第二章气相色谱-第三章高效液相色谱详解

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高效液相色谱法

由直径为10nm的硅胶微粒凝聚而成。这类固定相由于颗
第三节高效液相色谱的固定相和流动相
粒很细（5~10m），孔仍然较浅，传质速率快，易实现高效、高速。特别适合复杂混合物分离及痕量分析。
二、流动相
由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲合力，并参与固定相对组分的竞争，因此，正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是：（1）溶剂对于待测样品，必须具有合适的极性和良好的选
酸镁、分子筛及聚酰胺等。非极性吸附剂最常见的是活性炭。极性吸附剂可进一步分为酸性吸附剂和碱性吸附剂。酸
性吸附剂包括硅胶和硅酸镁等，碱性吸附剂有氧化铝、氧化
第四节液—固色谱法
镁和聚酰胺等。酸性吸附剂适于分离碱，如脂肪胺和芳香胺。碱性吸附剂则适于分离酸性溶质，如酚、羧和吡咯衍生物等。
各种吸附剂中，最常用的吸附剂是硅胶，其次是氧化铝。
级，存在一些分散的具有表面活性的吸附中心。因此，液
固色谱法是根据各组分在固定相上的吸附能力的差异进行分离，故也称为液固吸附色谱。
吸附剂吸附试样的能力，主要取决于吸附剂的比表面积和理化性质，试样的组成和结构以及洗脱液的性质等。组分与吸附剂的性质相似时，易被吸附，呈现高的保留值；当组分分子结构与吸附剂表面活性中心的刚性几何结构相适应时，
硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中，它由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为3.5108Pa。固定相按孔隙深度分类，可分为表面多孔型和全多孔型固定相
第三节高效液相色谱的固定相和流动相
两类。 1. 表面多孔型固定相
它的基体是实心玻璃球，在玻璃球外面覆盖一层多孔活性材料，如硅胶、氧化硅、离子交换剂、分子筛、聚酰胺等。这类固定相的多孔层厚度小、孔浅，相对死体积小，出峰迅速、柱效亦高；颗粒较大，渗透性好，装柱容易，梯度淋洗时能迅速达到平衡，较适合做常规分析。由于多孔层厚度薄，最大允许量受到限制。 2. 全多孔型固定相

高效液相色谱法简介

高效液相色谱的特点
高压——压力可达150～300 kg/cm2。色谱
柱每米降压为75 kg/cm2以上。
高速——流速为0.1～10.0 mL/min。高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中
同时分离成份可达100种。
高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。
同时消耗样品少。
第二节
塑料块 Teflon
1 cm
工作电极 (Pt, Au, 碳糊)
e.电导检测器
电导检测器主要用于离子色谱的检测。原理：根据待测物在一些介质中电离后所产生的电导（电阻的倒数）变化来测量电离物质的含量。电导检测器的主要部件是电导池。其响应受温度影响较大，因此需要将电导池置于恒温箱中。另外，当 pH>7时，该检测器不够灵敏。电导检测器不能用于梯度洗脱。
◆恒流泵
注射型泵------输出精确，无脉动，需更换溶剂而中断工作。
往复型泵------造价低廉，溶剂更换方便，但存在脉动。（使用较多）对流量变化敏感的检测器会有噪声干扰，此时可连接一脉动阻尼器。
◆恒压泵--------压力恒定，但流量不恒定（现在已经较少使用）。
输液泵操作注意事项：
防止固体微粒进入泵体流动相不应含有腐蚀性物质防止溶剂瓶内的流动相被用完不超过规定的最高压力流动相一般应该先脱气
F=2.3QKI0εCl
Q为量子产率，K为荧光效率，ε为摩尔吸光系数，l为光径长度。
F=KC
特点：选择性好，
专属型检测器，灵敏度比紫外检测器高（检测限10-10 g/ml）对多环芳烃，维生素 B 、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；
c. 示差折光检测器

《仪器分析》作业题解答 2..

