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DOI ：10．3724/SP．J．1096．2011．00617超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛肉中青霉素类药物及其代谢产物刘创基1王海*2杜振霞1姜艳彬2单吉浩2蔡英华21（北京化工大学理学院，北京100029）2（中国动物疫病预防控制中心，北京100125）摘要建立了同时检测牛肉中2种青霉素（阿莫西林和青霉素G ）及其5种主要代谢产物的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。
牛肉样品加入青霉素V 为内标，经乙腈提取后，在UPLC HSS T3色谱柱（100mm ˑ2．1mm ，1．8μm ）上分离，以乙腈和添加0．15%甲酸与5mmol /L 乙酸铵的水溶液（pH 2．8）作为流动相，采用梯度洗脱程序，正离子电喷雾多反应监测（MRM ）模式检测，一次进样分析需8min ，基体匹配标准内标法定量。
方法学确证表明：牛肉样品的线性范围为25 2500μg /kg ，各被测物质的线性相关系数均大于0.99，加标回收率为91% 106%，相对标准偏差为2% 9%（n =6），样品的检出限为0．05 3．0μg /kg （S /N ＞3），定量限均为25μg /kg （S /N ＞10）。
本方法灵敏度高，重复性良好，为生物组织样品中青霉素类药物的代谢研究提供了分析基础。
关键词超高效液相色谱-串联质谱法；牛肉；阿莫西林；青霉素G ；代谢物2010-09-09收稿；2011-01-10接受本文系国家科技支撑计划项目基金（No．2009BADB7B07）资助*E-mail ：cadc2008@126．com1引言阿莫西林（Amoxicillin ）和青霉素G （Penicillin G ）均属于β-内酰胺类抗生素，广泛应用于人和动物尿道、胃肠道和呼吸道感染等疾病［1 4］，同时也是目前治疗奶牛乳腺炎的首选药物。
然而，用药不规范会导致药物在奶和动物组织中的残留，食品中痕量的青霉素或其代谢物残留对青霉素过敏的人有潜在的健康危害［5 6］，已有文献报道在食用青霉素残留的食品后产生过敏反应的案例［7］。
超高效液相色谱-串联质谱法测定果汁中的展青霉素1.引言1.1 概述概述部分的内容可以如下所示：概述展青霉素作为一种广泛应用于医药和农业领域的抗生素，其在果汁中的检测具有重要的意义。
果汁作为一种常见的饮料，其质量的好坏直接关系到消费者的健康。
因此，对果汁中展青霉素的快速、准确和可靠的检测方法的研究具有重要的实际应用价值。
本文主要介绍了一种基于超高效液相色谱-串联质谱法测定果汁中展青霉素的方法。
超高效液相色谱-串联质谱法具有分离效果好、灵敏度高、定量准确等优点，能够有效地应用于展青霉素的检测。
通过对方法的优化和样品的处理，可以获得较高的检测灵敏度和准确度。
文章结构本文主要分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分旨在对文章的研究背景和意义进行介绍，以及概述本文的结构。
正文部分主要分为超高效液相色谱-串联质谱法、展青霉素的特性以及果汁中展青霉素的检测方法三个方面进行详细阐述。
结论部分主要对实验结果进行分析，并评价所使用方法的可行性，最后探讨了对果汁质量控制的意义。
目的本文的目的是研究和提出一种高效、可靠的检测果汁中展青霉素的方法，以提供给相关工业和监管部门作为果汁质量控制的辅助手段。
通过该方法的应用，可为果汁生产企业提供及时、准确的检测结果，从而保证产品质量，确保消费者的健康和安全。
通过本文的研究和探索，希望能够为果汁生产企业提供一种有效的展青霉素检测方法，为果汁质量控制提供科学依据，促进果汁工业的可持续发展。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下内容：文章的结构部分旨在对整篇文章的组织和内容进行简要介绍，为读者提供一个大致了解文章结构的导引。
本文的结构分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分包括概述、文章结构和目的三个方面。
首先，通过概述部分，介绍了超高效液相色谱-串联质谱法在果汁中展青霉素检测方面的重要性和应用前景。
其次，文章结构部分将详细描述整篇文章的组织和内容，以帮助读者更好地理解文章的框架。
2012年5月Vol．30No ．5May 2012Chinese Journal of Chromatography445 451研究论文DOI ：10．3724/SP．J．1123．2011．11036*通讯联系人：卓先义，研究员，主要从事毒物化学研究．Tel ：（021）52352955，E-mail ：zhuoxianyi126@126．com ．基金项目：上海市法医学重点实验室项目（11DZ2271500，2009-2）．收稿日期：2011-11-21超高效液相色谱-串联质谱法同时测定全血中青霉素G 及其主要代谢产物陈聪1，2，3，严慧1，沈保华1，卓先义1*（1．司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室，上海200063；2．上海市疾病预防控制中心，上海200336；3．复旦大学上海医学院法医系，上海200032）摘要：建立了同时检测全血中青霉素G 及其2种主要代谢产物青霉噻唑酸和脱羧青霉噻唑酸的超高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法。
血样经简单的蛋白沉淀提取后，目标化合物经BEH C 18色谱柱（50mm ˑ2.1mm ，1.7μm ），以含0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱分离后，选用正离子电喷雾多反应监测（MRM ）模式检测。
方法检出限（信噪比（S /N ）为3计）为0.1 2.0ng /mL ，定量限（S /N =10）为0.5 5.0ng /mL 。
各被测物的线性相关系数均大于0．9974，准确度为92.3% 105.5%，日内精密度小于10%。
考察了不同储存温度（18、4、－18、－80ħ）下全血中青霉素G 及其代谢物的稳定性，结果表明随着储存温度升高和时间的延长，青霉素G 的质量浓度下降明显。
