血栓调节蛋白的临床研究进展
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血栓调节蛋白在糖尿病大鼠心肌中的表达及意义张雷董志恒1(北华大学基础医学院细胞生物教研室,吉林吉林132013)〔摘要〕目的探讨STZ 诱导的糖尿病大鼠心肌组织中血栓调节蛋白(TM )的表达及意义,为糖尿病心肌病(DCM )的防治提供新的靶向。
方法从50只SD 大鼠中随机选取32只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ )制备糖尿病大鼠模型,剩余18只作为正常对照。
每日观察大鼠进食、饮水等一般状况,每周固定时间测量体重、血糖及尿糖。
分别在2、8、12w 末分批处死一定数量两组大鼠。
分别检测各批大鼠的心脏指数(HW /BW )、血糖、血脂;采用透射电镜观察心肌组织超微结构的改变;免疫组化方法观察心肌组织中TM 的蛋白表达;通过RT-PCR 检测TM mRNA 的表达水平。
结果与正常对照组相比,2w 末模型组心脏指数无明显差异;8、12w 末心脏指数均显著增加,且12w 高于8w (P <0.01)。
模型组各时间段各项生化指标均高于正常对照组(P <0.01),各项指标变化由低到高排列顺序为2、8、12w 末。
2w 末模型组大鼠未见明显病理变化;8、12w 末模型组大鼠出现心肌细胞肥大、排列紊乱、细胞外间质增多,线粒体肿胀、嵴断裂、溶解等病理变化;12w 末模型组大鼠上述病理变化较8w 末模型组更加明显。
免疫组化显示,模型组TM 表达明显高于正常对照组(P <0.01);组间比较阳性表达由低到高顺序依次是2、8、12w 末。
与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织中TM mRNA 的表达明显增高(P <0.01),其中,12w 末表达最强,其次是8,2w 末表达最弱。
结论TM 在糖尿病大鼠心肌组织中呈时间依赖性高表达,并与病程呈正相关,显示其可能在DCM 的发生、发展中发挥重要作用,这为该病的防治提供了新的靶向。
〔关键词〕糖尿病;心肌;血栓调节蛋白〔中图分类号〕R285.5〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202(2012)15-3229-04;doi :10.3969/j.issn.1005-9202.2012.15.044基金项目:吉林省科技厅资助(吉科合字〔2007〕第自52号);北华大学校管课题资助1病理教研室通讯作者:董志恒(1968-),男,医学博士,教授,硕士生导师,主要从事糖尿病慢性并发症研究。
综 述急性呼吸窘迫综合征中的凝血异常及治疗的研究进展张 鹏综述,聂时南审校 [摘要] 急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床常见的危重症之一,病死率达35%~40%。
ARDS常由创伤、严重感染、休克、中毒或手术等因素进一步继发瀑布性全身炎症所致,发病机制复杂,其中凝血与纤溶功能的异常贯穿ARDS整个病程,早期促凝机制增强,介导微血栓产生及炎症放大。
随着病程发展,纤溶系统的功能障碍致使纤维蛋白沉着增加。
凝血及纤溶异常的预防和治疗在病程的转归中发挥重大的作用。
文章主要就近年来ARDS中凝血功能及治疗等研究进展进行综述。
[关键词] 急性呼吸窘迫综合征;凝血功能;炎症 [中图分类号] R56 [文献标志码] A [文章编号] 1008 8199(2021)05 0555 06 [DOI] 10.16571/j.cnki.1008 8199.2021.05.022作者单位:210002南京,南京大学医学院附属金陵医院(东部战区总医院)急诊医学科[张 鹏(医学硕士研究生)、聂时南]通信作者:聂时南,E-mail:shn_nie@sina.comResearchprogressonabnormalbloodcoagulationandtreatmentinARDSZHANGPengreviewing,NIEShi