临床微生物学检验的标本采集一、血液和骨髓细菌学检验标本的采集（一）适应症菌血症、败血症和感染性骨髓炎等感染菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）病人准备1．凡怀疑菌血症和败血症的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用过抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，或在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。
2．应在病人发热期或寒颤时采集（三）标本采集1．血培养瓶领取：凭医嘱和检验申请单到检验科细菌室领取。
按照实际情况选择相应类型的血培养瓶：如灰色瓶盖为普通成人培养瓶；粉红色盖为儿童需氧菌培养瓶；紫色盖为厌氧菌培养瓶。
2．将患者信息录入相应的血培养瓶条码中，并在作好病人姓名、科别、床号等标识。
2．采集方法：严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液或骨髓后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀。
3．标本量：成人每次采血5~10ml，小儿采血3~5ml，骨髓2~3ml，采血量足够则阳性率高，反之阳性率减低。
（四）注意事项1．抽血、抽骨髓和接种时，须严格注意无菌操作，避免污染杂菌。
2．从抽血、抽骨髓到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固。
3．成人不明原因发热、怀疑血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套，每套2瓶（需氧、厌氧各一瓶）。
4．怀疑伤寒、亚急性细菌性心内膜炎及布鲁氏菌病的病人等，一般一日抽血三次培养，必要时需追加次数。
（五）标本送检和保存1．标本采集后应及时送检，一般不超过1h送交细菌室。
2．送检过程中应注意防止培养瓶打破或其它潜在性污染可能。
二、痰液或下呼吸道分泌物细菌学检验标本的采集（一）适应症肺炎、肺气肿、支气管炎、鼻窦炎、肺结核等感染菌的培养鉴定、药物敏感试验和抗酸菌检查。
（二）病人准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌标本容器，贴上条码、标明标识。
2．住院病人应留取清晨起床第一口痰。
为减少正常菌群的污染，嘱患者早上起床后用清水或生理盐水漱口，不要刷牙，除去鼻咽分泌物。
（三）标本采集1．一般病人用力咳出气管深处或肺部痰液，留于无菌标本容器内。
2．对无痰、少痰或痰不易咳出时，可用加温45℃的生理盐水雾化吸入，以使痰液易于咯出。
3．幼儿痰液收集困难时，可用清毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集标本。
4．通过气管穿刺获得痰液，即环状软骨下穿刺取肺分泌物，主要用于厌氧菌培养。
采集后立即排出注射器内空气，插入无菌的橡皮塞或直接注入厌氧培养瓶内送检。
6．浓缩法找抗酸杆菌应留取24小时痰（不少于5ml）。
7．痰标本直接染色找抗酸杆菌，应送检三份痰标本，最好连续3日。
（四）注意事项1．痰液标本应为气管深处或肺部咳出的真正呼吸道分泌物，切忌简单地将口水当成痰液送检。
2．痰液标本采集时不得混入唾液、鼻分泌物、食物和漱口水。
3．用不吸水的无菌容器盛留标本，所用容器须加盖，避免污染。
4．怀疑为嗜血杆菌感染时，应随留即送。
（五）标本送检和保存标本采集后应立即送检，如欲保存可置冰箱中，防止标本在运送中被污染。
三、尿液细菌学检验标本采集（一）适应症泌尿系统感染细菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）患者准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌试管，贴上条码、标明标识。
2．住院病人应留取早晨每一次尿液（浓缩尿液）。
