分离线粒体蛋白和胞质蛋白

大学细胞生物学考试练习题及答案31.[单选题]圆泡多出现在细胞有丝分裂的 （ ）A)晚期和G1期B)S期C)G2期D)贯穿整个有丝分裂期答案:A解析:2.[单选题]以下论述说法错误的是（ ）。

A)无包膜的病毒释放速率要明显快于有包膜的病毒，有包膜的病毒是以出芽的方式释放B)原核生物均是单倍体C)在光学显微镜下，原核生物的核区经过特殊染色可以呈现各种形状，但没有强的Feulgen正反应，说明它与真核细胞的核不一样D)细菌的鞭毛结构与真核细胞的鞭毛结构是完全一致的答案:D解析:原核生物鞭毛是指细胞表面着生的一至数十条长丝状、波曲的蛋白质附属物,结构简单，由基体、构型鞘和鞭毛丝3部分组成，真核生物鞭毛由鞭杆、基体和过渡区组成。

真核生物与原核生物鞭毛在运动功能上相同，均以挥鞭方式推动细胞运动，但两者在构造、运动机制等方面有显著的区别。

3.[单选题]用非特异性性微球菌核酸酶消化裸露的DNA 时，将产生（ ）：A)大约200bp的片段B)大约200bp整倍数的片段C)随机大小的片段群体D)大约146bp整倍数的片段答案:C解析:4.[单选题]下列哪种超高分辨率显微技术是由华人科学家庄小威教授创建的( )A)超分辨--受激发射损耗显微技术(STED)B)随机光学重建显微技术(STORM)C)饱和激发结构光照明显微技术(SSIM)D)荧光激活定位显微镜技术(FPALM)答案:B解析:5.[单选题]在下列蛋白中，除（ ）外，都是粘着带所需要的。

C)肌动蛋白D)中间丝答案:D解析:6.[单选题]在电镜下可见细胞核的外膜与细胞质中哪种细胞器相连？A)高尔基复合体B)滑面内质网C)线粒体D)粗面内质网答案:D解析:7.[单选题]凋亡细胞特征性的形态学改变是（ ）。

A)溶酶体膜和细胞膜破裂B)染色质边集，沿核膜分布C)线粒体嵴消失D)形成凋亡小体答案:D解析:细胞凋亡的特征性形态学改变是形成凋亡小体。

细胞凋亡过程中，细胞膜反折， 包裹断裂的染色质片断或细胞器，然后逐渐分离，形成众多的凋亡小体。

第十节
蛋白质 的分离与纯化
一、 引言
二、 蛋白质（酶）分 离纯化的前处理三、蛋白质（酶来自分离 与纯化四、层析技术
五、电泳技术
六、离心技术
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一、 引言
• 蛋白质（酶）存在于一切生物体中，是 非常重要的生物大分子。蛋白质是生物 功能的执行者，担负着生物催化、物质 运输、运动、防御、调控及记忆、识别 等多种生理功能。
化膜，暴露出疏水区域，同时又中和了电荷， 破坏了亲水溶胶，蛋白质分子即聚集而形成沉 淀。
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Salting-in
Salting-out
溶 解 度
盐浓度
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水化膜
++ + +
碱
+
+
++ +
酸
带正电荷蛋白质 （亲水胶体）
脱水
水化膜 碱
酸
等点电时的蛋白质 （亲水胶体）
脱水
带负电荷蛋白质 （亲水胶体）
脱水
• 盐析法应用最广的还是在蛋白质领域，已有八 十多年的历史，其突出的优点是：
• ①成本低，不需要特别昂贵的设备。 • ②操作简单、安全。 • ③对许多生物活性物质具有稳定作用。
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⑴ 盐析的基本原理
• 蛋白质溶液为亲水溶胶体系，其稳定因素：水 化膜和电荷。
• 中性盐的亲水性大于蛋白质分子的亲水性。 • 加入大量中性盐后，夺走了水分子，破坏了水
• 3) 酶解法：利用各种水解酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛 酶和酯酶等，于37℃，pH8，处理15分钟，可以专一性地将 细胞壁分解。
• 4) 有机溶剂处理法：利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶剂或 SDS（十二烷基硫酸钠）等表面活性剂处理细胞，可将细胞 膜溶解，从而使细胞破裂，此法也可以与研磨法联合使用。

