AST 作业指导书

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AST测定
1 测定方法
酶动力学法。

2 测定原理
L-精氨酸 + а-酮戊二酸谷草转氨酶
草酰乙酸 + L-谷氨酸
草酰乙酸 + NADH + H+ 苹果酸脱氢酶
苹果酸 + NAD+
上述偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性成正比,因此可通过监测吸光度的下降速率,计算出AST的活性单位。

3 标本
血清、肝素或EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。

稳定性:20-25℃稳定1天
4-8℃稳定7天
-20℃稳定1周
4 试剂
4.1试剂
来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。

贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末
R1:打开后机上稳定28天
R2:打开后机上稳定90天
准备:R1:将试剂R1与1a互溶后使用。

R2:直接使用。

4.2 校准物
来源:ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下:
S1:0.9%NaCl
S2:C.f.a.s
贮存条件:校准物在2-8℃保存可保存至有效期。

准备:直接使用。

定标频率:A 试剂盒在仪器上放置28天后 B试剂批号更换后 C 由质控结果决定
4.3 质控物
来源:Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
其它适合的质控品
贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。

准备:直接使用。

质控间隔时间及限制:应视不同地区及各自实验室情况而定。

质控结果应在限定的范围之内,如果超出范围,实验室应根据情况采取措施。

5 仪器
ROCHE MODULAR P生化分析仪。

6 上机操作
见仪器作业指导书。

7 参考范围
男性:0-37U/L;女性:0-31U/L。

8 性能指标
本法线性范围为4-800U/L,不准确度允许范围X±20%,不精密度CV=3.2%,本法灵敏度4U/L。

9 注意事项
9.1 血清中含有酮酸能消耗NADH,使结果偏高;血清中谷氨酸脱氢酶增高时,在有氨存在的条件下,亦消耗NADH,使结果偏高。

9.2 血清不宜反复冷冻保存,以免影响酶的活性。

9.3红细胞内AST约为血清的10倍,故溶血标本可使测定结果偏高。

剧烈的体力劳动,因骨骼肌细胞通透性增加,酶活力也增高。

9.4血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。

9.5换算公式:U/l × 0.0167=ukat/l
9.6仅应用于体外诊断。

9.7扔弃废物应符合当地的法规。

10抗干扰能力:
10.1 标准:回收率在90%-110%之间。

10.2 黄疸:黄胆指数达到60时不会有明显干扰。

(直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl)
10.3 脂血:乳糜指数达到500明显干扰。

(甘油三酯浓度约为1000mg/dl)。

11 临床意义
精氨酸氨基转移酶属于转移酶类,它能够催化氨基与酮酸之间氨基的转移。

在人体的很多组织中均能发现精氨酸氨基转移酶。

其中,其在心肌中的活性最大,其次是脑、肝、骨骼肌以及肾等组织中。

转氨酶的水平升高可能于是有心肌、肝脏等器官损伤,主要见于下列疾病:
a)急性肝炎、药物中毒性肝坏死,AST显著升高有时可达1000单位以上。

b)肝癌、肝硬化、慢性肝炎、心肌炎等中度增高。

c)胸膜炎、肾炎及肺炎等轻度升高。

d)心肌梗死时AST活性明显增高,常在急性心梗发生后6~12小时开始升高,24~48小时达高峰。

约3~6天内可降至正常。

e)骨骼肌疾病如进行性肌营养不良、皮肌炎、挤压性肌肉损伤等AST也可升高。

f)AST与ALT的比值对肝病诊断也有一定意义,病毒性肝炎病程中ALT持续升高,急性病毒性肝炎时AST/ALT比值<1,原发性肝癌时>3。

因此同时测定AST和ALT的活性,并在病程中观察其变化,对肝病鉴别和了解病情变化有一定意义。