Countstar 细胞计数仪操作手册
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Countstar细胞计数仪【快速操作指南】Countstar细胞计数仪【快速操作指南】章节一、介绍1.1 产品概述1.2 适用范围1.3 主要特点章节二、设备启动2.1 设备准备2.2 设备连接2.3 设备开机章节三、操作流程3.1 样本制备3.2 测量设置3.2.1 选择计数模式3.2.2 选择细胞类型3.2.3 设置计数参数3.3 测量操作3.3.1 放置载玻片3.3.2 吸取样本3.3.3 镜片清洁3.3.4 载玻片测量3.4 数据分析3.4.1 统计数据显示3.4.2 数据导出章节四、常见问题及解决方法4.1 设备故障4.2 计数不准确4.3 数据异常章节五、操作注意事项5.1 安全操作5.2 设备维护5.3 使用限制章节六、附件6.1 使用说明书6.2 软件6.3 技术支持联系方式法律名词及注释:1、细胞计数仪:一种科学仪器,用于快速准确地计数和分析细胞数量和特征的设备。
2、计数模式:根据需要选择的计数方式,如细胞计数、细胞大小、细胞形态等。
3、细胞类型:根据样本的种类,选择相应的细胞类型进行计数和分析。
4、计数参数:设定用于计数的相关参数,如计数孔的大小、样本的稀释倍数等。
5、载玻片:细胞样本用来放置的玻璃片,用于显微镜观察和计数。
本文档涉及附件:1、使用说明书:详细介绍Countstar细胞计数仪的操作步骤和注意事项。
2、软件:提供Countstar细胞计数仪的软件地质,方便用户升级和更新。
3、技术支持联系方式:提供Countstar细胞计数仪的售后服务方式和邮箱,用户在使用中遇到问题可联系技术支持人员。
细胞计数板的使用方法细胞计数板是一种用于计算液体中细胞数量的实验仪器,广泛应用于生物学、医学、生化学等领域。
1. 准备工作:首先,确保细胞计数板和显微镜等设备是干净的。
使用无纺布或纸巾轻轻擦拭细胞计数板和显微镜镜片表面,确保没有灰尘或污垢。
2. 取样:将需要计数的细胞悬液充分摇匀,并使用一根吸管或移液器将约10 μl的悬液吸起。
3. 加样:将吸取的悬液滴在细胞计数板的一个计数室(通常是一个小的方形区域)中。
确保滴入的悬液不会溢出计数室,以避免误差。
4. 显微镜观察:使用显微镜将计数室的细胞放大到适当倍数。
通常,使用40倍或100倍镜放大细胞会更容易进行计数。
调节显微镜的对焦和光照使细胞清晰可见。
5. 细胞计数:用显微镜通过目视或帮助计数的软件来计数计数室内的细胞。
一般来说,通过从左上角开始顺时针或逆时针移动显微镜视野,并计算每个小方格内的细胞数量。
6. 计数室细胞数量的计算:根据计数室的大小和计数室中细胞的总数,以及所使用的倍数,计算出每个计数室内的平均细胞数量。
通常,计数室内每个小方格的面积和厚度在细胞计数板上都有标记。
7. 样本体积与细胞密度的计算:利用计数室内的平均细胞数量,结合计数室的体积,可以计算出样本中的细胞密度。
根据需要,这可以使用以下公式计算:细胞密度(cells/ml)= 细胞数÷(计数室体积×加样体积)8. 数据记录与分析:将结果记录下来,并根据需要进行数据的分析和进一步处理。
需要注意的是,在使用细胞计数板时要小心操作,避免细胞污染和误差的发生。
同时,细胞计数板的使用方法可能会因具体型号或厂家的要求而有所不同,建议参考厂家提供的使用说明书。
血细胞计数设备计数法
简介
血细胞计数设备计数法是一种用于测量和计数血液中细胞数量的方法。
该方法利用计数设备来自动化地进行细胞计数,以提高精确度和效率。
步骤
1. 准备计数设备:确保计数设备已经校准和清洁,以确保准确的计数结果。
2. 准备样本:从待测血液中取得合适的样本,并将其放置在计数设备的取样室中。
3. 启动计数设备:按照设备说明启动计数设备。
设备会自动开始细胞计数过程。
4. 观察计数结果:观察计数设备显示的细胞计数结果。
这些结果可以直接显示在设备屏幕上,或者可以通过连接到计算机的软件进行分析和记录。
5. 记录结果:记录细胞计数结果,并将其用于后续病例分析或其他应用。
注意事项
- 为了获得精确的计数结果,应正确操作计数设备,并根据设备说明进行校准和维护。
- 选择适当的样本量以确保结果的可靠性。
- 定期对计数设备进行维护和清洁,以保持设备的正确工作状态。
- 记录和保存计数结果的详细信息,以备将来参考和分析。
结论
血细胞计数设备计数法是一种快速、准确、高效的方法,用于测量和计数血液中的细胞数量。
通过正确操作计数设备并遵循适当的步骤,可以获得可靠的计数结果,有助于医学研究和临床诊断。
Countstar Rigel S2细胞计数仪标准操作规程1、操作步骤1)开机:接通电源,并开启左侧底部电源按钮。
显示屏启动开关变成黄色后,长按触摸按键6-8秒,黄色指示灯变成蓝色,等待系统开机。
登陆界面输入用户名和密码,点击登陆(初始用户名:admin,初始密码:admin)。
2)准备:待测样品,Countstar计数板,移液器及枪头。
3)计数:吸取20ul样品匀速加入Countstar计数板中,在“类型”界面,点击所测实验类型图标,如“AOPI细胞活率”,将计数板插入进样口中,输入测量信息。
a)在信息输入界面选择计数槽位(自上而下为1-5),选中后槽位由蓝色变成黄色。
b)输入实验名称(允许为空)、样品ID(允许为空)、稀释比例和细胞类型。
c)点击“确认”,槽位变成绿色。
d)点击“开始”,开始计数。
4)计数完毕,样品板自动退出,屏幕上显示计数结果。
5)数据管理:以“AOPI 细胞活率”为例,点击结果界面左上角“返回”或直接点击导航栏“数据”并在实验类型下拉框中选择“AOPI 细胞活率”,均可进入“AOPI 细胞活率”的数据界面中,点击数据行第一列的圆形按钮选中记录,可进行如下操作:a)查看视野:查看样品ID 下各视野的结果。
b)详细结果:查看选中记录的详细结果,若选中多条记录,默认显示第一条记录。
c)参数调节:优化识别参数。
d)样本删除:删除选中的数据。
e)Excel 导出:插入USB 存储设备,可批量进行Excel 格式的数据导出。
f)PDF 导出:插入USB 存储设备,可批量进行PDF 格式的数据导出。
g)图片导出:插入USB 存储设备,可批量进行图片形式的数据导出。
h)计算器:可以根据当前的浓度计算加入多少体积稀释至目标浓度6)关机:点击导航栏关机按钮,弹出对话框,点击“关机”,等待触摸按钮变为黄色后,关闭左侧底部电源按钮,并关闭电源。
2、注意事项1)关机后请拔出样品板。
