复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定

复方磺胺甲噁唑片【药品名称】通用名称：复方磺胺甲噁唑片英文名称：Compound Sulfamethoxazole T ablets【成份】本品每片中含磺胺甲噁唑（C10H11N3O3S）应为0.360-0.440g，含甲氧苄啶（C14H18N4O3）应为72.0-88.0mg【适应症】近年来由于许多临床常见病原菌对本品常呈现耐药，故治疗细菌感染需参考药敏结果，本品的主要适应症为敏感菌株所致的下列感染：1.大肠埃希杆菌、克雷伯菌属、肠...【用法用量】1.成人常用量治疗细菌性感染，一次甲氧苄啶160mg和磺胺甲唑800mg，每12小时服用1次。

治疗卡氏肺孢子虫肺炎一次甲氧苄啶3.75～5mg/kg，磺胺甲唑18.75～25mg/kg，每6小时服用1次。

成人预防用药：初予甲氧苄啶160mg和磺胺甲唑800mg，一日2次，继以相同剂量一日服1次，或一周服3次。

2.小儿常用量2月以下婴儿禁用。

治疗细菌感染，2个月以上体重40kg以下的婴幼儿按体重口服一次SMZ 20～30mg/kg 及TMP 4～6mg/kg，每12小时1次；体重≥40kg的小儿剂量同成人常用量。

治疗寄生虫感染如卡氏肺孢子虫肺炎，按体重一次口服SMZ 18.75～25mg/kg及TMP3.75～5mg/kg，每6小时1次。

慢性支气管炎急性发作的疗程至少10～14日；尿路感染的疗程7～10日；细菌性痢疾的疗程为5～7日；儿童急性中耳炎的疗程为10日；卡氏肺孢子虫肺炎的疗程为14～21日.【不良反应】1.过敏反应较为常见,可表现为药疹,严重者可发生渗出性多形红斑、剥脱性皮炎和大疱表皮松解萎缩性皮炎等；也有表现为光敏反应、药物热、关节及肌肉疼痛、发热等血清病样反应。

偶见过敏性休克。

2.中性粒细胞减少或缺乏症、血小板减少症及再生障碍性贫血。

患者可表现为咽痛、发热、苍白和出血倾向。

3.溶血性贫血及血红蛋白尿。

这在缺乏葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的患者应用磺胺药后易于发生,在新生儿和小儿中较成人为多见。

续表1序号保留时间t /min化合物名称分子式分子量相对含量(%)79.3213-octadecenoic acid(Z)(Z)-13-十八碳烯酸C 18H 34O 228221.6289.73octadecan oic acid 十八烷酸C 18H 36O 228433.46910.6210,13-octadecadienoic acid 10,13-十八碳二烯酸C 18H 32O 22800.131010.7910-noadecen oic acid 10-十九烯酸C 19H 36O 22960.091111.26noadecanoic caid 十九烷酸C 19H 38O 22980.281212.7211-eicosenoic acid 11-二十碳烯酸C 20H 38O 2310 2.101313.23eicosanoic acid 二十碳烷酸C 20H 40O 2312 1.771417.42docosanoic acid 二十二碳烷酸C 22H 44O 23400.18由表1可以看出,从中药材木鳖子中共鉴定出14种脂肪酸,占脂肪酸总含量的89.23%,其中饱和脂肪酸7种,占总脂肪酸含量的47.32%不饱和脂肪酸7种,占脂肪酸总量的41.91%。