nanchecking(DepartmentofEmergency,JinlingHospital,NanjingUniversitySchoolofMedicine,GeneralHospitalofEasternTheaterCommand,PLA,Nanjing210002,Jiangsu,China) [Abstract] Acuterespiratorydistresssyndrome(ARDS)isoneofthemostcommoncriticalillnessesintheclinic,withacasefatalityrateashighas35%-40%.ARDSisoftencausedbytrauma,severeinfection,shock,poisoningorsurgeryandfurtherseconda rywaterfallsystemicinflammation.Thepathogenesisiscomplicated,andtheabnormalitiesofcoagulationandfibrinolysisfunctionin volveintheentirecourseofARDS.Intheearlystage,theprocoagulantmechanismisenhanced,mediatingthegenerationofmicro thrombosisandtheamplificationofinflammation.Asthediseaseprogresses,thedysfunctionofthefibrinolyticsystemleadstoanin creaseinfibrindeposition.Therefore,thepreventionandtreatmentofabnormalbloodcoagulationandfibrinolysisplayanimportantroleintheprognosisofthedisease.ThearticlewillsummarizetheresearchprogressoncoagulationfunctionandtreatmentinARDSinre centyears. [Keywords] acuterespiratorydistresssyndrome;coagulation;inflammation0 引 言 新型冠状病毒(coronavirusvirusdisesse,COV ID 19)诱发急性呼吸窘迫综合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS)是患者最终死亡的重要原因之一。
血栓调节蛋白在肝脏疾病中表达及作用的研究进展
谌翠容;陈亚岗
【期刊名称】《国际流行病学传染病学杂志》
【年(卷),期】2004(031)005
【摘要】血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)是一种内皮细胞膜糖蛋白,是某些疾病血管内皮损伤的分子标志物,在凝血和纤溶过程中发挥重要作用.TM作为凝血和纤溶的调节蛋白,与肝脏疾病的发生发展有密切的关系,可作为疗效观察及预后判断的有用指标,同时可以预防和治疗肝缺血损伤,可望成为一种有效的治疗方法.本文就TM在肝脏疾病中的表达及其作用的研究进展进行综述.
【总页数】3页(P301-303)
【作者】谌翠容;陈亚岗
【作者单位】杭州市第六人民医院;310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院【正文语种】中文
【中图分类】R575
【相关文献】
1.血栓调节蛋白在肺血栓栓塞症、急性呼吸窘迫综合征及肺癌中的作用研究进展[J], 聂晶;孔英君
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4.血栓调节蛋白在大鼠深静脉血栓模型中的表达及其意义 [J], 成曦;孙宝兰;苏张瑶;张玉泉
5.肝脏疾病病人血浆血栓调节蛋白变化及其临床意义 [J], 江彩玉;杨敬茂;崔桦
