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天然产物研究与开发 V o l .11 N o.3NA TU RAL PRODU CT R ESEA RCH AND D EV ELO PM EN T 收稿日期:1999201207抗肿瘤药物筛选中M T T 法和SRB 法的比较谭卫东 金 红 罗弟祥 钟绍东 苏 芝 彭旭东 高小平(中国科学院成都地奥制药公司 成都 610041)摘 要 在抗肿瘤药物的体外筛选中,M T T 法和SRB 法是常用的两种方法。
我们用M T T 法和SRB 法分别测定3种已知植物抗癌药对22株人肿瘤细胞的抗癌活性,对这两种方法进行了详细的比较。
通过分析两种方法测出的细胞存活率(T C )的差异分布和相关系数以及I C 50的二变量分布,比较了两种方法测定结果的异同;通过两种方法重复测定3种药物对7株人癌细胞的抗癌活性,比较了两种方法的重复性;通过分析两种方法测定结果T C 值随时间变化的程度,比较了两种方法测定结果的稳定性。
实验结果表明:M T T 法和SRB 法的相关性较好,都可用于抗肿瘤药物的体外筛选,SRB 法更适合于大规模筛选,3种抗癌药物的测定结果与临床资料基本一致。
关键词 M T T 法,SRB 法,抗肿瘤药物体外筛选抗肿瘤药物筛选是抗肿瘤药物研究工作中非常重要的一个环节,建立合理的筛选体系,提高筛选质量,发现新的抗癌药物,是90年代肿瘤药理研究的一项重大课题。
美国国立肿瘤研究所目前使用的筛选方法是针对某种肿瘤病而不是以肿瘤总体为对象[1],这种方法用60种人体瘤细胞系作为筛选用模型,组成一个“板块”。
此板块按肿瘤病种种类再分成白血病、黑色素瘤、肺癌、结肠癌、肾癌、卵巢癌及中枢神经系统癌等7个亚板块。
如果某种受试药物的细胞毒作用具有亚板块特异性,则可能发现对某种(些)肿瘤具有选择性的抗肿瘤药。
在此基础上,辅以针对机理的生化筛选测定,并用体内模型复筛,就可以筛选出有效的抗癌药物,用于临床试验。
我们建立了“板块”筛选方法,用M T T 法[2]和SRB 法[3]在体外初步测定药物对癌细胞杀伤作用的选择性。
MTT体外药敏指标下消化道肿瘤化疗的临床应用
杨琨;黄晓梅
【期刊名称】《沈阳医学院学报》
【年(卷),期】2000(002)004
【摘要】目的：筛选化疗药物，提高肿瘤化学治疗的预见性。
方法：采用ＭＴＴ法检测３５例手术切除的消化道恶性肿瘤组织对几种常用化疗药物的敏感性，根据其结果选择果选择化疗药物，指导临床化疗，并与经验化疗组进行比较，结果：ＭＴＴ指导组总有效率为７７．１％，经验化疗组总有效率４２．２％，两组比较，差异有非常显著意义（Ｐ〈０．０１），结论：ＭＴＴ体外药敏试验指导恶性肿瘤化疗方法可行，疗效满意。
【总页数】3页(P226-228)
【作者】杨琨;黄晓梅
【作者单位】辽宁省人民医院肿瘤研究所,沈阳;沈阳医学民人教育学院,沈阳
【正文语种】中文
【中图分类】R730.53
【相关文献】
1.MTT体外药敏试验在指导恶性肿瘤化疗中的作用 [J], 洪本英;杨勇;赵朝辉
2.MTT法体外药敏试验研究进展及临床应用 [J], 郭以河;张闽峰;孟家榕
3.肿瘤化疗MTT药敏试验方法学研究的现状 [J], 徐建明
4.抗癌药物敏感试验(MTT法)在胃肠道恶性肿瘤化疗中的临床应用 [J], 殷玉炳;罗崇德;韩文妙;郁解非;骆云鹏;汤为学;王瑞雪
5.MTT法在妇科恶性肿瘤体外药敏试验中的临床应用 [J], 陈心秋;唐东平;李力;黄薇;张洁清
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直肠癌体外药敏试验与临床疗效的相关性研究王城;王崇树;魏寿江;赵国刚;侯华芳【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2007(17)11【摘要】目的研究直肠癌体外药物敏感性与临床疗效的相关性,为临床肿瘤个体化化疗提供依据.方法将同期98例直肠癌,分别分为MTT试验组和对照组.接受MTT 药敏实验者,根据药敏结果分为敏感组和不敏感组,敏感组根据药敏结果指导化疗,不敏感组和对照组采用常规化疗方案化疗,观察各组临床近期疗效和3年生存率.