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重组人抗狂犬病病毒单抗SO57、SOJB对不同狂犬病病毒毒株中和作用的研究

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重组抗体文库技术及其应用

重组抗体文库技术及其应用

重组抗体文库技术及其应用抗体是一种在生命科学领域中非常有用的分子工具。

人们可以通过提取动物或人体内特异性抗体来对特定的物质进行检测和定量分析。

但是，传统的抗体制备方法需要提取动物或人体内的抗体，这个过程十分繁琐且涉及许多伦理和法律问题。

为了解决这些问题，人们开始尝试开发一种新的抗体制备和生产方法——重组抗体。

重组抗体技术是通过将人工合成的基因片段插入到真核细胞中，从而利用人工合成的方式来制造抗体。

这种方式既快速又可控，而且由于不需要动物参与，因此符合伦理和法律的要求。

在重组抗体技术的研究中，一个非常重要的进展是重组抗体文库技术。

重组抗体文库技术是一种通过基因重组来合成大量抗体的方法。

它利用人工合成的基因段和哺乳动物细胞进行结合，构建了一个可以用于生产大量抗体的文库。

这些抗体仍然具有高亲和力和高特异性，但是它们来自完全人工生成的基因，与动物或人体没有任何关系。

这种方法因为不需要动物参与，因此被认为是一种高度可持续的抗体生产方法。

随着生物技术的飞速发展，重组抗体文库技术得到了广泛应用。

它涵盖了很多应用领域，例如药物研制、疾病检测和治疗、医疗设备和生物安全等方面。

下面，我们将从这些方面分别探讨其应用。

一、药物研制重组抗体文库技术对药物研制有着非常重要的意义。

在过去的几十年中，许多制药公司都致力于生产抗体类药物。

因为这种药物可以对很多病毒、细菌和癌细胞进行特异性识别，因此在抗肿瘤和免疫治疗方面具有良好的应用前景。

但是，传统的抗体制备方法生产速度和成本都十分昂贵，这大大限制了抗体类药物的开发。

重组抗体文库技术便可以克服这些缺点，大幅度降低了制药成本并增加了药物开发的速度。

利用重组抗体文库技术，生物技术公司可以生成大量可供选择的抗体。

这些抗体可以用于药物筛选或疗效验证实验中。

在药物开发的早期阶段，科学家可以通过选择合适的抗体来进行药物筛选，以寻找最佳的作用机制。

在药物的临床试验和上市后，重组抗体还可以用来测试药物的质量、含量和稳定性等重要指标。

重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的质控方法及质量标准的建立

重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的质控方法及质量标准的建立
通讯作者：魏敬双，E-mail：weijsh@hotmail. com
mbinant human anti-rabies virus monoclonal anti－ body，rhRMcAb）为 CHO 细胞表达的全人源抗体，属 于 IgG1 亚型，可代替抗狂犬病血清用于狂犬病病毒 暴露后预防。本文对本公司研制的 rhRMcAb 的质控 方法和质量标准进行了研究，现报道如下。
1. 材料与方法 1. 1 毒株及细胞
狂犬病病毒固定毒株（CVS-11）由武汉生物制品
·862·
中国生物制品学杂志 2010 年 8 月第 23 卷第 8 期 Chin J Biologicals August 2010，Vol. 23 No. 8
研究所提供；鼠成神经细胞瘤细胞（NA 细胞）来自 TJU USA。 1. 2 样品
狂犬病疫苗，并使用抗狂犬病血清。临床上用单克隆
抗体取代血源抗体用于狂犬病病毒暴露后预防已成
为共识［1］。重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体（Reco-
基金项目：“十一五”863 计划生物和医药技术领域重大项目 （2006AA02A247）.
作者单位：华北制药集团新药研究开发有限责任公司生物技术 研究室（石家庄 050015）.
【Abstract】 Objective To establish the method and standard for quality control of recombinant human monoclonal antibody against rabies （rhRMcAb）. Methods The rhRMcAb was analyzed for neutralizing activity by mouse neutralization test（MNT）and rapid fluorescent focus inhibition test（RFFIT）, for purity by reduced and non-reduced SDS-PAGE and for peptide map by reduction alkylation and trypsin digestion followed by reverse phase HPLC. The amino acids at N-terminus was sequenced by amino acid sequencer after the pyroglutamate blockage at N-terminus was removed by pyroglutamate aminopeptidase. The affinity constant of rhRMcAb with rabies virus glycoprotein was determined by surface plasmon resonance（SPR）method. Other quality indexes of rhRMcAb were determined according to the requirements in Chinese Pharmacopeia （2005 edition）, based on which a standard for quality control was established. Results The activities of six batches of rhRMcAb determined by MNT and RFFIT were basically in agreement. The reduced SDS-PAGE purities of three batches of rhRMcAb bulks were more than 99. 0% . Except major antibody bands, some minor bands with both high and low relative molecular masses were also observed on the non-reduced SDS-PAGE profile of rhRMcAb. The peptide maps of three batches of bulks were consistent with that of in-house reference. The amino acid sequence at N-terminus was identical to the theoretical value. The affinity constant of rhRMcAb with rabies virus glycoprotein was 1. 86 × 108 ／ M. All the other quality indexes of rhRMcAb met the requirements in Chinese Pharmacopeia （2005 edition）. In the established standard for quality control, the neutralizing activity of rhRMcAb was not less than 500 IU ／ ml, while both SDS-PAGE and HPLC purities were not less than 98. 0%. Conclusion The method and standard for quality control of rhRMcAb were established.

