ep5临床化学设备精密度性能的评价

生化检测系统精密度的性能评价目的对生化检测系统的精密度进行评价分析，评估检测结果的可靠性。

方法根据美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）EP5-A2文件，对稳定的实验样本选择常规生化项目22项，用Microsoft Excel分析数据，计算出各个项目批内、批间、天间不精密度和总不精密度。

按照EP5-A2文件规定，1/4允许误差范围为批内不精密度的判断限，1/3允许误差范围为天间不精密度的判断限，1/2允许误差范围为总不精密度的判断限。

结果总胆汁酸的批内、天间和总不精密度均超过了规定的参考标准；肌酐的天间不精密度超出了1/3允许误差范围。

其余20个项目批内、天间和总不精密度均在要求范围之内。

结论临床实验室应定期监测检测系统的精密度，合格的精密度是检测系统保证检验结果准确、可靠的前提。

标签：生化检测系统；总不精密度；判断限美国临床实验室管理法规CLIA-88颁布后，临床实验室定量检测的分析性能被确定为六个内容：精密度、正确度、分析范围、检出限、分析干扰和参考区间[1]。

应该重视的是，这六个基本性能的第一个为精密度。

这是临床实验室基本操作特性确定的。

临床实验室的检测也应该分析精密度。

可是，不知何故，自从有了专门为临床服务的临床实验室，临床实验室对每个标本（样品）需要检测的各个项目，都只做单次检测就发出报告。

单次检测引入的随机误差的变异很大。

因此，检测系统的精密度评价就显得尤为重要。

1检测系统1.1仪器TBA-120FR（YZB/JAP 4665-2008）1.2校准品朗道CAL2350--828UN复合校准血清1.3质控品朗道HE1532-507UN 3（高浓度）朗道HN1530-795UN 2（中浓度）1.4试剂ALT、AST、ALP、GGT选用英科新创（生产许第20100068），TP、ALB、GLU、BUN、CR、UA、CHE选用宁波美康（生产许第20130042），CK、CK-MB、LDH、HBDH选用北京九强生物（生产许第20020023），TC、TG、HDL、LDL选用浙江东欧（生产许第20080022），TBIL、DBIL选用浙江伊利康（生产许第20130007）2资料与方法2.1对象收集正常体检人血清40ml混匀后分装50支，每支800ul，-20℃冷冻保存。

临床化学设备的精密度评价前言目前临床化学文献包含了大量产品评估的实例。

这些评估使用了多种不同的实验和统计方法，而其中有些使用是不恰当或错误的。

目前几乎没有用于体外诊断设备的评估的指导原则。

有时由于文献中的评估缺乏足够的数据和描述而无法重现结果。

针对这一需求，委员会根据用户、厂商代表、统计学家、化学家、实验室人员和医务人员的经验编写了这一指导原则。

由于目前可用的体外诊断设备种类繁多，单一的实验设计显然不适于所有的设备。

因此，我们提出了指导原则这一框架，对可广泛适用于不同分析物和设备的时间、程序、材料、数据总结与解释技术提供了主要的概念性指导。

我们用一个典型实验设计的例子力图阐明评估的每个步骤。

在编写这个草案的每一步中，我们在许多推荐的时间，质控的容和确定精密度组分的方法中认真选择。

我们力求在实验与公式的复杂性和操作的简便性之间建立平衡。

我们提供了附录（附录C），它可为修改设计和计算提供指导。

EP5早期的版本被实验室社团广泛的评论，并产生了不同的评论。

委员会感所有评论者的建议。

我们认真回顾了每一种意见并在文件中做了适当的修改。

但并非采纳了所有的意见。

对EP5-T的意见和小组委员会的回答都包含在附录D中。

欢迎对本版批评指正。

关键词：评价草案，实验设计，医学设备，离群点，精密度，质量控制。

1.0序言1.1目的本文件是为评价临床化学设备的精密度而提供的指导原则。

在很多情况下，这些技术可用于化学以外的其他领域。

当设备被修整后再与要求的精密度性能比较是无效的。

典型修整的例子有，不同试剂，校准液，控制品的使用，或操作程序与制造商标示的不同。

1.2一般精密度评价实验的概述1.2.1一般指导原则（1）有足够的时间熟悉设备的操作和保养的原理。

（2）有足够的时间熟悉评价草案的步骤。

（3）整个评价期间设备需保养与做质控。

（4）应选择适当的样品进行适当长时间的实验，以得到足够的数据，来反应仪器在日常工作中长期真实的性能。

1.2.2设备熟悉期对设备的全面熟悉，包括原理、操作、设定、保养、故障处理等容。

应用NCCLS EP5-A2文件对AU5811全自动生化仪进行精密度性能评价邓常春【摘要】ObjectiveTo evaluate the precision performance of the AU5811 fully automatic biochemical analyzer so as to meet the requirements of clinical trials.Methods With the usage of corollary reagent calibrators and quality control materials, the precision performance of the AU5811 fully automatic biochemical analyzer in measurement of glycosylated hemoglobin was examined in line with NCCLS EP5-A2standards.ResultsThe within-run precision CV%, the between-run precision CV%, between-day precision CV% and the total precision CV% of HbAc1-high and HbAc1-normal measured by AU5811 fully automatic biochemical analyzer were 0.83% versus 1.1%; 1.25% versus 2.19%; 1.5% versus 2.74%;1.66% versus 3.29% respectively.Conclusion All precision CV% results were in acceptable range, AU5811fully automatic biochemical analyzer could meet the requirements of clinical trials.%目的：对AU5811全自动生化仪进行精密度性能评价，以确定其是否满足临床需要。