3．女病人先用肥皂水及1：1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口。
男病人应翻转阴茎包皮，先用肥皂水清洗，再用灭菌水冲洗。
再用无菌纱布或干棉球拭干。
（三）标本采集1．无菌导尿法：由临床医生或护士采用导尿术留取尿液10ml左右，盛于无菌试管中送检。
因多次重复导尿易造成逆行性感染，故此法较少用。
2．中段尿法：病人冲洗外阴部及尿道口以后，让病人排尿，弃去前半部分尿液，收集中段尿3-5ml盛于用洒精火焰消毒管口后的无菌试管中，立即塞好塞子送检。
3．肾盂尿法：由临床医师采集左右肾盂尿送检，左右侧的标本应标记明确，以免出现错误。
4．24小时尿法：做结核杆菌集菌时，可收集24小时尿液，将沉淀部分盛于洁净瓶内送检。
（四）注意事项1．尿液标本的采取和培养最大的问题是污染杂菌，故应严格执行无菌操作。
2．标本采取后应立即送检和接种，因放置时间长杂菌容易在尿液标本中生长繁殖，影响正确诊断。
3．尿液标本不得加入防腐剂和消毒剂，否则会影响阳性率的检出。
（五）标本送检和保存尿液标本采集后，常规≤2h送交实验室，4℃≤24h送检，防止标本在运送中污染。
实验室收取标本后，应立即接种。
四、粪便细菌学检验标本采集（一）适应症肠道致病菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）患者准备尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌标本容器，贴上条码、标明标识。
（三）标本采集1．自然排便采集法：取有粘液、脓血部分的粪便2~3克置于无菌标本容器中。
如为稀水便，可直接收集适量容器于无菌培养管中，盖好盖子送检。
2．直肠拭子采集法：在无法获得粪便的情况下，可用无菌生理盐水湿润无菌肠拭子，插入肛门2-4cm，在肛门括约肌处轻轻转动拭子一圈，擦取直肠表面的黏液后取出，盛入无菌试管中送检。
3．02号菌培养：用检验科准备的02号菌专用的带盖子的无菌容器管，亦可用无菌生理盐水湿润无菌肠拭子，插入肛门2-4cm处，在轻轻转动拭子一圈，擦取直肠表面的黏液后取出，盛入无菌试管中送检。
（四）注意事项1．粪便标本含有多种杂菌，为防止污染必须注意标本的采集方法。
标本容器内不能混入尿液、消毒剂及其他化学药品，以避影响病原菌生长。
2．为提高阳性检出率标本采集要新鲜，因陈旧标本大大影响阳性检出率。
如能进行床边培养，则更能提高阳性率。
3．直肠拭子采集法，患者不能自行采集；除婴儿患者外，不推荐用拭子做常规病菌培养。
4．采集粪便标本应注意在急性期，使用抗菌素前作培养。
（五）标本送检和保存标本采集后要及时送检，防止标本在运送中污染。
五、脓液和病灶分泌物细菌学检验标本的采集（一）适应症外伤、手术及烧伤感染、疖肿、骨髓炎等病原菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）患者准备尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌试管，贴上条码、标明标识。
（三）标本采集1．开放性脓肿和病灶分泌物：用无菌生理盐水或75%乙醇擦去表面渗出物和污染物，用无菌拭子深入病灶底部或边缘部，采集脓性分泌物，以无菌操作置于无菌试管中送检。
2．封闭性脓肿和病灶分泌物：以无菌操作法，用无菌注射器抽取脓汁适量于无菌试管。
如疑为厌氧菌感染时，取材后立即将注射器内空气排尽，刺入无菌橡皮塞中送检。
（四）注意事项1．开放性脓肿和病灶标本采集前，必须对病灶表面及周围皮肤进行消毒处理。
2．局部伤口敷用药物在2小时以内、烧伤在12小时内均不应采集标本，此时获得阳性结果的机会甚少。
3．采集标本时必须严格无菌操作，以防杂菌污染。
（五）标本送检和保存1．标本采集后要及时送检，防止标本在运送中污染。
如不能立即送检应置冰箱中保存。
2．厌氧培养标本绝不可冷冻，宁可在室温中保存。
六、眼、耳、鼻、咽拭子细菌学检验标本的采集（一）适应症眼、耳、鼻、咽等感染部位，病原菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）患者准备尽量在未使用抗菌素前留取标本，以清晨起床采集为宜。