结果56例直肠癌组织对5种化疗药物的体外敏感性顺序依次为:丝裂霉素、羟基喜树碱、5-氟尿嘧啶、顺铂、阿霉素,与临床实践不完全一致.MTT敏感组、不敏感组与对照组近期临床有效率分别为:75.0%(30/40)、14.3%(1/7)和51.4%(18/35).差异存在显著性(P＜0.05).MTT敏感组、不敏感组与对照组的3年生存率分别为65.7%(23/35)、0%(0/6)和47.1%(16/34),差异存在显著性(P＜0.05).结论 MTT药敏试验结果有助于临床的个体化治疗和化疗效果的预测,有助于提高直肠癌患者的远期存活率.【总页数】4页(P1380-1383)【作者】王城;王崇树;魏寿江;赵国刚;侯华芳【作者单位】川北医学院附属医院,普外科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院,普外科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院,普外科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院,普外科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院,普外科,四川,南充,637000【正文语种】中文【中图分类】R735.37【相关文献】1.肝癌肿瘤细胞与外周血淋巴细胞体外药敏试验的相关性研究 [J], 覃理灵;廖维甲;梅铭惠2.肝癌细胞与淋巴结细胞体外药敏试验的相关性研究 [J], 廖维甲;梅铭惠;覃理灵3.氟康唑纸片扩散法和E-test法检测酵母菌体外药敏试验相关性研究 [J], 樊瑞军;黄晶晶;张立平;牟立东;杜宗孝4.晚期肿瘤患者外周血淋巴细胞体外药敏试验与临床疗效的相关性研究 [J], 孙凌;王于理;李娜;王振华;郑秋生;巩平5.4种抗真菌药物对马尔尼菲青霉感染体外药敏试验与临床疗效相关性研究 [J], 韦高;吴易;李菊裳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
应用MTT法对恶性肿瘤原代细胞培养进行规范化体外药敏试验的研究MTT法是一种用于评估细胞存活和细胞增殖能力的常用方法。
该方法基于将细胞培养在96孔板中，然后添加MTT（3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]-2,5-二苯基-2H-四唑共辅酶）溶液，通过还原作用将MTT转化为紫色的甲基紫，并测定吸光度以评估细胞活力。
本研究旨在通过应用MTT法对恶性肿瘤原代细胞培养进行规范化体外药敏试验，为临床治疗提供更准确的药物选择和指导。
我们收集并处理了来自不同患者的恶性肿瘤组织样本，分离出原代肿瘤细胞，并进行细胞培养。
鉴于原代细胞在培养和扩增过程中可能存在细胞浓度、培养时间和其他因素的差异，我们首先对原代细胞的培养条件进行了优化，并测定了细胞的生长曲线和增殖速率，以确定最适宜的培养条件。
接下来，我们建立了恶性肿瘤原代细胞的体外药敏试验模型。
在试验过程中，我们选择了常用的抗肿瘤药物，如氟尿嘧啶、紫杉醇和卡铂等，以及一些新型靶向药物，如吉非替尼和曲妥珠单抗等，分别加入到细胞培养基中，与细胞一起孵育一定时间后，通过MTT法测定细胞的存活率和增殖能力，从而评估药物的抗肿瘤效果。
在进行体外药敏试验时，我们对实验流程进行了规范化处理。
我们确保每种药物的浓度和处理时间都是一致的，以减少实验误差。
我们设置了对照组和空白组，用来比较各药物对恶性肿瘤原代细胞的影响，确保试验结果的可靠性和科学性。
我们重复了每种药物的试验，并计算平均值和标准差，以获取更准确的药物抗肿瘤效果数据。
通过以上实验，我们成功建立了恶性肿瘤原代细胞的规范化体外药敏试验模型。
在实验过程中，我们发现各种抗肿瘤药物对不同类型的恶性肿瘤原代细胞具有不同的抗肿瘤作用，部分药物甚至存在耐药现象。
这些结果为临床治疗提供了重要的参考依据，可以帮助医生们更准确地选择和调整药物治疗方案，提高治疗效果和患者生存质量。
