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关于我国SPF鸡（蛋）发展情况的综述摘要本文从SPF鸡（蛋）的概念，SPF鸡群的建立程序、生产要求、饲养管理及环境监测注意事项等方面对SPF鸡（蛋）进行了简要的介绍，同时阐明了SPF鸡（蛋）的发展历史及国内外的生产现状，综合分析了我国SPF鸡（蛋）产业发展中存在的主要问题并提出了改进措施，以期对我国SPF鸡（蛋）产业的发展提供良好的借鉴作用。
一、SPF动物及SPF鸡（蛋）概述1.1SPF动物的概念SPF动物即无特定病原体动物（Specific Pathogen Free animals，SPF），是指动物体内没有特定的微生物或寄生虫存在，但可能带有非特定的微生物和寄生虫的动物，也称三级动物。
该级别的动物除了一、二级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病性病原以及对科研试验具有明显干扰作用的病原。
SPF动物来源于无菌动物，必须饲养在屏障系统或隔离系统中，实行严格的微生物学控制。
11.2 SPF鸡（蛋）的概念SPF鸡指无特定病原体鸡，SPF蛋指不含有国际规定的19种病原体（禽腺病毒、产蛋下降综合症、禽脑脊髓炎病毒、禽流感病毒、多杀性巴氏杆菌、禽呼肠孤病毒、禽白血病、禽贫血病毒、鸡痘病毒、鸡副嗜血杆菌、传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性喉气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒、鸡败血支原体、鸡滑液囊支原体、鸡新城疫病毒、网状内皮增生症病毒、鸡白痢沙门氏菌）2和相关抗体的卵。
SPF鸡的培育建立在对无菌鸡培育成功的基础上，最初是通过挑选生产性能良好的母鸡，经各种检测证实无主要传染病病原（特别是可经蛋垂直传播的病原），对种蛋消毒，孵育而成。
SPF鸡(蛋)是生物制品的原材料。
主要用于生物制品及有关制品的疫苗制作、检验、检疫，其生产繁育条件在万级净化环境设施条件下进行。
31.3 SPF鸡群的建立一个指定的SPF鸡群是由未感染上述19种疾病的垂直传播病原的鸡建立的。
这个鸡群建立于连续两代检测的指定SPF鸡群。
鸡胚在医学中的应用摘要：鸡胚是研究动物发育的重要模型，已被大量用于医学各个学科的研究。
对鸡胚的研究可以追溯到古希腊著名的博物学家亚里士多德，之后被很多生物学家予以深入的研究。
现在对鸡胚发育的过程已有清楚的了解和认识。
鸡胚在疫苗的开发和研究中更是有着不可替代的作用。
本文主要阐述了鸡胚胎在发育生物学、肿瘤、神经、干细胞和免疫等研究领域中的应用。
关键词：鸡胚；发育；肿瘤；神经；干细胞；免疫正文：1鸡胚与发育生物学鸡胚在发育生物学上作为一个重要模型系统已具有悠久的历史，一个多世纪以来，鸡胚已经成为洞悉发育过程和胚胎细胞命运的一个经典实验模型。
随着生物技术的发展，如体内电穿孔技术、胚胎干细胞、新的转基因技术和基因组测序完成等，这些已经使鸡胚模型系统已变得更加强大，再结合传统的移植和世系追踪等技术，鸡胚已成为最优秀的实验系统之一[1]。
随着模式生物鸡的基因资源增加、胚胎的易得性和RNA干扰方法的应用，这些都使研究胚胎发育中众多基因的功能变得简单容易。
因此，鸡胚也成为众多对基因功能感兴趣的脊椎动物学家首选的研究系统[2]。
2 鸡胚和肿瘤宫颈癌是一种严重威胁女性健康和生命安全的恶性肿瘤[3,4]，近年来宫颈癌的治疗手段有了改进，但其生存率仍然有待提高，宫颈癌的动物模型对提高宫颈癌的实验研究水平具有重要意义。
有人用BALB／c~nude、SCID小鼠或大鼠作为人宫颈癌移植瘤的动物模型[5,6,7]。
鸡胚作为人类疾病模型有许多优点[8]，有人把鸡胚作为其它癌细胞如人结肠癌细胞系HT-29、成釉细胞瘤细胞、骨肉瘤细胞移植受体[9,10]，或作为肿瘤新生血管形成、肿瘤侵袭和远处脏器转移潜能，以及抗肿瘤药物作用机制探讨等方面研究的体内实验模型[11]，为建立宫颈癌鸡胚模型提供了可能性与借鉴方法。
3 鸡胚和神经生物学3.1建立鸡胚神经管缺陷模型鸡胚胎内注射氨甲喋呤(MTX)，制作鸡胚神经管缺陷动物模型。
