重组人粒细胞集落刺激因子动员后人外周血单核细胞来源树突状细胞肿瘤疫苗治疗研究

人外周血单核巨噬细胞诱导、培养及鉴定杨志梅;符州;王莉佳;陈艳【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2008(25)5【摘要】在重组人粒.巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)作用下体外诱导培养人外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定和功能检测.Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMc),含10%胎牛血清的RPMll640培养基和rhGM-CSF培养7d.光镜、扫描电镜及透射电镜观察细胞形态,鸡红细胞吞噬试验检测吞噬功能,流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志CDl4等生物学技术鉴定贴壁细胞性质.获得的贴壁细胞具备巨噬细胞的形态学特征及免疫表型.有吞噬功能,纯度较高.人外周血单核细胞在rhGM-CSF诱导下向巨噬细胞分化,具有生物学活性,纯度较高.是一种简单易行的体外诱导培养巨噬细胞的方法.【总页数】3页(P66-68)【作者】杨志梅;符州;王莉佳;陈艳【作者单位】重庆医科大学附属儿童医院,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院,重庆,400014【正文语种】中文【中图分类】R329.2+8【相关文献】1.体外诱导培养健康成人外周血单核细胞源树突状细胞及鉴定 [J], 叶双樱;陈礼平;武蓉珍2.人外周血树突状细胞体外诱导培养及表型鉴定 [J], 颜汝平;周海滨;李翀;王剑松;王伟;赵献3.健康人外周血树突状细胞诱导培养及鉴定 [J], 林东军;方志刚;华佳叶;刘相富;黄仁魏4.人外周血树突状细胞的诱导、培养及其表面标记的鉴定 [J], 张云飞;范清宇5.人外周血来源树突状细胞诱导培养及鉴定的实验研究 [J], 孙梯业;颜伟;孙冬丽;刘全达;段伟宏;周宁新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

科学技术创新2019.35树突状细胞与肿瘤免疫Dendritic cells and tumor immunity许若琳史曼*（西安医学院临床医学院，西安医学院基础医学部*，陕西西安710021）1DCs 的来源与分布人DCs 的来源有两条途径：①巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子的刺激下，来自于骨髓的髓系细胞，可定向分化为髓样DC ；②来源于淋巴样干细胞，与NK 细胞和T 细胞具有共同前体细胞的淋巴样DC 。

DCs 通常分布于血液和与外界接触的组织如皮肤，粘膜中，在活化后移至淋巴组织中与T 细胞与B 细胞互相作用，以刺激与控制适当的免疫反应。

2DCs 抗肿瘤机制2.1DCs 高表达MHC-Ⅰ类和MHC-Ⅱ类分子，MHC 分子与肿瘤抗原结合，递呈给T 细胞，启动MHC-I 类限制性CTL 反应和MHC-Ⅱ类限制性的CD4+Thl 反应。

同时，DC 还提供T 细胞活化所必须的第二信号，启动了特异性细胞免疫应答。

2.2DCs 与T 细胞结合可大量分泌IL-12、IL-18激活T 细胞增殖，诱导CTL 生成，主导Th1型免疫应答，利于肿瘤清除；激活穿孔素P 颗粒酶B 和FasL/Fas 介导的途径增强NK 细胞毒作用。

2.3DCs 释放IL-12、IFN-γ等影响肿瘤血管的形成；分泌趋化因子趋化初始型T 细胞的聚集；保持效应T 细胞在肿瘤部位长期存在。

并以正反馈旁分泌的方式活化其附近DCs ，上调IL-12及CD80、CD86表达；同时DCs 也向CD8+T 细胞呈递抗原，在CD4+T 细胞辅助下使CD8+T 细胞活化，增强抗肿瘤免疫应答。

3DCs 和细胞因子诱导的杀伤细胞（DCs-CIKs ）细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokines induced killer ，CIKs ）是将人外周血单个核细胞在体外用IFN-γ、IL-2和抗CD3单抗刺激后获得的一群异质细胞。