应用建立的方法检测了给予20mg /kg 青霉素G 后的大鼠血液样本，血液中青霉素G 原形药物在给药后0.5h 即消除完全（低于检出限），而其代谢物的体内消除时限可延长至36h 。
超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中12种青霉素类药物残留量梁晶晶;沈丹;徐潇颖;丁宇琦;罗金文【摘要】应用PRiME HLB净化技术,采用超高效液相色谱-串联四级杆质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)分析手段,建立动物源性食品中12种青霉素族抗生素类药物残留量的检测方法.该文着重对样品的净化、浓缩、液相分离及串联质谱等相关检测参数进行了最佳化研究.样品经80％乙腈水混合溶液提取,PRiME HLB固相萃取柱净化,经CORTECS C18色谱柱(100 mm x2.1 mm,2.7 μm),以甲醇和0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,以MRM方式进行定量分析.结果表明,各组分在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数r2≥0.998,平均回收率在81.7％～111.9％,相对标准偏差在0.89％～8.56％.该方法用于食品中青霉素族抗生素药物残留检测,具有准确、快速、简便、灵敏度高等优点,可满足我国对青霉素族抗生素类药物检测限要求.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2018(044)005【总页数】5页(P265-269)【关键词】青霉素;PRiME HLB;UPLC-MS/MS【作者】梁晶晶;沈丹;徐潇颖;丁宇琦;罗金文【作者单位】浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州,310052;通标标准技术服务有限公司,浙江杭州,310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州,310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州,310052;浙江省食品药品检验研究院,浙江杭州,310052【正文语种】中文青霉素族属β-内酰胺类抗生素，通过抑制细菌细胞壁四肽侧链和五肽交联桥的结合来阻碍细胞壁合成，具有较强的杀菌作用，广泛应用于人和动物尿道、胃肠道和呼吸道感染等疾病[1-2]。
第42 卷第 11 期2023 年11 月Vol.42 No.111503~1509分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO（Journal of Instrumental Analysis）超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中52种抗感染类药物张丽蓉1，肖紫芬1，谢宋阳1，毛林芳1，王慧2*，陈硕1*（1．福建省食品药品质量检验研究院，福建福州350001；2．中国食品药品检定研究院，北京100050）摘要：建立了超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）同时测定化妆品中52种抗感染类药物的分析方法。
样品经乙腈超声提取，选用Waters HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm），以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相，在电喷雾（ESI）正、负离子模式下以多反应监测（MRM）模式进行测定。
结果显示，水剂、乳液、膏霜3个基质中52种抗感染类药物在1~50 ng/mL范围内呈良好线性关系，相关系数（r）均大于0.99，检出限为1~10 μg/kg，定量下限为3~35 μg/kg。
样品在3个加标水平下的回收率为81.2%~116%，相对标准偏差（RSD）均小于10%。
该方法适用于化妆品中52种抗感染类药物的测定，可为化妆品中抗感染类药物的违禁添加监管提供技术参考。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱法；化妆品；抗感染类药物；违禁添加中图分类号：O657.7；TQ658文献标识码：A 文章编号：1004-4957（2023）11-1503-07Determination of 52 Anti-infective Drugs in Cosmetics by Ultra Per⁃formance Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryZHANG Li-rong1，XIAO Zi-fen1，XIE Song-yang1，MAO Lin-fang1，WANG Hui2*，CHEN Shuo1*（1．Fujian Institute for Food and Drug Quality Inspection，Fuzhou 350001，China；2．National Institutes forFood and Drug Control，Beijing 100050，China）Abstract：An ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）method was established for the simultaneous determination of 52 anti-infective drugs in cosmetics. Af⁃ter ultrasonic extraction with acetonitrile，the sample was eluted on Waters HSS T3 column（2.1 mm×100 mm，1.8 μm） with mobile phase consisted of 0.1% formic acid solution-0.1% formic acid aceto⁃nitrile. For quantitative analysis，the electrospray ionization source was applied to carry out the posi⁃tive and negative ions scanning with multiple reaction