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中国生物工程杂志China Biotechnology,2021,41 (4) :30-36DOI:10. 13523/j.cb.2101031血栓调节蛋白化学发光免疫分析检测方法的建立李帅鹏1任和1安展飞2杨艳坤1白仲虎W(1江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室无锡214122 2江苏拜明生物技术有限公司盐城224〇05)摘要目的:建立并评价基于板式化学发光免疫分析(CLIA)平台的血栓调节蛋白(TM)定量检测 方法。
方法:以链霉亲和素包被微孔板,加入待检血浆,偶联生物素和辣根过氧化物酶的配对抗体组成分析体系,采用双抗体夹心模式,建立T M抗原定量检测方法,并对其进行条件优化和性能评价。
结果:生物素化抗体和酶标抗体的工作浓度分别为0.5 |xg/m L和0.75 ixg/mL,加样后的脖育时间选为15 min,最低检测限为0.2 TU/mL,该检测方法的检测范围为1 ~200TU/mL,批间和批内精密度(C V)均小于8%,37 t10天稳定性良好,207份临床血浆测值与希森美康测值相关性较高(R2 >0.96)。
结论:建立了 TM板式化学发光定量检测方法,且各项性能指标良好,可满 足临床检测的需要。
关键词血栓调节蛋白化学发光免疫分析检测方法性能评估中图分类号Q819血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)是一种广泛 存在于血管内皮细胞的跨膜糖蛋白,由557个氨基酸 组成,同时N端有一段18个氨基酸组成的信号肽[1~。
完整的T M有五个结构域,分别为凝集素样(lectin-like)结构域(TM-D1),六个表皮生长因子样(EGF-like)重复序列(TM-D2),丝氨酸/苏氨酸富集区域(TM-D3),跨膜结构域(TM-D4)和胞质尾(TM-D5 )[4~。
在 凝血酶介导的酶原蛋白C转换为活化蛋白C的过程中 首次发现TM,当T M存在时,该转换速度会提高1 000 倍以上[7\T M通过与凝血酶结合形成复合物激活蛋白C,水解凝血因子V illa和V a同时下调凝血酶的生成 发挥抗凝作用[8],活化蛋白C还会激活羧肽酶原,抑制 纤维蛋白溶解[6],通过抑制体内白细胞的滚动粘附等机制发挥抗炎作用[9]。
基金项目:安徽省自然科学基金项目(No 070413123)作者简介:董 炤,男,硕士研究生;通讯作者:彭代银,男,教授,硕士生导师,研究方向:中药药理,E 2mail:pengdy@ahtc .cn血栓调节蛋白的临床研究进展董 炤,刘秀珍,刘从彬,彭代银(安徽中医学院,安徽省现代中药重点实验室,安徽合肥 230038)摘要:血栓调节蛋白(thr ombomodulin,T M )是1981年首次由Es mon 等确认并提出的一种存在于细胞膜表面的跨膜糖蛋白。
近年研究表明,T M 普遍存在于血管内皮细胞表面,通过与凝血酶结合和激活蛋白C 系统发挥抗凝作用。
正常生理状态下,T M 分布于细胞质膜表面。
当血管内皮细胞受到损伤后,常常引起T M 的分泌异常和释放入血。
目前在医学研究中已把T M 当成内皮细胞损伤的标志物,用于临床上疾病的诊断和鉴别。
本文就近年来T M 在临床疾病中的研究进展进行综述,为T M 作为内皮细胞损伤标志物的深入研究进一步提供理论依据。
关键词:血栓调节蛋白;肿瘤;儿科疾病;心血管疾病T M 是1982年首次由Es mon 从兔肺中分离提取的一种具有重要抗凝作用的细胞膜蛋白。
T M 含有575个氨基酸和5个主要基目的完整的膜糖蛋白,大多出现在动脉、静脉、毛细血管和和淋巴血管的内皮细胞表面,主要是作为凝血酶受体发挥生物学效应[1]。
其凝血功能主要通过两个方面发挥作用:①促进蛋白C 的活化,形成活化后的蛋白APC [2]。
②是与凝血酶形成复合物,使凝血酶促凝性质改变。
T M 也是细胞间黏附分子的一种,参与肿瘤细胞的产生,增殖和转移。
T M 在体内通在细胞膜表面和血浆中稳定表达,当人体内正常内皮细胞病变和损伤时,常发生T M 在膜表面和血浆中表达水平的变化[3]。
近些年的临床研究表明,许多心脑血管疾病,肿瘤疾病,儿科疾病的发病与治疗前后常发生T M 表达水平的显著变化。
本文就近年来对临床上疾病患者细胞与血浆中T M 水平的相关性研究做一综述,阐明T M 作为疾病诊断,衡量治疗状况的重要指标的理论意义。
