2019版高考生物大一轮复习第43讲基因工程优选课件
- 格式：ppt
- 大小：2.24 MB
- 文档页数：69
文档推荐
-
2019版高考物理一轮复习 专题七 静电场课件.ppt页数:107
-
2019版高考物理大一轮复习全一册课件(打包42套)页数:1574
-
2019高考物理一轮复习-物理学史页数:5
下载文档原格式
合集下载
2019年高考生物一轮复习精品课件：2-3-11-40基因工程
4.目的基因的检测与鉴定
DNA分子
抗原—抗体
分子
5．PCR技术
DNA双链复制 。 (1)原理：_______________ DNA母链 模板： 酶： Taq酶 (2)条件 引物：分别与单链相应序列 相结合 原料：4种 脱氧核苷酸
(3)过程
①条件：温度上升到 变性 → ②实质：双链DNA
功能 结果
黏性末端 只缝合________
恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 ___________
③DNA 连接酶和限制酶的关系
(3)载体
质粒 、λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 ①种类：________
能自我复制 ②质粒的特点有一个至多个 限制酶切割位点 有特殊的标记基因
下一代。
表达 和发挥作用。 ②使目的基因能够________
(2)基因表达载体的组成
启动子
标记基因
目的基因
(3)基因表达载体的构建过程
3.将目的基因导入受体细胞
生物种类 常用方法 受体细胞 植物 农杆菌转化法 ____________ 体细胞 动物 显微注射法 _____________ 受精卵 将含有目的基因 的表达载体提纯 →取卵(受精卵 )→显微注射→受 精卵发育→获得 具有新性状的动 物 微生物
选修3 第十一单元 现代生物科技专题
第40讲 基因工程
[考纲要求]
1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及
技术(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。
考点 01
基因工程的工具及操作程序
一
有关本考点备考基础点再熟悉
一、基因工程的工具 1．基因工程的概念
目的基因 (1)供体：提供_________ PCR技术 扩增目的基因。 ②利用___________ 化学 ③用___________ 方法直接人工合成目的基因。
基因工程-高三高考生物一轮复习考点突破教学PPT课件
考纲链接
考点梳理
考点例析
课堂自测
第1课 基因工程
结束
◎考点一 基因工程的工具 1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶)——“分子手术刀” (1)来源：主要是从原核生物中分离纯化。 (2)特点：能够识别双链 DNA 分子某种特定核苷酸序列，并且使每一条 链特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)切割后末端的种类：黏性末端和平末端。 2．DNA 连接酶——“分子缝合针” (1)作用：将双链 DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核 苷酸之间的磷酸二酯键。 (2)种类：按来源可分为 E·coli_DNA 连接酶(来自大肠杆菌)和 T4DNA 连 接酶(来自 T4 噬菌体)。 3．载体——“分子运输车” (1)条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一个至多个限制酶切割 位点；具有标记基因。
考纲链接
考点梳理
考点例析
课堂自测
第1课 基因工程
结束
3．将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术 感受态细胞法
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到 将含有目的基因的 Ca2＋处理细胞→
感受态细胞→
Ti 质粒的 TDNA 上 表达载体提纯→取 重 组 表 达 载 体
第十二单元 现代生物科技专题
结束
最新考纲
考纲解读
备考建议
基因工程的诞生(Ⅰ) 基因工程的原理及技术(Ⅱ) 基因工程的应用(Ⅱ) 蛋白质工程(Ⅰ) 植物的组织培养(Ⅱ) 动物的细胞培养与体细胞克隆 (Ⅰ) 细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ) 动物胚胎发育的基本过程与胚胎 工程的理论基础(Ⅰ) 胚胎干细胞的移植(Ⅰ) 胚胎工程的应用(Ⅱ) 转基因生物的安全性(Ⅰ) 生物武器对人类的威胁(Ⅰ) 生物技术中的伦理问题(Ⅰ) 简述生态工程的原理(Ⅱ) 生态工程的实例(Ⅰ)
高三生物一轮复习专题课件选修三专题一基因工程ppt
是基因工程的核心。
(2)基因表达载体的组成：除目的基因外，还必须有
□15 启动子 、□16 终止子和 □17 标记基因 等。
①启动子：是一段有特殊结构的 □18 DNA片段 ，位于 □19 基因首端 ，是 □20 RNA聚合酶识别和结合 的部位。
②标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有□21 目的 基因 ，从而 □22 将含目的基因的细胞筛选出来 。
专题一 基因工程
教材基础回扣 核心考点整合 命题视角研析 课后限时练
教材基础回扣
教材梳理
一、DNA重组技术的基本工具 1．DNA重组技术的“分子手术刀”