应用MTT法对恶性肿瘤原代细胞培养进行规范化体外药敏试验是一种可行的方法，可以为临床治疗提供更准确的药物选择和指导。
(methyl thiazolyl tetrazolium) mtt法1. 引言1.1 概述MTT法是一种常用的细胞存活率检测方法，它通过检测细胞对(methyl thiazolyl tetrazolium) MTT染料的代谢能力来评估细胞的生命活力。
该方法被广泛应用于生物医学研究中，特别是在肿瘤细胞耐药性研究、药物筛选与毒性评价以及组织工程等领域。
1.2 文章结构本文将首先介绍MTT法的基本原理和在细胞存活率检测中的应用，然后详细阐述MTT法的操作步骤，包括细胞处理及培养条件准备、MTT染色和测量以及数据分析和结果解读。
接下来，本文将分享一些MTT法在生物医学研究中的应用案例，包括肿瘤细胞耐药性研究、药物筛选与毒性评价以及组织工程及再生医学。
最后，文章将总结并展望MTT法在未来的发展前景。
1.3 目的本文旨在全面介绍MTT法，并突出其在生物医学研究中的重要应用。
通过详细阐述MTT法的原理、操作步骤和应用案例，旨在提供读者对该方法的全面了解和应用指导，进一步促进其在生物医学研究中的广泛应用和发展。
同时，本文也希望能够引起更多研究者对MTT法的关注，并为未来的相关研究提供新思路和启示。
2. MTT法的原理：MTT法（(methyl thiazolyl tetrazolium) MTT assay）是一种常用的细胞存活率检测方法，通过测量细胞内还原酶催化将无色MTT显色成紫色形azán离子。
该方法基于细胞代谢活跃度与存活能力密切相关的原理。
2.1 MTT法的基本原理：MTT是一种黄色可溶于生理盐水的四唑类化合物，在细胞实验中被广泛应用。
当MTT进入到细胞内后，由于存在细胞内还原酶（如线粒体呼吸链中的NADH-脱氢酶、二氢四氮杂苯脱氢酶等），MTT会被代谢成可以溶于有机溶剂（如DMSO，二甲基亚砜）的紫色产物——甲基三唑瓣啉蓝(MTT-formazan)。
这个过程为混色反应。
2.2 MTT法在细胞存活率检测中的应用：MTT法主要通过检测MTO-formazan所生成的紫色产物来分析细胞存活率和生长情况。
MTT测定恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性摘要：目的探讨3-(4.5)-双甲基-2-噻唑-(2.5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法测定恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
方法采用改良的MTT法检测了189例恶性肿瘤标本对9种化疗药物的体外敏感性。
结果51例胃癌细胞对化疗药物的敏感性，由高到低依次为丝裂霉素(MMC)，5-氟脲嘧啶(5-Fu)，顺铂(DDP)，阿霉素(ADM)，阿糖胞苷(Ara-C)，平阳霉素(PYM)，甲氨喋呤(MTX)，足叶乙甙(VP-16)，长春新碱(VCR)；75例结直肠癌细胞对化疗药物的敏感性，由高到低依次为5-Fu，MMC，PYM，VP-16，MTX，VCR，DDP，Ara-C，ADM。
43例肝癌细胞对化疗药物的敏感性，由高到低依次为DDP，MMC，5-Fu，ADM，MTX，Ara-C，VP-16，PYM，VCR；20例乳癌细胞对化疗药物的敏感性，由高到低依次为5-Fu，MMC，DDP，ADM，MTX，PYM，VCR，Ara-C，VP-16。
结论MTT法快速、简便、敏感性高、可评价率高，适用于恶性肿瘤的药敏试验，对临床用药有指导意义。
关键词：抗肿瘤药，多剂联用；药物敏感试验； MTT法中分类号：R979.19 文献标识码：B抗癌药物体外敏感性试验一直是临床化疗界瞩目的问题。
现今已建立了多种肿瘤化疗药敏试验方法，但因成功率低和受试条件限制，都未能在临床推广应用。
由Mosman(1983)［1］建立的MTT显色法是近年来用于验测药物对肿瘤细胞增殖影响的新指标。
MTT法具有简便、快速、有一定的特异性等优点，作者采用MTT法对189例恶性肿瘤细胞的体外药物敏感性进行了初步的研究，报告如下。
