地贫筛查的检测技术(精)

地中海贫血检测的方法目前,用于地中海贫血检测的方法的代表性技术大体可分为以下两类:检测基因缺失突变的单管多重跨越断裂点PCR技术和多重连接探针扩增技术(MLPA);检测基因点突变的反向点杂交技术(RDB)、变性高效液相色谱技术(dHPLC)]和DNA序列分析技术等。

此外,最近发展的基于实时荧光PCR平台的新技术,如用于α地贫缺失拷贝数定量的实时荧光PCR直接检测技术、以及用于检测β地贫点突变的基于探针熔解曲线的基因分型技术(PMCA),可能是下一步更新换代的技术选择。

上述胛p PCR、RDB和MLPA等为地贫检测的主流技术。

1.Southern 印迹法优点：分析缺失型α-地中海贫血分子缺陷的可靠技术缺点：操作繁冗，不宜作为常规手段2.联合检测平均红细胞参数（MCV、MCH）+红细胞脆性检测+Hb（血红蛋白）电泳MCV：平均红细胞容积 MCH：平均红细胞血红蛋白量3.PCR-RDB法（PCR/寡核苷酸探针反向斑点杂交法）检测中国南方常见的17种β地贫突变：CD41～42(-TCCT)、IVS-2 nt654 C →T、-28 A→G、CD71～72（+A）、CD71～72（+T）、CD17 A→T、CD26 G→A、CD31（-C）、CD27～28（+C）、CD43 G→T、-32 C→A、-29 A→G、-30 T→C、CD14～15（+G）、CAP、Int及IVS-1 nt5 G→C4.α地中海贫血的基因诊断依据Gap-PCR原理采用单管四重PCR法（多重PCR技术）对其基因组DNA进行扩增，同时检测-α3.7、-α4.2、--SEA和正常对照4种等位基因型，采用1.2％琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物，通过片断大小判断患者的基因型。