2)操作员需经过培训并在管理规范的实验室内才可以操作。
Countstar细胞计数仪操作手册计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序一、启动Cedex XS 系统1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝色光表示仪器已打开;2. 打开Cedex XS 控制软件:①打开配套电脑,进入Windows操作系统;②双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出;②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定1. 样品制备①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;②使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;③将细胞悬液充分混匀;④用移液枪取细胞悬液加入样品板,每槽10μl;可以一次测定八槽,也可测定单槽。
2. 进样:样品板有八个槽,一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架;②加有样品方向朝里,将样品板放上支架;③将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置:1. 打开测定界面:在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键,进入测定界面;2. 设置样品参数:①在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;②输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;③软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;④点击MI×键,出现进样体积对话框;⑤输入参数:样品量(Sample V olume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent V olume);⑥系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)。
APPLICATION NOTE Countess II FL Automated Cell CounterFluorescent apoptosis evaluation using the Countess II FL Automated Cell CounterProtocol—instrument setup1. Turn on the Countess II FL Automated Cell Counter and install the GFP and Cy5 EVOS Light cubes.2. Install the appropriate slide holder for either the disposable or reusable slide.3. Obtain a disposable or reusable Countess slide.Protocol—culture setup and counting1. Acquire a eukaryotic cell suspension, CellEventCaspase-3/7 Green Detection Reagent, and SYTOX Red Dead Cell Stain.2. Stain the cell sample according to the manual provided with the CellEvent Caspase 3/7 Green Detection Reagent.3. Stain the cell sample according to the manual provided with the SYTOX Red Dead Cell Stain.4. Apply 10 µL of the stained cell sample to the Countess slide.IntroductionThe ability to assess cell health in a cell population is a basic and critical evaluation parameter in many cell and molecular biology labs. To this end, knowing how many cells are dead or dying are key pieces of information. To answer such basic questions, the cells of interest can be stained with a viability dye, such as Invitrogen ™ Molecular Probes ™ SYTOX ™ Red Dead Cell Stain, as well as an apoptosis indicator that measures caspase activation, such as Invitrogen ™Molecular Probes ™ CellEvent ™ Caspase-3/7 Green Detection Reagent. This staining combination, used together with an Invitrogen ™ Countess ™ II FL Automated Cell Counter equipped with GFP and Cy ®5 EVOS ™ Light Cubes, allows a quick and simple method to obtain apoptosis data together with cell viability data.General methodsMaterials• Countess II FL Automated Cell Counter (Cat. No. AMQAF1000)• Invitrogen ™ Countess ™ Cell Counting ChamberSlides (Cat. No. C10228) or Invitrogen ™ Countess ™ II FL Reusable Slide (Cat. No. A25750)• EVOS Light Cubes, GFP (Cat. No. AMEP4651) and Cy5 (Cat. No. AMEP4656)• CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Cat. No. C10423)• SYTOX Red Dead Cell Stain (Cat. No. S34859)5. Insert the Countess slide into the Countess II FL Automated Cell Counter sample port to initiate autofocus.6. Adjust fluorescence light intensities to minimize background while maximizing signal.7. Press Capture.Apoptosis assessmentThe CellEvent Caspase-3/7 Green DetectionReagent (Ex/Em: 502/530 nm when bound to DNA) is intrinsically nonfluorescent, as the DEVD peptide inhibits the ability of the dye to bind to DNA. However, after activation of caspase-3/7 in apoptotic cells, the DEVD peptide is cleaved, enabling the dye to bind to DNA and produce a bright, fluorogenic response. The fluorescence emission of the dye when bound to DNA can be observed using a standard “FITC” or GFP filter set.To use CellEvent Caspase 3/7 Green DetectionReagent, simply add substrate to control and treated cells, incubate 30 minutes, and visualize. Apoptotic cells with activated caspase-3/7 will have bright green nuclei, while cells without activated caspase 3/7 will have minimal fluorescence signal.SYTOX dead cell stains do not cross intact cellmembranes, and they exhibit increased fluorescence upon dsDNA binding, making them some of ourbrightest dead cell stains. SYTOX dead cell stains can be applied to cells and visualized without an additional wash step because they are nonfluorescent inaqueous media. These stains are available in multiple single-color formats, making them compatible with many filter sets.After brief incubation with SYTOX Red Dead Cell Stain, the nucleic acids of dead cells fluoresce bright red when excited and detected with traditional Cy5 filter sets. SYTOX Red Dead Cell Stain is distinct from dead cell probes such as 7-AAD and propidium iodide (PI) that are excited using 488 nm light. Moreover, the emission of SYTOX Red Dead Cell Stain is limited to one channel, thus minimizing spectral overlap with CellEvent Caspase 3/7 Green Detection Reagent and simplifying workflow.What used to take more than an hour on traditional microscopes or cytometers—simply acquiring preliminary results—now takes only a few minutes with the Countess II FL Automated Cell Counter. You can save time and effort by checking your sample before using a microscope or flow cytometer.Find out more at thermofi/countessFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. © 2015 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified. Cy is a trademark of GE Healthcare. CO210384 0615Figure 1. Apoptotic and dead cells counted on a Countess II FLAutomated Cell Counter. A