第二章气相色谱法1.简要说明气相色谱分析的基本原理借在两相间分配原理而使混合物中各组分分离。

气相色谱就是根据组分与固定相与流动相的亲和力不同而实现分离。

组分在固定相与流动相之间不断进行溶解、挥发（气液色谱），或吸附、解吸过程而相互分离，然后进入检测器进行检测。

2.气相色谱仪的基本设备包括哪几部分?各有什么作用?气路系统．进样系统、分离系统、温控系统以及检测和记录系统．气相色谱仪具有一个让载气连续运行管路密闭的气路系统．进样系统包括进样装置和气化室．其作用是将液体或固体试样，在进入色谱柱前瞬间气化，然后快速定量地转入到色谱柱中．19.有哪些常用的色谱定量方法?试比较它们的优缺点和使用范围?（1）．外标法：外标法是色谱定量分析中较简易的方法．该法是将欲测组份的纯物质配制成不同浓度的标准溶液。

使浓度与待测组份相近。

然后取固定量的上述溶液进行色谱分析．得到标准样品的对应色谱图，以峰高或峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标作峰高或峰面积对浓度的标准曲线．该曲线为一通过原点的直线．分析样品时，在上述完全相同的色谱条件下，取制作标准曲线时同样量的试样分析、测得该试样的响应讯号后．由标谁曲线即可查出其百分含量．此法的优点是操作简单，因而适用于工厂控制分析和自动分析；但结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性．（2）．内标法：当只需测定试样中某几个组份．或试样中所有组份不可能全部出峰时，可采用内标法．具体做法是：准确称取样品，加入一定量某种纯物质作为内标物，然后进行色谱分析．根据被测物和内标物在色谱图上相应的峰面积(或峰高)]和相对校正因子．求出某组分的含量．内标法是通过测量内标物与欲测组份的峰面积的相对值来进行计算的，因而可以在—定程度上消除操作条件等的变化所引起的误差．内标法的要求是：内标物必须是待测试样中不存在的；内标峰应与试样峰分开，并尽量接近欲分析的组份．内标法的缺点是在试样中增加了一个内标物，常常会对分离造成一定的困难。

气相色谱与液相色谱

.一、分别原理：1.气相：气相色谱是一种物理的分别方法。

利用被测物质各组分在不一样两相间分派系数（溶解度）的渺小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行频频多次的分派，使本来只有渺小的性质差异产生很大的成效，而使不一样组分获取分别。

2.液相：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达′107Pa）;色谱柱是以特别的方法用小粒径的填料填补而成，进而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高敏捷度的检测器，可对流出物进行连续检测。

二、应用范围：1.气相：气相色谱法拥有分别能力好，敏捷度高，剖析速度快，操作方便等优点，可是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳固性差的物质都难于应用气相色谱法进行剖析。

一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采纳衍生化法或裂解法。

2.液相：高效液相色谱法，只需求试样能制成溶液，而不需要气化，所以不受试样挥发性的限制。

关于高沸点、热稳固性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（些物质几乎据有机物总数的75%～80%）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分别、剖析。

