血小板抗体检查及配血操作规程
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输血科工作直接关系到患者生命安危,如何科学合理地利用血液资源及确保临床的用血安全尤其重要。
近几年我院迅速发展,为配合临床工作,输血科同样面临更艰巨的任务和责任。
在输血科工作近一年,下面谈谈一年来工作当输血科工作直接关系到患者生命安危,如何科学合理地利用血液资源及确保临床的用血安全尤其重要。
近几年我院迅速发展,为配合临床工作,输血科同样面临更艰巨的任务和责任。
在输血科工作近一年,下面谈谈一年来工作当中心得体会!1.认真+责任:直接关系到患者的生命,一定要做到零差错率。
让自己一切行为有依据,一切行为有记录,一切行为保质量。
一次值夜班,早晨5点多起来有些迷糊,有位实习同学来取血,我随即把昨天晚上事先配好的一袋说是早上来取血的发给了她,她看了半天说:"这个不是我要的血,我的申请单在这里!"原来这位同学是来申请配血的。
经历此次事件,自己总结了几个值得注意的问题:①值夜班起来时一定要让自己保持头脑的清醒,可以休息几分钟后,再选择去做工作;②要弄清楚别人的来意,避免差错;③由医院的正式医护人员来取血。
取血这个环节是保证病人输注正确的血液的关键,需是双方认真核对,同时也很感谢各位医护人员的配合;2.确保输血安全:输血科必须严格按照规定的程序进行管理和操作,确保用血安全。
在输血前对供受血者检查。
例如:①在做ABO血型鉴定时,一定要同时做反定,这样正反定型可以相互核对;②交叉配血时,改良的凝聚胺试验虽已替代了生理盐水试验,但是生理盐水法可以对血型复查一次;③在输血前对供血者血型核对。
输血工作是细活,不要怕麻烦,因为也许你节省的是一个环节,可是付出的代价也许就是生命!3.血液发放与保存管理:发血时输血科医务人员要与临床医护人员双方要进行逐项核对。
当血液从输血科取走后,必须立即输注,不允许长时间放在室温或其他冰箱内。
原则上离开血库的血液制品不能退回,但因故未使用的应在30分钟之内退回。
4.科学合理的利用血液资源:首先,要求临床医生严格掌握血液制品的使用适应证。
输血查对制度一、合血查对1.医师下达合血医嘱后,由两名护士在护士站核对输血申请单、试管标签及病人电子信息。
核对内容:患者科别、床号、姓名、性别、年龄、诊断、病案号、登记号、血型、输血品种,并查看输血协议。
有两人以上抽血时,一次只能拿一个病人的试管和输血申请单,要做到准确无误。
2.合血试管为EDTAK2血型交叉试管,合血小板悬液需再做血小板抗体检测(普通干试管)。
输血患者血型鉴定和交叉配血不得使用一个血液标本。
普通合血者,血标本应在1小时之内送血库。
3.两名护士携用物到病人床旁。
查对患者及其床头牌、手腕带,再次核对输血申请单、试管标签,并询问病人既往有无输血史。
4.采集血标本应严格无菌操作,禁止直接从输液管或正在输液的一侧肢体采集,避免血液稀释、药物影响引起血型鉴定和配血错误。
5.采集结束后,双人应再次核对病人、输血申请单、试管标签信息,确认无误后,派专人将取血标本及时送血库。
二、取血查对取血者与血库人员共同查对患者的科别、床号、姓名、性别、病案号、血型(包括Rh性质)、血量、交叉配血试验结果以及血液质量。
