交叉配血操作规程 凝聚胺法

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管，1支标明“主侧”；另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴；“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1，洁净试管，离心机，显微镜。

2，0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3，凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

*2 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

*3 复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

*4 阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4，抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1．凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2．有效期内可使用。

3．抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1．抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2．2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1．取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

交叉配血试验（凝聚胺方法）一、试剂储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2～25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。

二、样本要求1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3%-5%的红细胞悬液。

2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。

三、检验方法1、取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者 3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管反之。

2、各加 LIM0.7ml,混合均匀后，再各加 Polybrene2 滴，并混合均匀。

3、用血库离心机 3400 转/分离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。

4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。

5、最后加入 Resuspending2 滴，轻轻转动试管混合并涂片，显微镜下观察结果：在 30 秒-1 分钟内凝集散开，代表是由 Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。

如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

四、注意事项1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用。

2、若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。

3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。

4、若试剂使用前为低温贮存，请恢复室温再行操作。

5、加做辅助性抗球蛋白试验，目的是增加检测抗-K的敏感性，对检测其他红细胞抗体无帮助。

6、在冬天室温极低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，面导致假阳性的结果出现。

若有此怀疑，建议在最后滴入Resuspending时，将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在60秒内观察结果。

类另小操作规程部n ：输血科名称：输血科交叉配血试验标准作规程 新 增：交叉配血标准操作规程【目的】检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配 血，确保受血者输血安全。

【范围】所有输血前需要进行交叉配血的血制品。

【职责】配血岗位负责交叉配血试验。

【原理】交叉配血试验是指受血者血清与供血者红细胞及受血者红细胞 与供血者血清之间的混合凝集试验，分为主管（或称主侧）及次管（或称次侧）。

主管是受血者血清与供血者红细胞，次管是受血者红细胞 与供血者血清。

凝聚胺法利用多聚季胺盐类一一凝聚胺携带很多正电荷，中和 红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆 性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝 集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判 断供、受者间血液的相容性。

生效日期：2014. 10 修改日期：2014. 09【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA抗凝静脉血2ml。

2、标本保存：室温放置不超过6小时，4℃保存不超过72小时，无溶血及明显乳糜。

【设备与试剂】1、凝胶胺介质试剂盒①包装规格：150Tests∕盒。

②试剂组成：低离子溶液，凝聚胺溶液，悬浮液。

③储存条件及有效期：未开封试剂应贮存于2℃-25℃、相对湿度不大于80%；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后6个月内使用完。

2、红细胞悬液：取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制3%-5%红细胞悬液。

3、BaSo2005-2> BaSo2002-2型医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司。

【方法】1、盐水介质法a）取小试管（内径10 mm×60 mπι）2支，分别标明“Ps+Dc”和“Pc+Ds”，前者为主管，后者为次管。

其中Ps=受血者血清，Pc=受血者红细胞，Ds=供血者血清，De二供血者红细胞。

血液交叉配血试验标准操作规程血液交叉配血试验标准操作程序交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体，故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”;供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”，两者合称交叉配血。

交叉配血试验又称不配合性试验，是确保患者安全输血必不可少的试验，完整的操作规程应包括:?查阅受血者以前的血型检查记录，如与这次检查结果有所不同，应及时分析原因;?对收到的受血者血样应作ABO正反定型，Rh血型和其他血型检查以及血型抗体检测和鉴定;?选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。

一、配血要求1( 受血者配血试验的血样(血型复查)必须是输血前三天之内的;2(核对病人资料:核对输血申请单、受血者血样、病历三者，其内容包括:患者姓名、性别、年龄、科室床号、住院号、血型(原始血常规血型和血型复查中血型)、用血品种、用血量等，必须正确无误;3(核对血液:血液完整性、血液标签、血液质量;4(核对取血凭证:按临床(取血凭证)实际用血品种、量进行配发血;5(配血前，先复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和抗筛，并报告其结果;6(在电子病历或急诊医生工作站中，检查临床输血五项的执行情况;7(输注全血、浓缩红细胞、洗涤红细胞、浓缩白细胞等患者应进行交叉配血试验，其方法:采用盐水配血试验、凝聚胺法。