1 材料与方法1.1 药品与试剂阿霉素(ADM，意大利爱宝大药厂)，顺铂(DDP，山东齐鲁制药厂)，5-氟脲嘧啶(5-Fu，上海旭东海普药业有限公司)，甲胺喋呤(MTX，上海华联制药有限公司)，丝裂霉素(MMC，日本协和发酵工业株式会社)，长春新碱(VCR，中国民生药厂)，平阳霉素(PYM，天津太河制药有限公司)，阿糖胞苷(Ara-C，北京医科大学实验药厂)，足叶乙甙(Vp16，北京制药工业研究所实验药厂)。
MTT法用于抗癌药物筛选的实验研究
王瑞雪;骆云鹏;韦克;汤为学
【期刊名称】《重庆医科大学学报》
【年(卷),期】1991(16)4
【摘要】本文就MTT法在抗癌药物筛选试验中的应用方面进行了初步探讨,结果显示该方法简便、快速.细胞浓度以1—5×10~4/孔较为适宜,吸光度30min内不变.DMSO为MTT法的想理溶剂,但需除去蛋白质的影响.MTT以5mg/ml与细胞反应4h为佳.批内CV值为10%左右.四种抗癌药物对瘤株细胞SW-480作用后。
【总页数】4页(P330-333)
【关键词】抗癌药;MTT法;试验
【作者】王瑞雪;骆云鹏;韦克;汤为学
【作者单位】重庆医科大学病理生理教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R979.1
【相关文献】
1.MTT法用于药物对L2细胞毒性的实验研究 [J], 陈云芳;王胜;李冰
2.MTT法检测抗癌药物对人癌细胞敏感性的实验研究 [J], 王小平;李龙芸
3.一种抗癌药物的体外筛选方法—MTT比色分析法 [J], 武红果;黄立成
4.使用荧光检测法替代MTT检测法进行抗癌药物筛选的可行性 [J], 吴春扬;吴风娟;李大伟
5.MTT法、CPE观察法用于药物细胞毒性实验的比较与分析 [J], 阎祖炜;朱欣;李闻文
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西咪替丁抑制人大肠癌细胞生长及诱导其凋亡作用的研究李健;申安;王森森;李国强;李茂竹【摘要】目的探讨西咪替丁对体外培养的人大肠癌细胞株COLO-320的抑制和诱导其凋亡的作用.方法采用MTT比色法、形态学观察和TUNEL法检测不同浓度西咪替丁溶液处理COLO-320细胞后的生长状况、形态学、分子生物学改变.结果西咪替丁可抑制COLO-320细胞的增殖,且有时间和剂量依赖性趋势,1.0mg/L西咪替丁处理COLO-320细胞48h后,在光镜、电镜检测中可见典型的凋亡细胞;TUNEL法从分子生物学角度证实了凋亡的发生.结论西咪替丁对大肠癌细胞COLO-320有抑制作用,主要通过诱导其凋亡而发生.【期刊名称】《青岛医药卫生》【年(卷),期】2014(046)002【总页数】3页(P105-107)【关键词】西咪替丁;大肠癌细胞株;凋亡【作者】李健;申安;王森森;李国强;李茂竹【作者单位】潍坊医学院,山东潍坊261042;潍坊医学院,山东潍坊261042;潍坊医学院,山东潍坊261042;潍坊医学院,山东潍坊261042;潍坊医学院,山东潍坊261042【正文语种】中文【中图分类】R735.3+4大肠癌是人类最常见的消化系统恶性肿瘤之一，已严重危害人类生命健康，其治疗原则是以手术切除为主，化疗、放疗、生物免疫及基因治疗等为辅助治疗的综合治疗。
目前治疗效果及预后仍不理想。
因此有关大肠癌细胞的生长调控特点及如何抑制其生长、诱导其凋亡问题亟待研究。
本课题旨在研究西咪替丁（Cimetidine，CMD）抑制大肠癌细胞生长及诱导其凋亡的机理，为西咪替丁用于临床提供依据。
西咪替丁注射液，人大肠癌细胞株COLO-320（中国科学院上海细胞生物研究所生产），四甲基偶氮唑蓝（MTT）（FLUKA公司产品），小牛血清（Hyclone公司产品），RPMI-1640培养基（Hyclone公司产品）。
1.2.1 细胞培养将人大肠癌细胞株COLO-320接种于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液（内含100μg／mL青霉素，100μg／mL链霉素）的无菌培养瓶中进行传代培养，培养条件为：37℃，5%CO2。