□ (1)“分了手术刀”即 1 限制性核酸内切酶 。 □ (2)来源：主要从 2 原核生物中分离。
(3)功能：识别□3 特定核苷酸序列、切割 □4 磷酸二酯键。 (4)结果：产生□5 黏性末端 或□6 平末端 。
3．将目的基因导入受体细胞的方法
(1)植物最常用： □23 农杆菌转化 法，其次为 □24 基因枪 法、□25 花粉管通道 法。
(2)动物：最常用 □26 显微注射 法，其受体细胞通常为 □27 受精卵 。
(3)细菌：□28 感受态细胞 法，需用 □29 Ca2＋ 处理细胞。
4．目的基因的检测和鉴定
(4)目的基因的检测和鉴定
[应用训练2] (2012·南京教学检测)如图为获得抗虫棉的 技术流程。在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因 (kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才 能在卡那霉素培养基上生长。
请据图回答： (1)A过程所用的载体是________，需要的工具酶有 ________和________。 (2)C过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素 外，还需加入________。 (3)由图中离体棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可采用 ________技术，该技术所依据的原理是_________________ __________________________________________________。
(2)基因表达载体的组成：除目的基因外，还必须有
□15 启动子 、□16 终止子和 □17 标记基因 等。
①启动子：是一段有特殊结构的 □18 DNA片段 ，位于 □19 基因首端 ，是 □20 RNA聚合酶识别和结合 的部位。
②标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有□21 目的 基因 ，从而 □22 将含目的基因的细胞筛选出来 。
专题一 基因工程
教材基础回扣 核心考点整合 命题视角研析 课后限时练
教材基础回扣
教材梳理
一、DNA重组技术的基本工具 1．DNA重组技术的“分子手术刀”
□ (1)“分了手术刀”即 1 限制性核酸内切酶 。 □ (2)来源：主要从 2 原核生物中分离。
(3)功能：识别□3 特定核苷酸序列、切割 □4 磷酸二酯键。 (4)结果：产生□5 黏性末端 或□6 平末端 。
3．将目的基因导入受体细胞的方法
(1)植物最常用： □23 农杆菌转化 法，其次为 □24 基因枪 法、□25 花粉管通道 法。
(2)动物：最常用 □26 显微注射 法，其受体细胞通常为 □27 受精卵 。
(3)细菌：□28 感受态细胞 法，需用 □29 Ca2＋ 处理细胞。
4．目的基因的检测和鉴定
(4)目的基因的检测和鉴定
[应用训练2] (2012·南京教学检测)如图为获得抗虫棉的 技术流程。在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因 (kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才 能在卡那霉素培养基上生长。
请据图回答： (1)A过程所用的载体是________，需要的工具酶有 ________和________。 (2)C过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素 外，还需加入________。 (3)由图中离体棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可采用 ________技术，该技术所依据的原理是_________________ __________________________________________________。
高三生物一轮复习基因工程课件
多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培 养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄 入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出 相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应 变化的个体进一步培养、研究。 例：用棉铃饲喂棉 铃虫，如虫吃后不出现 中毒症状，说明未摄入 目的基因或摄入目的基 因未表达。如虫吃后中 毒死亡，则说明摄入了 抗虫基因并得到表达。
• 步骤一：目的基因的提取 3）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ： 根据已知蛋白质的氨 蛋白质的氨基酸序列 基酸序列，推测出相应的 推测 信使RNA序列，然后按 mRNA的核苷酸序列 照碱基互补配对原则，推 推测 测出它的结构基因的核苷 结构基因的核苷酸序列 酸序列，再通过化学方法， 化学合成 以单核苷酸为原料合成目 目的基因 的基因。
基因工程的成果在实际生产、生活中的应用有哪些？
医药卫生 基因诊断：用同位素或荧光分子制备DNA探针，利用DNA
分子杂交的原理检验被试样品的遗传信息
利用转基因的工程菌等生产基因工程药品
基因治疗：用健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞
培育优良品质的转基因作物或抗逆性转基因作物 农牧业 培育优良品质的转基因动物
（三）基因操作的基本步骤
• 上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？
优点 鸟枪法 操作简便 广泛使用 专一性强 缺点 工作量大，盲目，分 离出来的有时并非一 个基因 操作过程麻烦，mRNA 很不稳定，要求的技 术条件较高
反转录法
根据已知氨基酸 专一性最强 仅限于合成核苷酸对 较少的简单基因 合成DNA法
重播
DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏 性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有 相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。
• 什么叫黏性末端？
高三一轮复习：基因工程正式ppt课件
达到治疗疾病的目的。病人细胞中既有缺陷基因，也有
正常基因。
高考总复习.生物
二、 植物基因工程与动物基因工程的成果
外源基因类型及举例
成果举例
抗虫转基 因植物
抗虫基因：Bt毒蛋白基 因、蛋白酶抑制剂基因、 淀粉酶抑制剂基因
抗虫水稻、抗虫棉、 抗虫玉米
抗病转基 因植物
抗病毒基因：病毒外壳 蛋白基因、病毒的复制 酶基因抗真菌基因：几 丁质酶基因
3．PCR技术扩增目的基因
高考总复习.生物
(3)PCR技术扩增目的基因 ①原理：_D_N__A_复__制___。 ②过程 第一步：变性：_D__N_A__解__链__；第二步：复性：引物结合到 互补DNA链；第三步：延伸：在热稳定DNA聚合酶作用下， 从引物起始合成互补链。 2.基因表达运载体的构建 (1)目的：使目的基因在受体细胞中_稳__定__存__在___，并且可以 _遗_传__至__下_一__代_，使目的基因能够__表__达__和_发__挥_。作用 (2) 组 成 ： 目__的__基__因____ ＋ __启__动__子____ ＋ ___终__止__子___ ＋ __标__记__基__因__
三、将目的基因导入受体细胞
生物 种类
植物细胞
动物细胞
常用 农杆菌转化 显微注射技
方法 法
术
受体 细胞
体细胞
受精卵
高考总复习.生物
微生物细胞
感受态细胞 法
原核细胞
转化 过程
将目的基因 插入Ti质粒 的TDNA上→ 农杆菌→导 入植物细胞 →整合到受 体细胞的
将含有目的 基因的表达 载体提纯→ 取卵(受精卵 )→显微注射 →受精卵发 育→获得具 有新性状的
用是（ ）C
高考生物大一轮复习第43讲基因工程优选课件高三全册生物课件
12/8/2021
2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中__稳__定__存__在____， 并可以遗传给下一代；使目的基因能够__表__达____和发挥 作用。 (2)基因表达载体的组成：目的基因、__启__动__子____、 终止子和标记基因等，如图。
12/8/2021
C．一个质粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段 和6个黏性末端
D．将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的 受体细胞
12/8/2021
解析 图中pBR322质粒、抗病基因和重组质粒都是DNA分子，其基本组成单 位都是脱氧核苷酸；通过分析含抗病基因的DNA可知，该DNA含三个限制酶切割位 点，其中SmaⅠ的切割位点位于抗病基因内部，因此用PstⅠ、EcoRⅠ才能完整地切 下 该 抗 病 基 因 ； 一 个 质 粒 被 限 制 酶 EcoRⅠ 、 PstⅠ 、 SmaⅠ 同 时 切 割 后 可 得 到 3 个 DNA片段，产生6个末端，从表格信息可知，EcoRⅠ、PstⅠ切割产生的4个末端是 黏性末端，而SmaⅠ切割产生的2个末端是平末端；当EcoRⅠ切割质粒时，氨苄青 霉素抗性基因(Ampr)已受到破坏，因此，在筛选时，应将受体细胞置于含有四环素 的培养基上培养。
12/8/2021
2．若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图 丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC) 和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( D)
12/8/2021
A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 解析 解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和 Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目 的基因上的移动方向才一定与图丙相同。
2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中__稳__定__存__在____， 并可以遗传给下一代；使目的基因能够__表__达____和发挥 作用。 (2)基因表达载体的组成：目的基因、__启__动__子____、 终止子和标记基因等，如图。
12/8/2021
C．一个质粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段 和6个黏性末端
