工业发酵染菌的防治

工业发酵染菌的防治和灭菌试题一、选择题1.在化学消毒剂中，通过凝固蛋白作用杀菌的是（ ）A 新洁尔灭B 乙醇C 甲醛D 拮抗2.化学消毒剂（ ）是能损伤细菌外膜的阳离子表面活性剂A 福尔马林B 结晶紫C 漂白粉D 新洁而灭3.下列抗生素作用机制中，抑制细胞壁合成的是（ ）A 利福霉素B 四环素C 两性霉素D 青霉素4.实验室常规高压蒸汽灭菌的条件是（ ）A 135℃—140℃，5—15秒B 72℃、15秒C 121℃，30分钟D 100℃，5小时5.使用高压锅灭菌时，打开排汽阀的目的是（ ）A 防止高压锅内压力过高，使培养基成分受到破坏B 排尽锅内有害气体C 防止锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸D 排尽锅内冷空气6.出于控制微生物的目的，灭菌一词指的是( )。

A 除去病原微生物B 降低微生物的数量C 消灭所有的生物D 只消灭体表的微生物7.高压灭菌器杀死微生物需要下列所有条件，除了( )之外。

A 蒸汽温度121℃B 15分钟C 每平方英寸15磅压力D 10个大气压的体积8.消毒剂与防腐剂的差别是( )。

A 消毒剂仅用于非生物的物体，而防腐剂用在皮肤表面B 消毒剂杀死细菌的芽孢，而防腐剂不能C 消毒剂不能灭菌，防腐剂可以D 消毒剂是化学物质，而防腐剂不是化学物质9.干热法常用于( )灭菌。

A 盐溶液B 细菌培养基C 油料物质D 医院的毛毯10.紫外线辐射主要作用于微生物的( )。

A 糖类B 酶类C 核酸D 细胞壁11.环氧乙烯广泛用于( )。

A 灭菌塑料制品B 消毒台面C 杀死皮肤表面的细菌D 灭菌化学溶液12.为使醇类制菌效果显著，所用化学试剂必须( )。

A 用10％溶液B 放溶液中5分钟C 用丁醇D 完全浸没在溶液中13.所有下列情况均是抗生素抑制微生物的方法，除了( )之外。

A 抗生素抑制细胞壁合成B 抗生素干扰细胞膜功能C 抗生素阻止能量从ATP释放D 抗生素抑制蛋白质合成14.青霉素族的抗生素主要用于抗( )。

学生综述性论文题目：发酵过程中染菌的分析、检测及预防姓名：刘莉学号：2008132114专业：生物技术班级：083班课程名称：微生物工程指导教师：燕平梅课程学期：2010至2011学年第一学期发酵过程中染菌的分析、检测及预防姓名：刘莉指导老师：燕平梅（太原师范学院生物系083班学号：2008132114）摘要：通过分析发酵过程中染菌的各种原因，总结检测染菌的方法，并提出染菌后应采取哪些措施及预防染菌的方法。

关键词：发酵；染菌；危害；检查；预防前言：发酵工业生产中，污染杂菌造成发酵失败的事故时常发生，严重影响发酵生产，关于发酵过程是否污染杂菌，如何检测，染了菌后如何处理等等，这些问题的研究是十分有意义的。

内容：1发酵染菌的危害1.1不同种类的杂菌对发酵的影响青霉素发酵：污染细短产气杆菌比粗大杆菌的危害大链霉素发酵：污染细短杆菌、假单孢杆菌和产气杆菌比粗大杆菌的危害大四环素发酵：污染双球菌、芽孢杆菌和夹膜杆菌的危害较大柠檬酸发酵：最怕污染青霉菌肌苷、肌苷酸发酵：污染芽孢杆菌的危害最大谷氨酸发酵：最怕污染噬菌体高温淀粉酶发酵：污染芽孢杆菌和噬菌体的危害较大1.2不同染菌时间对发酵的影响1.2.1种子培养期染菌菌体浓度低、培养基营养丰富1.2.2发酵前期染菌杂菌与生产菌争夺营养成分，干扰生产菌的繁殖和产物的形成1.2.3发酵中期染菌严重干扰生产菌的繁殖和产物的生成1.2.4发酵后期染菌如杂菌量不大，可继续发酵。

如污染严重，可采取措施提前放罐1.3不同染菌途径对发酵的影响种子带菌：种子带菌可使发酵染菌具有延续性空气带菌：空气带菌也使发酵染菌具有延续性，导致染菌范围扩大至所有发酵罐培养基或设备灭菌不彻底：一般为孤立事件，不具有延续性设备渗漏：这种途径造成染菌的危害性较大1.4染菌对产物提取和产品质量的影响1.4.1对过滤的影响发酵液的粘度加大；菌体大多自溶；由于发酵不彻底，基质的残留浓度加度。