据统计，在已知化合物中，能用气相色谱剖析的约占20%，而能用液相色谱剖析的约占70～80%。

三、仪器结构：1.气相：由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据办理系统构成。

进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。

柱箱：色谱柱是气相色谱仪的心脏，样品中的各个组份在色谱柱中经过频频多次分派后获取分别，进而达到剖析的目的，柱箱的作用就是安装色谱柱。

因为色谱柱的两头分别连结进样器和检测器，所以进样器和检测器的下端（接头）均插入柱箱。

柱箱能够安装各样填补柱和毛细管柱，并且操作方便。

色谱柱（样品）需要在必定的温度条件下工作，所以采纳微机对柱箱进行温度控制。

并且因为设计合理，柱箱内的梯度很小。

关于一些成份复杂、沸程较宽的样品，柱箱还可进行三阶程序升温控制。

高效液相色谱法教学【全】精选全文

P307~311
例: 流动相极性变化对组分k’的影响
②更换色谱柱（改变N）
措施： a.选择长柱子(N=L/H) b.填料颗粒尽量小 c.低流速(溶质传质阻力小，峰扩展小) d.低的溶剂粘度(提高柱效)
高效液相色谱法
High Performance Liquid
Chromatography （HPLC）
前言:
HPLC是70年代以后发展最快的一个分析化学分支，现已成为生化、医学、药物、化学化工、食品卫生、环保检测等领域最常用的分离分析手段。
我国：
开始仅为少数研究实验室拥有，现很多的生产、研究、质检部门都拥有。广泛应用于：质量控制、分析化验、制备分离。讲课目的：入门教材：《实用色谱法》（詹益兴编著）学习要求：记好笔记，
ⅰ大分子，扩散系数小 ⅱ小分子，扩散系数大
5. 影响分离的因素与提高柱效的途径
• 液体的扩散系数仅为气体的万分之一，在高效液
相色谱中,速率方程中的分子扩散项B/u较小，可忽略不计，即 H = A + C u
• 降低传质阻力是提高柱效主要途径。 •气相和液相Ｈ－ｕ区别
§１－４分离度 (Rs)
于世林编著)
第一章高效液相色谱法基本原理 §1－1 概述一、色谱法
混合物最有效的分离、分析方法。是一种分离技术。混合物分离过程：试样中各组分在固液两相间不断进行着的分配。一相固定不动，称为固定相。另一相是携带试样混合物流过固定相的液体，称为流动相。
液相色谱仪
高效液相色谱仪流程图
(1) 存在着浓度差，产生纵向扩散;
(2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(Ｎ↓)，分离变差; (3) B/u与流速有关：流速↓→ 滞留时间↑→ 扩散↑

高效液相色谱原理和操作详解

高效液相色谱我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表：鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。

I．概论 (2)一、液相色谱理论发展简况 (2)二、HPLC的特点和优点 (2)三、色谱法分类 (3)四、色谱分离原理 (3)II．基本概念和理论 (5)一、基本概念和术语 (5)二、塔板理论 (8)三、速率理论（又称随机模型理论） (9)III．HPLC系统 (10)一、输液泵 (11)二、进样器 (13)三、色谱柱 (14)四、检测器 (17)五、数据处理和计算机控制系统 (20)六、恒温装置 (20)IV．固定相和流动相 (20)一、基质（担体） (20)二、化学键合固定相 (22)三、流动相 (23)1．流动相的性质要求 (23)2．流动相的选择 (24)3．流动相的pH值 (24)4．流动相的脱气 (25)5．流动相的滤过 (25)6．流动相的贮存 (26)7．卤代有机溶剂应特别注意的问题 (26)8．HPLC用水 (26)V．HPLC应用 (27)一、样品测定 (27)二、方法研究 (27)附件：高效液相色谱法（HPLC）复核细则 (28)一、对起草单位的要求： (28)二、对复核单位的要求： (28)I．概论一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。

又称为色层法、层析法。

色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。

后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。

液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。

3--第二章色谱分析理论基础

当待分离组分随着载气进入色谱柱，组分就开始在两相间进行分配，平衡后，再随着载气进入下一个塔板进行分配，平衡后再进入下一个塔板。以此类推，从而不断达到分配平衡。
1.塔板理论基本假设
（1）在色谱柱中的每一小段长度H内，组分迅速达到分配平衡，这一小段色谱柱称为理论塔板，其长度称为理论塔板高度，简称板高，记为H；（2）载气不是连续通过色谱柱，而是脉冲式，每次进气量为一个板体积；（3）试样开始时都加在0号塔板上，且试样沿柱纵向扩散忽略不计；（4）分配系数在各塔板上是常数；（5）塔板与塔板之间不连续。
结论：分配系数K是色谱分离中的一个重要参数。两组分分配系数K相差越大，两峰分离的就越好。不同物质的分配系数K相同时，组分不能分离。因此是色谱分离依据。
3.分配比k
又叫容量比、容量因子。
在一定温度、压力下，在两相间达到分配平衡时，组分在两相之间的质量比值，以k表示。
组分在固定相中的质量
k＝
分子扩散大。
3.传质阻力项C
组分在气相和液相两相间进行反复分配时，遇到阻力。传质阻力C包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL 。液相传质阻力大于气相传质阻力。
C =（Cg + CL）
气相传质过程是指试样组分从气相移动到固定相表面的过程。
这一过程中试样组分将在两相间进行质量交换，即进行浓度分配。有的分子还来不及进入两相界面，就被气相带走；有的则在进入两相界面后又来不及返回气相。这样，使得试样在两相界面上不能瞬间达到分配平衡，引起滞后现象，从而使色谱峰变宽。
（3）对于某确定的色谱分配体系，组分的分离最终决定于组分在每相中的相对量，而不是决定于组分在每相中的相对浓度，因此分配比是衡量色谱柱对组分保留能力的重要参数。 k越大，组分保留时间越长，k=0，组分的保留时间为死时间。