鲍南、施诚仁等选用上海农业科学院“菜杭”鸡的受精蛋552枚，分成3组，分别为药物(MTX)注射组、生理盐水注射对照组及正常对照组。
SPF鸡场饲养管理体系在规模化鸡场中的应用随着我国养殖业的迅猛发展，养鸡场规模化、集约化、工厂化程度得到大幅度提高，与此同时，疫病的发生也出现了多样性、复杂性，可谓旧病未除，新病又来。
这样的现实状况迫使许多养殖户高密度使用疫苗和兽药来进行疫病防控，结果既耗费人力、物力导致饲养成本增加，又影响鸡的生长，造成药物残留的超标。
在这样的现实背景下，乾元浩南京生物药厂SPF鸡场12年来一直安然无恙。
我们在饲养SPF鸡的时候，不接种任何疫苗，不使用任何兽药，能够保证鸡群健康生长，其关键在于我们建立了一整套行之有效的综合饲养管理体系，通过采取一切有效的生物安全防范措施，为鸡群建立一道道铜墙铁壁，阻止病原微生物的侵入，确保鸡群不受疫病困扰。
规模化养殖场如果能够借鉴SPF鸡场在饲养管理方面的经验，一定能够有效防控疫病，大大降低风险，获得更多的收益。
1 我国目前鸡病流行的特点和原因分析1.1 疾病的种类增多，继发感染和并发感染的现象普遍存在，发病率和死亡率增加。
主要原因：①鸡场分布集中，导致饲养密度增加，病原传播和变异的机会增多；②鸡群饲养的环境日益恶化。
病鸡粪便乱堆，死鸡乱扔，致使鸡场受到病原微生物的严重包围和威胁；③消毒意识淡薄。
虽然任何消毒药都不可能彻底清除病原微生物，但可以使病原微生物的密度降低，以减少发病的概率。
养鸡户平常都很少消毒，遇到鸡病了，才会想到要消毒，但是为时已晚。
另外因为忽视病原微生物对消毒药的耐药问题和使用单一的消毒药也是导致消毒失败的原因。
1.2 免疫鸡群仍然发病主要原因：①免疫抑制病的存在。
如法氏囊病、马立克氏病等；②免疫程序不当。
当地兽医因为不了解种鸡场的母源抗体情况，没有进行抗体检测，他们只能设计固定的免疫程序，针对性不强；③疫苗在贮存和使用过程中的操作失误。
多数人都错误地认为：袋里放有冰块，疫苗就没事，其实疫苗受阳光直接照射很容易失效；④疫苗质量问题。
假疫苗或过期疫苗充斥市场的现象屡见不鲜，个体养鸡户往往缺乏鉴别真假疫苗的能力，受骗上当，叫苦不迭；⑤饲养条件恶劣，有的鸡场基本不搞清洁消毒和卫生防疫工作。
SPF鸡生物安全控制技术作者：王春玲李峰张世栋亦飞李新华来源：《家禽科学》2016年第01期中图分类号：S831.4 文献标识码：C 文章编号：1673-1085（2016）01-0022-04SPF鸡生物安全体系是一个复杂的系统工程。
SPF鸡舍通过屏障系统净化空气，隔离病菌，以此控制疾病，严格把关每一个可能造成疾病传播的环节，在空间上重视从外部环境的影响，在整个生产系统中关注各部分的联系，在时间上将最佳的饲养管理条件和传染病综合防治措施贯彻于SPF鸡养殖生产的全过程，强调了不同生产环节之间的联系及其对SPF鸡健康的影响。
1 采取隔离措施隔离措施就是让SPF鸡群远离传染来源的措施，防止疫病传入SPF鸡场，在SPF鸡场内部阻止疾病在SPF鸡群间的传播，这是疾病控制的第一道防线。
场内建筑的分区：①场区应设有生产区、办公区、生活区、辅助生产区、粪便及废弃物处理区。
应按从净化区向污染区不可逆走向的要求进行布局；②生活管理区设在场区常年主导风向上风处及地势较高处，主要包括生活设施、办公设施及与外界接触密切的生产辅助设施，设主大门和消毒池；③生产区主要包括育雏区、育成区、产蛋区，在不同区内建设育雏舍、育成舍、产蛋舍；④SPF鸡舍设后门，与污道相接；⑤场区绿化要结合区之间、舍与舍之间的距离、遮荫及防风等需要进行。
可根据当地实际，种植能美化环境、净化空气的树种和花草，不宜种植有毒、飞絮的植物；⑥大门、生产区入口要建一宽同门口、长于汽车轮一周半的消毒池及人员消毒池；⑦鸡场工作人员必须更换工作鞋，经人员消毒池，方可出入；饲养人员更不能随意外出，应严格控制离开场区次数；⑧SPF鸡场饲养的种鸡大多数自己孵化，从国外引种。
不同日龄的SPF鸡群应分舍饲养，不得混养。
实行整舍的“全进全出”制。
每栋SPF鸡舍用后应保留至少3～4周以上的空舍时间。
SPF鸡舍工具专用，不得带出鸡舍或舍间串用。
预防啮齿类动物进入鸡舍；⑨饲料经过高温高压进入SPF鸡舍；饮水经过反渗透过滤无菌处理，方可应用；粪便当天清除舍外；⑩SPF鸡饲养人员必须经更衣、淋浴洗澡、更换舍内无菌工作服和可消毒工作鞋后方可进入SPF鸡舍。