二、盐水配血试验标准操作程序【方法原理】本法是目前最常用的配血方法，可以发现临床上最重要的ABO不配合性。

当受血者血清(浆)和供血者红细胞经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来。

【标本采集和处理】1(标本采集:常规静脉采血3ml于EDTA.K2。

2(标本采取时间:要求受检者血样一定要在输血前48h(抗筛是48h)内采集，血样必须是新近的，无溶血现象。

【试剂】1(抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长春博德)2(Anti-D (IgM) Biotest。

⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。

根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。

5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。

备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。

⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。

【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。

【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。

【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。

凝聚胺交叉配血操作流程
凝聚胺交叉配血是一种重要的辅助性医学操作，它可以帮助医生和护士在紧急情况下，迅速、准确地给患者配血，保证患者得到优质的治疗。

本文将结合流程图，着重介绍凝聚胺交叉配血操作的基本流程。

自动交叉配血系统通常由凝聚胺交叉配血设备和血液实验室材
料组成，它可以完成一次全自动的交叉配血操作。

第一步是将血液实验室的样本置于设备上，将凝聚胺置入设备中。

耐普森凝聚胺具有双向交叉作用，能够将血液样本混合、交叉混合，达到所需的组成比例。

第二步是进行配血，将混合的血液样本注入接收者的血液管中，使血液按照所需的比例分配，从而使接收者得到最佳的治疗效果。

第三步是处理凝聚胺，经过操作后，凝聚胺被收集，然后经过处理处理，分解凝聚胺质粒，使其保持有效的状态，为下一次的操作做好准备。

第四步是清洗设备，在每次操作完成后，应当及时清洗设备，以确保本次操作在下一次使用时可用。

整个凝聚胺交叉配血操作不仅确保了患者得到优质的治疗，而且操作流程简单、安全，为医护人员提供了大量便利。

凝聚胺交叉配血操作提醒我们，要提高护理质量，做到安全、准确、快速，在每一个环节都要做到严谨慎重。

采用凝聚胺交叉配血的护理工作应该被视为一项重要的护理任务，必须认真对待，以保护患
者的生命安全。

总之，凝聚胺交叉配血是一项重要的护理操作，它不仅能够给患者提供优质的治疗，还可以保证医护人员的安全，为他们提供一个安全、可靠的治疗环境。

通过规范操作，准确按照操作规程，凝聚胺交叉配血操作可以确保操作的安全性和准确性，保护患者的安全和健康。

凝聚胺法交叉配血试验操作规程[目的]保证交叉配血试验准确，确保临床输血安全。

[适用范围]XXX医院输血科[职责]具有专业技术的工作人员主要负责XXX医院输血标本的交叉配血试验，但只对该单份标本负责。

[相关文件]试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序紧急用血管理程序[相关记录]仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录交叉配血记录紧急用血记录[实验原理]红细胞表面带有大量的负电荷，以避免产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质中时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞与血清（血浆）中的抗体结合。

其次加入的凝聚胺（Polybrene）溶液是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞的Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝集。

最后加入的悬浮液（Resuspending）具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝集而不会散开，试验结果为阳性。

[仪器器械]玻璃试管、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。

[试剂]生理盐水、凝聚胺试剂、Anti-human IgG血清，均为有合格证件的正品。

[试剂保存和稳定性]1．凝聚胺试剂须保存在2-25℃（其中阴、阳对照血清应储存在2~8℃）。

在适当储存条件下有效期24个月。

2．抗人IgG血清低温冰箱保存。

交叉配血试验操作规程1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。

2范围：患者的血液标本与供血者标本。

3职责：3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。

3.2血库进行交叉配血试验。

4所用设备与试剂4.1BY-320A离心机4.2聚凝胺介质试剂5原理：红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液（Resuspending）,Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。

6操作将受血者、供血者的标本选择工况3分离血清及血浆待用。

用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次）6.1盐水介质交叉配血试验：6.1.1取小试管2支标记主、次侧。

