绝对乙醇脱水2-3分钟。
2.渗透:将切片放入二氯甲烷中,时间为5分钟,再在房温下放置3-5分钟以充分渗透。
3. 封片:将切片放入500-1000ml锡兰红封片剂中,时间为1-2分钟,然后将切片转到盖玻片上,将封片剂挤满,盖上玻片,压平后放在60摄氏度的烘箱中加热2-3小时。
注意事项:1.操作中应注意个人防护,佩戴手套和口罩,避免接触有害物质。
2.染色过程中要严格控制温度和时间,避免染色过程中出现偏差。
3.在脱水和封片过程中要注意将切片完全浸透,防止切片变形或脱落。
4.染色溶液和液体处理过程中,应注意防止溅溢和污染,保持操作环境清洁。
病理学技术特殊染色Masson三色染色法
试剂:
①Regaud苏木精:苏木精1克溶于蒸馏水80毫升,加温溶解,冷却;加95%酒精和甘油各10毫升,数日后使用
②丽春红G酸性品红液:丽春红G 0.7克,酸性品红0.3克,蒸馏水 99毫升,冰醋酸1毫升
③0.2%醋酸水溶液:冰醋酸1毫升,蒸馏水200毫升
④1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1克,蒸馏水100毫升
⑤蓝水溶液:苯胺蓝2克,蒸馏水98毫升,冰醋酸2毫升
⑥1%亮绿水溶液:亮绿1克,蒸馏水100毫升,冰醋酸1毫升
方法:
⑴石蜡切片脱蜡至水
⑵含汞固定者须脱汞去碘
⑶自来水洗,蒸馏水洗
⑷Regaud苏木精或Weigert苏木精染细胞核5~10分钟,充分水洗
⑸过染用盐酸酒精分色,蒸馏水洗
⑹丽春红G酸性品红液染色5~10分钟
⑺0.2%醋酸水溶液分色短时
⑻1%磷钼酸水溶液1~3分钟
⑼直接用苯胺蓝或亮绿液染5分钟
⑽0.2%醋酸水溶液洗短时
⑾95%酒精及无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片
结果:
胶原纤维、黏液、软骨蓝色或绿色(亮绿染色);
细胞质、肌肉、纤维素、神经胶质红色;
细胞核蓝黑色。
Masson三色法(根据Masson,1929)一、试剂配制(一)Weigert氏铁苏木素液(可用Herris苏木素代替)甲液:苏木素1g无水酒精(或95%酒精)100ml乙液:29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml)盐酸1ml临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
(二)丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R)0.7g酸性品红(acid fuchsin)0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml(三)1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid)1g蒸馏水加至100ml(四)2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue)2g冰醋酸(glacial acetic acid )2ml蒸馏水加至100ml(五)亮绿液亮绿(light green)1g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid )1ml(六)Bouin氏液苦味酸饱和液(1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1.组织固定于Bouin氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2.切片脱蜡至水:(1)二甲苯中脱蜡10分钟×3次,用吸水纸吸干液体;(2)100%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;(3)95%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;;(4)流水2分钟,用吸水纸吸干水分;3.Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
Masson 三色染色试剂盒(甲苯胺蓝)说明书修订日期:2018.07.31Cat number:KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only(科研专用)【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。
用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况,以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分;如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。
尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。
【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。
2、滴加 1 滴(50-100µl)苏木素染色液(试剂 A)染色 5-10 分钟。
蒸馏水冲掉染液。
3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。
4、滴加 1 滴(50-100µl)复合染色液(试剂 B)染色 5 分钟。
5、蒸馏水或自来水冲洗一下(2-3 秒,冲掉染液即可)。
6、滴加 1 滴(50-100µl)磷钼酸(试剂 C)染色 1 分钟。
7、甩干或自然晾干。
8、滴加 1 滴(50-100µl)甲苯胺蓝染色液(试剂 D)染色 5min 左右。
9、蒸馏水或自来水冲洗一下(2-3 秒,冲掉染液即可)。
10、放入烘箱(50-60 摄氏度)烘干。
中性树胶封片。
【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色;肌肉、弹力纤维呈红色;神经轴索呈粉红色;纤维素呈紫红色;红血球呈橘红色。
细胞核呈蓝紫色。
【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织,染色效果可有差异,要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。
2、染色液必须充分淹盖组织。
3、每次染色宜用阳性切片作对照。
【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。