3　讨论木鳖子中不饱和脂肪酸以亚油酸(19.85%)、(Z)-13-十八(碳)烯酸(21.62%)、11-二十(碳)烯酸(2.10%)为主。

近年来的研究表明不饱和脂肪酸对人体有降低血脂、胆固醇和血压,抗血栓、抗动脉硬化,预防心血管疾病,增强记忆力,预防老年痴呆症,防癌等多种作用[3]。

木鳖子是一种常见的中药,对中药木鳖子的研究已较深入,但对其脂肪酸的研究还未见报道。

本实验方法具有简单、准确、脂肪酸检出率高等优点,其结果将对木鳖子的深层次的开发和应用提供科学依据。

参考文献:[1]　宋立人,洪　恂,丁绪亮,等.现代中药大辞典,上册[M ].北京:人民出版社:349-351.[2]　S.R..Heller ,G.W.A.M iline.EPA/NIH M ass Spectral date[M ].U .S.Washington D.C.,1978:1-4.[3]　周永红.火麻仁油中脂肪酸的GC-M S 分析[J ].中国油脂,2004,29(3):72-72.收稿日期:2004-11-12;　修订日期:2005-02-12作者简介:熊久林(1956-),男(汉族),湖北黄梅人,现任湖北省黄石市药品检验所副主任药师,主要从事药品检验工作.高效液相色谱法测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶的含量熊久林,孙仲葆,黎　源,马锦星,运　委,张　晶(湖北省黄石市药品检验所　435000)摘要:目的:建立同时测定复方磺胺甲唑片中磺胺甲唑和甲氧苄啶含量的高效液相色谱法。

高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量［实验目的］1掌握高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2掌握高效液相色谱仪的操作及注意事项［实验原理］结构特点：苯环（紫外吸收）、芳伯胺基（重氮化-偶合反应）、磺酰胺基上的活泼氢有一定酸性，可与碱成盐或与重金属离子反应。

分子式：C10H11N3O3S 分子质量：253.28。

本品为白色结晶性粉末。

熔点167℃，易溶于稀盐酸；氢氧化钠溶液或氨水，几乎不溶于水。

无臭，味微苦。

外标法是以待测组分的纯品作为对照品，以供试品中待测组分的峰面积或峰高进行定量分析，本实验采用峰面积进行定量。

分别精密量取一定量的对照品和供试品配制成溶液，分别进相同的体积的对照品溶液和供试品溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测定峰面积。

［实验仪器、试剂］仪器：75-4型紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂 )，高效液相色谱仪，色谱柱，超声波清洗仪，紫外吸收检测器，无油隔膜真空泵，抽滤装置，电子分析天枰，称量纸，研钵，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml），漏斗，滤纸，烧杯，玻璃棒，移液枪试剂：复方磺胺甲噁唑片(山东新华制药股份有限公司 ,批号 0412073 )，甲氧苄啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色谱纯）,水（超纯水），乙腈(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，醋酸溶液（1→100），［实验步骤］1.色谱条件与系统适用性试验：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相：水-乙腈-三乙胺（799∶200∶1）（用醋酸溶液（1→100）调节pH值至5.9±0.1）检测波长：254nm流速：1.0mL/min进样量：20ul理论塔板数：按甲氧苄啶计算应不低于2000，甲氧苄啶与磺胺甲噁唑峰之间的分离度应大于 5.0。

甲氧苄啶峰与磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得过2.0。

2.测定法2-1溶液的配制2-1-1对照品储备液的配制：取磺胺甲噁唑200mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。

依据：《复方磺胺甲噁唑片质量标准》，产品质量的稳定性考察。

内容：
1颗粒
1.1性状：本品为白色颗粒。

1.2检查
水分：应为1.0%～4.0%（快速水分测定法）。

1.3含量测定：本品每克中含磺胺甲噁唑（C10H11N3O3S）应为0.712～0.827g，含甲氧
苄啶（C14H18N4O3）应为140.4～167.3㎎。

2素片
2.1性状：本品为白色片。

2.2检查
2.2.1 重量差异：±4.5%。

2.2.2 崩解时限：不得过13分钟。

3分装
3.1 装量差异：50片/瓶，不允许有误差。

3.2 封口质量：封口处应严密。

4包装：贴签端正（允许偏差≤2mm）；装量准确，每件装量应为：50片×300瓶；
封口严密、牢固；产品批号、生产日期、有效期印字清晰，内外一致；打包端正
（打包带上下偏差不得过1㎝），松紧适度。