1 T M 与儿科疾病1.1 T M 与小儿过敏性紫癜 周欣[4]等研究表明,过敏性紫癜(HSP )患儿急性期和缓解期其血浆中T M 的水平均高于健康儿童对照组。
其中急性发作期血浆中T M 含量明显高于缓解期和正常对照组,经治疗后,血浆中T M 水平逐渐恢复正常。
结果表明T M 可能参与了血管炎症病理生理过程。
1.2 T M 与小儿急性白血病 王菊香[5]等对40例小儿急性白血病患者进行T M 的检测。
研究结果表明,小儿急性白血病患者治疗前血浆中的T M 水平均明显高于正常组中水平。
在经治疗病情缓解后,T M 在血浆中水平逐渐恢复正常。
复发时,血浆中T M 水平再次提高,表现与病情一致性变化。
研究结果显示,小儿急性白血病患者血浆中的T M 水平变化与病情严重程度基本一致,可作为患儿病情检测的重要指标。
1.3 T M 与川崎病 川崎病(K D )是导致儿童后天性心脏病的重要病因之一,常引起心脏冠状动脉的病变。
李爱国[6]等根据心脏彩超结果将K D 患儿分为冠状动脉损伤组和无冠状动脉损伤组,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验对患儿静脉血液中T M 的含量进行测定,结果显示川崎病患儿血浆中T M 水平明显升高,其中K D 冠状动脉损伤组血浆水平高于无冠状动脉损伤组。
结果表明T M 可能在K D 血管炎性损伤特别是冠状动脉损伤中发挥重要作用。
王凤鸣[7]等采用K D 患儿血清对人脐静脉内皮细胞进行体外培养,采用PCR 技术和E L I S A 法分别检测细胞表面T M mRNA 的表达和细胞上清液中T M 的含量。
实验结果表明用川崎病患儿血清培养的人脐静脉内皮细胞组其表面T M 的mRNA 表达显著下降,细胞上清液中的T M 水平明显高于正常血清培养组。
上述结果显示,细胞表达T M 减少而细胞上清液中T M 的含量显著提高,可能由血管受损病变后导致内皮细胞损伤,T M 释放入血引起。
K D 患儿的血浆中可溶性T M 的水平可反映病情的严重程度。
2 T M 与肿瘤疾病2.1 T M 与子宫内膜癌 王月玲[8]等用免疫组织化学SP 法对子宫内膜癌组织中的T M 含量进行测定,经染色后观察发现。
子宫内膜癌组中T M 的表达明显高于正常子宫和子宫内膜复杂型增长过长组,其可能机制是与凝血酶活性有关。
凝血酶通过影响纤溶蛋白系统,促进细胞间黏附分子表达,促进肿瘤细胞与内皮细胞的黏附,导致肿瘤细胞的转移。
T M 通过与凝血酶结合为1ζ1的复合物使凝血酶失去活性,从而间接的阻止内皮细胞同肿瘤细胞间的黏附作用,起到抑制肿瘤细胞转移作用。
T M 的含量可能成为衡量子宫内膜癌治疗情况的一项重要指标。
2.2 T M 与肝癌 周俭[9]等对肝癌患者的癌组织中的血栓调节蛋白含量均进行了测定,免疫组化染色分析表明T M 主要在肝癌细胞的细胞质和细胞膜以及血管内皮细胞表面表达,而在癌细胞周围正常肝组合和肝良性病灶组织中表达不明显。
B iguzzi [10]等发现T M 在肝脏炎症状态下,表达没有明显的变化,在肝脏细胞癌变后,T M 表达显著增加。
以上实验说明T M 的表达与肝脏细胞癌变密切相关,可以作为判断肝癌病变的一个标准。
周俭[11]等进一步实验研究发现,肝癌患者血浆中T M 水平明显高于正常人血浆中水平,但肝癌伴门静脉癌栓患者血浆中T M 的水平低于普通肝癌患者水平,T M 还可能成为判断肝癌门静脉癌栓的推测标准之一。
2.3 T M 与乳腺癌 Ki m [12]等对60例侵袭性乳腺癌患者进行按照T M 在癌症细胞膜表面和细胞胞浆中的表达水平不同进行分组,将其分为高表达组与低表达组。
实验结果表明,乳癌细胞中T M 高表达组病人的存活时间明显长于低表达组病人,且病情复发率远远低于低表达组。
实验结果可能表明T M 在乳癌细胞的侵袭与转移中起抑制作用,可以作为侵袭性乳癌的一个判断预后指标。
2.4 T M 与结肠直肠癌 朱耀明[13]等对结肠直肠癌病人的血浆和癌组织中的T M 的含量分别进行测量。