monitoring（MRM） mode. Results showed that there were good linear relationships for 52 anti-infective drugs from 1 ng/mL to 50 ng/mL，with corre⁃lation coefficients（r） greater than 0.99. The limits of detection ranged from 1 to 10 μg/kg，and the limits of quantitation ranged from 3 to 35 μg/kg. The recoveries ranged from 81.2% to 116% at three spiked levels，with the relative standard deviations（RSDs） less than 10%. The method could be used for the determination of 52 anti-infective drugs in cosmetics，and provides a technical reference for the supervision and administration of prohibited addition of anti-infective drugs in cosmetics.Key words：ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）；cosmetics；anti-infective drugs；prohibited addition喹诺酮类、林可酰胺类、硝基咪唑类等抗感染类药物，大多属于临床使用的处方药，可用于治疗皮肤病（除螨、祛痘等）。
专利名称：一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗菌药物的方法
专利类型：发明专利
发明人：成晓亮,李美娟
申请号：CN202010477009.7
申请日：20200529
公开号：CN111735880A
公开日：
20201002
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗菌药物的方法，所述的抗菌药物包括：舒巴坦(SBT)、亚胺培南(IPN)、利奈唑胺(LNZ)、美洛培南(MPN)、莫西沙星(MXC)、哌拉西林(PRC)、替加环素(TGC)、头孢哌酮(CFZ)、万古霉素(VCM)、替考拉宁(TCL)；采用超高效液相色谱串联质谱法检测预处理血清中上述抗菌药物的含量，利用质谱同位素内标法定量，以标准品与内标物的浓度比为X轴，标准品与内标物峰面积比为Y轴，建立校准曲线，计算出血清中目标药物的浓度；本发明方法前处理过程简单且灵敏度高、特异性强，5min之内完成抗菌药物的分离和检测，为临床上抗菌药物的治疗浓度监测提供一种可靠的检测方法。
申请人：南京品生医学检验实验室有限公司
地址：210043 江苏省南京市江北新区浦东北路7号扬子科创总部基地5号楼10层
国籍：CN
代理机构：镇江基德专利代理事务所(普通合伙)
代理人：邓月芳
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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛肉中青霉素类药物及其代谢产物刘创基;王海;杜振霞;姜艳彬;单吉浩;蔡英华【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2011(39)5【摘要】建立了同时检测牛肉中2种青霉素(阿莫西林和青霉素G)及其5种主要代谢产物的超高效液相色谱一串联质谱分析方法.牛肉样品加人青霉素V为内标,经乙腈提取后,在UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)上分离,以乙腈和添加0.15%甲酸与5 mmol/L乙酸铵的水溶液(pH 2.8)作为流动相,采用梯度洗脱程序,正离子电喷雾多反应监测(MRM)模式检测,一次进样分析需8 min,基体匹配标准内标法定量.方法学确证表明:牛肉样品的线性范围为25～2500 μg/kg,各被测物质的线性相关系数均大于0.99,加标回收率为91%～106%,相对标准偏差为2%-9%(n=6),样品的检出限为0.05～3.0 μg/kg(S/N>3),定量限均为25 μg/kg(S/N> 10).本方法灵敏度高,重复性良好,为生物组织样品中青霉素类药物的代谢研究提供了分析基础.%A comprehensive analytical method based on ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry has been developed for the simultaneous determination of 2 penicillins (amoxicillin and penicillin G) and their 5 major metabolites. Penicillin V was used as the internal standard in this method. Bovine muscle sample was prepared by precipitation of proteins with acetonitrile. The penicillins was analyzed on an ACQUITY UPLC HSS T3 column 100 mm × 2. 