课件分享II临床基因扩增检验实验室建设及技术审核解析

42、只有在人群中间，才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
☆临床基因扩增Байду номын сангаас验实验室的设置及 质量管理体系的建立
1、 舟 遥 遥 以 轻飏， 风飘飘 而吹衣 。 2、 秋 菊 有 佳 色，裛 露掇其 英。 3、 日 月 掷 人 去，有 志不获 骋。 4、 未 言 心 相 醉，不 再接杯 酒。 5、 黄 发 垂 髫 ，并怡 然自乐 。
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹

11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
临床基因扩增检验试验室的设置质量管 理
61、辍学如磨刀之石，不见其损，日 有所亏 。 62、奇文共欣赞，疑义相与析。
63、暧暧远人村，依依墟里烟，狗吠 深巷中 ，鸡鸣 桑树颠 。 64、一生复能几，倏如流电惊。 65、少无适俗韵，性本爱丘山。
谢谢

26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
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27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
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28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
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29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
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30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
13、遵守纪律的风气的培养，只有领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致，是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
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临床基因扩增检验试验的设置 质量管理体系的建立及技术验
收
11、战争满足了，或曾经满足过人的 好斗的 本能， 但它同 时还满 足了人 对掠夺 ，破坏 以及残 酷的纪 律和专 制力的 欲望。 ——查·埃利奥 特 12、不应把纪律仅仅看成教育的手段 。纪律 是教育 过程的 结果， 首先是 学生集 体表现 在一切 生活领 域—— 生产、 日常生 活、学 校、文 化等领 域中努 力的结 果。— —马卡 连柯(名 言网)
Байду номын сангаас
谢谢！
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13
试剂管理制度
• 实验室应根据工作需要定期提交试剂申请单，做
到及时盘存清点。
• 所有试剂做到来源渠道正规，质量保证。 • 实验室应对试剂库存定期检查，不得用过期变质
的试剂。
• 试剂保存应严格按照规定存放，确保有效期内能
有效地使用，杜绝浪费。
• 试剂外借一律须经实验室负责人同意，剧毒试剂
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16
第三节：临床基因扩增实验室 操作指导书（SOP）
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17
• 各种仪器设备的标准操作维护程序
（PCR扩增仪、离心机、干式恒温器、生物安全柜、移液器、 冰箱、可移动紫外线消毒车等。）
• 各种仪器设备标准校准程序 • （温度计、移液器、PCR扩增仪等） • PCR标本唯一标识编号规则（120525B05） • 临床标本的采集及处理的标准操作程序 • 各种病原体扩增荧光检测标准操作程序 • 室内质量控制、室间质评标准操作程序
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24
空白管对照的种类
• 反应液空白管对照 • 试剂空白管（在整个实验过程中开口放置
于核酸提取的操作台面区域内30—60分钟， 然后进行扩增在反应液空白管为阴性的情 况下如果出现阳性提示可能出现实验室污 染。）
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25
扩增产物分析
• 通过标准曲线对未知模板进行定量分析 • 1。根据试剂盒的要求先确定基本的基线和域值。 • 2.初步分析未知模板的定量结果，根据当时曲线
• 人员的培训 • 规范操作
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21
分析中的质量控制
• 核酸提取 • 1.标本制备最好在生物安全柜内进行，可防止标本气溶胶
的扩散。
• 2.在实验操作过程中要经常更换手套，因为手套的污染很

（四）标本的贮存
1. 血清/血浆等— -70℃ 2. 用于DNA测定的已纯化核酸样本— 4℃ 3. 用于RNA测定的已纯化核酸样本— -80℃ 4. 用乙醇沉淀的核酸样本— -20℃ 5. GITC处理的RNA标本在室温可保存7天
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
在巢式PCR测定中，第二次加样必 须在本区内进行。
可降低本区的气压以避免气溶胶从 本区漏出。
如有加样则应在超净台内进行。 打开反应管前快速离心数秒。
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（四）扩增产物分析区
功能： 扩增片段的测定。
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二、各阶段操作要求
测定分析前的标本采集处理、测 定中的核酸提取、扩增和产物分析以 及测定后的结果报告等。
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（一）标本的采集
临床标本包括EDTA或枸橼酸钠抗凝全血或骨髓、 血清或血浆、痰、脑脊液、尿及分泌物等。
EDTA和枸橼酸盐是首选的抗凝剂。不能使用肝素 抗凝，因肝素是Taq酶的强抑制剂。
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一、临床基因扩增检验实验室的 规范化设置及其各室的功能
二、各阶段操作要求 三、PCR污染与对策 四、因操作欠规范导致的问题分析
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一、临床基因扩增检验实验室的 规范化设置及其各室的功能
玻璃器皿在使用前应高压处理，250°烘烤4小时 以上可使RNA酶永久性失活。