有下列情形的,一律不得接收:1.标签破损、字迹不清2.血袋有破损、漏血3.血液中有明显凝块4.血浆呈乳糜状或暗灰色5.血浆中有明显气泡、絮状物或粗大颗粒6.未摇动时血浆从与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血7.红细胞层紫红色8.过期或其他需查证的情况三、输血操作查对(一)操作前查对1.输血前两名护士核对医嘱无误后打印执行单并在治疗室进行两人核对,准确无误后方可执行。
2.严格检查血液质量、血液的有效期及血袋有无渗漏等情况。
3.查对患者输血申请单与供血者血袋标签上的血袋编号、血型、血量品种、供血时间、供血量是否相符,不规则抗体,交叉配血试验是否相符。
查对过程中如有疑问,应及时与血库联系,自己不得擅自涂改,必要时由血库更正后方可再用。
(二)操作中查对4.输血时由两名护士携用物在床边查对床头牌,手腕带并核对患者姓名、年龄、病案号、病室、床号、血型等,确认与输血记录单(配血报告)相符,询问病人有无输血史,询问病人血型,再次核对血液无误后方可输注,在输血记录单上双人签名。
内蒙古自治区卫生厅关于印发内蒙古自治区医疗机构输血科(血库)建设与管理规范(试行)的通知文章属性•【制定机关】内蒙古自治区卫生厅•【公布日期】2011.05.12•【字号】内卫发[2011]15号•【施行日期】2011.05.12•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】医疗管理正文内蒙古自治区卫生厅关于印发内蒙古自治区医疗机构输血科(血库)建设与管理规范(试行)的通知(内卫发〔2011〕15号)各盟市卫生局,厅直属各医院,内蒙古医学院各附属医院:为指导和加强医疗机构输血科(血库)的规范化建设和管理,保证临床用血安全,根据《中华人民共和国献血法》、《医疗机构临床用血管理办法((暂行)》和《临床输血技术规范》等有关法律、法规,自治区卫生厅组织制定了《医疗机构输血科(血库)建设与管理规范(试行)》(以下简称《规范》),现印发给你们。
具备条件的医疗机构要按照《规范》要求,加强对输血科(血库)的建设和管理,大力推行科学合理用血,进一步提高临床输血诊疗水平。
目前条件尚不能达到《规范》要求的医疗机构,要加强对输血科(血库)的建设,增加人员、配置设备、改善条件、健全制度、严格管理,力求到2012年年底达到《规范》要求。
二〇一一年五月十二日内蒙古自治区医疗机构输血科(血库)建设与管理规范(试行)第一章总则第一条为了加强和规范医疗机构临床输血管理,促进临床科学合理用血,确保临床输血安全,根据《中华人民共和国献血法》、《医疗机构管理条例》、《医疗机构临床用血管理办法(试行)》和《临床输血技术规范》等法律法规,结合我区实际,制定本规范。
第二条输血科(血库)应参照本规范建设与管理。
第三条三级综合医院、年用血量超过3000单位的三级专科和二级综合医院应设立独立建制的输血科。
其他有临床输血治疗需求的医疗机构应设立血库,其中,二级以上(含二级)医疗机构应设立独立建制的血库,二级以下医疗机构设立挂靠检验科的血库。
1.内科具有出血倾向的患者入院后常规化验血型。
重点科室:消化内科。
2.平诊需要输血的患者要等血型结果出来以后(也就是病房医生从电脑上看到血型结果后)才能申请输血。
平诊患者夜晚禁止输血。
急诊除外。
3.每位输血的患者每次输血都要进行输血前评估和输血后效果评价,填评价表。
评价表在“全院→其他记录→输血相关记录”中选取打印。
4.大量输血(24小时内或一次输血(备血)量≥1600ml)时,需要填写审批表,审批表在“全院→其他记录→输血相关记录”中选取打印。
输血相关医嘱下法:
一、血型医嘱消化内科