化验基础知识

第二章有效数字的处理
• 三、有效数字运算法则
• 1.在加减法运算中，每数与它们的和或差的有效数字的保留，以小数点后面有效数字位数最少的为标准。在加减法中，因是各数值绝对误差的传递，所以结果的绝对误差必须与各数中绝对误差最大的那个相当。
• 例如：2.0375＋0.0745＋39.54 = ？
第三章高效液相色谱法
• 注意事项 • 1.虽然泵能耐压6000PSI的压力，但不要使泵
处于4000PSI以上的压力为宜。 • 2.安装与拆卸色谱柱时应注意柱的连接方向，
千万不能接反。否则可能导致柱效降低，甚至损坏色谱柱。 • 3.严禁开空泵。在无流动相通过时不要扳动进样阀的操作杆，使用时要注意尽可能少扳动，以免磨损内部的密封垫圈。 • 4.为了延长检测器灯源的使用寿命，在色谱泵稳定后再打开检测器电源开关，分析结束后立即关闭检测器。 • 5.应使用高纯度、高质量的溶剂和试剂。
第三部分仪器分析法
• 第一章比色法 • 一、原理与适用范围 • 在可见光区，除某些物质有吸收外，很
多物质本身并没有吸收，但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后，根据颜色深浅与浓度成正比关系，则可用比色法测定含量。
第一章比色法
• 二、仪器 • 可见分光光度计（或比色计）其应用波
三、注意事项
• 1.沉淀法测定，取供试品应适量。取样量多，生成沉淀量亦较多，致使过滤洗涤困难，带来误差；取样量教少，称量与各操作步骤产生的误差较大，使分析的准确度较低。
• 2.不具挥发性的沉淀剂，用量不宜过量太多，以过量20～30%为宜。过量太多，生成络合物，产生盐效应，增大沉淀的溶解度。
挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以与离子型化合物等的定性、定量分析。中国药典主要用于药品的含量测定、有关物质检查、杂质限度检查和鉴别等。 • 三、仪器 • 高效液相色谱仪主要由输液泵系统、进样器系统、色谱柱、检测器、记录器、显示器与数据处理机（或兼有组分收集系统）等组成。使用时应按仪器的说明书进行操作。

色谱概论1-3章

气相色谱图
二、色谱流出曲线的意义：从色谱图上可获得的信息有：色谱峰的个数，可判断样品中所含组份的最少个数；色谱峰的保留值，可进行定性分析；色谱峰的峰高或峰面积，可进行定量分析；