目的：为检验复方磺胺甲噁唑片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。

范围：适用于复方磺胺甲噁唑片中间产品的检验。

职责：检验员，检验室主任对本规程实施负责。

规程：1 性状：本品为白色片.2 鉴别：2.1 试剂与仪器2.1.1 稀盐酸 2.1.2 0.1mol/L亚硝酸钠溶液2.1.3 碱性B-萘酚试液 2.1.4 稀硫酸2.1.5 甲醇 2.1.6 氯仿-甲醇-二甲基酰胺(20:2:1)2.1.7 碘试液 2.1.8 硅胶GF254薄层板2.1.9 烧杯、量筒、试管 2.1.10 微量进样器2.1.11 层析缸 2.1.12 漏斗、漏斗架2.1.13 电炉2.2 项目与步骤2.2.1 取本品细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg)，显芳香第一胺的鉴别反应：取供试品约50mg，加稀释盐酸1ml，必要时缓缓煮沸便溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性B-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到桔红色,为符合规定。

2.2.2 取本品的细粉适量(约相当于甲氧苄啶50mg)，加稀硫酸10ml微热溶解后，放冷、滤过、滤液加碘试液0.5ml，即生成棕褐色沉淀，为符合规定。

2.2.3 取本品的细粉适量(约相当于磺胺甲噁唑0.2g)，加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液，另取磺胺甲噁唑0.29g、甲氧苄啶40mg，加甲醇10ml溶解，作为对照溶液；照薄层色谱法 (SOP-QC-304-00)试验，吸取上述两种溶液各5ml，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇-二甲基甲酰胺(20：2：1)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)检视，供试品溶液所显两种成分的主斑点的位置应与对照溶液的主斑点相同为符合规定。

3 检查：3.1 试剂与仪器3.1.1 电子天平（万分之一克） 3.1.2 片剂崩解仪3.1.3 片剂脆碎度仪 3.1.4 吹风机3.2 项目步骤3.2.1 崩解时限:取本品6片,照崩解时限检查法(SOP-QC-330-00) 检验，应在15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片用样方法复试，全部崩解完全为符合规定。

一、实验目的1. 掌握双波长法测定复方磺胺甲恶唑片含量的原理和方法。

2. 了解复方磺胺甲恶唑片的质量分析。

3. 提高实验操作技能和数据处理能力。

二、实验原理本实验采用双波长法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量。

在一定的条件下，磺胺甲恶唑在特定波长下有最大吸收，而其他成分在此波长下无吸收或吸收较小。

通过比较样品和对照品的吸光度，可以计算出样品中磺胺甲恶唑的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 复方磺胺甲恶唑片- 磺胺甲恶唑对照品- 磺胺甲恶唑对照品储备液- 磺胺甲恶唑对照品溶液- 稀释剂2. 实验仪器：- 721分光光度计- 电子天平- 磁力搅拌器- 离心机- 量筒- 容量瓶- 移液管四、实验步骤1. 样品溶液的制备- 称取适量复方磺胺甲恶唑片，置于100ml容量瓶中。

- 加入适量稀释剂，超声溶解。

- 定容至刻度，摇匀。

2. 对照品溶液的制备- 称取适量磺胺甲恶唑对照品，置于100ml容量瓶中。

- 加入适量稀释剂，超声溶解。

- 定容至刻度，摇匀。

3. 吸收度测定- 在721分光光度计上，以稀释剂为空白，分别测定样品溶液和对照品溶液在特定波长下的吸光度。

- 记录数据。

4. 样品含量计算- 根据对照品溶液的吸光度，计算磺胺甲恶唑对照品溶液的浓度。

- 根据样品溶液的吸光度，计算样品中磺胺甲恶唑的含量。

五、实验结果与分析1. 样品溶液和对照品溶液的吸光度测定结果如下：| 溶液类型 | 吸光度 || -------- | -------- || 样品溶液 | 0.475 || 对照品溶液 | 0.502 |2. 样品含量计算结果如下：样品中磺胺甲恶唑的含量 = (样品溶液吸光度 / 对照品溶液吸光度) × 对照品溶液浓度× 样品质量 / 样品溶液体积样品中磺胺甲恶唑的含量= (0.475 / 0.502) × 0.1 × 0.1 / 1 = 0.0945六、实验结论本实验采用双波长法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量，结果表明，该方法操作简便、准确可靠。

双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。

2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。

二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg （20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。

3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm 为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。

再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。

4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[取盐酸液(0.1mol/L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml 摇匀] 稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液(1)的稀释液，以239.0nm为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔0.2nm)选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。

再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(2)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。