一种抗狂犬病毒G蛋白的单克隆抗体及其应用[发明专利]

一种抗狂犬病毒G蛋白的单克隆抗体及其应用[发明专利]

专利名称：一种抗狂犬病毒G蛋白的单克隆抗体及其应用专利类型：发明专利
发明人：赵凌,吴琼,傅振芳,周明,全晓杭
申请号：CN201910426153.5
申请日：20190521
公开号：CN110218704A
公开日：
20190910
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种抗狂犬病毒G蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株RABV G Mab
7A3分泌的，所述杂交瘤细胞株RABV G Mab 7A3保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C201975。

本发明还公开了该单克隆抗体在制备狂犬病毒检测试剂盒中的应用以及一种狂犬病毒中和抗体竞争ELISA检测试剂盒，该试剂盒以狂犬病毒LBNSE毒株的全病毒蛋白为包被原，以量子点标记的单克隆抗体为竞争抗体，具有病毒传播风险小、检测灵敏度和准确性高，特异性好等优点。

申请人：华中农业大学,武汉康湃特生物科技有限公司
地址：430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号
国籍：CN
代理机构：武汉开元知识产权代理有限公司
代理人：徐绍新
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狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节I_型干扰素作用的差异分析

狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节I_型干扰素作用的差异分析

华南农业大学学报 Journal of South China Agricultural University 2024, 45(2): 190-198DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.202211015肖宇, 吴凡, 张宝石, 等. 狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节I型干扰素作用的差异分析[J]. 华南农业大学学报, 2024, 45(2): 190-198.XIAO Yu, WU Fan, ZHANG Baoshi, et al. The different regulatory effect of glycoproteins from virulent and attenuated strain of rabies virus on type I interferon signaling pathway[J]. Journal of South China Agricultural University, 2024, 45(2): 190-198.狂犬病病毒强、弱毒株糖蛋白调节I型干扰素作用的差异分析肖　宇，吴　凡，张宝石，徐孟磊，龙家慧，罗　均，郭霄峰，罗永文(华南农业大学 兽医学院/广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室, 广东 广州 510642)摘要: 【目的】狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus，RABV)引起的一种高致死性人兽共患传染病。

I型干扰素(IFN-I)通路在抵抗RABV感染中发挥重要作用。

RABV可通过磷蛋白及核蛋白的功能逃逸IFN-I的抗病毒作用，本研究旨在探讨对RABV的致病性有重要影响的糖蛋白(Glycoprotein，G)在调节IFN-I通路方面扮演怎样的角色。

【方法】将RABV弱毒株Hep-Flury的G基因替换成致病株CVS-11的G基因，拯救得到重组病毒HepG，分析Hep-Flury、CVS-11和HepG这3种毒株在体内和体外感染对IFN-I通路激活和调控的差别，比较它们在神经细胞中对抗IFN-I抗病毒作用的差异性。

针对狂犬病病毒的重组人二价双链抗体及其用途[发明专利]

针对狂犬病病毒的重组人二价双链抗体及其用途[发明专利]

专利名称：针对狂犬病病毒的重组人二价双链抗体及其用途专利类型：发明专利
发明人：文卡塔·尼迈格答·斯里戴维,赛卢麦尼·那咖拉简,戴乌·常德兰,阿尔沃·维路帕努尔·斯里尼瓦桑
申请号：CN201180012154.7
申请日：20110103
公开号：CN103596975A
公开日：
20140219
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了针对狂犬病病毒的重组人二价双链抗体及其制备方法，所述双链抗体能识别狂犬病病毒糖蛋白并中和狂犬病病毒。

