盐酸小檗碱检验记录

盐酸小檗碱原始检验记录文件编号：第1 页共6页名称盐酸小檗碱规格批号包装生产单位供应单位检验项目检验依据检验仪器【性状】本品为本品在热水中（溶解），在水或乙醇中（微溶），在三氯甲烷中（极微溶解），在乙醚中（不溶）项目结论：【鉴别】（1）取本品约0.1g，加水10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷（必要时滤过），加丙酮8滴，（应即发生浑浊）项目结论：（3）本品红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集320图一致）项目结论：（4）（2）取本品约5mg，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，（应即显樱红色）项目结论：（4）本品约0.1g，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液（应显氯化物的鉴别（1）反应）项目结论：【检查】有关物质：照高效液相色谱法(通则0512)试验供试品溶液的色谱中，如有与药根碱峰和巴马汀峰保留一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过1.0%；其他杂质峰面积的和不得大于对照品溶注液中的小檗碱峰的面积(2.0%)。

检验者：复核者：产品名称：盐酸小檗碱批号：规格：第2 页共6页检验条件：色谱柱：C18柱（以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂ODS柱）柱号：E15XXXXXX 填料：Hypersil ODS 25µm 批号：柱长：150mm 管径：4.6mm 柱温：进样器：XX型进样器进样量：XXµl定量环流动相：0.01mol/L磷酸二氢铵溶液(用磷酸调pH值至2.8)-乙腈(75：25)，检测波长：345nm流速：压力：对照品溶液的制备方法精密称取盐酸药根碱对照品和盐酸巴马汀对照品适量，加流动相溶解并定量稀释成每1ml中约含0.1mg的溶液，分别作为对照品溶液(1)和(2)。

对照品溶液的制备精密称取盐酸药根碱对照品 g（中检所，批号：）和盐酸巴马汀对照品 g（中检所，批号：）分别置于ml、ml容量瓶中，加流动相溶解，摇匀，定容至刻度，分别作为对照品溶液(1)和(2)。

一、实验目的1. 熟悉盐酸小檗碱的提取、分离与鉴定方法；2. 掌握薄层色谱法、紫外光谱法等分析方法；3. 提高实验操作技能，培养实验思维。

二、实验原理盐酸小檗碱是从黄连、黄柏等植物中提取的一种生物碱，具有抗菌、抗炎、抗癌等药理作用。

本实验采用溶剂提取法、柱层析法等方法对盐酸小檗碱进行提取、分离，并通过薄层色谱法、紫外光谱法等对其进行鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：黄连、黄柏、盐酸小檗碱标准品；2. 实验仪器：电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、紫外分光光度计、薄层色谱仪、硅胶G薄层板、硅胶柱、微量注射器等。

四、实验方法与步骤1. 提取（1）将黄连、黄柏药材粉碎，过40目筛；（2）称取2g药材，加入20ml甲醇，超声提取30min；（3）过滤，滤液旋蒸浓缩至约1ml；（4）加入1ml盐酸溶液，搅拌，静置，沉淀完全后过滤，滤液即为粗提液。

2. 分离（1）将硅胶G加入适量甲醇，搅拌均匀，倒入玻璃层析柱中；（2）将粗提液加入层析柱中，用甲醇洗脱；（3）收集盐酸小檗碱洗脱液，旋蒸浓缩至约1ml；（4）加入1ml盐酸溶液，搅拌，静置，沉淀完全后过滤，滤液即为盐酸小檗碱精制品。

3. 鉴定（1）薄层色谱法：取盐酸小檗碱标准品和精制品适量，分别点于薄层板上，以氯仿为展开剂，展开后晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热显色，观察斑点颜色和位置；（2）紫外光谱法：取盐酸小檗碱标准品和精制品适量，分别用无水乙醇溶解，制成溶液，在紫外分光光度计上测定其在256nm处的吸光度。