实验结果发现癌症病患手术前血浆中的T M 明显高于正常组,手术后T M・383・安徽医药 A nhuiM edical and Phar m aceutical Journal 2010Ap l;14(4)的表达比手术前明显降低,说明血浆中的T M水平表达可作为肿瘤进展的判断标准。
实验还通过对结肠直肠癌患者不同临床分期的血浆中T M含量进行测量,结果显示随着疾病的加重,血浆中的T M含量不断升高到疾病晚期,T M的含量达到峰值。
实验结果说明,在结肠直肠癌患者的治疗过程中, T M可作为反映病情的一项指标。
2.5 T M与肺癌 黄伟英[14]等实验结果显示肺癌患者血浆中的T M含量明显增高,而癌组织浸液中T M的水平低于周围正常组织水平,经手术治疗后,血浆中T M含量降低,而癌组织中含量略有提高,表明癌变组织和其周围血浆中T M的水平与肺癌病情相关。
Ta mura[15]等对全肺切除的Ⅰ型非小细胞肺癌患者术后标本研究表明,T M在抑制肿瘤细胞转移中发挥着重要的抑制作用,T M的水平表达高低直接影响到肺癌的治疗结果,可作为肺癌病患治疗状况的良性指标,但其作用机制需进一步研究探讨。
3 T M与心脑血管疾病3.1 T M与原发性高血压 卢兴国[16]等对原发性高血压患者血浆内T M含量进行测定,结果发现原发性高血压患者血浆内T M水平与病情有关,Ⅰ期患者与正常对照组相比T M 表达无明显变化,Ⅱ期与Ⅲ期患者T M表达明显提高,Ⅲ期患者T M表达远远高于Ⅱ期患者。
可见原发性高血压血浆T M 对评估血管内皮损伤具有参考意义。
3.2 T M与冠心病 冠心病由冠状动脉病变引起,常伴有冠状动脉血管内皮细胞损伤。
刘国良[17]等依据冠状动脉造影对病人分为单支病变组,双支病变组合三支及以上病变组。
实验结果显示该三组血浆中T M含量均高于正常对照组,且呈依次提高的趋势,其中第3组T M水平与第1组比较具有显著性差异。
说明T M可以作为冠心病病人动脉血管内皮细胞损伤程度的评价标准。
4 T M与血液系统疾病4.1 T M与弥散性血管内凝血 T M与凝血酶结合,使凝血酶失活参与人体内抗凝生理活动。
当内皮细胞损伤后,T M 大量释放到周围血液中,抗凝作用减弱。
临床研究发现,T M 与弥散性血管内凝血密切相关。
邢迎红[18]等通过检测疑似弥散性血管内凝血患者血浆内T M含量,结果发现最终确诊为弥散性血管内凝血患者的血浆内T M水平在一周时间内一直保持在较高水平,而非弥散性血管内凝血患者得血浆内T M 值下降趋势比较明显,说明T M在弥散性血管内凝血早期诊断具有一定意义。
4.2 T M与出血性疾病 过敏性紫癜与血小板减少性紫癜是常见的2种出血性疾病,临床均表现为出血点、紫癜和瘀斑。
罗方[19]等实验发现,过敏性紫癜患者血浆内T M普遍升高,而血小板减少性患者血浆T M水平与健康者无差异。
其原因可能是因为过敏性紫癜是由毛细血管炎症引起,导致广泛的内皮细胞损伤,使得T M大量进入血浆。
而血小板减少性紫癜则是由血小板数量减少引起的凝血功能障碍,无明显血管内皮细胞损伤。
可见,检测血浆中T M的水平,对过敏性和血小板减少性紫癜的鉴别与诊断具有重要意义。
5 T M与糖尿病临床研究表明,糖尿病患者的血浆中T M水平与Ⅱ型糖尿病病程相关。
随着病程进展,血管病变加重,内皮细胞加重损伤,测定血浆内T M水平,能有效地帮助监测病情与指导治疗。
丁芳林[20]等研究发现,Ⅱ型糖尿病患者有血管病变者血浆内T M水平与无血管病变者相比,其差异有统计学意义。
王涤飞[21]等还发现血溶性T M水平可用于评价Ⅱ型糖尿病患者动脉粥样硬化的病变范围。
可见T M作为内皮细胞损伤的标志物,可作为监测糖尿病患者并发的血管疾病的一项标准,用于临床上糖尿病病情的诊断与观察。
6 展望T M作为血管内皮细胞损伤的标志物,在伴有内皮细胞损伤的血管疾病中,其水平检测已广泛作为监测,诊断病情与衡量治疗标准的一项指标。
近年来研究更表明T M在许多肿瘤疾病治疗中发挥重大作用,肿瘤细胞表面T M的表达和血浆中可溶性T M水平检测为肿瘤疾病的鉴别和诊断提供理论依据。
大量临床研究结果表明T M已经成为临床上用于监测疾病与观察病情的重要工具,随着研究的进一步深入,血栓调节蛋白在疾病防治中必将具有更大的理论意义和更为广阔的临床应用前景。
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