热点关注要制造优质疫苗必须对原材料加以苛刻选择，选用更优化的SPF 蛋是良心疫苗企业的标准。
因此，6月25-26日，由山东省畜牧协会、国家SPF 禽类种子中心主办，山东益吉达生物科技有限公司承办的“中美SPF 鸡种源生产及技术创新研讨会”在美丽的济南舜耕山庄召开，来自全国各地40多家疫苗生产企业代表、SPF 鸡场代表150余人汇聚一起，分享来自美国、法国和国内的业界专家对国内SPF 鸡生产企业的现状与困境、疫苗生产企业的未来所展开的探讨。
SPF 是指无特定病原体，SPF 蛋是指不含有国际规定的19种病原体和相关抗体的卵。
SPF 鸡和鸡胚是进行生命科学研究的高标准化实验动物，是进行病毒学研究和各种人、禽生物制品生产和鉴定的标准化原材料，其质量控制的好坏，直接关系到研究成果、产品质量、人民群众健康。
自1986年建了我国第一个SPF 鸡群至今已经30年。
前20年，SPF 鸡胚年产量一直维持在400～500万枚。
为提高兽用生物制品的质量，专家极力推荐用法规的形式规定禽用活疫苗的生产和检验必须使用SPF 鸡（鸡胚）。
由于农业部重视并采纳专家意见，将禽用活疫苗的生产和检验必须使用SPF 鸡（鸡胚）列入《中华人民共和国兽药典》。
SPF 鸡（鸡胚）的质量和鸡舍的饲养设施息息相关，SPF 鸡的饲养设施有两种，一是隔离系统，也就是通常所说的隔离器，实现局部隔离环境的实验动物笼器具。
使饲养环境保持一定压力和洁净度，用以避免环境污染动物（正压）或动物污染环境（负压）。
材质有玻璃钢、不锈钢等。
二是屏障系统，以一定建筑围护结构配以空气净化通风等设备，使饲养环境保持一定压力和洁净度，符合动物居住的要求。
严格控制人员、物品和空气的进出，以便大规模饲养SPF 级实验动物的设施。
山东是全国畜牧大省、家禽大省，产业基础雄厚，肉蛋奶总产量约占全国的1/10，是我国重要的畜牧业生产和加工出口基地，同时，也是国内最早成功培育SPF 鸡的省份。
SPF鸡胚孵化前后的营养成分对比研究刘青霄① 党斌② 朱琦③ 孙珂② 宋孟泽① 孙淑红*①（①山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 ②济南赛斯家禽科技有限公司山东济南③济南百准生物检验有限公司山东济南）摘要本试验旨在比较研究11日龄与0日龄的SPF鸡胚粉中的各种营养成分含量。
选择济南赛斯家禽科技有限公司的11日龄与0日龄SPF鸡胚蛋，经蒸煮等前期处理后，用真空冷冻干燥机将SPF鸡胚蛋冷冻干燥后研磨成粉，利用凯氏定氮仪等仪器以及营养检测试剂盒对其营养成分进行检测。
结果表明，11日龄的SPF鸡胚粉中的营养成分含量有变化，尤其牛磺酸、蛋白质、维生素E、钙、磷等营养成分显著优于0日龄SPF鸡胚粉，其中，牛磺酸提高为孵化前的10.1倍。
本研究为SPF鸡胚粉研制以及进一步应用奠定了一定的理论基础。
关键词SPF鸡胚粉11日龄鸡胚0日龄鸡胚营养成分中图分类号：S831.4+4 文献标识码：A 文章编号：1007-1733(2019)06-0001-04鸡胚蛋是指经过孵化还没有变成小雏的受精蛋。
其营养成分极高，食用后可以强身健体[1]，鸡胚蛋的蛋黄中含有丰富的卵黄蛋白，卵黄不仅是胚胎发育的重要能量来源,也是脂溶性维生素和抗体由种鸡传递给鸡胚的桥梁[2]。
鸡胚蛋的蛋清里富含蛋白质和19种以上的氨基酸，还有钙、铁、锌、硒等盐类，还有丰富的维生素A、B1、B2、E等，还有生物体胚胎发育所必需的蛋白酶、淀粉酶、溶菌酶等酶类。
所以自古以来就有很多人服用鸡胚来补充营养，增强自身抵抗力。
不仅如此，毛蛋也成为一种美味的路边小吃，备受人们喜爱。
然而市场上的毛蛋大都是非正常死亡的死胚蛋。
这种鸡胚蛋中含有大量病原微生物，包括大肠杆菌、葡萄球菌、伤寒杆菌、变形杆菌等，食用这种死胚蛋容易引起食物中毒[3]，引发疾病产生，食用后具有潜在危险。
因此需要找到一种既没有病原微生物又含有较高营养价值的鸡胚蛋。
然而无特定病原(SPF)鸡胚蛋,是指生长在屏障系统或隔离器中，体内无特定的致使鸡群生病的病原微生物的鸡胚蛋。
鸡胚胎在生命科学研究中的应用摘要：鸡作为优秀的模式动物在生命科学研究中的作用日益受到人们重视，其L}I以鸡胚胎的贡献尤为突出本文简要综述了鸡胚胎在发肯生物学、肿瘤、再生、神经生物学和胚胎十细胞等研究领域中的应用，同时对鸡基冈组和鸡胚胎的研究方法也进行了简单探讨。