1 mm, 1.8 μm using a mixture of 0.15％ formic acid in water with 5 mmol/L ammonium acetate(pH 2.8) and acetonitrile as the mobile phase and a gradient program with a cycle time of 8 min, and detected by positive electrospray ionization tandem mass spectrometry in the MRM mode, and quantified by matrix-match internal standard solution. The standard curves were linear in the range of 25- 2500 μg/kg for bovine muscle. The average recoveries were 91％-106％ with RSDs of 2％-9％ (n= 6). The detection limits (S/N＞3) of the 8 analytes were 0.05-3.0 μg/kg, the limits of quantitatio n (S/N＞1O) were all 25 μg/kg. The method is sensitive and repeatable, and can be applied to the field of residue analysis about penicillins and their metabolites.【总页数】6页(P617-622)【作者】刘创基;王海;杜振霞;姜艳彬;单吉浩;蔡英华【作者单位】北京化工大学理学院,北京,100029;中国动物疫病预防控制中心,北京,100125;北京化工大学理学院,北京,100029;中国动物疫病预防控制中心,北京,100125;中国动物疫病预防控制中心,北京,100125;中国动物疫病预防控制中心,北京,100125【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中青霉素类药物残留量 [J], 董雪玲2.超高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中12种青霉素类药物残留量 [J], 梁晶晶;沈丹;徐潇颖;丁宇琦;罗金文3.超高效液相色谱-串联质谱法测定畜产品中6种青霉素类药物残留 [J], 王飞;陈其勇;宓捷波;柴佳4.高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中青霉素类药物残留量 [J], 董雪玲;5.高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中的青霉素类药物及其主要酶解代谢产物 [J], 李玮;艾连峰;郭春海;马育松;窦彩云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
2012年5月Vol．30No ．5May 2012Chinese Journal of Chromatography445 451研究论文DOI ：10．3724/SP．J．1123．2011．11036*通讯联系人：卓先义，研究员，主要从事毒物化学研究．Tel ：（021）52352955，E-mail ：zhuoxianyi126@126．com ．基金项目：上海市法医学重点实验室项目（11DZ2271500，2009-2）．收稿日期：2011-11-21超高效液相色谱-串联质谱法同时测定全血中青霉素G 及其主要代谢产物陈聪1，2，3，严慧1，沈保华1，卓先义1*（1．司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室，上海200063；2．上海市疾病预防控制中心，上海200336；3．复旦大学上海医学院法医系，上海200032）摘要：建立了同时检测全血中青霉素G 及其2种主要代谢产物青霉噻唑酸和脱羧青霉噻唑酸的超高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法。
血样经简单的蛋白沉淀提取后，目标化合物经BEH C 18色谱柱（50mm ˑ2.1mm ，1.7μm ），以含0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱分离后，选用正离子电喷雾多反应监测（MRM ）模式检测。
方法检出限（信噪比（S /N ）为3计）为0.1 2.0ng /mL ，定量限（S /N =10）为0.5 5.0ng /mL 。
各被测物的线性相关系数均大于0．9974，准确度为92.3% 105.5%，日内精密度小于10%。
考察了不同储存温度（18、4、－18、－80ħ）下全血中青霉素G 及其代谢物的稳定性，结果表明随着储存温度升高和时间的延长，青霉素G 的质量浓度下降明显。
应用建立的方法检测了给予20mg /kg 青霉素G 后的大鼠血液样本，血液中青霉素G 原形药物在给药后0.5h 即消除完全（低于检出限），而其代谢物的体内消除时限可延长至36h 。
所建方法对司法鉴定的适用性得到了进一步扩大，同时对食品残留检测也具有一定的参考价值。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱；青霉素G ；代谢产物；全血中图分类号：O658文献标识码：A文章编号：1000-8713（2012）05-0445-07Simultaneous determination of penicillin G and its majormetabolites in blood using ultra performance liquidchromatography-tandem mass spectrometryCHEN Cong 1，2，3，YAN Hui 1，SHEN Baohua 1，ZHUO Xianyi 1*（1．Institute of Forensic Science of Ministry of Justice ，Shanghai Key Laboratory of Forensic Medicine ，Shanghai 200063，China ；2．Shanghai Municipal Center for Disease Control ＆Prevention ，Shanghai 200336，China ；3．Forensic Medicine Departm ent of Shanghai Medical College of Fudan University ，Shanghai 200032，China ）Abstract ：A fast method for the quantitative determination of penicillin G （PEN G ），penicilloic acid and penilloic acid in blood w ith ultra performance liquid chromatography-electrospray tan-dem mass spectrometry w as developed．