五、实验结果与分析1. 薄层色谱法：盐酸小檗碱标准品和精制品在薄层板上形成相同颜色的斑点，且位置一致，证明精制品中含盐酸小檗碱。

2. 紫外光谱法：盐酸小檗碱标准品和精制品在256nm处的吸光度基本一致，证明精制品中含盐酸小檗碱。

六、实验结论本实验成功提取、分离了黄连、黄柏中的盐酸小檗碱，并通过薄层色谱法、紫外光谱法对其进行了鉴定，结果表明精制品中含盐酸小檗碱。

盐酸小檗碱实验报告盐酸小檗碱实验报告引言：盐酸小檗碱是一种常见的药物成分，广泛应用于医药领域。

本实验旨在通过对盐酸小檗碱的实验研究，探索其化学性质和药理作用，以期对其应用和研究提供一定的参考。

实验方法：1. 实验材料和仪器：- 盐酸小檗碱样品- 盐酸- 乙醇- 氯仿- 玻璃仪器：烧杯、试管、滴管等2. 实验步骤：1) 取适量盐酸小檗碱样品，加入烧杯中。

2) 逐滴加入盐酸，观察是否有气体生成，记录颜色变化。

3) 将盐酸小檗碱样品溶解于乙醇中，观察是否溶解，记录溶解度。

4) 取少量溶解的盐酸小檗碱样品，加入氯仿中，观察是否发生相互作用。

实验结果：1. 盐酸与盐酸小檗碱反应：在实验中，我们发现当盐酸与盐酸小檗碱反应时，会产生气体，并伴随着颜色的变化。

这是因为盐酸与盐酸小檗碱发生了化学反应，产生了气体。

这种反应是酸碱反应，盐酸起到了酸的作用，而盐酸小檗碱则是碱性物质。

2. 盐酸小檗碱的溶解性：在实验中，我们观察到盐酸小檗碱在乙醇中有一定的溶解度。

这说明盐酸小檗碱在非极性溶剂中具有一定的溶解性。

然而，当我们将溶解的盐酸小檗碱样品加入氯仿中时，我们并没有观察到明显的相互作用。

这可能是因为氯仿与盐酸小檗碱之间的相互作用较弱。

讨论与分析：通过本实验，我们初步了解了盐酸小檗碱的化学性质和溶解性。

盐酸小檗碱在与盐酸反应时会产生气体，并伴随着颜色的变化，这是因为盐酸小檗碱具有碱性。

此外，盐酸小檗碱在乙醇中具有一定的溶解性，这对于药物的应用和制备具有重要意义。

盐酸小檗碱作为一种药物成分，具有广泛的应用。

它在医药领域中常被用于治疗消化系统疾病和感染疾病。

其药理作用主要是通过抑制细菌和病毒的生长，从而达到治疗的效果。

此外，盐酸小檗碱还具有一定的抗炎和抗氧化作用，对于改善机体免疫功能也有一定的帮助。

然而，盐酸小檗碱也存在一些潜在的副作用和风险。

长期或过量使用盐酸小檗碱可能导致肝脏损伤和胃肠道不适等不良反应。

因此，在使用盐酸小檗碱时，应严格按照医生的指导和剂量使用，避免不必要的风险。

盐酸小檗碱的提取实验报告一、实验目的本次实验旨在从黄连中提取盐酸小檗碱，并对提取过程和结果进行分析和评估，以掌握盐酸小檗碱的提取方法和相关实验技能。

二、实验原理盐酸小檗碱是一种季铵型生物碱，能溶于水，较易溶于热水和热乙醇，难溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。

本实验采用溶剂提取法，利用盐酸小檗碱在不同溶剂中的溶解性差异，将其从黄连中分离出来。

三、实验材料与仪器1、实验材料黄连（＿____g）、浓盐酸、乙醇（95%）、石灰乳等。

2、实验仪器电子天平、圆底烧瓶（＿____mL）、回流冷凝管、布氏漏斗、抽滤瓶、蒸发皿、玻璃棒、烧杯（＿____mL、＿____mL）、容量瓶（＿____mL）、移液管（＿____mL）、pH 试纸等。