应用CLSI EP5-A2文件评价生化检测系统的精密度性能温冬梅;张秀明;吴剑杨;李曼;萧金丽;庞嘉琳【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2010(007)019【摘要】目的应用CLSI EP5-A2文件对生化检测系统检测的精密度性能进行评价,以确定其是否满足临床的需要.方法在全自动生化分析仪上,根据CLSI EP5-A2文件,用稳定的高低值实验样品对采用速率法和终点法检测的项目进行精密度试验,对其批内标准差(S批内)、批间标准差(S批间)、天间标准差(S天间 )和总不精密度(S 总)进行评价.结果检测系统检测常规生化项目的批内标准差为美国的临床实验室室间质量评估允许误差的1/4,天间标准差应为该允许误差的1/3,且小于厂商声明的精密度性能指标,两者差异无统计学意义(P>0.05).说明由实验估计的总不精密度均可接受.结论精密度既是临床检验的方法评价,也是检测系统性能评价的重要指标之一.CLSI EP5-A2精密度性能评价方法能够较为严密地反映出自动生化分析仪的长期使用性能是否能符合日常常规工作的质量要求.【总页数】3页(P2096-2098)【作者】温冬梅;张秀明;吴剑杨;李曼;萧金丽;庞嘉琳【作者单位】广东省中山大学附属中山医院检验医学中心,528400;广东省中山大学附属中山医院检验医学中心,528400;广东省中山大学附属中山医院检验医学中心,528400;广东省中山大学附属中山医院检验医学中心,528400;广东省中山大学附属中山医院检验医学中心,528400;广东省中山大学附属中山医院检验医学中心,528400【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.应用NCCLS EP5-A2文件对AU5811全自动生化仪进行精密度性能评价 [J], 邓常春2.应用CLSI EP5-A2文件评价全自动血液流变学分析仪的精密度性能 [J], 吴双;吴少华;赵桂梅;王秋菊;董翠莲3.应用CLSI EP15-A2文件评价BNP和NT-proBNP测定的精密度性能 [J], 欧阳能良;王伟佳;李飞;阚丽娟;索明环;严海忠;温冬梅;张秀明4.应用NCCLS EP5-A2文件评价CA7000全自动血凝仪的精密度 [J], 黄福达;杨志钊;梁培松;杨山虹;张秀明5.应用CLSI EP5-A2文件评价ADAMSTM Alc HA-8160全自动糖化血红蛋白仪的精密度 [J], 崔晓阳;朱彩云;周卫;吴敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

测量精密度评价南通大学附属医院景蓉蓉精密度性能是检测系统的基本分析性能之一，它也是其他方法学评价的基础，如果精密度差，其他性能评价实验则无法进行。

对临床实验室而言，一般样本只作单次测量便发出报告，这种情况下精密度性能更是至关重要。

国家《医疗机构临床实验室管理办法》也要求临床实验室能够开展精密度的方法学评价；对参考实验室而言，精密度是测量不确定度评定的一个重要分量。

因此，有必要了解和掌握测量精密度评价的相关知识。

一、有关术语和定义1. 测量精密度测量精密度（measurement precision）简称精密度，指在规定条件下，对同一或类似被测对象重复测量所得示值或被测量的值间的一致程度。

精密度是个抽象概念，只能将精密度描述为“高”或“低”，其反义概念“不精密度”可用数量形式表示，如极差（R）、标准差（s）、方差（s2）或变异系数（CV）。

所谓“规定条件”可以是重复性条件、期间精密度条件或复现性条件，相对应的精密度为重复性、期间精密度和复现性。

2. 测量重复性测量重复性（measurement repeatability）简称重复性，指在重复性测量条件下的精密度。

重复性测量条件指相同测量程序、相同操作者、相同测量系统、相同操作条件和相同地点，在短时间内对同一被测对象重复测量的一组测量条件。

日常工作中将“一批”内的测量条件视为“短时间内”，因此重复性又常称为批内精密度。

3. 期间测量精密度期间测量精密度（intermediate measurement precision）简称期间精密度，指一段时期内在期间精密度条件下的精密度，类似于日常工作中常说的“批间精密度”。

