生物化学实验习题及参考答案
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生物化学实验习题及参
考答案
Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】
生物化学实验习题及解答
一、名词解释
1、pI;
2、层析;
3、透析;
4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳;
5、蛋白质变性;
6、复性;
7、Tm 值;
8、同工酶;
9、Km值; 10、DNA变性;11、退火;12、增色效应
二、基础理论单项选择题
1、用下列方法测定蛋白质含量,哪一种方法需要完整的肽键()
A、双缩脲反应
B、凯氏定氮
C、紫外吸收
D、羧肽酶法
2、下列哪组反应是错误的()
A、葡萄糖——Molish反应
B、胆固醇——Libermann-Burchard反应
C、色氨酸——坂口(Sakaguchi)反应
D、氨基酸——茚三酮反应
3、Sanger试剂是()
A、苯异硫氰酸
B、2,4-二硝基氟苯
C、丹磺酰氯
D、-巯基乙醇
4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收()
A、215nm
B、260nm
C、280nm
D、340nm
5、下列蛋白质组分中,哪一种在280nm具有最大的光吸收()
A、色氨酸的吲哚基
B、酪氨酸的酚环
C、苯丙氨酸的苯环
D、半胱氨酸的硫原子
6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质()
A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同
B、分子大小不同
C、分子极性不同
D、溶解度不同
7、蛋白质用硫酸铵沉淀后,可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净,你选用下列哪一种试剂检查()
A、茚三酮试剂
B、奈氏试剂
C、双缩脲试剂
D、Folin-酚试剂
8、蛋白质变性是由于()
A、一级结构改变
B、亚基解聚
C、空间构象破坏
D、辅基脱落
9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有()
A、胶体性
B、粘性
C、变性作用
D、沉淀作用
10、有关变性的错误描述为()
A、蛋白质变性后,其一级结构和空间结构改变
B、蛋白质变性后,其理化性质和
生物学活性改变C、加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加,易被酶水解,易沉淀
11、双链DNA热变性后()
A、黏度下降
B、沉降系数下降
C、浮力密度下降
D、紫外吸收下降
12、酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上()
A、天冬氨酸
B、脯氨酸
C、赖氨酸
D、丝氨酸
13、在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体()
A、His的咪唑基
B、Arg的胍基
C、Cys的巯基
D、Trp的吲哚基
三、填空
1、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生()色物质,而其他氨基酸与茚三酮产生
()色的物质。
2、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量,这是因为蛋白质分子中的()、()、()三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。
3、移液枪在每次实验后应将刻度调至(),让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命,并严禁吸取()。
4、使用离心机时,如有噪音或机身振动时,应立即(),并且离心管须对称放入套管中,防止机身振动,若只有一支样品管,则另外一支要用()代替。
5、测定蛋白质浓度的方法主要有()、()、()。
6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性,使它和其他小分子物质分开的方法有()和()等。
7、核酸在260nm附近有强吸收,这是由于()。
(),同样条件8、双键DNA热变性后,或在pH2以下,或在pH12以上时,其OD
260
()。
下,单键DNA的OD
260
9、硝酸纤维素膜可结合()链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交,称()印迹法。
10、常用二苯胺法测定()含量,用苔黑酚法测定()含量。
11、变性DNA的复性与许多因素有关,包括()、()、()、()、()。
12、温度对酶活力影响有以下两方面:一方面(),另一方面()。
13、维生素C是()酶的辅酶,另外还具有()作用。
14、在分光光度计的使用或检定中,()的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标,它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。()的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。
四、问答
1、紫外分光光度法测定核酸含量的原理。
2、蛋白质变性与沉淀的关系。
3、牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。
4、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。
5、若样品中含有蛋白质和核苷酸等杂质,如何排除干扰
6、体液血糖测定有哪些方法
7、DNA在电场中的迁移率取决于哪些因素
8、琼脂糖凝胶有哪些注意事项
9、考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么
10、何谓Rf值影响Rf值的主要因素是什么
11、蛋白质分离和纯化的一般方法
12、如何正确选择核酸电泳指示剂
参考答案
一、名词解释
1、指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示。
2、按照在移动相和固定相(可以是气体或液体)之间的分配比例将混合成分分开的技
术。
3、通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开
的一种分离纯化技术。