２．１对照品溶液的制备精密称取在１０５℃干燥至恒重的磺胺甲嗯唑对照品５０ｎａｇ与甲氧苄啶对照品１０ｍｇ，分别置１００ｍＬ量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液…和对照品溶液‘“。

２．２供试品溶液的制备取该药１０片。

研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲嚼唑５０ｍｇ与甲氧苄啶１０ｍｇ），置１００ｍＬ量瓶中，加乙醇适量，振摇１５ｒａｉｎ，使磺胺甲嚼唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

２．３阴性对照溶液的制备按处方组成比例，制得不含磺胺甲嗯唑与甲氧苄啶的空白样品，按２．２项下方法制备阴性对照溶液。

２．４测定波长的选择原理本试验采用双波长等吸收点法分别测定磺胺甲嚼唑和甲氧苄啶。

以磺胺甲嚼唑为例，说明测定波长的选择原理。

在０．４％氢氧化钠溶液中，磺胺甲嚼唑的入…为２５７ｎｍ，在这一波长处甲氧苄啶也有吸收，而且位于其最小吸收波长（ｘ。

．。

）处。

由甲氧苄啶的ｕＶ吸收睦线可选择其等吸收点在３００ｉｌｍ附近。

这样，以２５７ｈｉｌｌ为测定波长（ｋ），用甲氧苄啶对照品的稀溶液，选择其等吸收点波长（入，，在３０４ａｍ附近，每间隔０．２ｎｍ，测定吸收值，予以选定）为参比波长，则对于甲氧苄啶，在此条件下，△Ａ＝Ａ、。

一Ａ、：＝０。

所以，在此条件下，测定磺胺甲唔唑和甲氧苄啶混合物时，△Ａ与磺胺甲噫唑的浓度成正比，甲氧苄啶的干扰已消除。

２．５样品的测定２．５．１磺胺甲嚼唑精密量取上述供试品溶液与对照品溶液¨一１各２ｍＬ，分别置于１００ｍＬ量瓶中，各加０．４％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，用分光光度法，取对照品旧１的稀释液，以２５７ｎｍ为测定波长（ｋ），在３０４ｎｍ附近（每间隔０．２ａｍ）选择等吸收点波长为参比波长（入．），要求△Ａ＝Ａ、。

一Ａｎ＝０，再在ｘ：与入。

波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液…的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（△Ａ），计算。

即得。

实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定一、实验原理磺胺甲恶唑是一种广谱抗菌药物，在临床上被广泛应用。

为了保证其药效，需要严格控制其含量。

本实验使用紫外分光光度法测定样品中复方磺胺甲恶唑的含量。

紫外分光光度法是利用化合物吸收紫外光的特性来测定化合物的浓度的方法。

在特定波长下，化合物分子吸收能量，产生吸收峰。

对于复方磺胺甲恶唑，其吸收峰波长为266nm。

因此可以通过测定吸光度值来计算复方磺胺甲恶唑的浓度。

二、实验仪器与药品仪器：紫外分光光度计三、实验步骤1、称取严密瓶装的复方磺胺甲恶唑片20片，粉碎并混匀。

2、取粉末约0.5g，置于50ml量瓶中，加入50ml甲醇溶液，摇匀，振荡30分钟，放置10分钟。

如样品不易溶解，可适当加热。

3、用甲醇溶液配制出复方磺胺甲恶唑的标准曲线。

取不同浓度的复方磺胺甲恶唑溶液，用25ml量瓶定容至刻度，得到不同浓度的溶液。

4、打开紫外分光光度计电源，进行预热。

5、向紫外分光光度计分光计分别加入甲醇，并进行零点校准。

6、取适量复方磺胺甲恶唑样品溶液，置于1cm医用玻璃比色皿中，放在紫外分光光度计的样品池中，测量吸光度值。

7、利用标准曲线计算复方磺胺甲恶唑在样品中的含量。

四、实验数据及计算1、标准曲线的制备制备3组复方磺胺甲恶唑溶液，分别为0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.3mg/ml。

将每组溶液分别加入紫外比色皿中，测量其吸光度值，并制作标准曲线。

复方磺胺甲恶唑浓度（mg/ml）吸光度值0.1 0.1280.2 0.2510.3 0.377标准曲线如下图所示：2、样品的测定取测定样品1.0ml，加入甲醇定容至10.0ml，混匀，测量其吸光度值。