期间精密度条件指相同测量程序、相同地点，在一个长时期内重复测量同一被测对象的一组测量条件。

在这一段时间内可以对仪器进行重新校准或更换操作者等。

4. 测量复现性测量复现性（measurement reproducibility ）简称复现性，指在复现性测量条件下的精密度。

作者简介:郭绮,女,副主任药师,主要从事器械技术审评方面的研究.本文引用格式:郭绮．临床实验室对定量检测产品精密度的评价[J ]．国际检验医学杂志,２０１９,４０(１５):１８８９Ｇ１８９２．行业研究临床实验室对定量检测产品精密度的评价郭㊀绮(重庆市药品技术审评认证中心,重庆４０１１２０)㊀㊀摘㊀要:随着体外诊断(I V D )行业的不断发展以及临床实验室对I V D 定量检测产品精密度验证活动的不断实践和认识的加深,国家㊁行业㊁用户对产品质量要求不断提高.为了使临床实验室对于I V D 定量检测产品精密度验证达成统一标准,笔者依据美国临床和实验室标准化协会(C L S I )E P １５ＧA ３文件,编制了临床实验室定量测量项目精密度验证程序,旨在为临床实验室I V D 定量检测产品精密度的验证提供参考.关键词:临床实验室;㊀精密度;㊀评价D O I :１０．３９６９/j．i s s n ．１６７３Ｇ４１３０．２０１９．１５．０２５中图法分类号:R ４４６．１文章编号:１６７３Ｇ４１３０(２０１９)１５Ｇ１８８９Ｇ０４文献标识码:A E v a l u a t i n g t h e p r e c i s i o no f p r o d u c t s f o r q u a n t i t a t i v e a s s a yi n c l i n i c a l l a b o r a t o r i e s G U OQ i(C h o n g q i n g P h a r m a c e u t i c a lT e c h n o l o g y R e v i e wa n dC e r t i f i c a t i o nC e n t e r ,C h o n g q i n g ４０１１２０,C h i n a )A b s t r a c t :W i t h t h e d e v e l o p m e n t o f i nv i t r od i a g n o s i s (I V D )i n d u s t r y ,i n c r e a s i n gp r a c t i c ea n dc o gn i t i o no f p r e c i s i o nv e r i f i c a t i o na c t i v i t i e s f o r I V D p r o d u c t so f q u a n t i t a t i v ea s s a y i nc l i n i c a l l a b o r a t o r i e s ,t h e q u a l i t y re Ｇq u i r e m e n t s of n a t i o n a l a u t h o r i t y ,I V Di n d u s t r y a n dc l i n i c a l l a b o r a t o r i e s (e n d Ｇu s e r s )a r ec o n t i n u o u su p Ｇgr a d Ｇi n g ．I no r d e r t o r e a c h a u n i f i e d s t a n d a r d f o r t h e p r e c i s i o nv e r i f i c a t i o no f I V D p r o d u c t s f o r q u a n t i t a t i v e a s s a yi n c l i n i c a l l a b o r a t o r i e s ,t h e a u t h o r d e v e l o p e d a p r e c i s i o n v e r i f i c a t i o n p r o c e d u r e f o r q u a n t i t a t i v em e a s u r e m e n t i t e m s i n c l i n i c a l l a b o r a t o r y b a s e do n t h e d o c u m e n tE P １５ＧA ３o fC L S I ,a i m i n g a t p r o v i d i n g r e f e r e n c e f o r t h e p r e c i s i o n v e r i f i c a t i o no f I V D p r o d u c t s f o r q u a n t i t a t i v e a s s a y i n c l i n i c a l l a b o r a t o r i e s ．K e y w o r d s :c l i n i c a l l a b o r a t o r i e s ;㊀p r e c i s i o n ;㊀v e r i f i c a t i o n ㊀㊀临床检验中对患者样本一般进行一次测量,体外诊断(I V D )试剂的精密度符合要求才能保证临床结果的准确性,好的精密度是获得良好准确度的先决条件[１].精密度主要由测量过程中的随机误差和一些变异因素(如试剂批次㊁校准周期㊁校准品批次㊁仪器㊁操作者等)所引起,针对不同的引起精密度变化的因素进行考察,可得到不同类型的精密度,如批内精密度㊁批间精密度等[２Ｇ３].精密度是I V D 试剂㊁仪器的重要分析性能之一,是产品研发㊁产品标准制订㊁产品注册等过程的重要技术指标,其评价资料是评价拟上市产品有效性的重要依据,也是产品注册所需的重要申报资料之一[３Ｇ４].所以精密度在I V D 定量检测产品研发阶段就应该受到厂家研发人员的重视.精密度作为检验项目分析性能参数中最重要的性能指标之一同时也是医学实验室I S O１５１８９质量管理体系要求的项目,受到临床实验室的高度重视[５].目前,国内临床实验室主要依据W S /T４９２Ｇ２０１６«临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证»标准进行评价[４],该标准主要依据C L S IE P１５ＧA 文件[４,６].随着近几年国内I V D 行业的迅速发展以及临床实验室对I V D 定量检测产品精密度验证活动的不断实践和加深认识[７],国家审评中心㊁行业㊁临床实验室对I V D 定量检测产品的质量要求也在不断提高.笔者依据新版美国临床和实验室标准化协会(C L S I)E P １５ＧA ３文件用户对精密度验证和偏倚评估 ,编制了临床实验室定量测量项目精密度验证程序,旨在为临床实验室I V D 定量检测产品精密度验证的实施提供参考.１㊀精密度验证方法１．１㊀方法简介㊀实验主要是在５个工作日内重复检测同一批样本,共５次.如需要达到更可靠的稳定性,则建议增加实验时间[６].１．２㊀准备工作１．２．１㊀熟悉期㊀(１)人员培训:工作人员应学会仪器操作,维护程序,样本准备方法,测量系统校准和校准验证功能,必要时由厂家提供培训.(２)质控程序:在熟悉期就应该建立该方法的质控程序.根据厂家说明书,确认仪器操作在控,可使用厂家推荐的质控方法,但不应该使用厂家建立的不精密度来建立质控范围.关于质控程序的建立,可以参考C L S IC ２４文件.