杂交瘤技术和单克隆抗体技术ppt课件

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第二节、抗体分子
抗体是具有共同结构和功能形式的一大类糖蛋白。抗体分 成五类：IgG、IgM、IgA、IgE和IgD（见表2-1）。
一、IgG类抗体有两个相同的抗原结合位点 含有抗原结合位点的两个区域被称作Fab片段，涉及到免 疫调节的蛋白区称作Fc片段，在Fab和Fc片段之间的部分称 作铰链区。 重链分子量为5.5kDlt；轻链分子量为2.5kDlt。 二、不同类型抗体的区别 IgG、IgM、IgA、IgE和IgD因重链形式不同而有所区别。 它们的重链分别称作γ、μ、α、ε和δ。 重链的不同使这些蛋白具有不同形式的免疫功能，并且在 完成反应成熟的不同阶段发挥作用。这些差异主要是由于Fc 片段上的蛋白序列不同所致。 轻链只有两种：κ、λ。
B细胞：分泌抗体，并在细胞表面携带同一抗体的修饰型， 功能相当于受体。
毒性T细胞：携带结合抗原的细胞表面受体。 辅助T细胞：在控制B细胞和细胞毒性T细胞反应方面起关 键的调节作用。
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体液介导的适应性免疫反应：体液反应引发产生可结合外 来抗原的循环抗体，由B淋巴细胞产生，由辅助T淋巴细胞 介导是抗体技术的基础。
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3、免疫系统含有109以上淋巴细胞遍布全身，保证了它们在 任何部位都能迅速反应。淋巴细胞由骨髓中的原始干细胞不 断产生，经血液及淋巴系统循环，暂时停顿并积聚于称作淋 巴器官的特异化的结构中，在哺乳动物中就是淋巴结和肝脏。 在免疫反应过程中，免疫原积聚于一个淋巴器官中，这个淋 巴器官就变成了免疫反应的焦点。
第四讲 杂交瘤细胞和单克隆抗体技术
第一节、免疫的基本知识
一、免疫系统：分非适应性免疫和适应性免疫两类。 1、非适应性免疫是由非特异性反应的细胞介导的。如：巨 噬细胞的吞噬作用，泌细胞分泌的溶菌酶，以及中性细胞造 成的细胞裂解机制。 2、适应性免疫：是针对特定分子，而且可经反复暴露于外 源分子使之加强淋巴细胞合成细胞表面受体或分泌特异性蛋 白结合外源分子。这些分泌的蛋白称为抗体；可与抗体结合 的分子被称为抗原。当一个分子被用于诱导适应性反应时， 这个分子就被叫做免疫原。
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三、个别淋巴细胞识别个别抗原 一个细胞识别一个抗原，因为单一淋巴细胞上的所有抗 原受体是相同的。 在成熟淋巴细胞表面的所有受体都是糖蛋白，体细胞基 因重组、突变及基因转录后加工等使受体产生107个以上的 结合位点。抗原特异性通过确保只有一个类型的受体在一 个细胞内被合成的过程来维持。 虽然B细胞表面抗体和T细胞表面受体都具有类似的结构 ，但它们是由不同的基因家族编码的，其表达具有细胞型 的特异性。B细胞上的表面抗体能结合可溶性抗原，而T细 胞受体仅仅识别在其它细胞表面展示的抗原
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五、重链和轻链的可变区形成抗原结合位点
一个重链的可变区和一个轻链的可变区结合形成一个抗原
结合位点。可变区的异质性提供了动物有效进行免疫反应所
需的无数结合位点的基础。序列异质性并不是由整个可变区
的每一部分决定的，而是集中在与抗原接触的位点上。多数
可变性决定于每一个链的三个短区，它们形成轻链的三个超
七、形成λ轻链pre-mRNA外显子也要重排（图3）。V-J-
C-J-C。
八、形成功能性重链基因需要pre-mRNA外显子的重排（
图4）。50—100种可变区，12个D区，4个J区。
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九、这些重组及其它机制产生了无数的抗原结合位点。 十、等位基因排斥确保在任一B细胞中只有重新排列的一 个轻链和一个重链被表达。产生不同重链和轻链的基因重组 不总是产生一个功能基因，在B细胞分化过程中，轻链重排 开始于κ区内。然后，若二倍体基因中的一个首先重排，产 生一个功能性等位基因，另一个拷贝则进行重组。若二个重 组都产生非功能性等位基因，那么重组就要λ位点开始，以同 样的机制产生功能性重链。一旦重组产生一个功能性抗体， 一个未知的机制就制止进一步重组。将抗原性结合位点固定 ，直到细胞死亡。这个机制叫等位基因排斥。它可以解释为 什么B淋巴细胞分泌的只有一种抗原结合位点的抗体和抗体 只有一种类型的轻链。 十一、其它：重组被用于生产各种类和亚类的抗体。
细胞介导的适应性免疫反应：毒性T淋巴细胞结合于外来 或感染的细胞，随后将这些细胞裂解，辅助T细胞参与该反 应。 二、免疫系统能特异性地对无数种分子反应。
免疫系统持续地受无数抗原刺激。免疫系统的一个主要形 式是它能合成大量的抗体及细胞表面受体。各个带有不同抗 原结合位点的抗体和T细胞受体与外来分子的结合提供了免 疫反应特异性的基础。
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三、抗体轻链的分子结构 比较轻链的氨基酸结构发现，轻链有一个恒定区和一个可 变区。轻链由220个氨基酸组成，分为两个区，每个区由大 约110个氨基酸组成。-NH2末端那半部分是异源性的，称为 可变区（V）；羧基末端那部分称为恒定区（C）。 恒定区有两种类型：一种是决定κ轻链的，另一种是决定 λ轻链的。κ轻链基因位于第6染色体上，而λ轻链的基因则 位于第16染色体上。 四、抗体重链的分子结构 重链的序列也存在可变区和恒定区（图2-1）。IgG重链含 有一个可变区和三个恒定区，每区含110个氨基酸，其它重 链含有附加的恒定区。 IgG重链序列也显示γ链有四种亚类，即：IgG1、IgG2a、 IgG2b和IgG3。鼠重链多肽编码区在第12染色体上。
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四、免疫系统能将外来微生物和分子与自身成分区别开来。 五、系统记忆每一次与外来抗原的遭遇
免疫反应遇到同一抗原时一次比一次强，具有特异性。免 疫记忆可以延续动物终生。 六、免疫反应的许多性质是通过克隆选择确定的
一种抗原活化一种淋巴细胞。当淋巴细胞表面受体结合 抗原时，B淋巴细胞就被活化，分泌抗体被刺激而增殖（急 剧分裂克隆）。 七、一个有效免疫系统的成熟是由广泛的细胞间信息交换来 调节的。
变区和重链的三个超变区。这些超变区形成抗原抗体结合的
接触残基。由于它们是实际的抗原结合位点，故被认为是互
补决定区。
六、功能性κ、λ轻链和重链基因的一个明显特征是在所有
细胞中这些基因转录后的选择性剪接是不同的（见图2）。
200个V区，4个功能性J区。