ABO红细胞定型、ABO血型鉴定(卡式法)、Rh血型鉴定(卡式法)
二、不规则抗体筛查
有孕产史、输血史的患者,包括入院后第二次输血的患者需进行不规则抗体筛查。
三、输血医嘱
1.输注红细胞医嘱(以2个单位为例,共三项):
手工分红细胞悬液/洗涤红细胞/RhD阴性冰冻去甘油红细胞2个单位
白细胞除虑
全血、各种红细胞、粒细胞、手工分离浓缩血小板配血
2.输注血浆医嘱(以200毫升为例,共三项):
手工分冰冻血浆200毫升
病毒灭活(血浆)200毫升
血浆、机采血小板、冷沉淀配血
3、输注血小板医嘱(以1个治疗量为例,共三项):
机采血小板1个治疗量
血浆、机采血小板、冷沉淀配血
4、输注冷沉淀医嘱(以1个单位为例,共三项):
冷沉淀1个单位
血浆、机采血小板、冷沉淀配血
四、血小板抗体测定医嘱(共二项):
血小板抗体(HPA)检测
血小板IgG致敏红细胞试验。
吉林省医疗机构输血科(血库)基本标准(2010年版)一、总则第一条为加强医疗机构输血管理,促进临床科学合理用血,确保输血安全、高效,根据《中华人民共和国献血法》、《医疗机构临床用血管理办法》(试行)和《血站实验室质量管理规范》制定本标准。
第二条本标准适合于各级各类医疗机构输血科(血库)。
内容包括输血组织与管理、功能与任务、科室设置与要求、信息管理、业务与质量管理及感染管理等。
第三条本标准是输血科(血库)执业应达到的标准,是对输血科(血库)准入及检查评价的基本依据。
第四条医疗机构根据临床用血需求设立独立建制的输血科(血库)。
年用血量超过5000单位(红细胞类)的医院应设立独立建制的输血科,其他有临床输血治疗需求的医疗机构设立血库。
二、组织与管理第五条各级各类医疗机构应向卫生行政部门申请办理输血科(血库)执业许可登记,经验收合格后在医疗机构执业范围内增加输血科或血库设置,由省级卫生行政部门指定的血站负责血液供应。
否则,卫生行政部门将通知血站停止血液供应。
第六条有临床输血治疗需求的医疗机构应成立临床输血管理委员会。
(一)由主管业务院长担任主任,成员由医务科、输血科、检验科、护理部、医院感染科、麻醉科及相关临床科室主任及有关专家组成。
(二)制定临床输血管理委员会章程。
第七条输血科(血库)应建立持续改进的临床输血质量管理体系。
文件应覆盖输血科(血库)整个工作过程,包括质量手册、程序文件、SOP文件和记录。
第八条输血科主任(血库负责人)应在院长、主管院长和输血管理委员会的直接领导下开展临床输血工作。
负责对输血科(血库)的质量管理体系进行全面管理和控制,确保输血科(血库)的质量管理体系有效运行。
三、功能与任务第九条输血科(血库)在医院临床输血管理委员会的指导和监督管理下开展工作。
认真执行《中华人民共和国献血法》、《医疗机构临床用血管理办法(试行)》和《临床输血技术规范(试行)》等有关法律、法规、行政规章和卫生行业标准,负责全院临床输血管理工作。
血小板特殊配血检测针对存在HLA抗体、HPA抗体或血小板自身抗体的患者进行的血小板配血称为血小板特殊配血。
(一)SEPSA1.该技术在血小板抗体检测中首次介绍,此处介绍在血小板特殊配血检测时的检验方法。
(1)原理:同SEPSA在血小板抗体检测中的原理。
器材:平板离心机,95×16mm尖底离心管(以下称“尖底管”),96孔脱卸式U型板,滴管,加样器。
(2)试剂:生理盐水、ACD-A保养液、甲醛、阴阳对照试剂、PBS及Tween20-PBS(以下称“T-PBS”)试剂。