根据标准曲线计算得到样品中复方磺胺甲恶唑的浓度。

5、结果与分析本实验使用紫外分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片的含量，结果显示样品中复方磺胺甲恶唑的含量为0.16mg/ml。

根据国家药典标准，每片复方磺胺甲恶唑片中复方磺胺甲恶唑的含量应在0.114mg~0.126mg之间。

双波长法测定复方磺胺甲恶唑含量The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020双波长法测定复方磺胺甲噁唑含量一、目的1.掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。

2.掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲噁唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。

二、实验内容1.供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg（20片平均片重的8分之一）与甲氧苄啶10mg（20片平均片重的8分之一）)，置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg（按原料药95%含量计）与甲氧苄啶对照品10mg（按原料药95%含量计），分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。

3.磺胺甲噁唑的测定精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)、(2)各2ml，分置100ml量瓶中，各加％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液(2)的稀释液；以257nm为测定波长(λ2)，在304nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参与波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。

再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△A)，计算，即得。

4.甲氧苄啶的测定精密量取上述供试品溶液与对照品溶液(1)(2)各5ml，分置100ml量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液 [取盐酸液L)75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml摇匀] 稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液(1)的稀释液，以为测定波长(λ2)，在295nm波长附近(每间隔选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求△A=Aλ2－Aλ1=0。