造成过滤时间拉长，影响设备的周转使用，破坏生产平衡；大幅度降低过滤收率。

避免发酵染菌的改进防止杂菌污染是任何发酵工厂的一项重要工作内容，尤其是无菌程度要求高的液体深层发酵，污染防止工作的重要性更为突出。

在发酵前期或中期染菌，杂菌会很快消耗营养物质，使生产菌无法正常生产而引起倒罐。

在发酵后期染菌，一般亦会使产率下降并影响产物的提取.我们可以通过一下几个步骤进行改造:一. 空气净化方面:1 吸入空气前处理设备因为高空空气尘埃少且微生物含量远低于地平面，故空气压缩机吸气口(采风塔)通常以离地面5～10米为宜，如为减少噬菌体出现机会，吸气口更应离地面15～20米为好.吸入的空气在进入压缩机前应先通过粗过滤器过滤，减少进入空气压缩机的灰尘和微生物的数量，以减少机械杂质造成压缩机的磨损，并减轻后空气除菌介质的除菌负荷。

常用的粗过滤器介质有涤纶无纺布或中孔聚氯酯泡沫塑料。

粗过滤器可作成板式或袋式。

吸气口流速小于lOm／s，粗过滤器气流速度一般为2～2.5m3／m2.min为宜。

2 选用合适空压机发酵生产中要求提供大量的无菌压缩空气供发酵通气用。

工厂常采用往复式，螺杆式、涡轮式空气压缩机作为空压站的主要设备。

发酵生产用压缩机一般以排气压力0.2～0.3Mpa低压居多.往复式空压机的价格比较低廉，操作与维修比较方便，单位比功率较小.但其出口流量因受往复压缩之故很不稳定，有脉冲现象，而且活塞与汽缸往复摩擦必须有润滑装置，使压出空气中夹带大量油雾给压缩空气的除菌带来一定困难。

为了解决这一缺点，目前有些工厂采用由二硫化钼的氟塑料制成的活塞环代替原来的金属环作无油润滑，效果甚好，既有利于后面的空气净化除菌，又节约了润滑油，但由于氟塑料的弹性不及金属环，故气缸中气体泄漏虽增加，改装后的空气压缩机的排气量一般要减少lO％左右。

中型空气压缩机可采用转子表面喷涂自润滑耐磨材料的螺杆压缩机，其体积较小，噪音，振动低。

大型空气压缩机较多采用涡轮式压缩机，与往复式空气压缩机相比，具有体．积小，重量轻，占地小，运转平稳、供气置大，出口压力稳定、输出的压缩空气不含油雾等优点。

发酵工业杂菌污染的控制技术摘要：在大多数发酵工业中，都要保持纯种的培养。

然而，许多工业发酵过程中的染菌不仅可能造成了巨大的经济损失，还会扰乱生产秩序、破坏生产计划。

因此，在发酵工业中杂菌污染的灭菌技术及控制技术应当得到生产者的高度重视。

关键字：发酵；杂菌；控制技术工业发酵的染菌问题是许多企业面临的一个严峻的问题，部分企业甚至无法找到染菌的原因，造成连续染菌，不仅造成了经济损失，对于人员的情绪和生产积极性也造成了很多的影响。

我们要控制杂菌污染，首先要找到易染杂菌的环节以及染菌的原因，然后针对其进行分析，进行灭菌技术的改进以及预防杂菌感染的措施。

1.发酵工业中杂菌污染的原因分析发酵染菌的原因，总结防止发酵染菌的经验教训，把发酵染菌消灭在发生以前，防患于未然，是积极制服发酵工业生产过程中杂菌的最重要的措施。

1.1染菌的菌型分类和杂菌生存的条件许多杂菌与我们的工业菌种有着相似的生长条件，因此能够在工业发酵中很好的生长。

我们要控制杂菌的污染，必须对杂菌的生长条件、代谢途径十分了解。

发酵过程中较易感染的杂菌主要有真菌的酵母菌、霉菌等，细菌中的长短杆菌、球菌等以及病毒噬菌体。

最适生长温度是指在此温度下，微生物的新陈代谢达到最大的速率，一般微生物的生长最适温度在25～35℃。

了解各菌种的最适成长温度，对分析染菌的原因有一定的参考价值[1]。

微生物在超过其最高生长温度的环境中生长就会死亡，微生物在高温下死亡的机理是酶遇热后失去活性引发新陈代谢故障而引起的。

我们采用致死温度和致死时间为标准。

掌握各种微生物的致死温度和致死时间有利于灭菌操作。

一般情况下，大肠杆菌、肺炎双球菌和酵母菌在60℃左右10min即可死亡，而枯草芽孢杆菌则要100℃时17min死亡，嗜热芽孢杆菌则需要120℃时12min才能杀死。