关键词：鸡；胚胎；发育生物学；再生；鸡以其独特的生物学特性已经成为研究许多生物学问题的重要模式生物。
作为一种中间进化模式生物介于哺乳动物和低等脊椎动物之间，鸡被人们认为是非哺乳动物中研究遗传学最重要的模式生物之一。
另外，由于鸡的胚胎发育起源于卵而非子宫，便于体外操作与观察，因此鸡也成为胚胎生物学和发育生物学研究中的优秀动物模型之一。
目前，鸡已经成为发育生物学、免疫学、遗传学、病毒学、癌症和细胞生物学等学科的重要实验系统，并且获得了许多重要的研究成果。
本文主要以鸡胚胎为探讨对象，简要综述鸡胚在生命科学研究中的应用和重要[1]。
1．鸡的基因组学近年来坞的基因组学发展迅速，已完成的鸡基因组测序结果表明：鸡与哺乳动物在3．1亿年前具有共同的祖先，在进化距离上没有被其他基因组所涵盖，这使我们能够更好地理解基因及其调控序列、基因组／染色体组型进化和保守的规律性。
作为鸟类中第一个被测序的物种，鸡基因组测序必将会对禽类功能基因组时代的各个研究方面起到巨大的推动作用[2]，也必然对禽类中控制重要性状基因的分离和鉴定有所帮助。
同时，鸡基因组测序为家禽育种与禽类分子生物学研究的结合提供一个很好的切入点，使禽类科学与整个生命科学的研究联系起米，并可广泛应用于农业和医药领域[3]。
2．鸡胚胎与发育生物学2O世纪90年代以来，发育生物学的研究取得'r突飞猛进的发展，发育生物学已成为当今生命科学最活跃的研究领域之一。
在发育生物学的形成和发展过程中，许多划时代的研究成果往往与一些模式生物相关。
由于进化的原因，细胞生命在发育的基本模式方面具有一定的同一性，人们往往利用位于生物复杂性阶梯较低级位置上的物种来研究发育的共同规律，以构建发育的普遍原理[4]。
中国兽药杂志２００２等我国ＳＰＦ鸡和ＳＰＦ鸡胚的生产及应用现状程水生农业部实验动物管理办公室[收稿日期] 2002-02-07 [文献标识码] B [文章编号] 1002-1280(2002)07-0006-03 [中图分类号] S815［摘要］ 通过对7家SPF鸡场的实地调查和对全国28个兽医生物制品厂及7个中试车间的函调了解到已投入生产的为16040m2Äê×î´óÉú²úÄÜÁ¦Îª936.8万枚年需求量约为1500万枚在2000年的疫苗检验中共应用SPF鸡28348只SPF鸡的质量检测情况不容乐观［关键词］ SPF鸡生产中华人民共和国兽用生物制品规程男从事实验动物及兽用生物制品研究及管理２００２８／程水生7ÆäSPF¼¦ºÍSPF ¼¦ÅßµÄÓ¦ÓÃÇé¿öδ°üÀ¨ÔÚͳ¼Æ½á¹ûÄÚ)ÏÔʾ½öÊÞÒ½ÉúÎïÖÆÆ·³§ºÍÖÐÊÔ³µ¼ä¶ÔS P F¼¦ÅßµÄÄêÐèÇóÁ¿½«´ïµ½1369.6Íòöȫ¹ú¶ÔS P F¼¦ÅßµÄÄêÐèÇóÁ¿Ô¼Îª1500ÍòöS P F¼¦ÅߵĹ©Ó¦Ð貹ȱ564Íòö»¹¿ÉÒÔ¸ù¾Ý²¡¶¾»îÒßÃçµÄʵ¼ÊÉú²úÁ¿µÈÊý¾Ý¶ÔS P F¼¦ÅßµÄÄêÐèÇóÁ¿½øÐÐÍÆËãÈ«¹úÄêÉú²ú¼¦Ð³ÇÒß»îÒßÃ缦´«È¾ÐÔÖ§Æø¹ÜÑ׶þÁª»îÒßÃç¹²¼Æ78225280mLÓ¦ÐèSPF¼¦ÅßÔ¼9778160ö°´Ã¿4000ÓðÐè1öSPF¼¦Åß¼ÆË㼦´«È¾ÐÔ·¨ÊÏÄÒ»îÒßÃç618626ÍòÓðÓ¦ÐèSPF¼¦ÅßÔ¼618626ö°´Ã¿3000ÓðÐè1öSPF¼¦Åß¼ÆË㼦¶»»îÒßÃç216901ÍòÓðÓ¦ÐèSPF ¼¦ÅßÔ¼542250ö×ÛºÏÆðÀ´ÐèSPF¼¦ÅßÔ¼1367Íòö×ܼÆÐèSPF¼¦ÅßÔ¼1467Íòöȫ¹ú¸÷ÊÞÒ½ÉúÎïÖÆÆ·³§ºÍÖÐÊÔ³µ¼ä¹²ÓÐÓ²Öʼ¦ÓøôÀëÆ÷175̨(¹þÊÞÑÐ96̨÷ÀïÑǶ¯Îï±£½¡ÓÐÏÞ¹«Ë¾14̨ÄϾ©Ò©Ðµ³§8̨ÔÚ2000ÄêµÄÒßÃç¼ìÑéÖй²Ó¦ÓÃSPF¼¦28348Ö»1.5¼à²âÔÚSPF¼¦µÄ¼à²â·½Ãæ¾ù°´¹ú¼ÊͨÓõļà²âÒªÇó½øÐмà²âÔÚ6ÖÜÁäÖ®ºóÿÔ°´ÖÖ¼¦µÄ5%ÓÐ1¼ÒµÄ¼ì²â´ÎÊýÉÔÉÙ8´ÎÓеļì²âƵÂʵÍ(ÿÄê2Óеļì²âƵÂÊËä±È½Ï¸ß2 ´æÔÚµÄÎÊÌâÔÚũҵϵͳµÄʵÑ鶯ÎïÉú²úºÍÓ¦ÓÃÖÐS P F¼¦ËäÈ»ÊÇÉÏÁ˵ȼ¶ÉõÖÁÔÚ²¿·ÖÊ¡(Èçɽ¶«ÁÉÄþÊ¡)ʵÑ鶯ÎïÐÐÒµÖÐÆðµ½ÁìÍ·ÑòµÄ×÷ÓÃÔÚS P FÖÖµ°·½Ãæ¸÷S P F¼¦³¡ÔÚÒýÖÖʱ¾ùÊÇ´Ó¹úÍâ½ø¿ÚÓÐʱÉõÖÁÖÖµ°µ½ÁË»ú³¡ºó¼¸ÌìÄÚÈ¡²»µ½»õÔÚS P F¼¦µÄÖÊÁ¿¼ì²â·½Ãæ¸÷S P F¼¦³¡¶¼ÊÇ×Ô¼º¼ì×Ô¼ºµÄ²úÆ··½·¨¼ì²â´ÎÊýûÓÐͳһ±ê×¼Èç¼ì²â´ÎÊýÉÙ¼ì²âƵÂʵ͵ÈÓû§¾-³£¶ÔS P F¼¦µ°µÄÖÊÁ¿Ìá³öÖÊÒÉÎÞ·¨µÃµ½Óû§µÄÈ«ÃæÈϿɾùÆÈÇÐÏ£ÍûÅ©Òµ²¿Ö¸¶¨Ò»¼Òͨ¹ý¼ÆÁ¿ÈÏÖ¤µÄÖÊÁ¿¼ì²âµ¥Î»²¢¶¨ÆÚ¹«²¼¼ì²â½á¹û¼õÉÙ²úÁ¿哈兽研２５７６ｍ２出现这一现象的原因而是ＳＰＦ鸡胚应用方面的要求未得到有效落实 ２０００年底以后各生物药品厂生产所有禽用病毒活疫苗必须使用ＳＰＦ鸡胚因此有些生药厂根本未应用ＳＰＦ鸡胚生产病毒活疫苗只部分应用了ＳＰＦ鸡胚以及加入ＷＴＯ后我国兽用生物制品行业面临的挑战ＳＰＦ鸡胚的生产和使用状况进行改进按照国家质量技术监督局１９９９年１１月１０日发布ＧＢ／Ｔ １７９９９．１-１９９９ＧＢ／Ｔ １７９９９．３-１９９９ＧＢ／Ｔ １７９９９．５-１９９９ＧＢ／中国兽药杂志２００２等Ｔ １７９９９．７-１９９９ＧＢ／Ｔ １７９９９．９-１９９９）对全国各厂家生产的ＳＰＦ鸡进行质量检测不定期地对各厂家生产的ＳＰＦ鸡进行质量抽检农业部定期公布抽检结果中华人民共和国兽用生物制品规程进一步强调各兽医生物药品生产企业在禽用病毒活疫苗生产中必须全部使用ＳＰＦ鸡胚并规定最后期限最好将最后期限定为２００３年底农业部应取消该产品的生产文号３．３ 从２００３年开始实验动物许可证管理办法（试行）并通知各科研农业部兽药审评委员会否则不予受理作者在调查期间得到被调查企业和黑龙江省山东省实验动物管理办公室以及辽宁省科委的大力协助加拿大强制推行１６个ＭＲＬｓ据ＡＮＩＭＡＬ ＰＨＡＲＭ Ｎｏ．４８９ 报道加拿大卫生部的Ｄｒ． Ａｎｎｅ ＭｃＣｌｅｌｌｌａｎ介绍了食品动物防止疾病常用兽药的ＭＲＬｓＭＲＬ／（ｍｇ。
我国SPF鸡、SPF鸡蛋的生产和使用概况
程水生
【期刊名称】《中国兽药杂志》
【年(卷),期】2007(41)9
【摘要】20世纪80年代，农业系统进行SPF鸡技术的开发研究。
20多年来，SPF鸡、SPF鸡蛋已在兽用生物制品企业推广使用，并取得了较好的经济效益。
特别是2003年中华人民共和国农业部公告第202号、2004年中华人民共和国国务院令第404号和中华人民共和国农业部公告第442号颁布以来，SPF鸡蛋和SPF 鸡的使用量明显增加（据不完全统计，2001年全国使用SPF鸡为28348只，2006年约73000只），正负压SPF鸡隔离器的数量也明显增多（2001年为96台，2007年为1232台），
【总页数】1页(P51)
【作者】程水生
【作者单位】中国兽医药品监察所,北京,100081
【正文语种】中文
【中图分类】S851.66
【相关文献】
1.提高SPF鸡蛋合格率的综合措施 [J], 杨金兴;王友令;欧阳文军;袁小远
2.目前我国SPF鸡隔离器使用现状、存在问题与对策 [J], 程水生;高艳春
3.我国SPF鸡和SPF鸡胚的生产及应用现状 [J], 程水生;陈光华
4.关于使用SPF鸡胚生产兽用生物制品的思考 [J], 秦玉明;刘国卿
5.SPF鸡蛋在家禽疫苗生产中的应用初报 [J], 无
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一、实习背景鸡胚培养是生物技术领域的一项重要技术，广泛应用于病毒学、免疫学、遗传学等研究领域。
通过在鸡胚中培养病毒，可以研究病毒的复制、传播机制以及疫苗的研发等。
为了提高自身对鸡胚培养技术的掌握，我参加了为期两周的鸡胚培养实习。
二、实习目的1. 熟悉鸡胚培养的基本原理和操作流程。