本发明还提供了编码重组二价双链抗体的多核苷酸。

本发明公开的二价双链抗体还可用于量化狂犬病病毒糖蛋白以评价疫苗质量并预期疫苗效能。

申请人：印度免疫有限公司
地址：印度海得拉巴
国籍：IN
代理机构：北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司
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抗人红细胞单链抗体与狂犬病毒G蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

抗人红细胞单链抗体与狂犬病毒G蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

抗人红细胞单链抗体与狂犬病毒G蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测周松峰;廖文军;覃绍敏;袁书智;白安斌;吴健敏【摘要】目的为构建具有凝集性、免疫反应性的双功能融合蛋白.方法本研究利用特异性引物从重组质粒pMD2E8scFv和pMD-G中以PCR方法扩增2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和Kg基因(狂犬病毒G基因主要抗原表位区),采用重叠延伸(SOE) PCR法拼接成融合基因2E8Kg,构建原核表达质粒pET-Trx-2E8Kg并将其转化至BL21 (DE3)pLysS中进行诱导表达并对诱导菌液进行SDS-PAGE分析.结果 2E8Kg融合基因获得了高效表达并主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的23.5％左右,分子量约为77.7kD,与预期的大小一致.将表达的蛋白以亲和层析法进行纯化并通过谷胱甘肽还原法进行复性,纯化后蛋白纯度达到98.9％.结论经Western-blot检测和红细胞凝集试验证明,2ESkg融合蛋白既能够与狂犬病毒(RV)高免血清发生特异性反应,又能够与人红细胞结合,具有双功能特性.%The purpose of this study is to construct fusion proteins that can generate agglutination and immune reaction. Specific primers were used to amplify, from the recombinant plasmids of both pMD-2E8scFv pMD-G with PCR, 2E8 gene (scFv gene against H antigen of human erythrocytes) and Kg gene (the major antigen epitope domain of G gene). These two were thereupon spliced into a fusion gene by splicing overlap extension PCR to construct prokaryotic expression plasmid pET-Trx-2E8Kg, and was then transformed into competent cell BL21 (DE3)pLysS. Finally, protein expression was induced with IPTG and analysed by SDS-PAGE. The results showed that the target fusion protein was successfully expressed andidentified in inclusion bodies, with an expression accounting for 23. 5% of the total bacterial protein. The molecular weight was 77. 7 kD, consistent with the expected size. The purity of the expressed protein reached 98. 9% after being purified by affinity chroma-tography and refolded by Glutathione reduction. The results of Western-blot detection and agglutination test on red blood cell indicated that the fusion protein 2E8kg had bifunctional characteristics, not only being able to have specific reaction with anti-rabies hyperimmune serum, but also could combine with human red blood cell.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2012(028)006【总页数】5页(P597-601)【关键词】狂犬病毒;G基因;单链抗体;双功能融合蛋白;原核表达【作者】周松峰;廖文军;覃绍敏;袁书智;白安斌;吴健敏【作者单位】广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室,南宁530001;北京博莱得利生物技术有限责任公司,北京 100850;广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室,南宁530001;北京博莱得利生物技术有限责任公司,北京 100850;广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室,南宁530001;广西兽医研究所广西畜禽疫苗重点实验室,南宁530001【正文语种】中文【中图分类】R373狂犬病是由狂犬病病毒（rabies virus，RV）引起的中枢神经系统感染的急性人畜共患传染病。