Countess II FL Automated Cell Counter was loaded with EVOS Light Cubes for GFP (Cat. No. AMEP4651) and Cy5 (Cat. No. AMEP4656). After incubation with 0.5 µm staurosporine, HeLa cells were labeled with 1:400 CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Cat. No. C10423) to identify apoptotic cells, and then stained with 1:1,000 SYTOX Red Dead Cell Stain (Cat. No. S34859) to denote all dead cells and incubated at room temperature for 30 minutes.Figure 2. Apoptosis of HeLa cells measured on a Countess II FL Automated Cell Counter using CellEvent Caspase-3/7 GreenDetection Reagent and SYTOX Red Dead Cell Stain. The indicated amounts of staurosporine were applied to HeLa cells to trigger apoptosis. Increases in green and far-red signal were noted with increased drug treatment, indicating significant increases in apoptosis and cell death,respectively.P e r c e n tConditionStaurosporineStaurosporineApoptotic DeadApoptotic and dead。
血细胞计数器计数法
步骤
以下是进行血细胞计数的一般步骤:
1. 准备设备:确保血细胞计数器已经校准并处于良好工作状态。
检查设备的各个部分是否清洁无尘,并确保试剂的有效期还没有过期。
2. 获取血样:使用已经消毒的器具采集适量的血液样本。
常见
的采集方法包括采血针或压力采血法。
3. 打开设备:打开血细胞计数器,根据设备的操作手册进行正
确操作。
4. 准备样本:将血液样本转移到设备的计数室中。
确保将足够
的血液应用于计数室,但不要超过设备规定的容量。
5. 启动计数:按下设备上的计数按钮开始计数程序。
设备将自动计算和分类各种血细胞,并给出结果。
等待计数过程完成。
6. 记录结果:在得到计数结果后,将结果记录在适当的记录表格中。
将血液样本处置妥当,按照相关要求进行清洁和消毒。
注意事项
在进行血细胞计数时,请注意以下事项:
1. 样本准备:确保血液样本收集得当,并在正确的时间内进行计数。
储存或运输期间,血液样本应该避免受到过度摇晃或温度变化的影响。
2. 设备操作:遵循设备的操作手册,确保正确操作血细胞计数器。
特别注意维护和清洁设备以确保准确性和可靠性。
3. 结果解释:理解血液样本中各种血细胞的计数结果和参考范围。
根据实际情况,可能需要与医生或专业人士进一步讨论和解释结果。
血细胞计数器计数法是一种方便、准确和可靠的进行血细胞计
数的方法。
通过遵循正确的步骤和注意事项,可以获得准确的结果,帮助医生和研究人员进行血液相关的诊断和研究工作。
细胞计数仪操作规程1、Countstar细胞计数仪简介1.1 基于经典台盼蓝染色法原理开发。
1.2 采自动优化成像系统,无需人工调焦,摒除人工调焦的误差。
1.3 精确标定死活细胞和校正结团细胞,能快速进行细胞计数、细胞形态和细胞统计图分析。
1.4 样本需求量低,快速:20µl/样本,<20s/样本。
1.5 自动光学对焦、成像并进行数据分析,每个样本可进行多个视野检测,系统自动统计出平均结果。
1.6 测量浓度范围:1×104~3×107/ml。
1.7 直径范围:5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。
2、操作过程简介2.1 打开配套电脑,进入Windows操作系统;2.2 双击桌面上的Countstar图标,进入Countstar控制中心;2.3 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮表示仪器已打开;2.4 设定所测的细胞参数;2.5 取样。
当样品浓度过大时,用盐水或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;2.6 染色。
使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;将细胞悬液充分混匀;2.7 加样。
移液枪取细胞悬液加入样品板,每槽20μl;2.8 插入计数板;2.9 自动计数结果;2.10 根据测试结果可适当调整细胞参数以达到最佳测试结果;微调旋钮同一样本可进行多个视野检测,系统自动统计出平均结果。
3、检测结果包括2.1 细胞图片2.2 总细胞浓度2.3 活细胞浓度2.4 死细胞浓度2.5 细胞存活率2.6 细胞平均直径2.7 细胞增长曲线2.8 细胞大小柱状图2.9 细胞平均圆度2.10 细胞结团率2.11 细胞结团柱状图(具体操作参见说明书)4、细胞总浓度的检测4.1无台盼蓝染色时,Countstar细胞计数仪可以检测细胞浓度、细胞平均直径、细胞平均圆度和细胞聚团率(绿色圈所示为有效计数细胞)。
Countstar细胞计数仪操作手册
计数仪的标准操作程序和细胞计数和活率检测标准操作程序
一、启动Cedex XS 系统
1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝色光表示仪器已打开;
2. 打开Cedex XS 控制软件:
①打开配套电脑,进入Windows操作系统;
②双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;
3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
①把样品板支架拉出;