D．将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养，可筛选出已导入抗病基因的 受体细胞
12/8/2021
解析 图中pBR322质粒、抗病基因和重组质粒都是DNA分子，其基本组成单 位都是脱氧核苷酸；通过分析含抗病基因的DNA可知，该DNA含三个限制酶切割位 点，其中SmaⅠ的切割位点位于抗病基因内部，因此用PstⅠ、EcoRⅠ才能完整地切 下 该 抗 病 基 因 ； 一 个 质 粒 被 限 制 酶 EcoRⅠ 、 PstⅠ 、 SmaⅠ 同 时 切 割 后 可 得 到 3 个 DNA片段，产生6个末端，从表格信息可知，EcoRⅠ、PstⅠ切割产生的4个末端是 黏性末端，而SmaⅠ切割产生的2个末端是平末端；当EcoRⅠ切割质粒时，氨苄青 霉素抗性基因(Ampr)已受到破坏，因此，在筛选时，应将受体细胞置于含有四环素 的培养基上培养。
12/8/2021
2．若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图 丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC) 和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( D)
12/8/2021
A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 解析 解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和 Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目 的基因上的移动方向才一定与图丙相同。
[优选]高三一轮复习高考人教版生物选修基因工程课件
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
③作用：断裂特定的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键。 ④作用结果
在识别序列中―心―→轴线两侧切开黏性末端 结果 —在识别序列―中―心→轴线处切开平末端
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
4.正确看待转基因生物与环境安全问题
(社会责任)
01
考点一 基因工程的基本 工具及基本程序
知识·能力·素养 考法·考技·考能
（ 名 师 整 理 课本专 题）高 三一轮 复习高 考人教 版生物 选修基 因工程 课件pp t优质说 课稿（ 精选）
1．基因工程的概念 (1)概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA重组 和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
缝合黏性末端和平末端
作用 缝合双链 DNA 片段，恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
③作用：断裂特定的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键。 ④作用结果
在识别序列中―心―→轴线两侧切开黏性末端 结果 —在识别序列―中―心→轴线处切开平末端
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
4.正确看待转基因生物与环境安全问题
(社会责任)
01
考点一 基因工程的基本 工具及基本程序
知识·能力·素养 考法·考技·考能
（ 名 师 整 理 课本专 题）高 三一轮 复习高 考人教 版生物 选修基 因工程 课件pp t优质说 课稿（ 精选）
1．基因工程的概念 (1)概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA重组 和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
缝合黏性末端和平末端
作用 缝合双链 DNA 片段，恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
【 （ 名 师校 整课 理堂 课】本获专奖 题PP）T-高 三一轮 复习高老 考高人考教人 版教生版物生 选物修选基修 因基工因程工 课程件课件pp （t优最质新说版课本稿）（推精荐选）
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2．DNA连接酶
常用类型
来源 功能 结果
E·coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶 T4噬菌体 连接____________________ 黏性末端或平末端
大肠杆菌 ____________
连接黏性末端
恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
3．载体 化学本质：双链环状DNA分子 能自我复制 (1)常用载体——质粒 限制酶 切割位点 特点有一个至多个__________ 标记基因 有特殊的____________ 动植物病毒 (2)其他载体：λ噬菌体衍生物、______________ 等。
终止子和标记基因等，如图。
农杆菌转化法 导入植物细胞： ________________ 、 基因枪法、花粉管通道法 显微注射法 3．将目的基因导入受体细胞导入动物细胞：______________ Ca2＋ 导入微生物的方法：先用 ________ 处理再融合