抗狂犬病重组人腺病毒疫苗

抗狂犬病重组人腺病毒疫苗
Prevec,L;赵永军
【期刊名称】《国外兽医学：畜禽传染病》
【年(卷),期】1991(011)003
【总页数】3页(P23-25)
【作者】Prevec,L;赵永军
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S858.953
【相关文献】
1.一种重组人腺病毒抗狂犬病疫苗 [J], Prev.,L;姚坤
2.用牛痘—狂犬病重组病毒疫苗口服免疫幼狐预防狂犬病 [J], Broc.,BM;于文涛
3.预防狂犬病的重组人类腺病毒疫苗 [J], 孙桐
4.重组人抗狂犬病病毒单抗SO57、SOJB对不同狂犬病病毒毒株中和作用的研究[J], 贾茜;徐葛林;赵伟;吴杰;郑新雄
5.重组人源抗狂犬病毒单克隆抗体SO57、SOJB对狂犬病毒G蛋白亲和力的比较研究 [J], 程立均;贾茜
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１１
ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ
ｒａｂｉｅｓ ｖｉｒｕｓ
ＮＭ５７对小鼠街毒暴露后的治疗
１６～１８９雌性
ＢＡＬＢ／ｃ ａｎｄ ｌａｂｅｌｅｄ
ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，分成４组，每组１０只小鼠，小鼠于０ｄ大腿肌 肉注射８０％致死量狂犬病病毒街毒株０．１ｍｌ（染色确定部 位），０．５～１ｈ后同部位肌肉注射单抗ＮＭ５７２００ＩＵ／ｋｇ或 ＨＲＩＧ２００ＩＵ／ｋｇ，０ｄ、７ｄ分别于腹腔注射疫苗免疫。观察并 记录小鼠的死亡情况。这项实验中只选取了一株街毒株 “简”作为攻击毒株，试验设计见表３。
ＰＥＰ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ａｇａｉｎｓｔ
ｓｔｒｅｅｔ
ＣＶＳ一１１ １００
ｃｈａｌｌｅｎｇｅ
ＮＭ５７ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ
ｒａｂｉｅｓ ｖｉｒｕｓ‘Ｊｉａｎ —８（）
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２０
ＢＡＬＢ／ｃ ｆｅｍａｌｅ ｍｉｃｅ
ｄａｙ ０，ａｎｄ
ｗｅｒｅ
ｔｒｅａｔｅｄ ｉ．Ｐ．ｉｎ ｔｈｅ ｅｕｔｈａｎｉｚｅｄ ｗｈｅｎ
ｐａｒｔ ｗｉｔｈ ２００ ｓｉｇｎｓ
４００
ＩＵ／ｋｇ
Ｓ０５７，Ｓ０５７＋ＳＯＪＢ，ｏｒ ＨＲＩＧ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
ｗｉｔｈ；‘ ’．Ｎｏ
ａｆｔｅｒ０．５—１
ｍｏｎｉｔｏｒｅｄ ｄａｉｌｙ １０
ａｎｄ
ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｏｆ ｒａｂｉｅｓ
狂犬病是一种严重的人类致死性传染病，根据 全国疫情报告系统资料，１９９８年后狂犬病疫情年增 长幅度越来越高。２００２年发病数１ １２２例，死亡
１
和东部毒株，具有区域代表性Ｈ Ｊ。在小鼠模型的试 验中我们选取了这３株狂犬病病毒街毒株做为暴露 后治疗攻击毒株，以考察Ｓ０５７和ＳＯＪＢ对不同毒株 的中和效力。 在中和抗体效价测定上，ＲＦＦＩＴ法是ｗＨｏ推 荐的一种中和试验方法，普遍应用于抗狂犬病病毒 免疫球蛋白药代动力学评价、新免疫程序和免疫途 径的有效性分析以及检疫工作中。本实验中抗体的 中和效价测定即采用了ＲＦＦＩＴ法。
第２２卷
第４期
病
毒
学
报
Ｖ０１．２２
Ｎｏ．４
１ １ １ ｉ生！旦
￡旦！塑垦曼墨』Ｑ堕垦丛生出Ｑ曼ｙ！垦Ｑ垦ＱＱ羔
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重组人抗狂犬病病毒单抗Ｓ０５７、ＳｏＪＢ对不同 狂犬病病毒毒株中和作用的研究
贾茜１，徐葛林２，赵伟１，吴杰２，郑新雄２