5.采用PCR-RFLP方法检测非缺失型α地贫Hb Constant Spring(HbCS)。

地贫基因分型检测技术今天咱们来聊一个很重要的事情，就是地贫基因分型检测技术。

也许这个名字听起来有点复杂，不过没关系，我会讲得很简单，让大家都能明白。

你们知道吗？有一种病叫地中海贫血，这是一种很特殊的病。

有些小朋友得了这个病，就会经常感觉没力气，脸色也不好看，像个没有生气的小木偶一样。

那怎么知道一个人有没有地贫，是哪种地贫呢？这就需要地贫基因分型检测技术啦。

就好比我们在一个神秘的城堡里找宝藏，这个宝藏就是地贫基因的秘密。

检测技术就像一把神奇的钥匙，能打开城堡的大门，让我们看到里面的情况。

我给大家讲个小故事吧。

有一个叫小美的小朋友，她总是比别的小朋友容易累。

她的爸爸妈妈很担心，就带她去医院。

医生怀疑小美可能有地贫，于是就用这个地贫基因分型检测技术来检查。

这个检测就像是给小美的身体里的小细胞们做了一个超级仔细的检查。

医生从她身体里取了一点点血，就那么一点点，就像我们不小心被针扎了一下流出来的那点血。

然后把血送到一个专门的地方去检查。

在那个检查的地方啊，有好多神奇的仪器。

这些仪器就像一个个小侦探，在血液里寻找地贫基因的线索。

它们可聪明啦，能把血液里那些和地贫有关的小秘密都找出来。

比如说，有的地贫基因就像一个调皮的小怪兽，会让身体里的红细胞不能好好工作。

检测技术就能发现这个小怪兽，然后告诉医生这个小怪兽是什么样子的，是很厉害的那种，还是稍微不那么厉害的。

如果没有这个检测技术呢，医生就像在黑暗里摸瞎，不知道小美到底怎么了。

但是有了这个技术，医生就能很清楚地知道小美是不是地贫，是哪一种地贫。

这样就能给小美制定专门的治疗方法啦。

还有一个小朋友叫小阳，他的哥哥有地贫。

小阳的爸爸妈妈很担心小阳也会有。

于是也带小阳去做了这个检测。

小阳一开始很害怕，他想会不会很疼啊。

可是当他知道只是扎一下手指取点血的时候，他就勇敢了。

结果出来后，小阳没有地贫，他的爸爸妈妈松了一口气，小阳也开心地笑了。

这个地贫基因分型检测技术就像一个守护小天使，守护着小朋友们的健康。

地贫的实验室检查究竟有哪些？地贫是一种常见的遗传性血液疾病，主要特征是红细胞内缺乏血红蛋白中的一种重要结构蛋白质——地中海贫血血红蛋白。

地贫的诊断和治疗离不开实验室检查，通过实验室检查可以明确地贫的类型、严重程度和并发症。

本文将详细介绍地贫的常见实验室检查方法。

一、血常规检查血常规检查是最基础的实验室检查方法之一，可以帮助医生了解患者的全血细胞计数和细胞形态学。

对于地贫患者来说，血常规检查最关注的指标是红细胞计数、红细胞压积和平均红细胞体积等。

1. 红细胞计数：地贫患者的红细胞计数通常会偏低，这是由于地中海贫血血红蛋白缺乏使得红细胞的生命力受损所致。

2. 红细胞压积：红细胞压积是血液中红细胞所占据的体积比例，一般情况下地贫患者的红细胞压积也会偏低。

3. 平均红细胞体积：平均红细胞体积反映了红细胞的大小情况，对于地贫患者来说，平均红细胞体积会有所增大。

二、血红蛋白电泳血红蛋白电泳是一种常用的地贫分类诊断方法，通过检测血液中的血红蛋白类型和比例来确定地贫的类型。

地贫主要分为α地贫和β地贫两种类型，而每种类型还有不同的亚型。

血红蛋白电泳可以明确地贫的类型，帮助医生制定合理的治疗方案。

三、骨髓穿刺检查骨髓穿刺检查是一种直观了解骨髓情况的方法，对于地贫患者来说也是必不可少的检查手段之一。

通过骨髓穿刺可以了解骨髓造血功能是否正常、红细胞生成受损的程度以及有无其他造血障碍的存在。

四、铁代谢相关指标检查地贫患者由于长期输血或红细胞寿命缩短，容易引起身体内铁的过多积聚或过严缺乏。

铁代谢相关指标检查包括血清铁、血清铁蛋白、转铁蛋白等指标。

通过这些指标可以了解患者体内铁代谢的情况，以便制定合理的铁剂使用与控制输血量。

五、溶血指标检查地贫患者由于红细胞形态不规则，容易导致红细胞的慢性破坏与溶血。

溶血指标检查包括血清胆红素、血清乳酸脱氢酶等指标。

这些指标的升高可以提示患者是否存在慢性溶血的情况，指导治疗与判断病情。

六、免疫系列相关指标检查地贫患者的免疫功能往往较差，易于发生感染。

地贫诊断标准参考指南一、概述地中海贫血（简称地贫）是一种遗传性溶血性贫血，由于血红蛋白的珠蛋白β链发生了缺失或突变，导致红细胞结构异常，易于破裂，进而引发贫血。

地贫的诊断需综合考虑多个方面的检查结果，以得出准确诊断。

二、诊断方法1.血常规检测：通过血常规检测，观察红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白量（MCH）等指标，初步判断是否存在贫血及可能的贫血类型。