四、实验步骤1、黄连的预处理将黄连粉碎，过_____目筛，备用。

2、提取称取_____g 黄连粉末，置于圆底烧瓶中，加入_____mL 95%乙醇，装上回流冷凝管，在水浴上加热回流_____小时。

回流结束后，趁热过滤，滤液置于烧杯中。

3、酸化向滤液中滴加浓盐酸，调节 pH 值至_____，此时有黄色沉淀析出。

4、过滤将上述混合液用布氏漏斗抽滤，得到黄色沉淀。

5、重结晶将沉淀用少量蒸馏水洗涤至中性，然后溶于适量热乙醇中，趁热过滤。

滤液放置冷却，使盐酸小檗碱结晶析出。

再次抽滤，得到盐酸小檗碱的结晶。

6、干燥将结晶置于干燥箱中，在_____℃下干燥至恒重，得到盐酸小檗碱成品。

五、实验结果与分析1、产量经过干燥后，得到盐酸小檗碱成品的质量为_____g。

2、纯度通过化学分析方法（如熔点测定、薄层色谱分析等），对所得盐酸小檗碱的纯度进行检测，结果表明其纯度为_____%。

3、结果分析（1）产量方面，影响盐酸小檗碱产量的因素可能包括黄连的质量、提取时间、乙醇用量等。

如果产量较低，可能是提取不完全，需要进一步优化实验条件。

（2）纯度方面，若纯度未达到预期，可能是在提取过程中引入了杂质，或者重结晶的操作不够完善。

对照品盐酸药根碱的来源、批号含量
对照品盐酸巴马丁来源、批号含量
4.精密量取供试品溶液2ml和对照品溶液（1）和（2）各10ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；取对照品溶液（2）1ml，用供试品溶液稀释至10ml，摇匀，作为系统适用性试验用溶液。
5、检测
精密量取对照品溶液和供试品溶液及系统适应性试验各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
检验日期：；检验人：；
□是□否
符合规定
（4）
仪器：电子天平、编号：；
傅立叶变换红外光谱仪、编号：；
本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集320图）。
检验日期：；检验人：；
□是□否
符合规定
检验员/日期： 复核员/日期：
编号:JD-RSGB1036-3
检验操作记录
品 名
盐酸小檗碱（提取品）
批 号
取样日期
取样量
规 格
/
剂 型
/
检品来源
检验依据
企业标准JD-STB1036
检验项目
操 作 过 程
结果/结论
三、检查
1、水分
仪器：电子天平、编号：；
卡氏微量水分测定仪、编号：；
依照卡氏微量水分测定仪检验操作规程操作。
漂移值：ul/min 水分标定值：mg/ml
样品量（mg） 结果(%)
1#
2#平均结果：
3#
检验日期：；检验人：；
检验项目
操 作 过 程
结果/结论
3、有关物质
检验人：________________检验日期：
1.检验仪器:
色谱仪：编号：
检测器：编号：____________
色谱柱：____；规格：____________编号：____________