(３)实验记录:实验应记录的内容包括仪器名称和检测信息(分析物种类㊁数量㊁单位)㊁试剂和校准品批号㊁选择某测量浓度的理由㊁样本信息(组成㊁不确定度等)㊁精密度声明的来源(通常是厂家的药品说明书里的表格)㊁实验所用的软件工具以及它们的版本号㊁检测数据回顾和数据处理的个人责任㊁实验设计和延期的任何决定.(４)数据处理方法:当选定了一种数据处理的方法后,应注意一些潜在的误差来源:如每一个计算步骤的公式转变需要额外校对,合理进行有效数字的取舍,注意表格的完整性和公式的正确性等.１．２．２㊀设备和环境要求㊀所有用于精密度验证实验的设备均应在使用前核查是否处于受控状态,在设备运行期间应保持实验室内环境始终处于受控状态,无空气污染,通风足够,如每小时至少换气６次(尤其是有机械通风装置的房间内).１．２．３㊀实验室要求㊀需有足够时间开启和运行仪器以确保操作者理解仪器的全部步骤并能正确操作.１．３㊀实验设计１．３．１㊀时间㊁批次及重复次数㊀基本的５ˑ５设计:要求至少检测２个不同浓度样本,至少检测５d(可以不连续),每天１批,每批重复测量５次.实验结束后每个样本总共得到２５个结果[６].为获得更可靠的精密度验证数据,可以将检测时间增加为７d.１．３．２㊀样本㊀(１)样本选择:应至少选择２个样本,最好是患者血清或混合血清,或者商业性的质控材料,尽量与厂家建立精密度声明时所用材料一致[８Ｇ１０]. (２)浓度选择:样本应有不同的检测浓度,最好有一个代表了临床决定值(临界值)或参考限附近,或简单地落在正常和异常范围.应避免使用极高㊁极低浓度样本[１１],因为它超出了厂家说明书的水平范围,需要外推计算,或者得到的结果可能会超出某些重复检测范围.(３)样本保存:应注意样本储存条件,保证整个实验期间样本的稳定性,降低因样本不稳定带来的精密度影响.习惯做法是能整个使用和解冻的样本,以方便检测.在决定样本体积和数量的时候,要注意无效腔以及有可能要用到的额外批次的检测.(４)样本处理:应严格按照要求进行样本处理,避免不同操作者带来的差异,样本处理过程要与厂家建立精密度声明时所做的保持一致;不同浓度样本可以在不同天或不同批内检测完毕,检测时需先做质控,质控在控时结果可以接受,如失控需查明原因,拒绝所有检测结果,缺失的结果需额外补齐.２㊀精密度验证实验流程㊀㊀精密度验证实验给用户提供了精密度性能验证的指引和方法.为了区分厂家的不精密度声明和用户的不精密度验证值,本文分别用σR㊁σW L表示厂家声明的重复性和实验室内不精密度,用S R㊁S W L表示用户验证的重复性和实验室内不精密度.通常,厂家有两种精密度声明 重复性(批内不精密度)和实验室内不精密度[１０].本部分内容提供了从这两种声明中识别总变异的统计学方法.图１为样本的(重复性和实验室内)不精密度的验证和分析图.图１㊀㊀样本精密度(重复性和实验室内)验证分析图３㊀数据分析３．１㊀测量数据判断３．１．１㊀数据完整性判断㊀每天都应检查所有结果,如果由于检测系统或室内质控导致需要拒绝该批结果,应及时查找原因补充数据.３．１．２㊀各样本数据分析㊀注意:本文内容假设用户实验时使用最基本的５ˑ５设计,也可多１~２个批次,可使用单因素A N O V A软件进行分析.按照５ˑ５设计进行试验得到的总胆红素结果,见表１.表中总胆红素检测结果无缺失值,根据G r u b bᶄs法２５个结果中无离群值[６],具体分析:计算所有结果的平均值和标准差(S D),G r u b b sᶄ因子G(取决于N,当数据是平衡无缺失时N＝２５,G一般为３．１３５,n０则为５)[６].也可以根据«数据的统计处理和解释正态样本离群值的判断和处理其他方法»进行离群值判断[１２].总胆红素所有结果均值为１８．８和０．２２μm o l/L, G r u b b sᶄ范围的上㊁下限计算:G r u b b sᶄ限值＝均值ʃG S D＝１８．８ʃ３．１３５ˑ０．２２＝１８．１或１９．５μm o l/L.表１中数据均在该范围内,所以无离群值.表１㊀㊀总胆红素精密度验证原始数据(μm o l/L)重复次数第１天第２天第３天第４天第５天１次１８．６１８．５１８．９１９．１１９．０２次１８．４１８．５１８．８１９．０１８．９３次１８．７１８．７１８．９１８．９１８．８４次１８．８１８．６１８．７１９．１１８．５５次１８．５１８．８１８．７１９．２１８．６３．２㊀不精密度实验数据的单因素方差分析㊀精密度验证的实验数据使用单因素方差分析方法,可借助相关统计软件来进行,以表１中总胆红素分析结果为例,其统计结果输出如表２所示.表２㊀㊀总胆红素单因素方差分析的输出结果变异来源S S D F M S批间S S１＝０．６８２４D F１＝kＧ１＝４M S１＝０．１７０６批内S S２＝０．４３２０D F２＝D F t o t a l－D F１＝(N－１)－(k－１)＝N－k＝２０M S２＝０．０２１６总变异S S t o t a l＝１．１１４４D F t o t a l＝２４－㊀㊀注:－表示该项无数据㊀㊀有些方差分析软件提供批间和批内方差分量,即V B和V W的计算.如没有提供,可以根据以下公式进行计算:V W＝M S２;V B＝M S１－M S２/n０.如果M S１ɤM S２(相对罕见)则V B＝０.当数据是平衡的无缺失时,n０为５,如数据有缺失,则应咨询相应统计专家.变异分量V W直接与重复性变异相关,V０B 单纯地 与批间变异相关.批间变异可纠正为批内变异,但两种变异分量(V B和V W)的总和与实验室内不精密度相关.取平方根得到用S D s表示的预期精密度:S R＝V W,S B＝V B,S W L＝V W＋V B.相对而言,C V R ＝S Rˑ１００/X和C V W L＝S W Lˑ１００/X,X是样本所有结果的均值.仍以表１总胆红素样本数据做例子,单因素方差分析后得到表２.根据表格内数据,V W＝M S２＝０．０２１６,由于M S１(０．１７０６)ȡM S２(０．０２１６),计算V B:V B＝(M S１－M S２)/n０＝(０．１７０６－０．０２１６)/５．０＝０．０２９８,根据这些变异分量数值,可以计算用S D为表示单位的不精密度:S R＝V W＝０．０２１６＝０．１５μm o l/L,S B＝V B＝０．０２９８＝０．１７μm o l/L,S W L＝V W＋V B＝０．０２１６＋０．０２９８＝０．２３μm o l/L.总胆红素均值为１８．８μm o l/L,重复性C V R＝０．８０％,实验室批间变异C V B＝０．９０％,实验室内不精密度C V W L＝１．２２％.４㊀用户获得的不精密度与厂家的声明进行比较㊀㊀验证实验完成每个样本的重复性和实验室内不精密度的计算后,用户应检查获得的不精密度与厂家声明的是否一致,可将结果直接与厂家声明进行比较,如一致则验证通过[１４Ｇ１５];如不一致则需进行相关的上限值(U V L)计算,必要时可联系厂家.仍以表１中总胆红素数据为例,经统计分析总胆红素的C V R＝０．８０％,C V B＝０．９０％,C V W L＝１．２２％,分别与厂家声明的精密度(见表３)进行比较.表１中总胆红素浓度为１８．８μm o l/L,与厂家声明的第一个浓度相近,重复性为０．８０,小于厂家声明的２．７％;实验室内不精密度为１．２２％,小于厂家声明的４．６６％,验证通过.为了降低由于单独机会性导致的确证厂家精密度声明的失败,可以计算厂家声明的U V L.U V L表示当厂家声明正确时,从相同样本量和相同实验设计方案的用户精密度实验中获得不精密度估计的９５％上限,是不精密度确证实验是否接受的判断标准.用户宁可使用U V L也不单独使用厂家声明,这样可以避免由于机会性引起的不恰当的验证失败,使验证试验成功率至少提高５％.对于某给定标本,只有在用户的重复性估计值小于或等于厂家的声明(若失败,必须小于或等于厂家声明的相关U V L)的时候,才能说用户观察到某浓度样本的重复性与厂家声明一致.由于U V L经常大于相关的声明,用户的估计值通常至少大于厂家的声明３０％,仍然算通过.