A simple deproteinization of the blood w as used w ith a mixed solution of acetonitrile and w ater （4ʒ1，v /v ）as extraction solvent．The blood extract w as directly injected onto an LC column．The chromatographic separation of the components w as performed on a BEH C 18column （50mm ˑ2.1mm ，1.7μm ）using acetonitrile and w atercontaining 0.1%formic acid．The mass spectrometer w as operated in positive electrospray ion mode．Finally ，the analysis w as carried out w ith multiple reaction monitoring （MRM ）mode．The limits of detection （LODs ）for these three compounds w ere in the range of 0.1to 2.0ng /mL and the limits of quantification （LOQs ）in the range of 0.5to 5.0ng /mL．Within the lin-ear range ，the correlation coefficients （r ）of PEN G and its metabolites w ere all more than 0.9974．Accuracies for these targeted compounds w ere ranged from 92.3%to 105.5%，and the w ithin-day precisions w ere less than 10%．The stabilities of the components w ere evaluated in the temperature range from 18to －80ħ，and the mass concentration of penicillin G w as色谱第30卷decreased significantly w ith the extensions of storage temperature and storage time．Biological samples of the rats medicated w ith PEN G w ere analyzed using the developed method．The results show that PEN G can just be detected at0.5h after administration．How ever，the detection time limitation of penicilloic acid can be extended to36h．The established method has been further expanded for the applicability of forensic identification，and has a reference value for the detection of penicillin G residue in food．Key words：ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/ MS）；penicillin G；metabolites；blood青霉素G属于青霉素类抗生素，由于其具有抗菌作用强、疗效高、毒性低且价格便宜等优点，在临床上使用广泛。
然而在所有抗生素药物中由青霉素引起的过敏反应较为常见，使用该药物所致的医疗纠纷时有发生。
由于青霉素G进入生物体后易分解，代谢快，检测时限短，实验表明青霉素钠以30mg/kg耳缘静脉给药后，在兔体内血液中的检测时限不到2 h［1］。
对于一些检材中有时难以检测出原形药物而仅能检测出代谢物的情况，在法医学鉴定上经常以特异性代谢产物取代药物原体来作为判断是否摄入该毒（药）物的指标物，因此需要对青霉素G及其代谢产物建立快速而灵敏的检测方法。
目前较多见原体青霉素G检测的文献［2－7］，而对于体内代谢物或环境中降解产物的研究报道较少［8］。
1973年，Cole 等［9］证实了青霉噻唑酸为青霉素在体内的主要代谢产物；Ho等［10］利用多级串联质谱检出人体血清中多种青霉素代谢物，包括青霉噻唑酸和脱羧青霉噻唑酸两种主要代谢物及其他5种新微量代谢产物；Li等［11］利用高效液相色谱-电喷雾质谱在废水处理厂排出的污水和接受污水的河流的河水中检测到青霉素G及其降解产物青霉噻唑酸、脱羧青霉噻唑酸、青霉酸、青霉醛和异构青霉酸等5种降解产物。
Zhang等［12］利用酶联免疫法检测牛奶中青霉素降解产物青霉噻唑酸。
刘创基等［13，14］建立了超高效液相色谱-串联四极杆质谱联用（UPLC-MS/ MS）检测牛奶和牛肉中羟氨苄青霉素、青霉素G及其主要代谢产物（阿莫西林噻唑酸、阿莫西林二酮哌嗪、青霉噻唑酸、脱羧青霉噻唑酸及青霉二酸）残留的分析方法。
目前还没有血或尿中青霉素及其代谢物系统检测方法的文献报道。
鉴于此，本文选择以青霉素V为内标，建立了青霉素G及其两种主要代谢物青霉噻唑酸和脱羧青霉噻唑酸的UPLC-MS/ MS分析方法。
1实验部分1．1材料与试剂1．1．1药品与试剂青霉素G购自Dr．Ehrenstorfer公司，脱羧青霉噻唑酸购自Luckenw alde公司，青霉噻唑酸由国内制药企业提供，内标青霉素V购自中国药品生物制品检定所。
乙腈购自Merck公司（HPLC级）、50%甲酸购自Fluka公司（HPLC级）。
水由Milli-Q超纯水制备系统制得。
其他化学试剂均为国产分析纯。
1．1．2对照品溶液的配制待测物储备液和工作液的配制：分别称取青霉素G、青霉噻唑酸和脱羧青霉噻唑酸对照品适量，用甲醇溶解并稀释制成1.0mg/mL的对照品储备液，置于－20ħ的冰箱中储存。
临用前取各对照品储备液适量，用水稀释制成所需浓度的混合工作液。