色谱的保留值或区域宽度，是评价色谱柱分离性能的
色谱峰间距是固定相或流动相选择是否合适的依据。
依据；
a.死时间(tM) ：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。如用热导池检测器时，从注射空气样品到空气峰顶出现时的时间。 b.保留时间（tR）：试样从进样到出现峰极大值时的时
间。它包括组份随流动相通过柱子的时间tM和组份在固定相
第三节色谱法的定义与分类
一、色谱法的定义
色谱法或色谱分析也称之为层析法，是一种物理化学的分析方法，它利用混合物中各组分在两相间分配系数的差别，当溶质在两相间做相对移动时，各物质在两相间进行多次分配，从而使各组分得到分离。分离的仪器即色谱仪。
二、色谱法的分类
色谱法可按两相的状态及应用领域的不同分为两大类。（一）按流动相与固定相的状态分类 1 ．气相色谱气相色谱又可分为气固色谱和气液色谱，前者是以气体为流动相，以固体为固定相的色谱，后者是以气体为流动相，以液体为固定相的色谱。 2 ．液相色谱液相色谱又可分为液固色谱和液液色谱，前者是以液体为流动相，以固体为固定相的色谱；后者是以一种液体为流动相，以另一种液体为固定向的色谱。
色谱分析
概论
第一章绪论
第二章色谱法的原理
第三章色谱仪
第一章绪论
1
色谱法的发展简史色谱法与其他方法的比较和配合

第3章高效液相色谱分析

第3章高效液相色谱法一、判断题1、高效液相色谱适用于大分子，热不稳定及生物试样的分析。

（）2、高效液相色谱中通常采用调节分离温度和流动相流速来改善分离效果。

( )3、高效液相色谱中通用型检测器是荧光检测器。

( )4、液相色谱中常采用改变流动相的种类和配比的方法来提高柱的选择性。

( )5、在液相色谱中，速率方程中的涡流扩散项可以忽略不计。

( )二、选择题1、液相色谱的H-u曲线( )A、与气相色谱的H-u曲线一样，存在着H minB、H随流动相的流速增加而逐渐增加C、H随流动相的流速增加而下降D、H受u影响很小2、提高液相色谱分离效率的主要途径或措施是( )A、增加柱长，保持低温B、采用相对分子量较大的流动相，减少分子扩散C、采用相对低流速，有利于两相间的质传递D、采用细粒度键合固定相3、高效液相色谱仪与气相色谱仪比较，前者没有A、贮液器B、高压泵C、程序升温D、梯度淋洗装置4、在液相色谱中，最普遍使用的检测器是A、紫外光度检测器:B、荧光检测器C、差示折光检测器D、电导检测器5、有下列四种液相色谱类型，样品峰全部在溶剂峰之前流出的是( )A、液-液色谱法B、液-固色谱法C、离子排斥色谱法D、空间排阻色谱法6、液相色谱中，影响色谱峰展宽的主要因素是( )A、纵向扩散B、涡流扩散C、传质阻力D、柱前展宽7、对于能迅速溶于水的试样，宜选用的液相色谱是A、正相液液色谱B、反相液液色谱C、液固吸附色谱D、空间排阻色谱8、对溶于水或非水溶剂，分子大小有差别的试样，宜选用的液相色谱是A、液液色谱B、液固色谱C、空间排阻色谱D、离子交换色谱9、对于能溶于酸性或碱性水溶液的试样，宜选用的液相色谱是A、液液色谱B、液固色谱C、空间排阻色谱D、离子交换色谱10、在气相色谱法中可以忽略，而在高效液相色谱中则必须加以考虑的速率方程中的项是A、流动相传质项B、涡流扩散相C、固定相传质项D、分子扩散相。