准备好无菌试管，贴上条码、标明标识。
1．采集眼部标本时，患者于采集前不得用药物冲洗眼部；2．采集咽崃部标本时，患者于采集前数小时不能用消毒液漱口；3．采集鼻窦内标本量，患者于采集前数小时不能使用消毒药物；4．外耳正常可有细菌寄生，采集标本时局部需进行必要的消毒。
（三）标本采集1．眼结膜标本：预先沾湿拭子，在结膜上滚动采集标本。
2．眼角膜标本采集：在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，直接接种在培养基平板上并进行涂片。
3．口腔咽部标本：先用拭子揩去溃疡或创面浅表分泌物，再另用拭子采集溃疡边缘或底部标本送检。
4．患有外耳炎患者，需要深部耳拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂窝组织炎。
5．鼻标本留取：用一根无菌棉拭子，伸进一侧鼻孔约2.5cm处，与鼻黏膜接触，轻轻地旋转拭子，蘸取黏膜上分泌物，缓缓抽出，置于运送培养基或将拭子置于无菌试管中送检。
（四）注意事项1．标本采取前数小时不得用消毒液漱口或涂抹病灶局部。
对刚治疗过或用药物冲洗过眼部的患者，最好在12-24小时后采集标本，以免药物影响细菌生长。
2．用棉拭子采集标本时应小心、认真、准确地在采集部位采取，避免触及舌、口腔黏膜和唾液，以免污染。
3．疑为白喉时，应在咽喉部深层组织中采取标本，而表面渗出液多为类白喉杆菌和葡萄球菌。
4．采集扁桃体标本时应以小窝部为宜。
5．眼部感染所获取标本量很少，建议医生取样后直接接种在培养基平板上并行涂片。
（五）标本送检和保存1．眼、耳、鼻、咽拭子所获取标本量一般较少，容易干燥而使细菌死亡，所以标本采集后应立即送检，常规培养于2小时内必须运送实验室。
2．眼睛、内耳标本绝对不可以冷藏。
七、脑脊液细菌学检验标本采集（一）适应症化脑和流脑时，病原菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）患者准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。
准备好无菌试管，贴上条码、标明标识。
2．患者在采集标本之前避免精神紧张和恐惧，积极配合医生采集标本。
（三）标本采集1．由临床医生以无菌操作方法，行腰穿抽取脑脊髓液2~3ml，置于无菌试管内，及时送检。
（四）注意事项1．用于细菌学检查标本应保温送检（20℃），不可置于冰箱保存，否则会导致细菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌。
2．不同检验需要脑脊液量：细菌培养≥1ml，真菌≥2ml，抗酸杆菌≥2ml。
3．怀疑脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌或肺炎链球菌时，标本采集后立即送检或床边接种。
因为脑膜炎奈瑟菌能产生自溶酶，离体后迅速自溶；流感嗜血杆菌或肺炎链球菌容易死亡。
4．怀疑新型隐球菌感染者，应另留取0.5ml脑脊液于无菌试管中送检。
（五）标本送检和保存1．CSF采集后，置于无菌试管中，应尽快（15min内）运送到实验室，绝不可冷藏。
遇天气寒冷时应注意在保温条件下送检。
2．标本送检过程中，应防止盖子脱落而引起标本污染。
八、穿刺液细菌学检验标本采集包括：胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液等（一）适应症胸膜炎、腹膜炎、心包炎、化脓性关节炎时，相应病原菌的培养鉴定和药物敏感试验。
（二）患者准备1．尽量在未使用抗菌素前、或在停止用药1~2天后留取标本。
2．准备好无菌试管，贴上条码、标明标识。
为防止穿刺液凝固，可在无菌试管中预先加入无菌肝素0.5ml。
3．患者在采集标本之前避免精神紧张和恐惧，积极配合医生采集标本。
（三）标本采集1．各种穿刺液标本，由临床医师以无菌穿刺术抽取。
心包液和关节液等抽取量约为1~5ml，胸水和腹水抽取量约为5~10ml。
标本抽取后，立刻将其注入含有无菌抗凝剂的无菌试管中，轻轻混匀。
2．疑为厌氧菌感染时，取材后立即将注射器内空气排尽，刺入无菌橡皮塞中送检。