2.血红蛋白电泳：通过血红蛋白电泳，观察血红蛋白的组成，有助于地贫的初步筛查。

3.基因检测：基因检测是地贫诊断的金标准，通过检测β珠蛋白基因的突变位点，可以明确地贫的类型及严重程度。

4.家族史调查：了解患者的家族史，特别是地贫阳性家族史，有助于诊断地贫。

5.临床表现观察：地贫患者通常有面色苍白、黄疸、肝脾肿大等表现，根据临床表现可以辅助诊断。

6.铁代谢评估：由于地贫患者体内血红蛋白代谢异常，可能导致铁过载，因此进行铁代谢评估有助于了解病情。

7.骨髓检查：骨髓检查可以观察红细胞的生成情况，有助于地贫的诊断。

三、诊断标准判定1.若血常规检测、血红蛋白电泳及家族史调查结果均提示地贫可能，建议进行基因检测以明确诊断。

2.若基因检测发现β珠蛋白基因突变，结合临床表现及家族史，可以确诊为地贫。

3.若基因检测未发现β珠蛋白基因突变，但临床表现及实验室检查结果均支持地贫诊断，可以考虑其他类型地贫，如α地贫等。

4.对于临床表现不典型或实验室检查结果与地贫不符的情况，需综合考虑各项检查结果，进行全面评估，以得出准确的诊断。

四、注意事项1.地贫诊断需由专业医生进行，患者切勿自行诊断或治疗。

2.地贫患者需定期进行血常规及血红蛋白电泳等检查，以便及时了解病情变化。

地中海贫血的鉴别诊断
一、引言
地中海贫血是一种常见的遗传性血液疾病，主要发生在地中海沿岸地区。

由于
地中海贫血的临床症状与其他类型贫血相似，鉴别诊断成为临床工作中的重要任务。

本文将介绍地中海贫血的鉴别诊断方法。

二、地中海贫血的病因
地中海贫血主要由α地中海贫血和β地中海贫血两种类型构成，分别由α和β
球蛋白链基因的突变导致。

三、地中海贫血的临床表现
地中海贫血患者主要表现为贫血、溶血性贫血、肝脾肿大等症状，容易与其他
贫血类型混淆。

四、地中海贫血的鉴别诊断
1.实验室检查
–血常规：地中海贫血患者显示出不同程度的贫血和红细胞数量异常。

–血涂片：观察红细胞形态可与其他贫血类型区分。

–血红蛋白电泳：可明确地中海贫血类型。

2.遗传学检查
–基因检测：通过检测α和β球蛋白链基因突变可确定地中海贫血的类型。

五、地中海贫血的治疗
目前地中海贫血的治疗主要是对症治疗和干预治疗，包括输血、脾切除、造血
干细胞移植等方法。

同时，定期随访和遗传咨询也是重要的治疗手段。

六、结论
地中海贫血由于其独特的病因和临床表现，需要进行专门的鉴别诊断。

通过实
验室检查和遗传学检查的综合应用，可以明确诊断和选择合适的治疗方案，提高患者的生存率和生活质量。

对地中海贫血的研究和诊治工作仍需不断加强，以减少患者的痛苦和提高生活水平。

以上就是对地中海贫血的鉴别诊断的简要介绍，希望对您有所帮助。

孕前优生健康检查中地中海贫血筛查的技术方案目的探讨孕前优生健康检查中新婚待育夫妇地中海贫血筛查在出生缺陷干预应用中的意义，为预防和减少地贫病患儿的出生提供依据。

方法双方均为潮汕平原地区户籍的孕前优生健康检查对象12 092例，所有样品均采用MCV法进行初筛，以静脉血平均红细胞体积（MCV≤80fL）作为诊断地贫的阳性参考指标。

再应用Gap-PCR和反向点杂交技术（RDB-PCR）对部分样品进行α地贫基因和β地贫基因定型。

结果在1679例（MCV≤80fL）血标本中检出7种α-地贫等位基因（染色体）942例，检出9种β-地贫等位基因（染色体）482例，计算上10 413例MCV阴性α-地贫基因推算数205例和10 413例MCV阴性-β地贫基因推算数46例，则潮汕平原地区人群α-基因携带率为9.49%（1147/12 092），β-基因携带率为4.37%（528/12 092）。

结论新婚夫妇地中海贫血系统筛查及基因诊断能及时发现各类地贫异常患者，对预防出生缺陷有着重要意义。

标签：地中海贫血；筛查；出生缺陷；计划生育地中海贫血（简称地贫）是由于α和（或）β珠蛋白基因发生了改变，使得血红蛋白中一种或几种珠蛋白肽链合成速率降低或缺如，导致珠蛋白链生成失衡为特征的遗传性溶血性血红蛋白病[1-2]。

常见有α地贫和β地贫两种类型。

广东省是该病的高发区。

为了解本地区户籍人口地中海贫血的基因类型和频率分布，为开展遗传咨询、产前诊断预防和减少地贫病患儿的出生提供依据。

我们对12 092例双方均为潮汕平原地区户籍的孕前优生健康检查对象进行地贫检查。

1 对象与方法1.1 研究对象广东省潮汕平原地区从2013年1月～2014年3月的新婚夫妇，共12092例（年龄20～34岁，夫妇双方均为最佳生育年龄），调查对象均为潮汕平原地区户籍人口。