3.在鉴别小檗碱时，加入试剂之后，要注意振摇之前和振摇之后的现象。
4.加热提取时要注意温度不要过高，避免产品燃烧起来。
八、思考题
1.根据小檗碱的性质，可用哪些提取方法？
答：（1）酸水法提取小檗碱 (2)石灰乳法提取小檗碱 (3)乙醇法提取小檗碱 (4)超声波提取小檗碱 （5） 微波法提取小檗碱 （6）酶法提取小檗碱等方法提取小檗碱。
二、目的要求
1.通过对黄连中小檗碱的提取，掌握天然产物的提取技术。
2.通过对小檗碱的鉴定，掌握一般生物碱的鉴别方法。
3.通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计。
三、实验原理
黄连主含小檗碱，含量为5.20%-7.69%，还含黄连碱，甲基黄连碱、掌叶防己碱等，由于它们有相似结构，常统称为黄连生物碱。小檗碱异名为黄连素，在水或稀乙醇中结晶所得小檗碱为黄色针状结晶。游离小檗碱微溶于冷水，易溶于热水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。小檗碱和大分子有机酸生成的盐在水中的溶解度都很小。小檗碱有季铵式、醛式、醇式，3种能互变的结构式，以季铵式最稳定。小檗碱的盐都是季铵盐，于硫酸小檗碱的水溶液中加入计算量的氢氧化钡，生成棕红色强碱性游离小檗碱，易溶于水，难溶于乙醚，称为季铵式小檗碱。如果于水溶性的季铵式小檗碱水溶液中加入过量的碱，则生成游离小檗碱的沉淀，称为醇式小檗碱。如果用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类则能生成溶于乙醚的游离小檗碱，能与羟胺反应生成衍生物，说明分子中有活性醛基，称为醛式小檗碱。小檗碱的提取方法主要有溶剂法（包括水或水－有机溶剂法、醇－酸水－有机溶剂法、碱化有机溶剂法）、离子交换树脂法、沉淀法等，通过生物碱特有的沉淀反应和显色反应对其进行鉴别。
2.实验过程中为什么要采用水浴加热？
答：此时溶液中含有大量的乙醇，采用明火加热，溶液很容易着火引发事故；

ＨＰＬＣ法测定湿热痹片中盐酸小檗碱的含量目的:建立测定湿热痹片中盐酸小檗碱含量的HPLC法。

方法:采用高效液相色谱法对湿热痹片中的盐酸小檗碱进行含量测定,色谱柱为迪马Diamonsil(TM)钻石C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-1%磷酸溶液(48∶52,每100 毫升中加入十二烷基磺酸钠0.1 g),流速为1.0 ml/min,检测波长为265 nm,柱温为25℃,进样量为10 μl。

结果:盐酸小檗碱在0.018 6～0.372 0 μg范围内线性关系良好,r=0.999 9;平均回收率为100.14%,RSD为1.35%。

结论:本法操作简便、准确、重现性好,可用于湿热痹片的质量控制。

[Abstract] Objective: To establish a HPLC method to determine berberine hydrochlorde in Shirebi Tablets. Methods: The contents of berberine hydrochlorde were determined in Shirebi Tablets by HPLC. A Diamonsil(TM) C18 chromatographic column(4.6 mm×250 mm, 5 μm) was used, the mobile phase was consisted of acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution(48∶52) at the flow rate of 1.0 ml/min, the detection wavelength was 265 nm, the column temperature was 25℃and the sample volume was 10 μl. Results: The linear range of berberine hydrochlorde was 0.018 6-0.372 0 μg(r=0.999 9), the average recovery was 100.14% with a RSD of 1.35%. Conclusion: The method is easy to operate, and can provide accurate and reproducible results, thus is suitable for the quality control of Shirebi Tablets.[Key words] Shirebi Tablets; HPLC; Berberine hydrochlorde; Determination湿热痹片由苍术、薏苡仁、地龙、防己、黃柏、粉萆薢、防风等十多种中药材组成,具有祛风除湿、清热消肿、通络定痛的功效。

系为n重铬酸钾/n盐酸小檗碱=1/2.
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二、实验目的
• 学习和掌握黄连素片中盐酸小檗碱的测定 的原理和方法
• 学习和掌握返滴定法 • 学习和掌握重铬酸钾法 • 学习和掌握碘量法
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返滴定法
当试液中待测物质与滴定剂反应很慢，或者用滴定剂 直接滴定固体试样，反应不能立即完成，故不能用 直接滴定法进行滴定。此时可先准确地加入过量标 准溶液，待反应之后，在用另一种标准溶液滴定剩 余的标准溶液。
I
3
络离子；
2.避免光照；
3.控制溶液的酸度。
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参考文献
［1］四川大学化工学院、浙江大学化学系.分析化学实验 北京：高等教育出版社 ，2010 ［2］武汉大学.分析化学.5版 北京：高等教育出版社2008 ［3］傅强主编.药物分析实验方法学.人民卫生出版
社,2008.7.
滴定必须在中性或酸锌溶液中进行。因为 I 2 在碱性
溶液中会发生歧化反应。
2.防止 I 2 的挥发和空气中的氧气氧化。
加用入碘过瓶量，K不I的要可剧以烈使摇动I 2，形以成减I3少络的I 2离子挥，发I且，滴定被时空使气
氧化的反应，随光照及酸度增高而加快。因此，在反
应时，应置于暗处，滴定前调好酸度，洗出I 2 后，应
定至溶液呈亮绿色为终点。
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C20H18ClNO4 %

