生物化学实验习题及参
考答案
HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
生物化学实验习题及解答
一、名词解释
1、pI；
2、层析；
3、透析；
4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳；
5、蛋白质变性；
6、复性；
7、Tm 值；
8、同工酶；
9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应
二、基础理论单项选择题
1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（
）
A、双缩脲反应
B、凯氏定氮
C、紫外吸收
D、羧肽酶法
2、下列哪组反应是错误的（）
A、葡萄糖——Molish反应
B、胆固醇——Libermann-Burchard反应
C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应
D、氨基酸——茚三酮反应
3、Sanger试剂是（）
A、苯异硫氰酸
B、2，4-二硝基氟苯
C、丹磺酰氯
D、-巯基乙醇
4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（）
A、215nm
B、260nm
C、280nm
D、340nm
5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（）
A、色氨酸的吲哚基
B、酪氨酸的酚环
C、苯丙氨酸的苯环
D、半胱氨酸的硫原子
6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）
A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同
B、分子大小不同
C、分子极性不同
D、溶解度不同
7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（）
A、茚三酮试剂
B、奈氏试剂
C、双缩脲试剂
D、Folin-酚试剂
8、蛋白质变性是由于（）
A、一级结构改变
B、亚基解聚
C、空间构象破坏
D、辅基脱落
9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（）
A、胶体性
B、粘性
C、变性作用
D、沉淀作用
10、有关变性的错误描述为（）
A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变
B、蛋白质变性后，其理化性质
和生物学活性改变C、加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀
11、双链DNA热变性后（）
A、黏度下降
B、沉降系数下降
C、浮力密度下降
D、紫外吸收下降
12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上（
）
A、天冬氨酸
B、脯氨酸
C、赖氨酸
D、丝氨酸
13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体（
）
A、His的咪唑基
B、Arg的胍基
C、Cys的巯基
D、Trp的吲哚基
三、填空
1、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产
生（）色的物质。
2、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（）、（）、（）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。
3、移液枪在每次实验后应将刻度调至（），让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命，并严禁吸取（）。
4、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（）代替。
5、测定蛋白质浓度的方法主要有（）、（）、（）。
6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（）和（）等。
7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（）。
（），同样条8、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD
260
（）。
件下，单键DNA的OD
260
9、硝酸纤维素膜可结合（）链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（）印迹法。
10、常用二苯胺法测定（）含量，用苔黑酚法测定（）含量。
11、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（）、（）、（）、（）、（）。
12、温度对酶活力影响有以下两方面：一方面（），另一方面（）。
13、维生素C是（）酶的辅酶，另外还具有（）作用。
14、在分光光度计的使用或检定中，（）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。（）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。
四、问答
1、紫外分光光度法测定核酸含量的原理。
2、蛋白质变性与沉淀的关系。
3、牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。
4、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。
5、若样品中含有蛋白质和核苷酸等杂质，如何排除干扰？
6、体液血糖测定有哪些方法？
7、DNA在电场中的迁移率取决于哪些因素？
8、琼脂糖凝胶有哪些注意事项？
9、考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么？
10、何谓Rf值影响Rf值的主要因素是什么
11、蛋白质分离和纯化的一般方法？
12、如何正确选择核酸电泳指示剂
参考答案
一、名词解释
1、指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值，用符号pI表示。