如果用户的估计值超出了厂家声明,用户应将得到的估计值与声明的U V L比较,以总胆红素精密度验证为例.总胆红素厂家精密度声明１㊁２㊁３的均值分别为２０．６㊁８０．３㊁１６０．８μm o l/L.通过下列三步计算U V L s[６].(１)计算自由度d f,用于尚在疑问中的不精密度估计(d f R是重复性的不精密度,d f W L是实验室内不精密度).(２)从E P１５ＧA３文件中查得U V L 的F因子.(３)利用U V L的F因子计算U V L和厂家的声明.将用户的不精密度与U V L进行比较.对于重复性比较,计算重复性的自由度d f R.d f R＝N －k,N是结果的总数目,k是检测批次的数目.对于实验室内不精密度比较,首先计算声明的比率ρ:ρ＝σW L/σR＝％C V W L/％C V R,ρ是用厂家的实验室内不精密度声明除以厂家的重复性声明,可以用S D表示,也可以用C V表示.然后从E P１５ＧA３中得到大概的自由度,d f W L.见表３.表３㊀㊀总胆红素厂家不同精密度声明的U V L s计算项目声明１声明２声明３重复性不精密度㊀σR(％C V)０．５５(２．７％)１．８(２．２％)２．４(１．５％)㊀k５５５㊀n５５５㊀d f R２０２０２０㊀F１．３４１．３４１．３４U V L R(％C V)０．７４(３．５９％)２．４１(３．０％)３．２２(２．０％)㊀实验室内不精密度㊀σW L(％C V)０．９６(４．６６％)３．５(４．３％)５．４(３．４％)㊀ρ１．７５１．９４２．２５㊀d f R７６６㊀F１．６２１．６７１．６７㊀U V L W L(％C V)１．２０(５．８３％)５．８４(７．２７％)５．８４(３．６３％)５㊀结果解释㊀㊀精密度验证所有数据分析和一致性检验完成后,用户拥有:(１)实验中每个测试样本的 重复性 和 实验室内不精密度的估计值 .(２)一致性检验结果(通过或失败).用户还应检查一致性检验结果是否覆盖精密度确认实验的所有样本浓度范围.如果所有结果都在确认范围内,则用户的精密度与厂家的声明一致(注:由于样本数量有限,统计结果有可能接受了错误的通过和错误的失败).精密度验证实验完成后,可能会有以下３种情况.情况１A:所有估计值都通过,接近或低于厂家声明或U V L s,证明用户实验室的不精密度与厂家声明具有可比性.情况１B:所有估计值通过,但有些勉强通过,该情况表明用户实验室所有结果,或者部分检测范围内结果的不精密度可能超出厂家声明.总体来讲该实验在统计学上还是与厂家声明一致.情况２:大多数估计值通过,但有些没通过.实验负责人应回顾实验,判断该检验程序的不精密度是否与厂家的声明完全不符,该检验程序是否仍可接受使用.如可接受使用,人应详细阐述接受的理由,并监控日常质控的不精密度.情况３:好几个估计值均未通过,实验总体与厂家声明不一致.用户可以有３个选择:(１)完全拒绝该检验程序;(２)寻找故障,比如说在厂家帮助下,重复整个精密度验证实验;(３)为确定该检验程序精密度性能特征,做天数和次数更多的实验验证.６㊀注意事项㊀㊀成功完成精密度验证实验后,用户可以将该检验程序投入使用.使用过程中,室内质控作为实验室不精密度的主要反映,通过长时间监控日常质控样本收集到的统计资料更能代表实验室内不精密度[８].但如果出现试剂或定标物批号的改变,仪器维修㊁试剂稳定性改变㊁实验环境因素变化㊁新操作者或分析前因素的影响等情况时,日常质控结果得到的不精密度值可能会超出厂家声明,用户应充分考虑并排除或降低这些变异因素.如果用户 实验室内精密度 声明通过,但 重复性 声明没有通过,则反映了实验中 批 的差异.如厂家是通过双份检测得到,而用户的实验设计可能包含了更长的时间范围.本文假设厂家的精密度声明准确地代表了检测方法目前的性能,也假设了厂家的声明是没有特别明显的不确定度.表格列出了跟不确定度相关的不精密度统计资料,但厂家声明的精密度实验可能不那么严谨,包括检测天数也达不到经典的C L S I文件E P０５的实验设计[１３];对于某给定浓度和精密度类型,当用户的精密度既没有落入可允许变异范围也超出了厂家声明计算出来的U V L的时候,用厂家声明会比用临床可允许变异范围要好得多.这种情况下,即使精密度验证实验没有通过厂家声明,用户也可选择接受检测方法的精密度性能.参考文献[１]王薇,王治国,李少男．临床实验室对厂家声明的精密度和真实度的性能验证要求[J]．检验医学杂志,２０１０,２５(１２):１００１Ｇ１００５．[２]温冬梅,张秀明,吴剑杨,等．应用C L S I E P５ＧA２文件评价生化检测系统的精密度性能[J]．检验医学与临床,２０１０,７(１９):２０９６Ｇ２０９８．[３]崔涛,陈洪忠,张云娟．临床化学体外诊断试剂分析性能评估要点探讨[J]．生物技术通讯,２０１７,２８(３):３５６Ｇ３５９．[４]中华人民共和国卫生和计划生育委员会．临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证:W S/T４９２Ｇ２０１６[S]．北京:中国标准出版社,２０１６．[５]段敏,赵海建,王薇,等．临床检验程序不精密度㊁正确度及诊断准确度验证的实用性方法[J]．现代检验医学杂志,２０１７,３２(６):１６５Ｇ１６９．[６]C l i n i c a l a n dL a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e．U s e r v e r i f i c aＧt i o no f p r e c i s i o na n de s t i m a t i o no fb i a s:E P１５ＧA３[S]．W a y n e,P A:C L S I,２０１４．[７]张传宝,赵海建,张天娇,等．评价一种以C L S IE P１５ＧA２文件验证生化分析系统精密度和正确度方法的应用价值[J/C D]．中华临床实验室管理电子杂志,２０１３,１(１):４１Ｇ４５．[８]王宏斌,卓志娟,张丽等．一种室内质控精密度评价标准的建立及其应用[J]．国际检验医学杂志,２０１８,３９(２０):２５８５Ｇ２５８９．[９]徐春芝,吴继明,刘贵建,等．临床实验室检测系统精密度验证方法比较及应用体会[J]．国际检验医学杂志,２０１３,１７:２３０４Ｇ２３０５．[１０]徐建华,刘冬冬,徐宁,等．C L S IE P１５ＧA３在临床生化精密度验证中的应用[J]．临床检验杂志,２０１６,３４(３):２１５Ｇ２１８．[１１]徐建辉,王惠民,苏建友,等．两种商品定量试剂盒分析性能的验证实验[J]．临床检验杂志,２０１０,２８(６):４６７Ｇ４６８．[１２]国家标准化管理委员会．数据的统计处理和解释:正态样本离群值的判断和处理:G B４８８３Ｇ２００８[S]．北京:中国标准出版社,２００９．[１３]C l i n i c a l a n dL a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e．E v a l u a t i o no f p r e c i s i o n p e r f o r m a n c e o f q u a n t i t a t i v em e a s u r e m e n tm e t hＧo d s:E P０５ＧA３[S]．W a y n e,P A:C L S I,２０１４．[１４]杨志钊,缪丽韶,杨山虹,等．利用C L S IE P１５ＧA指南验证精密度和准确度[J]．国际检验医学杂志,２０１０,３１(３):２３１Ｇ２３２．[１５]沈荣春,杨春兰,崔明,等．不同精密度评价方法的比较及在临床血糖测定中的应用[J]．检验医学与临床,２０１４,５(１８):２４９７Ｇ２４９８．(收稿日期:２０１９Ｇ０２Ｇ１０㊀修回日期:２０１９Ｇ０５Ｇ２８)。