微生物生长环境中的pH与微生物的活动有密切关系，pH的变化可能引起某种代谢产物的积累，而pH若发生突变有可能是因为感染了某种杂菌。

不同染菌途径对发酵的影响：1、种子带菌：种子带菌可使发酵染菌具有连续性；2、空气染菌：空气染菌也是发酵染菌具有连续性，导致染菌范围扩大至所有发酵罐；3、培养基或设备灭菌不彻底：一般为孤立事件，不具有连续性；4、设备泄露：这种途径造成染菌的危害性较大；发酵染菌的防止一、种子带菌的原因及防止1.带菌的原因（1）无菌室的无菌条件不符合要求；（2）培养基灭菌不彻底；（3）操作不当。

2.种子带菌的防止种子带菌是发酵前期染菌的原因之一。

在每次接种后应留取少量种子悬浮液进行平板、肉汤培养，借以说明是否种子中带杂菌。

种子培养的设备和装置有无菌室、灭菌锅和摇瓶机等。

（1）无菌室接种、移种等无菌操作需要在无菌室内进行。

无菌室面积不宜过大，一般约4~6米2，高约2.6米。

为了减少外界空气的侵入，无菌室要有1~3个套间（缓冲过道）（参照下图）。

无菌室内部的墙壁、天花板要涂白漆或采用磨光石子，要求无裂缝，墙角最好做成圆弧形，便于揩擦清洗以减少空气中微生物的潜伏场所，室内布置应尽量简单，最好能安装空气调节装置，通入无菌空气并调节室内的温湿度。

无菌室的每个套间一般都用紫外线灭菌。

通常用30瓦紫外线灭菌灯照射20~30分钟即可。

紫外线杀菌的效率还与室内的空气性质有光；空气温度高杀菌效率高，空气中灰尘多杀菌效率低，而相对湿度高则紫外线灯的使用寿命长。

紫外线能穿过石英但不能透过玻璃。

配合使用的化学灭菌药剂有：用作喷洒或揩擦的（以揩擦为主）有75%酒精、0.25%新洁尔灭（季铵盐）、0.6~1%漂白粉、0.5%石炭酸、0.5%过氧乙酸、1%煤酚皂（来苏尔）、0.5%高锰酸钾、300单位/毫升土霉素、50单位/毫升制霉菌素等；用作熏蒸的有甲醛（每立方米空间约用10毫升）或硫磺（每立方米空间约用2~3克）。

要根据不同的情况采用不同的灭菌剂。

如检查出无菌室中潜伏的的微生物中细菌较多，用石炭酸、土霉素等灭菌较好；如无菌室中霉菌多可以采用制霉菌素；如有噬菌体则用甲醛、双氧水或高锰酸钾等较好。

发酵染菌：指在发酵过程中生产菌以外的其他微生物侵入了发酵系统，从而使发酵过程失去真正意义上的纯种培养。

染菌对发酵的影响一、染菌对不同发酵过程的影响1、青霉素发酵过程：由于许多杂菌都能产生青霉素酶，因此不管染菌是发生在发酵前期、中期或后期，都会使青霉素迅速分解破坏，使目的产物得率降低，危害十分严重。

2、核苷或核苷酸发酵过程：由于所用的生产菌种是多种营养缺陷型微生物，其生长能力差，所需的培养基营养丰富，因此容易受到杂菌的污染，且染菌后，培养基中的营养成分迅速被消耗，严重抑制了生产菌的生长和代谢产物的生成。

3、柠檬酸等有机酸发酵过程：一般在产酸后发酵液的pH值比较低，杂菌生长十分困难，在发酵中、后期不太会发生染菌，主要是要预防发酵前期染菌。

4、谷氨酸发酵：周期短，生产菌繁殖快，培养基不太丰富，一般较少污染杂菌，但噬菌体污染对谷氨酸发酵的影响较大。

二、染菌发生的不同时间对发酵的影响1、种子培养期染菌种子培养主要是使微生物细胞生长与繁殖，此时，微生物菌体浓度低，培养基地营养十分丰富，比较容易染菌。

若将污染的种子带入发酵罐，则危害极大，因此应严格控制种子染菌的发生。

一旦发现种子受到杂菌的污染，应经灭菌后弃去，并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底灭菌。

2、发酵前期染菌在发酵前期，微生物菌体主要是处于生长、繁殖阶段，此时期代谢的产物很少，相对而言这个时期也容易染菌。

染菌后的杂菌将迅速繁殖，与生产菌争夺培养基中的营养物质，严重干扰生产菌的正常生长、繁殖及产物的生成。

3、发酵中期染菌发酵中期染菌将会导致培养基中的营养物质大量消耗，并严重干扰生产菌的代谢，影响产物的生成。

有的染菌后杂菌大量繁殖，产生酸性物质，使pH值下降，糖、氮等的消耗加速；菌体自溶，致使发酵液发粘，产生大量的泡沫，代谢产物的积累减少或停止；有的染菌后会使已生成的产物被利用或破坏。

从目前的情况来看，发酵中期染菌一般较难挽救，危害性较大，在生产过程中应尽力做到早发现、快处理。