(3)操作:1)与患者ABO同型的献血者富含血小板血浆(PRP)中加入1/10量的ACD-A液,混合,1100g(2800r/min),离心10分钟,弃去上清液。
2)同血小板抗体检测SEPSA操作3)~8)。
3)每孔中加入25μl被检者血清,室温湿盒1小时。
4)同血小板抗体检测SEPSA操作10)。
5)同血小板抗体检测SEPSA操作12)。
6)结果判定与记录:凝集强度判读见表。
阳性表明受检者血清中存在和献血者血小板反应的抗体,为血小板特配不相合;阴性表明受检者血清中未检出和献血者血小板反应的抗体,为血小板特配相合。
2.方法学评价同血小板抗体检测中的SEPSA方法学评价。
3.质量保证(1)检测前:将被检血清4000r/min(2800g)离心10分钟,以去除沉淀。
被检标本不能使用血浆。
被检血清不需要灭活补体。
(2)检测中:为了防止静电干扰,宜在室温湿润状态下操作。
设立阴阳性对照以进行质量控制,以正常人AB血清为阴性对照,已知阳性血清为阳性对照。
4.参考范围阴性。
5.临床意义对于有指征的患者,在明确血小板抗体性质的基础上,其输注血小板时应通过血小板特殊配血获得配合性血小板输注,以避免血小板输注无效和输血后紫癜。
当患者被高度同种免疫,存在多种同种抗体时,比较难以获得相容性血小板,血小板特殊交叉试验往往难以成功。
这种情况下,可以通过选择HLA匹配的血小板来得以解决。
1目的为规范血小板抗体检测操作,保证检测的有效性及临床用血的安全性,依据《输血实验室管理规程》4.19.4条款的要求制定本规程。
2适用范围适用于医疗机构输血科(血库)进行血小板抗体检测。
3职责医疗机构输血科(血库)技术人员负责血小板抗体的检测。
4原理微孔板反应孔中包被有抗血小板单克隆抗体(针对血小板表面糖蛋白IIb/IIIa、Ib/V/IX),血小板悬液经离心洗涤后可在反应孔底部表面形成血小板单层。
加入受检血清或血浆,在孔中经过孵育后,若该血清或血浆中含有血小板抗体,则该抗体和反应孔中的血小板单层结合,未结合的成分通过洗涤被去除。
加入抗IgG及IgG致敏红细胞(指示红细胞),经离心后指示红细胞通过抗IgG的桥连与血小板单层上的血小板抗体结合,因此阳性反应为指示红细胞黏附在反应孔底部表面,而阴性反应为指示红细胞在离心力的作用下聚集于反应孔底部中央。
5设备与材料5.1材料血小板抗体检测试剂盒(固相凝集法)、血小板抗体筛检细胞(冻干粉)、血小板抗体检测用指示红细胞(固相凝集法)。
5.2设备平板离心机、血型血清学专用离心机、电热恒温水浴箱。
6检测环境室温应控制在18-25℃,湿度应控制在30%-70%。
7操作步骤7.1血标本采集及处理7.1.1检测样本准备7.1.1.1采集患者静脉血2ml,乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)或枸橼酸钠抗凝,经3000rpm离心5分钟,分离出血浆进行检测。
7.1.1.2如果患者血标本为如果患者血标本为不抗凝血,经3000rpm离心5-10分钟,取上清进行检测。
7.1.1.3如果患者血标本为血浆(血清),3000转离心5-10分钟。
7.1.2血标本处理样本4℃可保存7天。
若需长期保存,应离心后分离血清或血浆,-20摄氏度冻存。
7.2平衡室温取出血小板抗体检测试剂盒(固相凝集法)、血小板抗体检测用指示红细胞(固相凝集法)、血小板抗体筛检细胞(冻干粉)放在室温中平衡至室温。
7.3制备血小板悬液7.3.1商品化的冻干血小板稀释后直接使用。
【口的】Capture-?®是设计用来检测血小板IgG抗体的固相系统。