主侧管：受血者血清（PS）100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC）6.1.2将上述试管混匀后，放入离心机，选工况16.1.3取出试管，观察上清液是否溶血，如果没有溶血，然后轻轻晃动试管，肉眼观察结果。

6.1.4结果判定：6.1.4.1肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性、配血结果不相合，无凝集为阴性、配血结果相合。

凝聚胺交叉配血步骤
1.取试管两支，用0.9%生理盐水分别配受血者和供血者5%红细胞悬液（取分离血清后受血者底层红细胞50ul与0.9%生理盐水1mL，取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与0.9%生理盐1mL）
主侧：受血者血清（血浆）100uL＋供血者红细胞悬液50uL
次侧：供血者血清（血浆）100uL＋受血者红细胞悬液50uL
2.各加LIM0.65mL（按压到底一次），混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。

3.用离心机3400转／min（相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1mL液体。

4.轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。

5.最后加入Resuspending2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。

如果在60秒内凝集散开，代表是由Polybrene 引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。

如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

凝聚胺法配血标准化操作规程（SOP）实验室名称项目编号制定日期急诊检验室凝聚胺法配血年月日【目的】指导凝聚胺法配血。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准：专业主管、科主任。

【原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性凝集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta 电位，Zeta电位决定红细胞的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，产生非特异性的凝集。

最后，加入悬浮液（Resuspending）,Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，实验结果为阳性。

【试剂】（1）LIM(Low Ionic Medium)含葡萄糖、EDTA(2Na)等（2）Polybrene Solution含氯化钠、Polybrene等（3）Resuspending Solution含柠檬酸钠、葡萄糖等（4）Positive Ccontrol含抗-D等试剂盒打开使用后,可置室温贮存,未开封者2-10℃贮存，有效期2年。

【操作步骤】（1）取试管二支，标主次测，主测管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3-5％红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次测管反之。

（2）各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。

（3）用BASO血库专用离心机1000g离心力，离心10秒，（若用普通离心机，离心条件为：3400rpm，离心10秒）然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。

交叉配血试验操作规程1目的：保证临床用血安全，为患者提供配血相合的血液制品。

2范围：患者的血液标木与供血者标木。

3职责：3.1临床科室采集正确的血样，并提交输血申请单。

3.2血库进行交叉配血试验。

4所用设备与试剂4.1BY-320A 离心机4.2聚凝胺介质试剂5原理：红细胞表而带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM) 降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液, 它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷, 可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Ze恰电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚，最后，加入悬浮液(Resuspending)‘Resuspending具有中和凝聚胺阳例子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阴性。

6操作将受血者、供血者的标木选择工况3分离血清及血浆待用。

用生理盐水姜受血者、供血者红细胞制备5%盐水悬液代用（选用工况2洗涤红细胞三次）6.1盐水介质交叉配血试验：6.1.1取小试管2支标记主、次侧。

主侧管：受血者血清（PS） 100ul+ 供血者红细胞悬液（DS）50ul；次侧管：供血者血浆（DS）100ul+受血者红细胞悬液（PC）6.1.2将上述试管混匀后，放入离心机，选工况16.1.3取出试管，观察上清液是否溶血，如果没有溶血，然后轻轻晃动试管，肉眼观察结果。

6.1.4结果判定：6.1.4.1肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性、配血结果不相合，无凝集为阴性、配血结果相合。

凝聚胺法交叉配血步骤
凝聚胺法是一种用于交叉配血的实验方法，主要用于确定献血者和受血者之间的血型相容性。

以下是凝聚胺法交叉配血的步骤：
1. 准备试剂和血液样品：准备好用于配血的抗人类免疫球蛋白（anti-human globulin）、酶处理的红细胞（酶处理可增加凝
集反应的可观性）、受试者的血清样本和献血者的红细胞样本。