2. 掌握鸡胚接种、传代、观察等实验技术。
3. 了解鸡胚培养在病毒学研究中的应用。
三、实习内容1. 鸡胚培养基本原理鸡胚培养是利用鸡胚作为宿主，在适宜的条件下，使病毒在其中复制、增殖，从而达到研究病毒的目的。
鸡胚具有以下优点：（1）繁殖速度快，易于操作。
（2）病毒在鸡胚中生长条件稳定，有利于病毒学研究。
（3）鸡胚具有广泛的病毒易感性，可以用于多种病毒的研究。
2. 鸡胚培养操作流程（1）鸡胚选择：选择健康的鸡胚，一般选用9-14天的鸡胚。
（2）鸡胚消毒：将鸡胚置于75%酒精中浸泡30秒，然后用无菌生理盐水冲洗。
（3）接种：将病毒悬液滴加于鸡胚尿囊腔中，每只鸡胚接种量为0.2-0.5ml。
（4）孵育：将接种后的鸡胚置于37℃恒温箱中孵育，观察病毒生长情况。
（5）观察：定期观察鸡胚的生长状况，记录病毒复制情况。
（6）收获：当鸡胚出现病变时，收集尿囊液，进行病毒分离、鉴定等实验。
3. 鸡胚培养在病毒学研究中的应用（1）病毒分离：利用鸡胚培养可以分离出多种病毒，如流感病毒、新城疫病毒等。
（2）病毒鉴定：通过鸡胚培养可以观察病毒的形态、生长特性等，从而对病毒进行鉴定。
（3）病毒疫苗研发：利用鸡胚培养可以筛选出具有免疫原性的病毒抗原，为疫苗研发提供依据。
四、实习收获1. 熟悉了鸡胚培养的基本原理和操作流程，掌握了鸡胚接种、传代、观察等实验技术。
2. 深入了解了鸡胚培养在病毒学研究中的应用，提高了自己的科研能力。
3. 通过实习，培养了严谨、细致的科研态度，提高了自己的动手能力。
五、实习总结本次鸡胚培养实习让我受益匪浅。
在实习过程中，我不仅学到了鸡胚培养的基本知识和操作技能，还了解了鸡胚培养在病毒学研究中的应用。
SPF鸡及鸡胚与其在实际研究中的应用摘要：在参考大量的文献与材料后，本文概述了SPF鸡及鸡胚的概念，介绍了我国SPF鸡及鸡胚的发展历史和现状，着重阐述了SPF鸡及鸡胚在实际研究中的应用与其在疫苗生产上的重要性。
关键词SPF鸡鸡胚应用1 SPF动物概念无特定病原体动物（Specefic Pathogen Free animals，SPF）是指机体内没有特定的微生物和寄生虫的存在的动物，但非特定的微生物和寄生虫是容许存在的[1]。
故实际上是指无传染病的健康动物，SPF动物也称三级动物，该级别的动物除了一、二级别动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病性病原以及对科研实验具有明显干扰作用的病原，是实验动物的范畴的概念。
实验动物是指经人工饲养、繁育，对其携带的微生物及寄生虫实行控制，遗传背景明确或来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检验以及其他科学实验的动物[2]。
SPF动物来源于无菌动物，必须饲养在屏障系统或隔离系统中，实行严格的微生物学控制。
2 SPF鸡及鸡胚与其微生物控制SPF（Specefic Pathogen Free）鸡就是无特定病原鸡，是指生长在屏障系统或隔离系统中，无国际、国内（尤其是国内）流行的主要鸡传染性病病原，具有良好的生长和繁殖性能的鸡群[3]。
其所产的蛋即为SPF蛋。
SPF鸡的培育建立在对无菌鸡培育成功的基础来。
SPF鸡的微生物控制，主要是由世界各国、甚至某些生产单位根据国际、国内实际，结合其生产或科研的目的而制定的[4]。
目前，SPF鸡的微生物控制种类，没有国际统一的标准，但有国际共识，每个国家根据自己的实际情况确定需要控制的病原微生物种类[5]。
国外最高级别的SPF鸡及鸡胚监测项目有31种（包括亚型）。
我国于1999年颁布了《SPF鸡微生物质量监测标准》，SPF鸡除了应无鸡的内外寄生虫侵袭外，要消除的病原微生物主要有以下各种[6](见表1)。
此外，一些新的禽病如：鸡病毒性肾炎（ANV）、鸡贫血因子（CAA）、鸡轮状病毒（ARV）等的检查也将引起重视。
培育SPF鸡最初是通过挑选好的母鸡、经各种检测证实无主要传染病病原（特别是可经蛋垂直传播的），对种蛋消毒，孵育成鸡，隔离在无病原微生物的环境中，采用遗传育种方法，反复若干代，不断检查挑选渐次育成[7]。
表1 我国SPF鸡群主要控制的疾病种类3 SPF鸡及鸡胚在实验研究中的结果可信性SPF鸡与鸡胚的优势在于，无主要的传染病、无垂直传染性疾病、无人畜共患病、无对实验研究可能产生干扰的微生物。