可为血小板输注无效患者进行血小板配血。
【适用范圉】血小板输注无效患者血小板输注前配血【检测原理】Capture-P是一个固相抗体检测系统,是曲Rachel等人4、Juji等人5和Sh让毗&等人6发表的检测过程改良而来。
患者或供体血小板首先结合于聚苯乙烯微孔表面。
然后用它们来捕获患者或供体血浆中的血小板抗体。
血清在结合有血小板的微孔中进行简短孵育,使抗体与血小板结合(如果抗体存在)。
把微孔中游离的IgG 冲洗掉,并加入结合抗IgG指示红细胞。
进行离心,这样会使指示红细胞与结合于固定的血小板上的抗体接触。
阳性检测中,在指示红细胞和结合血小板抗体间形成了抗免疫球蛋口G桥联,从而阻止了指示红细胞向微孔底部的移动。
作为这种桥联的结果,指示红细胞会形成一个汇合单层从而覆盖固定的血小板。
相反,如果是阴性检测,当不存在血小板抗原-抗体反应时,指示红细胞的移动就不会被阻止,就会被离心到微孔底部,进而形成紧密圧缩、清晰的细胞扣。
可以使用事先经过冲洗和保存的血小板,这个步骤是可以选择的。
使用血小板冲洗和储存洛液洗涤血小板,使之不含污染性血浆蛋口和非血小板细胞成分,这样的血小板可以用来制备Capture-P检测微孔的单分子层。
【主要组成成份】Capture-P检测微孔板:1X8微带板,坚硕U型底部,表面覆盖特异性血小板粘合剂。
每个微带板可以进行8个单独的检测。
这些微带板保存于一个可重复性密封的铝箔袋中,铝箔袋中含有干燥剂和湿度计。
微带板可以单使用,也可以多个使用。
未使用的微带板.干燥剂和湿度计要立即谨慎重新密封于铝箔袋中,以免暴露于湿气中使粘合剂失效。
Capture检测微孔的辅助试剂:(另行购买)Capture LISS:低离子强度溶液,含有甘氨酸、漠甲酚紫染料和防腐剂叠氮化钠(0. 1%)* OCapture-P指示红细胞:结合有兔抗人IgG抗体的红细胞悬液。
红细胞悬浮在缓冲溶液(预先加入氯霉素(0. 25 mg/mL),新霉素(0.1 mg/mL)和庆大霉素(0.05 mg/mL))中。
如果指示红细胞出现轻微的聚集,这是正常现象。
Capture-P阳性对照血清(弱):含有血小板抗体。
加入叠氮化钠(0. 1%)作为防腐剂*o Capture-P阴性对照血清:不含有血小板抗体。
加入叠氮化钠(0. 1%)作为防腐剂叫进行Capture-P 试验的组分(Capture-P指示红细胞,Capture LISS, Capture-P对照血清,Capture-P检测微孔)在有效期内可以交替使用,而不用管它们的批号(前提是这些组分都在有效期内)。
【储存条件】在不使用微带板时,在1-10摄氏度下保存。
其它辅助试剂在1—10 摄氏度下保存。
【样本要求】血小板来源:源自供体血小板的样本应该采集于加有EDTA, ACD, CPD或CPDA-1的容器内。
不能使用已凝固的血样。
样本釆集后,富含血小板的血浆必须储存在20°C至25°C。
检测必须在48小时内进行。
从血小板浓缩袋中取出的密封小辫片段必须在釆集日期24小时内进行检测。
患者或供体血浆或血清:通过静脉穿刺来抽取血液样本。
抽取的血样可以加入EDTA, ACD, CPD,或CPDA-1,或者可以不加抗凝剂。
检测应当尽快进行,降低假阳性或假阴性(因为样本污染或者储存不当造成)的机率。
如果不能马上对血清或血浆进行检测,推荐将保存于1-1O°C下或冷冻保存。
不能使用收集于含有中性分离胶试管中的样本。
这样的样本会导致假阳性结果的出现。