1.2 研究方法1.2.1 MCV值测定以平均红细胞体积（MCV）为血液学表型初筛指标（采用日本Sysmex公司K4500型全自动血细胞分析仪进行检测）。

地贫的诊断技术
地贫是一种常见的血液疾病，其主要特征是血红蛋白水平低于正常范围。

地贫的诊断技术主要包括血液学检查和基因检测两种方法。

血液学检查是地贫诊断的主要方法之一。

通过血液学检查可以确定血红蛋白水平是否低于正常范围，以及红细胞形态、大小、数量等指标是否异常。

常用的血液学检查方法包括血常规、血红蛋白电泳、血红蛋白高效液相色谱等。

血常规是最常用的血液学检查方法之一，可以测定血液中的各种细胞数量和形态。

在地贫的诊断中，血常规可以检测红细胞数量、大小、形态等指标，从而确定是否存在地贫。

血红蛋白电泳是一种通过电泳分离血红蛋白种类的方法，可以确定血红蛋白是否异常。

血红蛋白高效液相色谱则是一种高效的血红蛋白分离方法，可以检测出各种血红蛋白异常。

基因检测是地贫诊断的另一种重要方法。

地贫是由基因突变引起的遗传性疾病，因此通过基因检测可以确定患者是否携带地贫基因。

目前常用的基因检测方法包括PCR扩增、DNA测序等。

PCR扩增是一种通过特定引物扩增目标基因片段的方法，可以检测出地贫基因是否存在。

DNA测序则是一种通过测序技术确定基因序列的方法，可以确定
地贫基因的具体突变类型。

总的来说，地贫的诊断技术主要包括血液学检查和基因检测两种方法。

血液学检查可以确定血红蛋白水平是否低于正常范围，以及红细胞形态、大小、数量等指标是否异常。

基因检测则可以确定患者是否携带
地贫基因。

在实际诊断中，医生通常会结合两种方法进行综合分析，
以确定地贫的确诊和类型。

附件1：地中海贫血产前诊断技术规范地中海贫血(以下简称地贫)是一种由珠蛋白基因缺失或突变导致肽链合成障碍而引起的溶血性贫血，是我省发病率最高的人类单基因遗传病之一。

为规范我省地贫产前诊断技术的应用，特制定本技术规范。

一、地贫产前筛查（一）基本要求1开展地贫产前筛查技术服务的医疗保健机构（以下简称产前筛查机构）应符合《广东省开展产前筛查技术服务的基本条件》；2、地贫产前筛查机构应与具有产前诊断技术服务资质的医疗保健机构（以下简称产前诊断机构）建立工作联系，并纳入产前诊断质量控制体系。

产前诊断机构应对产前筛查机构进行技术指导和质量管理。

（二）技术规范。

1、地贫产前初筛。

在地贫高发地区，凡未做过地贫筛查的孕妇应建议其进行地贫筛查。

地贫的初步筛查应推广使用血液红细胞指数(MCV,MCH)等适宜技术。

对红细胞指数下降的，应书面建议进一步做地贫产前筛查，并按规定转诊。

不具备红细胞指数检查条件的医疗保健机构，应书面建议当事人到有条件的医疗保健机构进行该项目检查，或采用其他方法进行筛查。

2、地贫产前筛查。

对产前检查和血液红细胞指数初筛发现的地贫可疑孕妇，应采用血红蛋白（Hb）电泳技术或/和高效液相色谱(HPLC)技术作进一步筛查，对检测结果为HbA2降低或临界值的，则再作血清铁测定。

临床医生根据检测结果，进行地贫、异常Hb和缺铁性贫血的鉴别诊断，并提供地贫相关的产前咨询及必要的转诊服务。

3、产前筛查报告。

产前筛查报告包括实验室检测结果和遗传咨询指导意见两部分。

实验室检测结果应包括产前筛查所选用的试验名称、参考范围、测定结果。

遗传咨询指导应包括是否存在α-或β-地贫的可能性及相应的进一步检查建议等。

实验室检测结果应由经培训的专业技术人员或实验室主管复核后，才能签发。

产前筛查报告应当由副高以上职称的产前筛查技术培训合格的执业医师复核后，才能签发。

产前筛查报告由2名以上经培训的执业医师签发。

4、产前筛查后高风险对象的处理原则。