2(6 CK2Cr2O7
V C K2Cr2O7
Na 2 S 2O3
m 1000
VNa2S2O3
) M K2Cr2O7
100 %
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万方数据药物研究Ｔｈｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓｔｕｄｙ中国民族民￥ｕ１医药Ｃｈｉｎｅｓｅｊｏｕｍａｌｏｆｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ·３３·０．７３５。

Ｉｔ＂＝０．９９９８。

结果表明盐酸小檗碱在２．１５—２１．５ｐ，ｇ·ｌＩｌｌ。

范围内线性关系良好。

图１盐酸小檗碱对照品图２盐酸小檗碱保留时间为２．８ｍｉｎ１．３．５．２精密度实验精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液１０止，测定峰面积，重复进样５次，求得盐酸小檗碱峰面积ＲＳＤ＝０．５２％。

１．３．５．３稳定性试验于０，４，８，１２，２４ｈ分别吸取盐酸小檗碱对照液、样品液各１０山测定，盐酸小檗碱对照品峰面积ＲＳＤ＝０．６３％，样品液峰面积ＲＳＤ＝１．５４％，说明２４ｈ内稳定性良好。

１．３．５．４重复性试验分别取同一样品５份，按供试品溶液的制备的方法和测定方法进行测定，盐酸小檗碱峰面积积分值的ＲＳＤ＝１．８７％，表明本试验方法重复性良好。

１．３．５．５加样回收率试验取已知含量的供试品，分别加入一定量的盐酸小檗碱对照品，按含量测定项下操作，结果见表１，平均回收率为９９．００％，符合要求。

衰１盐酸小檗碱的回收率试验２结果分别精密吸取样品溶液和对照品溶液各ｌＯ止，注入液相色谱仪，测定，对照品及样品色谱图见图ｌ，２，（图中横坐标为保留时向，纵坐标为峰高），结果见表２。

裹２盐酸小檗碱的含量测定结果３讨论３．１本试验测定三颗针提取物中盐酸小檗碱的平均含量为１５．４０％，由于三颗针来源广泛，采收季节不同、部位不同，均会对其提取物中盐酸小檗碱含量有影响拍１，我们按８５％规定下限，因此，规定该提取物中盐酸小檗碱含量不低于１３．１％。