【提供的材料及试剂】1.Capture-P检测微孔2.Capture LISS3.Capture-P指示红细胞4.Capture-P阳性对照血清(弱)5.Capture-P阴性对照血清6.源于供体或患者的血小板7.源于血小板供体和/或受血者的血浆或血清8.塑料移液管(注:不能使用玻璃移液管)9.10X75毫米聚丙烯或聚乙烯试管(注:不能使用玻璃试管或聚苯乙烯试管)10.适用于96孔板、硬质微孔板或微带板微孔的离心机和转子11.37°C加热板或干热培养箱12.磷酸盐缓冲液,pH 6. 5-7. 5 (近似15毫米)13.专用于微孔板的分配总管或移液管管理器14.秒表或间隔计时器15.照明表面16.记号笔17.离心机【检测方法】1.在检测前,把所有的检测试剂都置于18-30°C平衡。
2.血样采集:2.1血清标本:患者自凝血1500rpm离心lOmin,获取上层血清。
2.2待测血小板样本的制备:2.2. 1浓缩血小板(PC):将机釆血小板袋热合取下1-1. 5cm的富含血小板的小辫,再转移至塑料试管(聚丙烯或聚乙烯)中。
2.2.2富含血小板血浆(PRP) : EDTA抗凝全血在2600rpm离心样本Smino使用塑料吸管把血小板富含血浆(PRP)部分移至塑料试管中。
3操作步骤:3.1 除去密封袋上Capture-P检测微孔的必需编号。
检查密封袋中的湿度计。
如果湿度计显示有湿气存在,此密封袋中的微带板就不能使用。
3・2使用塑料移液管,在微带板微孔中分别加入1-2滴(50-100 U1)血小板样本(见图1) o本组中的第一个微孔将作为阳性对照(弱),第二个作为阴性对照。
在第一行中剩余微孔中依次作为待检测供者血小板(PC或PRP) o3.3在45-65 xg转速下离心微孔板5分钟。
使血小板固定在微孔板的孔表面。
3.4轻轻倒出上清,然后用生理盐水洗涤微带板3- 6次,以去除为结合的血小板。
(倒上清时应一次性倒扣微孔板并拍打)注意:过度或剧烈洗涤技术可能会造成血小板层的移位或在固定血小板层上出现小洞。
3.5立即向每个含有血小板的微孔中加入2滴(100图1. Capture-P检测微孔+10 U 1) Capture LISS。
LISS呈紫色。
社:倒出血小板超过1分钟,如果不加入如LISS或生理盐水之类的液体,微孔就会变干。
干燥就会导致血小板单分子层的破裂。
3.6向第一列中的第1个微孔中加入1滴(50+5 U 1) Capture-P阳性对照血清(弱)。
向第2个微孔中加入1滴(50+ 5» 1)Capture-P阴性对照血清。
3.7向第一列中微孔C和D与其他含有固定血小板测定微孔中,分别加入1滴(50+5 P 1) 患者血清。
3.8摇动微孔板以混合血浆和增效剂(通过重复轻叩微孔板的边缘来完成) 注:当血清存在时,Capture LISS会由紫色变成天蓝色或土耳其玉色。
如果Capture LISS还是保持紫色,就说明试验中血清被不小心漏加了。
3.9在37°C下孵育微孔板30分钟。
孵育时间不要超过60分钟。
3. 10用生理盐水冲洗每个微孔并倾倒,重复6-8次,每次冲洗后要倾倒彻底。
操作同3. 4o3. 11立即向每个含有血小板的微孔中加入1滴(50^5 P 1) Capture-P指示红细胞。
3. 12在700-900 x g转速下离心微带板1分钟。
3. 13将微带板置于照明表面上,来检测指示红细胞是否黏附。
邙日性反应的特征是指示红细胞黏附于微孔底部表面。
阴性反应的特征是在微孔底部形成一个紧密的细胞扣)。