自动生化分析仪精密度性能的评价1.仪器熟悉阶段在评价实验正式启动前，仪器应当在实验室运行一段时间，以便实验者能掌握好仪器的日常使用、维护和保养、样品准备、定标等操作。

在本阶段，仪器可以分析质控品、混合血清等适合仪器分析的任何其他样品，但实验者不应当收集精密度评价实验的数据，只需记录仪器在日常工作中发生的问题，包括错误标志、错误修正、校准等。

本阶段一般为5天，直到实验者确信可操作仪器为止，也可根据仪器的简单或复杂程度，适当增减。

2.文件熟悉阶段本阶段要求实验者熟悉EP5-A文件关于临床化学设备精密度评价的内容。

为了避免在精密度评价实验过程中遇到不熟悉步骤，实验者必须进行预实验。

预实验时，仪器可以分析实验室常规使用的测试样品和质控品，在预实验数据收集完成后，实验者应根据预实验时的日常室内质控结果计算实验控制限；此外，在本阶段结束或即将结束时，实验者还应对仪器进行初步批内精密度评价实验，具体方法是取低值、高值血清各一份，分别测定20次，计算标准差（SD）和变异系数（CV）。

实验者应该把预实验得到的实验控制限和初步批内精密度评价实验得到的SD、CV值与仪器生产商提供的预期值进行比较，如果实验控制限或SD、CV值与仪器生产商提供的预期值严重不符，则应联系仪器生产商寻找问题的原因，在解决问题后再开始下一步的实验。

在实验者无操作困难情况下，本阶段至少应持续5个工作日，如有必要，对于复杂仪器可适当延长时间。

如果在预实验过程中使用了精密度评价实验样品，且无明确异常情况发生，上述5个工作日（或更长时间）内收集的数据可与评价实验时收集的数据合并使用，但是所有数据应符合质量控制可接受性检查。

3.实验评价阶段总精密度是仪器在一段不确定时间内的变异性，影响仪器总精密度的因素很多，校准物、试剂批号、操作者等都是很重要的影响因素，但是EP5-A文件介绍的精密度评价实验过程中这些因素都是保持恒定的，所以实验者得到的结果并不反映上述因素对仪器总精密度的影响，这一点在解释结果的时候应该说明。

定量测量方法的精密度性能评价；批准指南－第二版美国临床实验室标准化委员会…通过自愿一致化的方式为世界医学科学团体服务NCCLS是一个非赢利的教育组织，她为国家和国际标准的编制、宣传和应用提供交流论坛。