（１．华北制药集团新药研究开发有限责任公司，河北石家庄０５００１５；２．武汉生物制品研究所，湖北武汉４３００６０） 摘要：用不同的动物模型研究了具有专利的重组人抗狂犬病病毒单克隆抗体Ｓ０５７、ＳＯＪＢ对不同狂犬病病毒株的 中和作用，１００１Ｕ／ｋｇ的Ｓ０５７能１００％保护被中国街毒株ＳＢＤ攻击的中国仓鼠；首次用小鼠模型模拟人体被狂犬 病病毒攻击后的治疗情况，在小鼠被ＣＶＳ及中国街毒代表株攻击后，Ｓ０５７与ＨＲＩＧ具有相近的对小鼠的暴露后保 护作用；同时结果显示ＨＲＩＧ对ＳＢＤ株攻击的保护率不能到达１００％，仅使用疫苗是不能对感染病毒的小鼠百分 之百的保护；ＳＯＪＢ与Ｓ０５７ １：１联合使用未显示比Ｓ０５７单独使用更好的保护效果。Ｓ０５７极有可能在中国代替 ＨＲＩＧ用于狂犬病病毒暴露后治疗。 关键词：狂犬病病毒；单克隆抗体；中和作用；狂犬病病毒暴露后治疗 中图分类号：Ｒ３７３．２２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００ｆｆ一８７２１（２００６）０４—０２５６—０６
约５Ｘ ｉ０４个，３７℃、５％Ｃ０２培养２４ｈ。弃培养液，ＰＢＳ洗１
次，冷丙酮固定７ｍｉｎ，，干燥后，加工作浓度的荧光素标记抗
表１
Ｔａｂｌｅ １
单克隆抗体对小鼠被ＣＶＳ暴露后的治疗实验设计
ＰＥＰ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ａｇａｉｎｓｔ ＣＶＳ－１ １
ＢＡＬＢ／ｃ ｒａｂｉｅｓ
ｋｇ
ｖａｃｃｉｎｅ ａｎｄ ｔｒｅａｔｅｄ ｉ．ｐ．ｉｎ
ｓａｍｅ
ｐａｒｔ
ｗｉｔｈ ２００
ＩＵ／
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Ｅ
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ＮＭ５７
ｏｒ
ＨＲＩＧ．Ｖａｃｃｉｎｅ ｇｒｏｕｐ ｒｅｃｅｉｖｅｄ
ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ
ｗｅｒｅ
ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｎｅｉｔｈｅｒ
ａｎｔｉｂｏｄｙ
ｎｏｒ
ｖａｃｃｉｎｅ．Ａｎｉｍａｌｓ
确定的ＬＤ８０分别为１０＿１”、１０。２９、１０－２
３
ｏ。
重组人抗狂犬病病毒抗体
专利的【５１Ｓ０５７和ＳＯＪＢ均
由重组狂犬病病毒表达系统在ＢＳＲ细胞中表达№＇７ Ｊ，ＨＰＬＣ 纯度＞９８％，分子量分别是１５０ｋＤ和１７０ｋＤ。两株抗体的基 因序列的ＧｅｎＢａｎｋ编号：ＳＯＪＢ
Ｉｇ
２７；修回日期：２００６—０４—１９
００３例；２００３年发病数达到２ ００９例，死亡１
８２７
例。病死数占各种法定传染病死亡总数的 ３７．２９％，成为当年死亡人数最多的传染病，２００４年 和２００５年死亡人数更是达到了２ ６６０例和２ ５３７例。 对狂犬病暴露后的预防（ＰＥＰ）主要是采用抗狂犬病 病毒免疫球蛋白（ＲＩＧ）结合狂犬病疫苗注射的方法。 目前临床使用的有两类：人抗狂犬病病毒免疫球蛋白 （ＨＲＩＧ）和马抗狂犬病病毒免疫球蛋白（ＥＲＩＧ）ｕ Ｊ。 由于ＨＲＩＧ成本高且产量少，难以满足我国的用药需 求，并且血源产品质量难以控制，还有潜在病毒污染 的风险；而ＥＲＩＧ存在引起过敏反应等问题，患者不 能放心使用。临床上用单克隆抗体取代现有的血源 抗体用于狂犬病病毒暴露后预防幢Ｊ的必要性已经成 为国际上研究者的共识。在Ｄｉｅｔｚｓｃｈｏｌｄ等发现的几 株针对Ｇ蛋白的人单克隆中和抗体中，Ｓ０５７、ＳＯＪＢ 具有广泛的中和活性。也是目前研究较多的针对Ｇ 蛋白的人单克隆中和抗体¨＇２ Ｊ。 研究表明，我国狂犬病病毒街毒的分布有地域 性的特点旧＇４ Ｊ。ＣＱ９２、“简”、ＳＢＤ分别分离自重庆 犬、宁夏人和上海犬，均为基因１型，分属我国狂犬 病病毒街毒３个基因亚组，分别代表中国西部、北部
作者简介：通讯作者：贾茜（１９６５一），女，正高级工程师，Ｅ—ｍａｉｌ