记录结果。
3. 14每一个检测结果都要跟阳性对照和阴性对照血清相比较,并与供体血小板对照进行比较。
如果出现可疑反应(无规则的,非同心消失)或阳性对照和/或阴性对照血清不正确,必须进行重复检测。
如果检测微孔和供体血小板对照微孔都是阴性反应,那么抗体检测试验就是阴性的。
如果检测微孔呈现阳性反应而供体对照微孔不呈阳性,我们就认为检测呈现阳性。
如果血小板样本抗体检测试验呈现出不同的结果,要重复进行检测。
供体血小板对照呈现阳性会使相同血小板抗体检测阳性结果失效,因为供体血小板在检测前就可能结合有抗体。
给出的g力是产生所需黏附程度的速度。
对于每一个离心机都应当单独设定其适当的每分钟转速和时间。
反应稳定性:在最后离心分离后,检测结果就可以马上进行读取。
因为阳性结果是持久的,微孔板通过离心后,可以被覆盖以避免蒸发,保存于l-10°C,可以立即读取检测结果或者可以在检测后2天内进行重新读取。
质量控制:在每次使用时,利用阳性对照和阴性对照检测对Capture-P检测体系的反应性进行评价。
如果,在任何一轮检测中,阳性对照血清不能产生阳性结果和/或阴性对照血清不能产生一个阴性结果,此轮中所有检测都必须重复进行检测。
对照血浆出现连续失败可能说明一种或儿种检测试剂已经变质,或者检测操作不正确。
【检验结果的解释】1•阳性试验:包被有抗人球蛋口的指示细胞被结合到有抗体包被的微孔上,在微孔表面形成完整的细胞层,反应表面部分或全部黏附着指示红细胞。
部分或全部凝集二阳性底部有纽扣状指示红细胞聚集,并且没有容易检测到的黏附区不凝集=阴性【检验方法的局限性】检测材料的细菌或化学污染、不恰当的孵育时间,不正确的离心、检测微孔冲洗不当或遗漏检测试剂或步骤都会导致错误结果的产生。
在抗体检测过程中,必须保证有足够量的血小板覆盖于微孔上,因为不足量的血小板单分子层会导致检测结果假阳性。
在单分子层制备过程中,不适当的离心时间或者转速会导致血小板覆盖度较差。
此外,过度或剧烈洗涤微孔会导致固定于微孔底部的血小板数量的减少。
在检测最后阶段加入指示红细胞就,如果使用了酸性、无缓冲盐水冲洗膜覆盖的检测微孔,很可能会削弱抗原与抗体之间的反应。
使用PH6. 5-7. 5:的生理盐水进行冲洗会得到最好的结果。
含有较高数量血小板聚合体的样本会产生无规则黏附血小板片层(因为血小板聚合体也能像非聚合体血小板一样跟微孔表面结合)。
在离心过程中,聚合体会抑制指示红细胞的正确沉降。
如果使用的血小板在体内已经结合有IgG分子(也就是直接抗球蛋口试验阳性),就会产生假阳性检测结果。
在血小板供体对照试验中,这种血小板会产生阳性反应。
如果使用的血小板与检测血清的ABO血型不一致,就会产生假阳性结果。
加入指示红细胞后,如果过度离心,会导致假阴性或可疑阳性结果(因为黏附指示剂层的破裂)。
如果不能获得阳性对照(弱)反应,就说明检测微孔板过度离心。
加入的指示红细胞数量超过指定数LI可能会导致假阴性或可疑检测反应。
离心机的减速因子可能会影响试验最终获得的反应类型结果。
错误使用离心机的制动装置使减速时间延长,这样会导致假阴性反应的产生。
相反地,减速时间过短会导致错误检测结果的产生。
没有完全凝结的血清样本会导致检测结果错误。
这种样本在加入到Capture-P检测微孔中后,还会继续凝结。
这种凝结的结果是在血小板单分子层上面产主了一层较薄的凝胶样物质。
加入微孔中的指示红细胞会被这种物质覆盖,而在离心过程中无法进行正确确定阳性或阴性反应。