３．２比较甲醇，水，磷酸不同用量和流动相不同ｐＨ值对盐酸小檗碱的保留时间及其相邻峰分离度的影响。

结果表明甲醇一水一磷酸（２５：７５：０．２），保留时间适当分离效果较好，与其它方法相比，该方法所采用的流动相具有简便，柱污染小，分离度好的优点。

高效液相色谱法测定一清颗粒中盐酸小檗碱的含量【摘要】目的成立一清颗粒中盐酸小檗碱的含量测定方式。

方式利用Waters C18色谱柱mm×250 mm，5 μm)；以乙腈mol/L磷酸二氢钾溶液(40∶60)为流动相；检测波长265 nm；流速ml/min。

结果盐酸小檗碱的线性范围为：8～μg，r= 8，平均回收率为%，RSD=%(n=5)。

结论HPLC法测定一清颗粒中盐酸小檗碱含量，操作简单，结果准确，方式重现性好。

【关键词】一清颗粒酸小檗碱含量测定HPLC一清颗粒为药典方，为临床经常使用药，功效为清热泻火解毒，化瘀凉血止血。

用于火毒血热所致的身热烦躁、目赤口疮、咽喉牙龈肿痛、大便秘结、吐血、咯血、衄血、痔血；咽炎、扁桃体炎、牙龈炎见上述证候者。

全方由黄连、大黄、黄芩三味中药组成，关于方中的君药黄连，药典中仅通过薄层辨别对其质量进行操纵，随着高效液相的普及，方中大黄、黄芩二药均有高效液相色谱法进行质量操纵的文献报导，而黄连那么尚无相关文献报导，本文通过对黄连中的要紧成份盐酸小檗碱的高效液相含量测定方式的成立，对一清颗粒中的黄连的质量进行操纵。

1 仪器与试剂Agilent 1100高效液相色谱系统，Chemstation液相色谱工作站，Mettler Toledo AG 285型电子天平，岛津UV2550紫外分光光度计。

一清颗粒购自市场；色谱乙腈(Fisher公司)，其余试剂均为国产分析纯。

2 方式与结果色谱条件色谱柱Waters C18柱mm×250 mm,5 μm)；流动相乙腈mol/L磷酸二氢钾溶液(40∶60)；检测波长265 nm；流速ml/min；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4 000。

对照品溶液的配制周密称取盐酸小檗碱对照品mg，置于25 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为8 mg/ml 的对照品溶液，历时取2 ml，以流动相稀释至10 ml，即得。

RP-HPLC法测定前列舒通片中盐酸小檗碱的含量目的:采用RP-HPLC法测定前列舒通片中盐酸小檗碱的含量。

方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液(40∶60)为流动相;检测波长为425 nm,流速为1.0 ml/min。

结果:盐酸小檗碱进样量在0.038 8～0.776 0 μg范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.3%,RSD 为2.04%。

结论:该法快速简便,结果准确可靠。

[Abstract] Objective: To establish a method for the content determination of berberine hydrochloride in Qianlie Shutong Tablets by RP-HPLC. Methods: The Diamonsil-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column was used. The mobile phases consisted of acetonitrile and 0.033 mol/L potassium dihydrogen phosphate solution (40∶60), the flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was at 425 nm. Results: The linear ranges of berberine hydrochloride was at 0.038 8-0.776 0 μg, the average recovery was 100.3% with a RSD of 2.04%. Conclusion: The method is fast, reliable, accurate and can be used in the quality control of berberine hydrochloride in Qianlie Shutong Tablets.[Key words] RP-HPLC; Qianlie Shutong Tablets; Berberine hydrochloride; Content determining前列舒通片由黃柏、赤芍、当归、川芎、土茯苓、三棱、泽泻、马齿苋、马鞭草、虎耳草、柴胡、川牛膝、甘草等13味药材组成的复方制剂,具有清热利湿、化瘀散结的功效。

实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。

主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。

小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。

黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。

），三角叶黄连（C。

deltoidea C。

Y。

Cheng et Hsiao）或云连（C。

teetoides C。

Y。

Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。

目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。

三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。

R1 R2 R3 R4 R51R1OR2OR5£-OR3OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23H CH3 CH3 CH3 H2345小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。

Mp.145℃至160℃即分解。

OCH3H3NHOCH3OH小檗胺H3COHCH3游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。

醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。

小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。

小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。

实验十黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识(一)目的要求学习提取精制和检识黄连中的小檗碱,通过实验要求：1.掌握小檗碱的结构特点和理化性质。

2.熟悉浸渍法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项。

3.了解盐酸小檗碱的检识方法。

(二)主要化学成分的结构及性质黄连为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.、三角叶黄连CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao、峨嵋野连Coptisomeiensis(Chen)C.Y.Cheng或云连CoptisteetaWall.的根茎。

黄连的根状茎含多种生物碱,主要为小檗碱(黄连素),约5%~8%,其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱、药根碱、木兰碱等。

