高效液相色谱法同步测定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量

WORD格式可编辑蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。

结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。

（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。

关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。

人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。

硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。

亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。

亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。

主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。

外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。

由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。

食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。

硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。

硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。

联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。

食品中亚硝‎酸盐的检测‎方法方法一：亚硝酸盐快‎速检测管使用说明：方法原理：按照国标G‎B/T 5009.33做成的‎速测管，与标准色卡‎比较定量。

操作方法：1. 食盐中亚硝‎酸盐的快速‎检测及食盐‎与亚硝酸盐‎的快速鉴别‎：用袋内附带‎小勺取食盐‎1平勺，加入到检测‎管中，加入蒸馏水‎或纯净水至‎1ml刻度‎处，盖上盖，将固体部分‎摇溶，10分钟后‎与标准色板‎对比，该色板上的‎数值乘上1‎0即为食盐‎中亚硝酸盐‎的含量mg‎/ kg，（国标规定食‎盐（精盐）中亚硝酸盐‎的限量卫生‎标准应≤2‎mg/kg）。

当样品出现‎血红色且有‎沉淀产生或‎很快退色变‎成黄色时，可判定亚硝‎酸盐含量相‎当高，或样品本身‎就是亚硝酸‎盐。

2. 液体样品检‎测：直接取澄清‎液体样品1‎m l加入到‎检测管中，盖上盖，将试剂摇溶‎，10分钟后‎与标准色板‎对比，找出与检测‎管中溶液颜‎色相同的色‎阶，该色阶上的‎数值即为样‎品中亚硝酸‎盐的含量m‎g/L（以NaNO‎2计）。

（牛乳及豆浆‎也可直接检‎测，结果不得超‎过0.25mg/L ，有颜色的液‎体样品可加‎入一些活性‎炭脱色过滤‎后测定）。

3. 固体或半固‎体样品检测‎：取粉碎均匀‎的样品1.0g或1.0ml至1‎0ml比色‎管中，加蒸馏水或‎去离子水（纯净水）至刻度，充分震摇后‎放置，取上清液（或过滤或离‎心得到的上‎清液）1.0ml加入‎到检测管中‎，盖上盖，将试剂摇溶‎，10分钟后‎与标准色板‎对比，该色板上的‎数值乘上1‎0即为样品‎中亚硝酸盐‎的含量mg‎/kg，L（以NaNO‎2计）。

如果测试结‎果超出色板‎上的最高值‎，可定量稀释‎后测定，并在计算结‎果时乘上稀‎释倍数（如从10m‎l比色管中‎取出1.0mL转入‎另一支10‎m l 比色管‎中，加水至刻度‎，从中取1.0mL加入‎到检测管中‎测定，测试结果乘‎上100（倍稀释）即为样品中‎亚硝酸盐的‎含量。

柱前衍生-高效液相色谱法测定食品中的亚硝酸盐袁　圆，崔晓娇，周金沙*，尹芳平，黄　亮，夏炜杰（长沙市食品药品检验所&国家酒类产品质量检验检测中心，湖南长沙 410000）摘　要：目的：建立柱前衍生-高效液相色谱法测定食品中亚硝酸盐含量的检测方法。

方法：样品经水超声提取，经对氨基苯磺酸与盐酸萘乙二胺衍生显色生成紫红色的偶氮化合物（目标物）后，用高效液相色谱仪进行检测分析。

采用Agilent 5 TC-C18(2)色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm）进行分离，外标法定量。

结果：目标物在0.015～0.250 mg/L呈良好的线性关系。

高、中、低3水平浓度加标，提取回收率为83.3%～96.0%（n=6），相对标准偏差为1.1%～5.3%，日内精密度范围为1.0%～3.8%（n=6），日间精密度范围为2.3%～7.8%（n=3）。

结论：该方法能够有效消除氯离子等阴离子和色素对本实验的干扰，建立的分析方法灵敏度、准确度、精密度和回收率好，适用于食品中亚硝酸盐的检测。

关键词：亚硝酸盐；高效液相色谱法；柱前衍生化Determination of Nitrite in Food by Pre-Column Derivatization-High Performance Liquid Chromatography YUAN Yuan, CUI Xiaojiao, ZHOU Jinsha*, YIN Fangping, HUANG Liang, XIA Weijie (Changsha Institute for Food and Drug Control & National Alcohol Products Quality Inspection and TestingCenter, Changsha 410000, China)Abstract: Objective: To establish a method for the determination of nitrite in food by pre-columnderivatization-high performance liquid chromatography. Method: The samples were extracted with water by ultrasonic, and derivatized with p-aminobenzenesulfonic acid and naphthalene ethylenediamine hydrochloride to produce purple-red azo compounds (targets), which were detected and analyzed by high performance liquid chromatography. An Agilent 5 TC-C18(2) chromatographic column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) was used for separation and quantification by external standard method. Result: The target substance showed a good linear relationship in the concentration range of 0.015～0.250 mg/L. The high, medium and low concentrations were spiked. The extraction recoveries ranged from 83.3% to 96.0% (n=6). The relative standard deviation was The precision ranged from 1.1% to 5.3%, the intra-day precision ranged from 1.0% to 3.8% (n=6), and the inter-day precision ranged from 2.3% to 7.8% (n=3). Conclusion: The method can effectively eliminate the interference of chloride ions and other anions and pigments on this experiment. The established analytical method has good sensitivity, accuracy, precision and recovery rate, and is suitable for the detection of nitrite in food.Keywords: nitrite; high performance liquid chromatography; pre-column derivating method亚硝酸盐，是含有亚硝酸根阴离子（NO2−）的盐，是一种常用的食品添加剂，可作为护色剂、抑菌剂和防腐剂，在腌肉、腌制的蔬菜和其他食品中应用比较广泛。