②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;
③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;
④调节完毕后关闭对话框。
二、细胞计数与活性测定
1. 样品制备
①用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;
②使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;
③将细胞悬液充分混匀;
④用移液枪取细胞悬液加入样品板,每槽10μl;可以一次测定八槽,也可测定单槽。
2. 进样:样品板有八个槽,一次可测定四个样品槽。
①拉出样品板支架;
②加有样品方向朝里,将样品板放上支架;
③将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品槽位置指示灯表示样品测定进程。
三、软件设置:
1. 打开测定界面:在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键,进入测定界面;
2. 设置样品参数:
①在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;
②输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;
③软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;
④点击MI×键,出现进样体积对话框;
⑤输入参数:样品量(Sample V olume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent V olume);
⑥系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)。
3. 设置测定与分析参数:
①在分析参数栏选择需要的精度水平(Precision):精度水平表示单次测定样品数,最多8个;
②选择细胞类型,默认的细胞类型有:标准大小细胞直径约12-14μm;可识别对象;小细胞直径约8μm;
③系统自动添加系统名和测定时间。
四、开始测定
①点击START MEASUREMENT键;
②测定多个样品时,在弹出对话框后将样品板支架推进一格,点击确定自动开始测定程序;
③重复上一步骤测定其他样品;
④若测定样品多于四个,可将支架抽出后样品板调转方向重新插入进行上述测定程序;
⑤全部测定结束后关闭对话框。
五、计数结果
1. 在测定界面获得结果
测定程序完成后,结果在测定界面的数据栏(Result Data)显示,数据栏有两个表格:第一个表格显示总细胞数,第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。
两个表中分别列出以下参数:
●Viable Cell Conc.: 活细胞浓度[×105/mL]
●Total Cell Conc.: 总细胞浓度[×105/mL]
●Viability (%): 细胞总数中活细胞的百分比
●Total Cell Count: 测定总细胞数
●Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度(1表示细胞形状均一)●Avg Diameter: 测定活细胞平均直径[μm]
●Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值
●Dead Cell Conc.: 死细胞浓度[×105/mL]
●Viable Cell Count: 测定活细胞数
●Dead Cell Count: 测定死细胞数
●Total Object Count: 全部测定数
●Total Object Conc.: 总浓度[×105/mL]
●Avg Object Diameter: 测定总群体平均直径[μm]
●Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异程度。
在单个样品结果表中,会有三项列在表头:
●Image No.: 图像编号
●Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求
●Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示
2. 在柱形图中看结果:此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果
①在测定界面点击HISTOGRAMS键,打开柱形图对话框;
②可选择以下项目:
●成团细胞柱形图
●细胞直径柱形图
●细胞形状均一度柱形图
●总群直径柱形图
六、查看图像
单副图像:在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像;
多幅图像:在图像显示区点击VIEW IMAGES键出现图像列表,可显示单次测定的多个样品。
1. 在图像框查看图像
图像框提供放大图像,系统自动分析活细胞与死细胞,并用绿色圈和红色圈分别标出,还可以使用下列功能:
●双击图像可打开大图,调节对比、亮度和焦距;
●显示或隐藏细胞的圈标记;
●浏览前后样品的图像;
●按住左键圈定可将选定图像放大或自定义尺寸,右键点击图像进行保存或复制。
七、系统优化:调节白平衡
若图像亮度不均衡,则需调节白平衡,影响图像亮度的调节。
①把载物支架拉出;
②点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;
③点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;
④调节完毕后关闭对话框。
八、结果列表
1. 点击Cedex XS 控制中心中的LIST键,或在Measurements菜单中选择Measurement List,可选择以下功能:
●查找结果
●浏览总体的测定数据
●删除结果
●打印报告
●结果输出保存为文件
●开始新测定
●查看测定过程
●重新测定
2. 查找结果可以通过以下方式:选定后点击FIND键
●样品处理时间
●测定时间
●样品名
●样品编号
●系统名
●存档数据/全部数据
●数据组
●细胞类型
九、关机
顺序为:Cedex XS 控制中心(软件)→配套电脑→计数仪。