叶含小檗碱1.49%。

小檗碱(berberine):分子式(C20H18NO4)+,分子量336.37。

系季铵生物碱。

游离小檗碱为黄色针状结晶(乙醚),mp.145℃,能缓缓溶于冷水(1∶20),可溶于冷乙醇(1∶100),易溶于热水或热乙醇,难溶于丙酮、氯仿、苯,几乎不溶于石油醚。

盐酸小檗碱(C20H17NO4·HCl·2H2O),为黄色结晶,微溶于冷水(1∶500),易溶于沸水,几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。

硫酸小檗碱((C20H18NO4)2·SO4·3H2O),溶于水(1∶30),溶于乙醇。

重硫酸小檗碱(C20H18NO4·HSO4)为黄色结晶或粉末,溶于水(1∶150),微溶于乙醚。

NOCH3OCH3OO+N+HOCH3OHOCH3OCH3CH3小檗碱木兰碱(三)实验原理根据小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小,而小檗碱的硫酸盐水中溶解度较大。

因此,从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉,然后向提取液中加入10%的食盐,在盐析的同时,也提供了氯离子,使其硫酸盐转变为氯化小檗碱(即盐酸小檗碱)而�1�7�1�7�1�7出。

氰化物取本品0.5g，依法检查（《中国药典》2000年版二部附录 F第一法），应符合规定（合成品）。
检查法：取本品各药品项下规定量的供试品,置A瓶中，加水10ml与10%酒石酸溶液3ml，迅速将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，摇匀，小火加热，微沸1分钟。取下碱性硫酸亚铁试纸，加三氯化铁试液与盐酸各1滴，15分钟内不得显绿色或蓝色。
有机腈取研细的本品0.25g，置25ml具塞锥形瓶中，加无水乙醚5ml，振摇5分钟，用垂熔漏斗(G5)滤过,用无水乙醚洗涤3～4次(每次2ml),合并滤液与洗液，浓缩至约0.5ml,作为供试品溶液；另取胡椒乙腈对照品适量，加氯仿制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法(中国药典二部附录ⅤB)试验,吸取对照品溶液10ul和全部供试品溶液,分别点于同一硅胶G(厚度0.5mm)薄层板上,以苯－冰醋酸（25：0.1）为展开剂，展开后，晾干，喷以5%钼酸铵硫酸溶液，在105℃加热10～20分钟，检视，供试品溶液在与对照品溶液所显主斑点的相应位置上，不得显杂质斑点（合成品）。
【性状】 本品为黄色结晶性末；无臭，味极苦。
本品在热水中溶解，在水或乙醇中微溶，在氯仿中极微溶解，在乙醚中不溶。
【鉴别】（1）取本品 约0.1g，加水10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液4滴，放冷（必要时滤过），加丙酮8滴，即发生浑浊。
（2）取本品约5mg，加稀盐酸2ml，搅拌，加漂白粉少量，即显樱红色。
（3）取本品约2mg，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5%没食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加热，即显翠绿色。
（4）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集320图）一致 。
（5）取本品约0.1g，加水20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸0.5ml，冷却，放置10分钟，滤过，滤液显氯化物的鉴别（1）反应（《中国药按（4.2～4.3）操作，直至恒重。

实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。

黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。

黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。

其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。

小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。

[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。

2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。

3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。

[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。

盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。

小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。

CHOOCH333季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）OCH3N+OCH33小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。

盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。

易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。

H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。

公司盐酸小檗碱片检验记录第 一 页【依据】 中华人民共和国药典（ 年版二部）【性状】 本品为 。

结论：【鉴别】 取本品的细粉适量（约相当于盐酸小檗碱0.1g ），加水10ml ，缓缓加热使盐酸小檗碱 溶解，滤过，取滤液，做以下试验:⑴ 取适量，加氢氧化钠试液4滴，放冷,过滤，加丙酮8滴， 。