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2 峰高（h）和峰面积：色谱峰顶点与基线的距离叫峰高。色谱峰与峰底基线所围成区域的面积叫峰面积。
3. 保留值
1)死时间(tM) ：不与固定相作用的物质（空气）从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。
2)保留时间tR：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随流动相通过柱子的时间tM和组份在固定相中滞留的时间。
温度控制
温度是色谱分离条件的重要选择参数；
气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制温度；
气化室：保证液体试样瞬间气化而不分解（一般比柱温高10-50 C）；
检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝，而且温度影响检测器灵敏度和稳定性，一般控温精度要求由于＋0.1 C
分离室：准确控制分离需要的温度。当试样为沸点范围很宽的混合物时，分离室温度需要按一定程序控制温度变化（程序升温），各组分在最佳温度下分离，从而改善分离效果，缩短分析时间。
液-固色谱法
液相色谱法
液-液色谱法
2.按固定相的状态分类：柱色谱：固定相装在色谱柱中；纸色谱：利用滤纸作载体，吸附在纸上的水作固定相；薄层色谱：将固体吸附剂在玻璃板或塑
料板上制成薄层作固定相。
3.按分离原理分类：
1)吸附色谱法：利用吸附剂（固定相一般是固体）表面对不同组分吸附能力的差别进行分离的方法；
3)调整保留时间tR'：某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在固定相中的滞留时间。即
tR' tR tM
4)死体积VM：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。忽略后两项可得到
VM tM qv,0 qv,0 载气体积流量
tM — 死时间
5) 保留体积VR：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。
Column
Detector
Injection valve and gasifying
W
Data station (Recorder)
载气系统进样系统
色谱柱
检测系统
温度控制记录处理系统
1. 气路系统
包括气源、净化干燥管和载气流速控制；
1-载气钢瓶； 2-减压阀； 3-净化干燥管； 4-针形阀； 5-流量计; 6-压力表；
三.色谱分类
色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。
1.从两相的状态分类：色谱法中，流动相可以是气体，也可
以是液体，由此可分为气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。固定相既可以是固体，也可以是涂在固体上的液体，分类情况如下：
气-液色谱法
气相色谱法
色
气-固色谱法
谱
法
4. 检测系统
色谱仪的眼睛，
通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成；被如热导检测器)或质量(质量型，如氢火焰离子化检测器)随
时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图；
广普型——对所有物质均有响应；热导检测器；
专属型——对特定物质有高灵敏响应；电子俘获检测器；
5. 记录和数据处理系统
色谱工作站
五、色谱流出曲线
从载气带着组分进入色谱柱起就用检测器检测流出柱后的气体，并记录信号随时间变化的曲线，此曲线就叫色谱流出曲线。
六、色谱术语
1. 基线：在实验条件下，色谱柱后仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。基线在稳定的条件下应是一条水平的直线。它的平直与否可反应出实验条件的稳定情况。
2)分配色谱法：利用不同组分在两相间的分配系数的差别进行分离的方法。
3) 离子交换色谱：利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的不同而进行分离的方法。
4)空间排斥（阻）色谱法：利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。
四、气相色谱仪的工作过程
气相色谱流程图
Flow or pressure controller
第二章气相色谱分析
Chapter two
Gas Chromatography (GC)
§2－1 气相色谱法概述
一.概述
分离、分析混合物的最有效方法。
俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置是色谱原型装置，如右图。
现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的，仍然称它为色谱分析。
色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在色谱分离柱中两相间不断进行着的分配过程。其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。
与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的高效分离与灵敏检测。
两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础。分离的动力为各组分在性质和结构上的差异导致其与固定相之间作用力有强弱。
VR tRqv，0
tR— 保留时间
6)调整保留体积VR'：某组份的保留体积扣除死体积后的体积。
VR'
VR
VM
t
' R
q
v,0
tR— 调整保留时间
7)相对保留值r2,1（选择因子）：组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比。
气路系统将样品载入色谱柱分离后进入检测器测定；
气路系统要求气密性好、载气流量稳定和测量流量准确；
气相色谱常用的载气为氮气、氢气和氦气等。载气的选择主要由检测器性质及分离要求所决定；
载气在进入色谱仪前必须经过净化处理；去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）；
载气流量由稳压阀或稳流阀调节控制。
2、进样系统
进样装置：进样器+气化室；
进样器：液体样品的进样通常采用微量注射器，气体样品的进样通常采用医用注射器或六通阀。气化室：
气化室的作用是将液体或固体样品瞬间气化而不分解,后进柱分离
要求: 热容量较大, 死体积较小,无催化效应
3. 分离系统
色谱柱：色谱仪的核心部件。柱材质：不锈钢管或玻璃管，内径3-6毫米。长度可根据需要确定。柱填料：粒度为60-80或80-100目的色谱固定相。液-固色谱：固体吸附剂；液-液色谱：担体+固定液柱制备对柱效有较大影响，填料装填太紧，柱前压力大，流速慢或将柱堵死，反之空隙体积大，柱效低。