ｊｉａｑｉａｎｚｈ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｒｎ
Ｌ，ＡＹｌ７２９６２；ＳＯＪＢ Ｉｇ Ｈ，
ＡＹｌ７２９５８；Ｓ０５７ Ｉｇ Ｌ，ＡＹｌ７２９６０；Ｓ０５７ Ｉｇ Ｈ，ＡＹｌ７２９５７。
ＮＭ５７是把上述Ｓ０５７的基因转入ＣＨＯ细胞后，由稳定的重
ｆｅｍａｌｅ ｍｉｃｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ
ｗｅｒｅ
ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ
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ｉ．Ｐ．ｗｉｔｈ
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ｉ．ｍ．ｗｉｔｈ ｒａｂｉｅｓ
ｖａｃｃｉｎｅ ａｎｄ
ｔｒｅａｔｅｄ ｉ．Ｐ．ｉｎ ｔｈｅ
收稿日期：２００６
０２
材料与方法
１狂犬病病毒固定毒株（ＣＶＳ） 实验用ＣＶＳ－１１病毒来自
武汉生物制品研究所，采用细胞和小鼠脑内传代分别用于 ＲＦＦＩＴ法效价测定和小鼠模型中。小鼠ＣＶＳ暴露后预防模 型中使用的ＣＶＳ－１１经过小鼠肌肉滴定实验确定ＬＤ８０为
１０
。
２狂犬病病毒街毒株３株街毒（ＣＱ９２、“简”、ｓＢＤ）均来自 武汉生物制品研究所。ＣＱ９２株为１９９２年分离于重庆狗脑， ＳＢＤ株为１９９３年分离于上海狗脑，“简”株为１９９５年分离于 宁夏人脑ＨＪ，在发病动物或人的脑内收集的病毒经两代小鼠 脑内传代后低温保藏。这３株毒株经过小鼠肌肉滴定实验
ＷＨＯ抗狂犬病病毒免疫球蛋白国际标准
ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＦｏＲ Ｂ１０ＬｏＧＩＣＡＬ
购自ＮＡ—
８暴露后治疗的中国仓鼠模型
用街毒ＳＢＤ株肌肉注射４
Ｔ１０ＮＡＬ
ＳＴＡＮＤＡＲＤＳ
～６周龄（８０～８５９）中国仓鼠右侧腓肠肌１０ ＭＬＤ５０／只，４ｈ 后，用Ｓ０５７或ＳＯＪＢ同侧腓肠肌注射。观察３６ｄ，统计存活 的仓鼠数量。 ９单克隆抗体对ＣＶＳ暴露后的治疗１６～１８９雌性ＢＡＬＢ／ ｅ小鼠，分成８组，每组１０只小鼠，小鼠于０ｄ大腿肌肉注射 ８０％致死量ＣＶＳ－１１病毒０．１ｍｌ（染色确定部位），０．５～１ｈ后 同部位肌肉注射单抗或ＨＲＩＧ，０ｄ、７ｄ分别于腹腔注射疫苗 免疫。观察并记录小鼠的死亡情况。使用抗体的剂量为分 别为２００ＩＵ／ｋｇ和４００ＩＵ／ｋｇ，Ｓ０５７＋ＳＯＪＢ为１：１混合，阳性 对照为ＨＲＩＧ。死亡小鼠用脑涂片法检验是否感染狂犬病 病毒。实验设计见表１。
ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ ｉ．Ｐ．ｗｉｔｈ
ｓｔｒｅｅｔ
ＲＶ’Ｊｉａｎ”ｏｎ
Ｏ
ｌａｂｅｌｅｄ
ｔｈｅ ｉｎｌｅｃｔｉｏｎ ｐｏｓｉｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｄｙｅ．Ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｖａｃｃｉｎａｔｅｄ ｔｈｅ
ｎｏ
霍 ｉ ０，ｌ。．圈．０，・。．圈．０，ｍ．圜．豳． １
１／１０ １／１０ １／１０
圈 豳
Ｇ
ｉ．ｍ．ｗｉｔｈ ｒａｂｉｅｓ
万 方数据
４期
贾茜等：重组人抗狂犬病病毒单抗Ｓ０５７、ＳＯＪＢ对不同狂犬病病毒毒株中和作用的研究 狂犬病病毒Ｎ蛋白抗体（ＦＩＴＣ—ＡＮＴＩ—ＲＡＢＩＥＳ
ＬＯＴ
・２５７・
组ＣＨＯ细胞表达的单抗经纯化制得，其质量符合２００５版药 典对重组ＤＮＡ产品的质量要求；以上单克隆抗体样品均来 自于华北制药集团新药研究开发有限责任公司生物技术室。 ４狂犬病病毒疫苗维尔博狂犬病病毒疫苗，批号：ｕ１６５２， 制造商：安万特．巴斯德公司。用磷酸盐缓冲液按体积稀释 １２５倍，０．５ｍｌ／只腹腔注射小鼠。