（规定：应即发生浑浊） 结论：⑵ 取适量，加稀盐酸2ml ，搅拌，加漂白粉少量， 。

（规定：应即显樱红色） 结论：⑶ 取适量，置白瓷皿中，加硫酸1ml ，5%加没食子酸的乙醇溶液5滴， 置水浴上 加热， 。

（规定：应即显翠绿色） 结论：⑸ 取适量，加硝酸0.5ml ，冷却，放置10分钟，滤过，加氨试液使成碱性，将析出 的沉淀滤过出去，取滤液加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液， 。

分离，沉淀加氨试液， ，再加硝酸， 。

（规定：应即生成白色凝胶状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀 复生成） 结论： 【检查】 室温: 相对湿度: 溶出度 仪器：智能溶出检查仪 紫外分光光度仪照溶出度测定法第一法。

取本品，以水1000ml 为溶剂，转速为每分钟120转，依法操 作,经45分钟时，取溶液5ml ，滤过，取续滤液2ml ，置25ml 量瓶中，加水稀释至刻 度，摇匀，照分光光度法，在263nm 波长处测定吸收度，按C 20H 18ClNO 4·2H 2O 的吸 收系数（E）为724计算出每片的溶出量。

测得吸收度为：A 1： ； A 2： ； A 3 ： ； A 4 ： ； A 5： ； A 6： ； 计 算：检验员： 复核员： 年 月 日⑷　×10×12500377×100×100%＝ %⑴ ×10×12500377×100×100%＝ %⑵　×10×12500377×100×100%＝ %⑶　×10×12500377×100×100%＝ %⑸ ×10×12500377×100×100%＝ %⑹　×10×12500377×100×100%＝ %第 二 页(规定:限量为标示量的70%) 结论: 【含量测定】 仪器：分析天平 紫外分光光度仪样品与对照品 取本品20片，除去包衣后精密称定: 20片+纸:—纸：平均片重： g/片 研细，精密称取：① ②－） －）置100ml 量瓶中，加沸水适量使溶解，并稀释到刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液 5ml ，置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液⑴、⑵。

HPLC法测定前列安通胶囊中盐酸小檗碱连云港市一院前列安通胶囊由黄柏、赤芍等八味中药组成，具有清热利湿，活血化瘀的功效，用于湿热瘀阻证，症见：尿频、尿急、排尿不畅，小腹胀痛等症，临床疗效确切。

处方中黄柏为君药，盐酸小檗碱为活性成分。

目前文献报道测定方法有薄层扫描法[3]和HPLC法[2]。

由于薄层扫描法存在准确性差，重现性差等缺点，因此，本实验采用HPLC法测定黄柏中的盐酸小檗碱，为有效地控制复方的质量标准提供依据。

1 仪器与试药Agilent 1100高效液相色谱仪，MWD紫外检测器。

Sartorius BP211D型电子天平。

HENGAO-HU10260B型超声仪。

盐酸小檗碱对照品购自中国药品生物制品检定所（批号：110713–200208），乙腈（色谱纯），水（超纯水），其余试剂匀为分析纯，前列安通胶囊由连云港人民医院药房提供。

2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱：X–Terra C18（250×4.6mm，5 μm），WATERS公司；流动相：乙腈–0.5‰磷酸水溶液（27：73）；检测波长：265nm；柱温：30℃。

2.2 系统适应性试验：在上述条件下，测定样品中盐酸小檗碱的含量，以盐酸小檗碱峰计算理论塔板数大于6000，分离度大于2，已达到基线分离。

为确保定量分析的准确，在系统实验中盐酸小檗碱的理论塔板数不得低于4000。

2.3对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含35μg的溶液，即得。

液相图谱见图1。

2.4供试品溶液的制备：取本品内容物，研细，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中,密塞，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声（功率250W，频率40KHz）处理30分钟，放冷，称定重量，加50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过,弃去初滤液,取续滤液作为供试品溶液。

液相图谱见图2。

2.5阴性供试品溶液的制备:按处方比例，除去黄柏药材，相同制备方法制得阴性供试品溶液。