4．目的基因的检测和鉴定 (1)检测： 检测是否有目的基因：DNA分子杂交技术 DNA探针 ＋转基因生物__________ DNA ______________ 分子水平检测是否转录：分子杂交技术 mRNA DNA 探针＋转基因生物 ____________ 抗原—抗体杂交 检测是否翻译：__________________ (2)鉴定：个体水平。
有这两种酶的切点)。
(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末
磷酸二酯键 。 (2)作用：切断两个核苷酸之间的______________ 特定的脱氧核苷酸序列 ，切割特定 (3)作用特点：专一性，即限制酶可识别________________________ 位点。 黏性末端 错位切：产生两个相同的____________ (4)结果 平切：形成平末端
确定限制酶的种类
(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类
①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割 目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也
3．下列关于载体的叙述中，错误的是( D ) A．载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子 B．对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点 C．目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒
D．载体具有某些标记基因，便于对其进行切割
解析 载体带有特殊的标记基因，如抗生素抗性基因，以便于对讲 基因工程
考纲要求
考情分析 2017，江苏卷，33T 2017，全国卷Ⅰ，38T 2016，全国卷Ⅰ，40T 2016，天津卷，7T 2016，江苏卷，33T 2015， 全国卷Ⅰ，40T 2015，全国卷Ⅱ，40T 2015，北京卷，5T 分值：6～16分
命题趋势 本讲是现代生物科技专 题的重点，考查频率较 高，预计明年的全国卷 中，以非选择题的形式 考查基因工程的原理、 操作技术及应用的可能 性较大
2 ．若要利用某目的基因 ( 见图甲 ) 和 P1 噬菌体载体 (见图乙 ) 构建重组 DNA( 见图 丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC) 和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( D )
A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
二、基因工程的基本操作程序
1．目的基因的获取 (1)目的基因：编码蛋白质的基因_ 扩增目的基因、利用 DNA合成仪 人工合成。 ________________
2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 稳定存在 ， (1)目的：使目的基因在受体细胞中 ____________ 表达 和发挥 并可以遗传给下一代；使目的基因能够 ________ 作用。 启动子 、 (2)基因表达载体的组成：目的基因、__________
1．判断正误，正确的画“√”，错误的画“×”。 (1) 限制性核酸内切酶、 DNA 连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶。
( × )
(2)DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合，形成重组 DNA。 ( × ) (3)E·coli DNA连接酶既可以连接平末端，又可以连接黏性末端。( × ) (4)Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶。 ( × )
1．基因工程的诞生 (Ⅰ ) 2．基因工程的原理 及技术(含PCR技 术)(Ⅱ) 3．基因工程的应用 (Ⅱ ) 4．蛋白质工程(Ⅰ)
栏目导航
考 考 点 点 一 二
考
点
三
考
点
四
考点一
基因工程的操作工具及程序
一、基因工程的基本工具
1．限制性核酸内切酶 原核生物 中分离。 (1)来源：主要从____________
B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
解析 解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用 EcoRⅠ 和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的 目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。
(5)基因表达载体中含有启动子和终止密码子。基
因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同。( × )
(7) 目的基因导入马铃薯细胞后，可随着马铃薯 DNA分子的复制而复制，传给 子代细胞并表达。( × ) (8) 应用 DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其 是否表达。( × )