2. 制备红细胞悬液：将献血者的红细胞样本与生理盐水等溶液混合，制备成红细胞悬液。

3. 凝聚胺法测试：将受试者的血清样本与献血者的红细胞悬液混合，使其发生凝集反应。

这种凝集反应是由于血型抗原和抗体的特异性反应引起的。

4. 观察反应：观察混合溶液中是否发生红细胞凝集。

如果发生凝集，说明受试者的血清中含有能与献血者红细胞上的抗原反应的抗体。

反之，如果没有发生凝集，则表示受试者的血清与献血者红细胞没有血型抗原-抗体相互作用。

5. 阅读和解释结果：根据凝聚胺法反应的结果，确定献血者和受血者之间的血型相容性。

对于发生凝集的配对，表示不相容；在没有凝集的配对中，表示相容。

这些步骤可以帮助血库人员确定合适的献血者给予血液输血给
受血者，从而减少输血反应和不良后果的发生。

每次输血前都要进行凝聚胺法测试来确保安全有效的输血过程。

凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。

二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、测定原理:红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。

若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性;但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开，试验结果为阳性。

五、试剂及材料（一）聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所）成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2～8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二）材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：（一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息），在3000r/min条件下离心5分钟备用。

（二)标本保存:血液样本必须密封,2~8℃保存7天.（三）用于交叉配血必须是2～8℃保存3天以内的标本。

七、操作程序：(一）将受血者红细胞配成3％盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型.(二）将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。

(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC)或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞（PC)或“次侧"。

（四）主侧管:受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul.次侧管:供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。

各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟,再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s.（五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。

(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。

乐平市第二人民医院众埠分院 编写人：刘永贵 页码：P30 G5 D1 检验科输血室 审批人：胡景文 执行期：2012-7

凝聚胺法交叉配血标准操作规程 1. 原理 凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2. 标本采集： 2.1 标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。

2.2 标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，标签齐全。 乐平市第二人民医院众埠分院 编写人：刘永贵 页码：P31 G5 D2 检验科输血室 审批人：胡景文 执行期：2012-7

3. 标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。

4. 标本运输：室温运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染。溶血标本，标签不齐全不能作测定。

6. 试剂： 6.1 试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching) 6.2 试剂组成： 试剂1. 低离子介质(LowLonic Medium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-10度贮存，有效期为2年。

试剂2. 凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。 试剂3. 重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。 试剂4. 生理盐水。 7. 仪器： 乐平市第二人民医院众埠分院 编写人：刘永贵 页码：P32 G5 D3 检验科输血室 审批人：胡景文 执行期：2012-7

交叉配血试验标准操作规程一、目的为规范交叉配血实验的技术操作，保证临床输血安全。

二、适用范围日常的交叉配血工作。

三、原理使受血者血清（血浆）和红细胞分别与献血者红细胞和血清（血浆）反应，采用盐水介质法、凝聚胺法，抗球蛋白法检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原-抗体反应，判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。

四、步骤和方法1、受血者ABO和RhD血型鉴定，执行《血型鉴定操作规程》。

2、根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择与其ABO和RhD相容血液成分，并复检献血者ABO和RhD血型。

3、分别吸取受血者和献血者30微升压积红细胞到已标示试管内，再分别加入生理盐水1毫升制成3%的红细胞悬液。

4、盐水介质法交叉配血(1) 取试管2支，分别标记为主侧和次侧，主侧加受血者血清（血浆）2滴，献血者3%红细胞悬液1滴，次侧加献血者血清（血浆）2滴，受血者3%红细胞悬液1滴，混匀。

(2) 用血型血清学专用离心机以120g离心1min后取出判断结果。

(3) 结果判断：先观察有无溶血，再轻轻转动试管观察有无凝集。

如无溶血、无凝集，继续进行凝聚胺法交叉配血试验。

若盐水介质法试验有凝集或者溶血时，应复检受血者和献血者ABO和RhD血型。

5、凝聚胺法交叉配血盐水介质法交叉配血试验完成后转做凝聚胺法交叉配血试验【方法原理】利用低离子介质（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（浆）中的抗体结合。

加入凝聚胺可使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后，加入悬浮液，具有中和凝聚胺的作用，使正常红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

【标本采集和处理】1．标本采集：常规静脉采血于分离胶/促凝剂管（血清）、或静脉采血3ml于EDTA.K2（血浆），一般采用血清进行抗体检查。

2．血清标本的采取时间：要求受检者血样一定要在输血前3天内采集，血样必须是新近的。