NCCLS创建于1968年并获得美国国家标准研究院的认可。

NCCLS所依据的原则是，对病人高质量服务所需的临床实验室检测，自愿一致的标准是必不可少的。

NCCLS通过各临床实验室、检验团体学会、工厂和政府机构的参与而代表临床检验界。

叙述了文件叙述了实验室的程序、常规和参考方法以及评估方案可应用于所有检验学科。

文件审核的一致化过程由一些正式的步骤组成，叙述了NCCLS文件和规范的编制如何发展到以及被接受为临床实验室标准。

出版物NCCLS文件以标准、指南、委员会报告出版。

标准通过一致化过程形成的文件，并对材料、方法、或实践以不能修改方式明确规定其特定的基本要求。

此外，标准也可以包含明确规定的选定要素。

指南通过一致化过程形成的文件，叙述了用于临床检验界的一般实验操作、方法或材料的规范。

使用者可以使用成文文件或修改指南以适应特定的需要。

报告未经过一致化审定过程的文件，由理事会颁布。

一致化过程NCCLS的自愿一致化审定程序是一个为以下方面建立正式规范的方案：标准项目的权威性文件的编制和公开评审根据实验室使用者反馈的评论修改文件文件被接受为临床实验室标准大多数NCCLS文件必须有“建议”和“批准”两种层次的一致化文件，根据特定的一致化过程，文件也可以有一个中间（“试行”）一致化的水平层次。

建议NCCLS文件作为建议标准或指南处在被临床检验界评审的第一阶段。

此文件需要接受广泛彻底的技术审核，包括对范围、方法、用途和逐字逐行对技术和行文内容的全面评审。

试行只有当一种推荐方法对某一领域的评审有明确的需要，或者当某一建议性方案需要收集特定的数据时，才制定试行标准或指南。

它应该接受评审以保证其有效性。

批准批准的标准或指南已在临床检验界得到一致同意。

利用EP5-A2文件的方法评价实时荧光定量PCR检测HBVDNA的精密度凡任芝;沈佐君【摘要】目的评价本实验室荧光定量PCR方法(Real time PCR)测定HBV DNA结果的精密度.方法按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP5-A2文件C1附录要求,对浓度约为107 (copies/ml) (S7)、105 (copies/ml) (S5)和103 (copies/ml)(S3)样本,评价其精密度.结果 S7、S5、S3的批内精密度CV值分别为2.022％、3.682％、4.469％,总精密度的CV值分别为4.037％、4.452％、7.090％.结论本检测系统的精密度情况符合试剂厂商声明要求,可以满足临床需求.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2015(017)002【总页数】3页(P139-141)【关键词】EP5-A2;精密度;实时荧光定量PCR【作者】凡任芝;沈佐君【作者单位】230001合肥,安徽省立医院临床检验中心;230001合肥,安徽省立医院临床检验中心【正文语种】中文【中图分类】R392.11;R512.6+3本临床基因扩增检测实验室在2012年分别采用3个浓度水平质控物做室内质控（IQC）的过程中，在月度及年度总结中发现各浓度的精密度情况有较大的变化，如2012年7月的3个浓度均值分别为5.21×103（copies／ml）、4.42×105（copies／ml）、3.33×107（copies／ml），IQC 质控物的月累计变异系数（coefficient of variation，CV）分别为4.59%、3.14%、2.14%，通过和2012年“卫生部临床检验中心全国临床PCR 测定（病毒类）室间质量评价”活动中最大允许总误差（TEa）比较（部临检中心设定其TEa为“均值±0.4”），各CV 值均小于1／2的TEa，但随着样本浓度增加CV 有减小的趋势，有必要对PCR 检测中各浓度的精密度情况进一步评价。

测量精密度评价南通大学附属医院景蓉蓉精密度性能是检测系统的基本分析性能之一，它也是其他方法学评价的基础，如果精密度差，其他性能评价实验则无法进行。

对临床实验室而言，一般样本只作单次测量便发出报告，这种情况下精密度性能更是至关重要。

国家《医疗机构临床实验室管理办法》也要求临床实验室能够开展精密度的方法学评价；对参考实验室而言，精密度是测量不确定度评定的一个重要分量。

因此，有必要了解和掌握测量精密度评价的相关知识。

一、有关术语和定义1. 测量精密度测量精密度（measurement precision）简称精密度，指在规定条件下，对同一或类似被测对象重复测量所得示值或被测量的值间的一致程度。

精密度是个抽象概念，只能将精密度描述为“高”或“低”，其反义概念“不精密度”可用数量形式表示，如极差（R）、标准差（s）、方差（s2）或变异系数（CV）。

所谓“规定条件”可以是重复性条件、期间精密度条件或复现性条件，相对应的精密度为重复性、期间精密度和复现性。

2. 测量重复性测量重复性（measurement repeatability）简称重复性，指在重复性测量条件下的精密度。

重复性测量条件指相同测量程序、相同操作者、相同测量系统、相同操作条件和相同地点，在短时间内对同一被测对象重复测量的一组测量条件。

日常工作中将“一批”内的测量条件视为“短时间内”，因此重复性又常称为批内精密度。

3. 期间测量精密度期间测量精密度（intermediate measurement precision）简称期间精密度，指一段时期内在期间精密度条件下的精密度，类似于日常工作中常说的“批间精密度”。

期间精密度条件指相同测量程序、相同地点，在一个长时期内重复测量同一被测对象的一组测量条件。

在这一段时间内可以对仪器进行重新校准或更换操作者等。

4. 测量复现性测量复现性（measurement reproducibility ）简称复现性，指在复现性测量条件下的精密度。

1.样本要求血液样本要求在采集后4小时内进行处理，并需要各种类型的样本，以反映血液中各种成分质和量的变化（表1-4-6）。

2.性能评价（1）稀释效应：包括①受倍比稀释影响的参数：用同源乏血小板血浆稀释压积细胞，得到各种浓度，如l00%，90%，80%……20%，l0%，评价稀释度与参数之间的线性关系。