DC-CIK 联合治疗是细胞免疫治疗中较为成熟的一项技术，实现了从发现到清除肿瘤细胞的全过程。

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的临床新用途摘要粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF）是一个具有多项潜能的造血生长因子，因为它不仅能够促进造血前体细胞的增殖、分化和成熟，而且对其他的细胞，如抗原递呈细胞（APC）、成纤维细胞、角质细胞、皮肤粘膜细胞等，均有着不同程度的刺激作用。

由于GM-CSF对骨髓抑制的修复作用，目前在临床上的用途主要是用于治疗恶性肿瘤因放、化疗所致的白细胞减少症，有关这方面的报道已有很多，GM-CSF在升高白细胞方面的作用已经比较肯定。

近年来有许多研究报道表明，GM-CSF对恶性肿瘤放、化疗后所致的口腔粘膜溃疡有着很好的治疗作用，以及在抗病毒、抗真菌感染等的治疗中也有着良好的疗效。

关键词重组人粒细胞- 巨噬细胞集落刺激因子；临床新用途《中国书资料分类法》分类号R730.5; R456自1985年Sieff［1］等发表第1篇有关重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulatingfactor,rhGM-CSF）的文章以来，rhGM-CSF的临床用途逐渐引起了各位学者的兴趣，这些年来有关rhGM-CSF研究报道的文献每年均在千篇左右。

作为一个多潜能的造血生长因子，它的主要临床应用是促进骨髓造血，目前在临床上rhGM-CSF已成功地用于治疗恶性肿瘤放、化疗后所致的白细胞减少症，以及用于骨髓移植、再生障碍性贫血和某些存在白细胞低下的免疫缺陷性疾病的治疗等。

近些年的研究发现，GM-CSF不仅能够作用于造血干、祖细胞促进骨髓造血，而且还作用于目前已知体内功能最强的抗原提呈细胞——树突状细胞，以促进免疫应答，调节免疫反应［2，3］。

另外，GM-CSF还作用于角质细胞、成纤维细胞、粘膜细胞等。

重组人粒细胞集落刺激因子注射液【药品名称】通用名称：重组人粒细胞集落刺激因子注射液英文名称：Recombinant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor Injection 【成份】重组人粒细胞集落刺激因子。

【适应症】1.癌症化疗等原因导致中性粒细胞减少症；癌症患者使用骨髓抑制性化疗药物，特别在强烈的骨髓剥夺性化学药物治疗后，注射本品有助于预防中性粒细胞减少症的发生，减轻中性粒细胞减少的程度，缩短粒细胞缺乏症的持续时间，加速粒细胞数的恢复，从而减少合并感染发热的危险性。

2.促进骨髓移植后的中性粒细胞数升高。

3.骨髓发育不良综合症引起的中性粒细胞减少症，再生障碍性贫血引起的中性粒细胞减少症，先天性、特发性中性粒细胞减少症，骨髓增生异常综合症伴中性粒细胞减少症，周期性中性粒细胞减少症。

【用法用量】化疗药物给药结束后24～48小时起皮下或静脉注射本品，每日1次。

本品的用量和用药时间应根据患者化疗的强度和中性粒细胞下降程度决定。

对化疗强度较大或粒细胞下降较明显的患者以2.5μg/kg体重/日的剂量连续用药7天以上较为适宜，至中性粒细胞恢复至5000/mm3停药;如所用化疗药物的剂量较低，估计所造成的骨髓抑制不太严重者，可考虑使用较低剂量预防中性粒细胞减少，以1.25μg/kg体重/日的剂量用药至中性粒细胞数稳定于安全范围，对化疗后中性粒细胞已明显降低的患者(中性粒细胞数【不良反应】1.肌肉骨骼系统：有时会有肌肉酸痛、骨痛、腰痛、胸痛的现象。

2.消化系统：有时会出现食欲不振的现象，或肝脏谷丙转氨酶、谷草转氨酶升高。

3.其他：有人会出现发热、头疼、乏力及皮疹，ALP、LDH升高。

4.极少数人会出现休克、间质性肺炎、成人呼吸窘迫综合征症、幼稚细胞增加。

【禁忌】1 对粒细胞集落刺激因子过敏者以及对大肠杆菌表达的其他制剂过敏者禁用。

2 严重肝、肾、心、肺功能障碍者禁用。