SPF鸡与鸡蛋对各种病原有敏锐的感受性，且反应一致，重复性好。
在试验中能取得准确，可靠的结果。
而普通鸡生活在自然环境中，容易受到各种病原微生物污染，尤其是一些亚临床疾病如CAA、REV等大多数垂直传染性疾病、寄生虫疾病等等。
这些鸡，外表健康，不显示症状，一旦承受某种实验或条件性变化，隐性感染被激发，就会造成实验鸡或鸡胚出现非特异性死亡或症状，给实验的结果判断带来极大困难，科学研究难以正常进行[8]。
SPF鸡及鸡胚由于排除了特定的传染病和寄生虫，实验结果准确可靠，是国际上公认的适用于生物医学各个领域研究的国际级别的实验动物。
赵四海等（2006）[9]比较了PubMed数据库中使用各种实验动物的文献总量，发现使用实验动物文献的比重指数（本年度使用实验动物的文献量/本年度数据库收录的文献总量）呈稳中稍降趋势，鸡、鱼、果蝇等非哺乳动物的使用日益得到重视。
使用鸡作为实验动物的文献数量相对稳定，近三十年来均2000多篇，是否利用SPF鸡及其种蛋成为衡量实验精确度的重要标志。
4我国SPF鸡及鸡胚的发展历史与现状在我国，SPF鸡及鸡胚的发展起步比较晚，规模也比较小。
从1979年我国农业部向中国农业科学院哈尔滨兽医研究所下达SPF鸡培育及相关微生物监控技术的研究任务开始，北京生物制品研究所用小型隔离器对美、德两国莱航SPF种进行了小规模实验。
我国于1985年由山东省农科院家禽研究所成功培育出国内第一个SPF鸡群，1991年又建成了当时亚洲规模最大的SPF鸡场——山东无特定病原实验种鸡场[10]。
1986---1991年北京实验动物研究中心执行中国-澳大利亚政府间为期五年的SPF鸡种卵技术合作，建成为我国小儿麻疹疫苗生产提供SPF鸡种卵的全屏障设施，经过10年左右的时间，部分解决了我国人用疫苗SPF鸡卵的供应问题。
上世纪90年代以后，我国的SPF鸡产业进入了一个快速发展的阶段，建立起了一批SPF鸡饲养设施[11]。
山东家禽研究所经过多年的努力也培育出了中国SPF种鸡群[12]。
自1991年开始，我国进入SPF鸡生产技术产业化建设和自主研发中国SPF鸡种鸡的新阶段，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所利用澳大利亚援助的设备和从澳大利亚进口的SPF种卵建成了国内一流的哈尔滨国家级SPF种禽饲养室，并且推出了一整套SPF鸡微生物质量检测方法，采用国内普通鸡（京白鸡）培育出无禽白血病、鸡传染性支气管炎、马立克氏病和新城疫等多种疫病的SPF种鸡基础群，并于1996年以此为基础进行了我国SPF种鸡群培育的研究工作，现已取得了阶段性进展，并建成了国家禽类实验动物种子中心。
自从我国建立SPF鸡群以来，很长一段时间发展缓慢、规模较小，只有山东省农业科学院家禽研究所、北京实验动物中心、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所等有限几家[13]。
2000年由中国农业大学、农业部中监所和山东省农科院家禽所联合起草的国家标准“SPF鸡微生物质量监测标准”颁布实施，这对我国SPF鸡的发展起到了积极的推动作用。
目前，国内已有规模化SPF 鸡场20余家,初具规模，但是SPF鸡的发展还有很长的路要走。
5 SPF鸡及鸡胚在实际研究中的应用鸡作为实验动物，从1789年Pasteur用鸡作禽霍乱的研究开始的。
1902年，Bateson用鸡验证了动物遗传符合孟德尔的遗传定律[14]。
1911年，Rous和Murphy 首次将鸡胚应用于病毒研究[15]。
鸡作为实验动物已有几百年历史了，并用鸡成功的研制出了人类的第一个抗癌疫苗的马立克氏病疫苗。
以鸡为代表的禽类实验动物具有繁殖快、卵生、体外孵化容易控制，试验成本低，一次可获得大量的鸡胚和胚胎细胞的特点，同时在胚胎期，鸡的免疫系统发育不全，鸡胚和鸡胚细胞适宜做多种病毒的培养基，用于禽病的病原学、流行病学、病理学和用于制备禽病诊断的检测试剂和疫苗生产等，用于疫苗的安全性及效力检验等[16]。
而SPF 鸡和鸡胚是从事高水平科研和多种人畜禽生物制品生产、鉴定所不可缺少的实验动物和原材料，在许多领域和实际研究中应用广泛。