理想的设置
产物分析区 扩增区 样本制备区 试剂准备区
空气流向
空气流向
空气流向
缓冲间
缓冲间
缓冲间
专用走廊
工作流向
磁性连锁装置
现实的问题是：

建筑结构

通道、门 水电供应 采光、通风
基本的要求:


四个区域必须是相互独立的 各区的仪器设备及各种物品必须是专用的 各区间不能直通，应有缓冲间，供换工作 服及鞋子用 产物分析区应安装排风扇或其它抽风装置。
实验室的设置

管理要求：设置标准和工作规范 具体落实：实事求是、因地制宜
设置标准和工作规范
“原则上分为四个分隔的工作区；…… 各区必 须有明确的标记……” “每一区域都须有专用的仪器……；不同的工作 区应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服……； 离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出……” “……，可在开展临床标本检测前对提取方法进 行评价” “……，本区如采用副压条件或减压情况下可减 少扩增产物从本区扩散至前区的可能性。
管理要求：
3 人员 3.1 实验室应配备足够数量的人员； 这些人 员必须经过培训，并取得上岗证； 3.2 实验室应有培训计划和措施，保证其技术 人员得到及时培训。 3.3 实验室应保存其技术人员有关资格证书 （如上岗证）、培训、技能和经历等技术档案。
管理要求：
4 设备管理 4.1 主要设备应有维护程序文件及维护记录； 4.2 (a)有问题的设备应立即停止使用，并加上明显标识，如可 能应将其贮存在规定的地方直至修复；(b)修复的设备必须 经校准、检定（验证）或检测满足要求后方能再次投入使 用；(c)实验室应检查由于上述缺陷对以前所进行的检测工 作的影响。 4.3 加样器、温度计、扩增仪和酶标仪等应有校准程序并进行 校准，扩增仪和酶标仪应有明显的标识表明其校准状态。 4.4 应保存扩增仪、酶标仪、生物安全柜、加样器等设备的档 案

8.实施民法典，构建和谐民事关系 9.民法典是新时代我国社会主义法治建设的重大成 果 10.让民法典走到群众身边，走进群众心里 11.运用民法典维护人民权益、化解矛盾纠纷、促进 社会和谐 12.民法典与生活同行 13.民法典——新时代的人民法典 14.崇尚法典精神，共筑美好生活
15.民法典是一部固根本、稳预期、利长远的基础性法律 16．加强民法典重大意义的宣传教育，是坚持以人民为中 心、保障人民权益实现和发展的必然要求 17．要把民法典纳入国民教育体系，加强对青少年民法典 教育 18.切实推进民法典实施，更好保障人民权益 19.加强民法典重大意义的宣传教育，是提高我们党治国 理政的必然要求 20.切实实施民法典，依法保障人民合法权益 21.学好用好民法典，做知法守法好公民 22.学习民法典，践行人民至上理念，维护群众合法权益 23.贯彻实施好民法典，让民法典深入人心 24．坚持党的领导、人民当家作主、依法治国有机统一 25.中国特色社会主义法治建设的根本目的是保障人民权 益
接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
什么样的临床基因扩增检验实验室 是最标准的？
临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作
“十六字口诀”
实验室质量管理体系的建立
质量手册 质量体系程序文件 标准操作程序
质量管理的内涵
写你所做的 做你所写的 记录你已做的 分析你已做的
临床基因扩增检验实验室的设置 及质量管理体系的建立
卫生部临床检验中心 李金明
临床基因扩增检验实验室的设置
依据：卫生部颁发的《临床基因扩 增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
临床标本的接收
通常的工作流程：标本采集 血清分离

临床基因扩增实验室验收要求和要点
1、战鼓一响，法律无声。——英国 2、任何法律的根本；不，不成文法本 身就是 讲道理 ……法 律，也 ----即 明示道 理。— —爱·科 克
3、法律是最保险的头盔。——爱·科 克 4、一个国家如果纲纪不正，其国风一 定颓败 。—— 塞内加 5、法律不能使人人平等，但是在法律 面前人 人是平 等的。 ——波 洛克
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。—பைடு நூலகம்阿卜·日·法拉兹
42、只有在人群中间，才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联

1、不要轻言放弃，否则对不起自己。
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
☆临床基因扩增检验实验室的设置及质量 4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管美景，我只要生生世世的轮 回里有你。 管理体系的建立
Thank you
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