暴露资料,故难以与环境致病因子进行综合分析.本研究对我国食管癌高发的河南省林州市食管癌标本中p 53基因第五外显子进行了DNA 序列测定,突变发生率为20%,突变大多发生在G ∶C 碱基对,G ∶C ※A ∶T 的置换最多,占5/9,A ∶T ※T ∶A 的颠换占3/9,G ∶C ※C ∶G 的占1/9.从突变类型看,10个突变中9个为点突变,1个为插入突变,与文献报道基本一致.突变位点较分散,可能与该地区多种危险因素暴露有关.这一结果与我室前期研究相吻合[4].既往宏观流行病学研究发现,食管癌家族史、食用酸菜不仅是林州市食管癌的危险因素,也与p 53蛋白高表达密切相关[5].我们的研究结果显示,p 53基因第五外显子突变与性别、年龄无关,与食管癌家族史、吸烟也未见关联,可能与本研究分组后样本量尚少有关.但与食用酸菜有明显联系,其OR 值为5.95(1.13～31.26).酸菜中含有包括亚硝酸胺在内的多种致癌的亚硝基化合物,p 53基因突变可能由于包括酸菜在内的多种外源性致癌物的暴露而诱发,从而诱导肿瘤形成.由于DNA 测序费用较高,在经费有限的情况下,本研究仅对p 53基因第五外显子进行了检测和分析,尚不能全面反映p 53基因的突变情况及影响因素,但为进一步研究奠定了基础.【参考文献】[1]Bennett WP ,Hol lstein M C ,M etcalf R A ,W elsh JA ,He A ,ZhuSM ,Kusters I ,Resau JH ,T rump BF ,Lane DP .p 53mutation and protein accumulation during multistage human esophageal Carcino -genesis [J ].Canc er Res ,1992;52(21):6092-6097.[2]Hussain SP ,Harris CC .p 53mutation spectrum and load :The gen -eration of hypotheses linking the exposure of endogenous or exoge -nous carcinogens to human cancer [J ].Mutation Res ,1999;428:23-32.[3]Zheng ZY ,Wang LD ,Shi Stephanie T ,Yang GY ,Xue ZH ,GaoS ,Li YX ,Yang CS .p 53gene mutation in multifocal esophageal precancerous and cancerous les ions in patiens w ith esophageal cancer in highrisk Northern China [J ].Sh ijie Huaren Xiaohua Zaz hi (Wor ld Chin J Digestol ),1999;7(4):280-284.[4]Li LS ,Sun CS ,Zhang XL ,Qiao GB ,Xu DZ ,Han CL ,YangWX ,Chang GS ,Yan M X ,Wang Y ,Zhang H Y .A comparative molecular epidemiological study on esophageal cancer between Xi an and Linzhou [J ].Jiefangjun Yu fang Y ixue Zazhi (Prevet Med PLA ),1999;17(4):255-258.[5]Zhang XL ,Li LS ,Xu DZ ,Sun CS ,Yang WX ,Zhao HZ ,ChangGS ,Yan M X ,Wang Y .A cas e -control study on relationship be -tw een overexpression of p 53protein and esophageal cancer in Linxi -an [J ].Di -si Junyi Da xue X uebao (J Fourth Mil Med Univ ),1997;18(4):330-332.编辑　何扬举收稿日期:2003-04-17;　修回日期:2003-05-01作者简介:何树芸(1952-),女(汉族),陕西省西安市人.副主任药师.Tel .(029)5239845·经验交流·　文章编号:1000-2790(2003)14-1330-01荧光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中的磺胺甲恶唑含量何树芸1,冯　云2,郭欢迎1(1陕西省药品检验所,陕西西安710061,2西安市药品检验所,陕西西安710054)【关键词】荧光光度法;复方磺胺甲恶唑片;磺胺甲恶唑【中图号】R927.2 【文献标识码】B 0　引言　复方磺胺甲恶唑片为《中国药典2000年版二部》所载的品种.临床运用较为广泛.其中磺胺甲恶唑的含量测定,药典采用双波长分光光度法,操作费事且要求条件较高.我们利用荧光光度法测定磺胺甲恶唑含量结果令人满意.1　一般资料1.1　仪器和试药　RF -540荧光分光光度计(日本岛津).磺胺甲恶唑对照品由中国药品生物制品鉴定所提供(批号98-2);复方磺胺甲恶唑片样品由陕西省西安妇幼制药厂提供;其他试剂均为分析纯.1.2　对照溶液的配制　取磺胺甲恶唑对照品12.5mg ,精密称定,置100mL 容量瓶中,加0.2mol ·L -1硫酸甲醇液溶解并稀释至刻度.摇匀取出适量,用0.2mol ·L -1硫酸甲醇液稀释成0.5μg ·mL -1即可.1.3　样品溶液的配制　取样品适量,精密称定(相当于含磺胺甲恶唑30mg ),置200m L 量瓶中,加0.2mol ·L -1硫酸甲醇液溶解并稀释至刻度.摇匀、过滤.弃去初滤液,取续滤液适量,用0.2mo l ·L -1硫酸甲醇液稀释成与对照溶液一致的浓度.1.4　标准曲线的制备　精密吸取对照溶液,0,0.2,0.4,0.6,0.8和1.0m L 分别置10m L 量瓶中各加1mol ·L -1的硫酸液和10mL ·L -1邻苯二甲醛液各2mL ,摇匀,在60℃水浴中加热30min .放冷后用甲醇稀释至刻度.摇匀,测定其激发光谱和发射光谱.结果激发波长为365nm ,发射波长425nm .在此条件下,测定其荧光光谱.以对照溶液的浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标作回归曲线.回归方程为:Y =16.1+13.8X ,r =0.997(n =3),可见磺胺甲恶唑浓度在0.01～0.05μg ·mL -1范围内浓度与荧光强度的线性关系良好.1.5　精密度实验　精密吸取对照溶液1mL 共4份分别置10mL 量瓶中,照2.3法测定,按测定的荧光强度计算其精密度RSD =1.3%(n =4).其结果表明该方法精密度良好.1.6　回收试验　按处方配制成复方磺胺甲恶唑片的粉末,精密称取一定量,照2.3法测定,计算其回收率.平均回收率为98.5%(n =4),RSD =1.0%.样品其他成分与辅料均无干扰.1.7　供试品的测定　精密吸取样品溶液1mL ,置10mL 量瓶中,照2.3法测定,计算样品的含量(表1).表1　供试品测定结果(n =3)批号荧光法(g /片)药典方法(g /片)20020405010.3760.38120020605020.3860.38920020104010.3790.3902　讨论　用荧光法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑含量与双波长分光光度法测定结果基本一致,说明此方法准确可行.荧光法的灵敏度高,因而对试剂要求也高,故所用的甲醇需加一定量的金属钠,放置4h 后经重蒸馏即可.样品稀释后,在1h 内测定其荧光强度.否则,结果偏低.编辑　黄良田1330第四军医大学学报(J F our th M il M ed Univ )2003;24(14)。