功能蛋白质组学研究方法课件
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功能蛋白质组学的研究方法说实话功能蛋白质组学的研究方法这事,我一开始也是瞎摸索。
我最开始尝试的是双向电泳法。
这就好比给蛋白质们分房子,不同大小和电荷的蛋白质住在不同的地方。
我先准备好样本,把蛋白质提取出来,这个提取过程可得小心着,就像从满满当当的杂物堆里找特定的东西,稍微不注意就可能破坏了蛋白质。
可是第一次做的时候,我就搞砸了,提取的过程可能某个试剂加错了量,结果跑出来的电泳胶一团乱麻,根本分不清哪个是哪个。
后来又试了几次,慢慢熟练了试剂的量,还有各种操作的顺序。
比如说要保持低温,提取过程要迅速,就像是在处理很容易变质的食材一样。
还有就是质谱分析。
哎呀,这个就更复杂了。
我一开始对这个仪器是完全摸不着头脑。
感觉就像是面对着一个超级复杂的机器人,不知道怎么给它下指令。
我试过直接把样本送进去,但是得到的数据根本没法用。
后来才知道,在做质谱之前,要对蛋白质做很多预处理。
比如说要对蛋白质进行酶切,这是对蛋白质进行“解剖”,把它们切成小段,这样质谱仪才能更好地识别。
而且数据处理也是个大难题。
那些分析软件的参数设定,简直如同迷宫。
我刚开始随随便便设置个参数就跑数据,结果可想而知。
后来也是慢慢向导师请教,向有经验的师兄师姐学习,才知道不同的样本类型,不同的研究目的,参数得精心调整。
Western Blot也是经常用到的,用来检测蛋白质。
这个就像是给特定的蛋白质贴标签找出来一样。
我做的时候,转膜这个步骤老是出问题。
当时我用的那个滤纸和膜没有很好的对齐,就像拼图没拼好一样,结果蛋白质转移得不完全。
后来就特别注意这些小细节,每次都小心翼翼把它们对齐才继续往下做。
目前我还在尝试其他方法,像蛋白质芯片技术。
这个对样本要求很高,就像盖房子对地基要求高一样。
面对这个,我还是半懂不懂的状态,要是有了进展再跟你说吧。
反正做功能蛋白质组学的研究方法这些事儿啊,得特别细心,不怕失败,不断尝试。