理想情况下，线性范围越宽越好、回归线应通过原点。

②不受稀释效应影响的参数：如红细胞平均指数，不受稀释度影响，理论上应为一条水平回归线。

（2）精密度：包括批内、批间精密度和总精密度。

①批内和批间精密度：是对同一批样本（批内或重复精密度）或二至多批样本（批间精密度）的重复测定，用CV值表示。

理论上，精密度研究样本应覆盖整个病理范围，包括高、中、低值，进行重复测定，采用双因素方差分析进行批内、批间精密度评价。

批间精密度受仪器校准和仪器漂移的影响。

②总精密度：总重复性由批内、批间精密度和携带污染结果得出。

实验时从一个较大范围中随机抽取样本，并在几小时内测定，采用单因素方差分析进行评价。

若总精密度评价在较长时间内完成，样本贮存和稳定性也是重要影响因素。

（3）携带污染：在运行临床样本前，必须对高值和低值样本的携带污染进行评价，保证交叉测量时仪器结果的稳定性。

方法是连续测试高值样本3次（il、i2、i3），随后立；即连续测试低值样本3次（jl、j2、j3）。

（4）相关性：是仪器测定结果与常规方法相比的满意程度。

采用大量的、未经选择的、覆盖所有预期范围的样本，用图形表达方式显示被评估仪器（Y轴）和常规方法（X轴）测定结果的差异，采用配对t检验进行统计分析。

（5）准确度：是“估计值与真值之间的一致性”。

真值由决定性方法或参考方法获得。

血细胞计数的参考方法见表l-4-7.（6）样本老化：是采集静脉血样本，观察随时间增加测定结果的变化量。

采集l0份样本，5份为正常，5份为异常，样本分别贮存在室温和4℃，并在0小时、30分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、12小时、24小时、48小时和72小时内测试。

C L S I所有E P标准的适用范围和简介SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#1.E P05-A3定量测量程序精密度评估：批准指南发布日期：2014年10月版本号A3适用范围：本文件为临床实验室的研究提供指南，目的是为定量测定程序建立批内精密度性能特征，以及进行批间变异研究。

本文阐述了多个实验方案，并考虑了如何选择和优化方案使其成为某特定测定程序的最佳方案，以及该方案的使用目的。

对于仅仅是验证厂家声明的精密度的用户，不适用于本文件，应参照CLSI文件EP15。

EP05首要适用于制造商和开发商者，对终端用户验证重复性和和实验室内精密度的建议可参考EP15，EP15中的实验方案已改为和EP05中单一实验室研究设计的兼容性。

单一实验室方案与前版EP05方案类似，对给定样品和试剂批号等需要检测20天，每天测2批，每批重复测定2次。

第3版仍使用该方案并以此作为制造商和开发者的规范实验，用于评估测量程序的重复性和实验室内的精密度。

新的EP05是第二个标准化实验：多中心方案至少要在3个地方重复测定5天，第4章提到了如何实施3（地）x5（天）x5（每天重复次数）和3（地）x5（天）x2（每天批次）x3（每批重复次数）。

该辅助方案阐述了实验室间变异和再现性的估计。

为了帮助理解基本概念，新版EP05中有针对非统计学研究人员的扩展教程（见1.5小节）。

鉴于本指南中计算的复杂性，建议使用CLSI提供的StatisPro TM方法评估软件。

2.EP06-A：定量测量程序的线性评估：统计学方法发布日期：2003年4月版本号A使用范围：本文件提供了一种方法用于建立、验证和证明定量测量程序的线性范围。

他不能鉴别造成明显费线性的原因。

样本数越多越能明确的检查线性。

因此，若线性评估失败则需要重做，重做时可以增加重复次数，或减少浓度水平以覆盖较小的线性范围。

本指南主要是评价线性关系，尽可能不受精密度和准确度的影响。

精细度评估指导原则1概括精细度是观察体外诊疗试剂对同同样本重复测准时可否获取同样实验结果的能力的指标。

精细度评论是质量控制的重要内容。

同时，精细度评估资料也是是评论拟上市产品有效性的重要依照，是产品注册所需的重要申报资料之一。

本指导原则鉴于国家食品药品监察管理局《体外诊疗试剂注册管理方法（试行）》的有关要求、参照《体外诊疗试剂剖析性能评估系列指导原则（征采建议稿）》、《 EP05A2-定量检测方法的精细度评估》和《临床查验质量管理技术基础》，并依照我企业详细状况，对定量检测方法中精细度的评估和数据办理方法进行了要求。

其目的是为我企业研发人员和有关技术人员进行定量检测方法中精密度的评估供给原则性指导。

同时也为用户考证某种方法和设施的精细度供给实验方案指导。

这个过程关于某些没法获取足够的检测资料的方法可能其实不合用。

2基本观点精细度是指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的凑近程度，即在规定条件下，独立测试结果表现的一致程度。

一般用标准误差 (Standard Deviation ，SD)或变异系数（ Coefficient of Variation ，CV）表示。

给定检测程序的“精细度”能够依据特定的精细度条件进行分类。

“重复性”的检测条件基本不变，常被称为“批内精细度”。

“重现性”与条件改变有关，如：不一样的时间、实验室、操作者和检测系统（不一样校准品和试剂批号）下的精细度。

2.1 批内精细度指在同一实验室，由同一（组）操作员在同一仪器上，使用同一方法和同批号试剂，在一个批次实验中对同一测试样品（常用校准品）重复测定10 次或以上丈量结果的精细度。

表现为“重复性”，也被称为“序列内精细度”和“剖析内精细度”2.2 批间精细度指在同一实验室，由同一（组）操作员在同一仪器上，使用同一方法和同一批号试剂，在一段时间内（一般不超出一天）对同一测试样品（常用校准品）分别做 10 个或以上试验批次的丈量结果的精细度。