（一）鸡广泛应用于：（1）家禽本身科学的研究：包括生理学、免疫学、营养学、疾病学、病理学、遗传学、育种学等各个方面以及与家禽生产息息相关的因素。
在禽病研究中，可排除非目标病原体的干扰作用；在病毒学研究中，鸡胚培养；提供细胞制备用原材料，种毒传代；制备高免血清[17]。
（2）比较医学研究：鸡在人的肿瘤研究上有重要作用。
（3）鸡还广泛的应用在免疫学、遗传学、育种学、放射学等研究方面。
在目前，SPF鸡主要用于研究某些鸡的传染病，以便提出防御的措施，同时还可用于检验生物制品的安全性及免疫原性，以判定生物制品是否能够安全、有效的用于防制传染病的发生。
另外，根据SPF鸡对禽病病毒敏感的特性，可以复制某些传染病用于制造相应的抗原、抗体或探讨其发病机制[18]。
（二）鸡胚应用更为广泛[19]：1 禽类胚胎是理想的生物模式。
鸡胚是在母体外形成的独立的生物体，其发育受遗传控制，在进化过程中，鸡胚形成了一系列完善的保护机制。
此外，鸡胚来源丰富、生长周期短、价格便宜、操作方便，因而容易进行较为直接的剖检和观察，容易做到大样品，多次重复，实验结果较为准确。
2 鸡胚是遗传学研究的理想模式。
因为人类已经有足够的技术引起胚胎遗传性状的改变，并能在短时间内观察到结果，这在遗传学、育种学上有广泛的应用价值。
3 禽类胚胎因免疫发育不完善，因此被广泛的应用于微生物学研究。
一方面，利用鸡胚胎或鸡胚细胞作为病毒的培养基；另一方面，在痘病毒、粘液病毒和疱疹病毒的研究以及某些病毒的分离、鉴定、抗原制备和各种疫苗的生产方面，鸡胚占重要位置。
4 鸡胚是放射科学研究的极好工具，尤其是对局部放射作用的研究。
由于对环境、条件、剂量、照射部位均容易选择和控制，因而实验更为准确、可靠和简便。
此外，鸡胚课广泛用于动物和人类的胚胎学、环境毒理学、化学、发育生理学等研究上。
事实上，在禽胚体内的活体内实验比很多在活体外实验的结果更具有参考价值。
6 SPF鸡及鸡胚在疫苗生产上的重要性SPF鸡蛋作为生物制品的原材料，在现代疫苗生产中有着不可替代的作用[20]。
农业部兽医局自2004年7月12日成立以来，对实验动物比较关注，特别是对影响兽用疫苗质量的原材料——SPF鸡胚的生产与质量尤为重视[21]。
据统计。
除少量鸡胚出口于东南亚和卫生部门使用外，绝大多数都用于禽类制品毒种的制备和部分病毒活疫苗的制造[22]。
禽类疫苗的制备多采用SPF鸡胚生产。
用SPF鸡胚生产的疫苗不会携带特定的外源因子，避免了外源病毒、细菌、支原体等的干扰，疫苗的纯净性、安全性和有效性得到保障，能够达到有效控制禽类疫病的目的[23]。
SPF鸡胚可杜绝母源抗体的干扰，获得在非SPF鸡胚中达不到的病毒滴度，提高了单胚抗原的产出量，不仅保证疫苗的纯净，而且生产过程中可大大提高疫苗的效力。
而采用非SPF鸡胚生产，生产出的产品难以保证不含外源病原，尤其是蛋传递的病原，活疫苗有可能污染外源病原体，导致多种细菌病、支原体病及各种免疫抑制病的发生，而单胚疫苗病毒含量很低[24]。
相比之下，用SPF鸡胚生产的疫苗，所含有的抗原纯净，而非SPF鸡胚生产的疫苗很难根除外源病毒污染。
在疫苗接种鸡体后，普通疫苗的免疫要受外源病毒一定的干扰而产生部分免疫抑制、免疫失败或直接导致免疫动物发病。
影响正常疫苗免疫，造成垂直传播、恶性循环，影响免疫效果。
而SPF疫苗能产生良好的免疫效果，达到免疫防病的目的。
由于SPF疫苗无外源病毒干扰，减少了人为传播疫病的可能，降低了疫苗接种频率，免疫效果好，避免了反复接种免疫，减少了鸡群应激，节约了大量劳力和财力，降低了成本[25]。
通常所用活疫苗必须采用SPF种蛋生产，多数国家灭活苗采用非SPF种蛋生产，但是美国所有禽用疫苗（包括灭活苗）都采用SPF种蛋生产。
其理由是：一方面很难完全保证采用灭活剂和灭活技术能杀死所有的病原；另一方面即使灭活的病毒也有免疫效应，从而干扰正常的血清学检测，而且采用SPF种蛋生产疫苗可以有更高的效价[26]。
总之，非SPF种蛋总存在一定程度的安全风险。
研究表明：用SPF鸡胚制备的鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病、鸡传染性支气管炎等病毒活疫苗，不仅质量大大提高，而且可避免因疫苗接种而引起其他疾病的传播[27]。