线粒体（mitochondrion)
细胞的生存需要两个基本的要素∶构成细胞结构的化学元件和能量。生物 从食物中获取能量，根据对氧的需要情况分为两种类型∶厌氧的，即不需要 氧；好氧的，即需要氧的参与。在真核生物中，需氧的能量转化过程与线粒 体有关，并且伴随着一系列的化学反应；而在原核生物中，能量转化与细胞 质膜相关。 线粒体(mitochondrion)是1850年发现的一种细胞器，1898年命名。是细 胞内氧化磷酸化和形成ATP的主要场所。
（2）葡萄糖酵解生成丙酮酸 细胞质中的葡萄糖(或糖原)在一系列酶的催化下生成丙酮酸的过程称为糖酵 解。反应的主要过程包括∶①葡萄糖在磷酸化酶的作用下形成1，6二磷酸果 糖，此过程需要消耗两个ATP；②二磷酸6-碳糖被裂解生成两个3-碳糖；③ 三碳糖被逐步转变成丙酮酸。
线粒体中乙酰CoA CoA的生成 （3）线粒体中乙酰CoA的生成 ● 丙酮酸生成乙酰CoA 细胞质膜中由糖酵解生成的丙酮酸分子经过线粒体外膜的孔蛋白进入线粒 体膜间隙，然后在运输蛋白的作用下穿过内膜进入线粒体基质。在基质中， 丙酮酸被丙酮酸脱氢酶氧化成乙酰辅酶A， 同时生成一分子NADH和一分子 CO2。 ● 乙酰辅酶A是线粒体能量代谢的核心分子，无论是糖还是脂肪酸作为能 源，都要在线粒体中被转变成乙酰辅酶A才能进入三羧酸循环彻底氧化。 ■ 三羧酸循环 乙酰CoA一旦形成，立即进入线粒体基质的循环氧化途径，即TCA循环。 TCA循环又称Krebs循环、柠檬酸循环。每循环一次生成两分子的CO2、一 分子GTP、四分子的NADH(连同丙酮酸脱羧形成乙酰CoA时产生的一分子 NADH在内)和一分子的FADH2，释放5对电子。
一. 线粒体的形态结构 线粒体是能够在光学显微镜进行观察的显微结构，它具有渗透性，在低 渗溶液中会膨胀，而在高渗溶液中能够收缩。 大小: 大小:

大学细胞生物学考试(习题卷1)第1部分：单项选择题，共227题，每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。

1.[单选题]新生肽链的折叠与装配是在下列哪种细胞器内完成的？A)溶酶体B)粗面内质网C)高尔基体D)滑面内质网答案:B解析:2.[单选题]下列哪种物质不参与氨基聚糖的组成( )A)N-乙酰氨基半乳糖B)N-乙酰氨基葡萄糖C)N-乙酰葡萄糖胺D)葡萄糖醛酸E.艾杜糖醛酸答案:C解析:3.[单选题]用特异性药物细胞松弛素B可以阻断下列哪种小泡的形成( )A)胞饮泡B)吞噬泡C)分泌小泡D)包被小泡答案:B解析:4.[单选题]下列哪一项不是凋亡细胞的特点（ ）A)细胞膜破裂B)细胞膜保持完整C)不引起炎症D)DNA ladder答案:A解析:5.[单选题]下列关于再生能力的比较，正确的是（ ）。

A)幼体强于成体B)动物强于植物C)高等动物强于低等动物D)器官强于组织答案:A解析:6.[单选题]矽肺、痛风和下列哪种细胞器的异常有关？D)滑面内质网答案:A解析:7.[单选题]线粒体作为半自主细胞器，下列论述有误的是（ ）A)线粒体具有环状双链DNA，可以自我复制B)线粒体可以像细菌一样自我增殖分裂C)线粒体具有核糖体，可以合成蛋白质，但线粒体核糖体与胞质中核糖体并不相同D)线粒体蛋白质均靠自身合成，且不受细胞核的调控答案:D解析:8.[单选题]在哪个阶段，去甲基酶清除DNA上几乎所有从亲代遗传下来的甲基化标记？（ ）A)受精时B)受精后卵裂最初几次分裂时期C)受精后卵裂后期D)胚胎植入子宫时答案:B解析:在受精卵的最初几次分裂时期，去甲基酶清除DNA上的甲基，在胚胎植入子宫的时候，建立新的甲基化模式。

9.[单选题]结构较稳定的细胞骨架是( )A)微管B)微丝C)中间纤维D)微梁网络答案:C解析:10.[单选题]以下可用于外源蛋白质分子导入细胞的方法是（ ）A)分子筛层析B)直接扩散法C)Western blotD)琼脂糖电泳答案:B解析:11.[单选题]从受精卵到成熟个体需进行( )A)细胞分裂B)细胞分化C)二者均有D)二者均无答案:C解析:12.[单选题]下列中哪种是由微丝为主要成分构成的细胞结构？A)肌肉的细肌丝，肌肉的粗肌丝，微绒毛，stress fiberB)肌肉的细肌丝，微绒毛，纤毛，细胞皮层C)肌肉的粗肌丝，微绒毛，stress fiber，胞质分裂环13.[单选题]以下哪一类组织中细胞外基质（ECM）含量较高？A)上皮组织B)肌肉组织C)神经组织D)结缔组织答案:D解析:14.[单选题]下面描述不属于密度梯度离心的是（ ）A)溶液介质本身不会形成密度梯度B)细胞各组分按照密度分离C)离心速度恒定D)大分子量组分位于离心管底部答案:A解析:15.[单选题]在单细胞凝胶电泳实验中，凋亡细胞（正常细胞的核为球形）的实验结果是（ ）。