PH1602 植物核蛋白胞质蛋白提取试剂盒实验方法手册

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植物核蛋白提取(蛋白组实验,质谱适用)

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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
产品说明书
植物核蛋白提取试剂盒
（蛋白质组学实验适用）
货号：BB-319906
V1.7.0
试剂盒储存条件： 2-8℃保存。
开盖后组份按要求条件保存。
试剂盒组成：
产品组成
BB-319906-1
BB-319906-2
组份编号
规格
50 assays
100 assays
试剂 A：植物核蛋白提取液 A
100ml

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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
本试剂盒采用非酶法提取，提取过程简单方便，速度快，可在 1 小时内完成，而且绝少交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法较低。酶法提取制备的蛋白，回收率稍有提高，蛋白纯度高，保持天然活性，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒（相关产品 BB-319910）。请根据实际需要选择试剂盒。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3104 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3126 BB-3105 BB-3702 BB-3181 BB-3183 BB-3187

植物核蛋白和细胞器蛋白提取方法

注：
① 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
② 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
相关产品：
产品总蛋白提取试剂盒核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒细胞蛋白提取试剂盒组织蛋白提取试剂盒细菌蛋白提取试剂盒酵母蛋白提取试剂盒磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
1. 提取液制备：每 500ul 预冷的蛋白提取液 A 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂；每 200ul 蛋白提取液 B 和 C 中分别加入 1ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 植物组织样本剪碎，采用以下一种方法处理： i. 加入 500ul 提取液 A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。 ii. 置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入 500μl 冷的提取液 A。 iii. 加入 500ul 提取液 A 直接置冰上研磨。
注意：
1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
储存条件：蛋白提取液 2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。
注意事项： ● 本试剂盒仅供科学研究使用。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。 ● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点： 1、使用方便。 2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。 3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

植物蛋白质的提取和含量测定(“含量”相关文档)共8张

62%MNHaCOl，1Hm13M0o毫Hl/升CLl。的HCl小心调pH至，于4000r/min离心15min，(留取沉淀物)，并用少量丙酮反（，先如加上入清复调液(成有至糊漂少状浮两，物再，次用再)少经搅量过拌多滤洗次；地涤慢（慢地在加离入心（边管加中边搅进拌行）），室，温加下入搅拌丙抽酮提1后0m一in，定于将40沉00r淀/mi搅n离拌心7充mi分n ,小，心使留沉取上淀清脱液，水弃。脂层和沉淀
四、实验试剂
1.大豆干粉 2. 0.2%NaOH 3. 丙酮（预冷） 4. 6M HCl，1M HCl 5 标准 BSA（0.5 mg/ml） 6. Folin—酚试剂甲（用前组分一: 组分二 = 50:1）（1） 1克 Na2CO3和0.2克 NaOH溶解于50毫升蒸馏水中。（2） 0.5克硫酸铜（CuSO4•5H2O）溶解100毫升 1%酒石酸钾钠（ KNaC4H4O6•4H量测定
1. 制作标准曲线
按照下表操作，以A500nm为纵坐标，以蛋白含量为横坐标建立标曲。
2. 测定提取第2步稀释后样品的蛋白浓度按上表中样品列操作，根据A500nm查找含量，并计算原始浓度。
（先加入调成糊状，再用少量多次地慢慢地加入（边加边搅拌），室温下搅拌抽提10min，于4000r/min离心7min ,小心留取上清液，弃脂层和沉淀
，如上清得液到有漂白浮色物粉，再末经状过滤的；大豆蛋白粉，用干净的滤纸吸干、平铺在表面皿上，放入40度烘箱干燥，
待整个实验结束后，再称重并计算产率（即3克大豆干粉中蛋白含量）。
按照下表操作，以A500nm为纵坐标，以蛋白含量为横坐标建立标曲。测定提取第2步稀释后样品的蛋白浓度 2%NaOH 30毫升。留出上清液2毫升稀释50倍做含量测定（第二步）留出上清液2毫升稀释50倍做含量测定（第二步）留出上清液2毫升稀释50倍做含量测定（第二步）植物蛋白质的提取和含量测定植物蛋白质的提取和含量测定 2克 NaOH溶解于50毫升蒸馏水中。 2克 NaOH溶解于50毫升蒸馏水中。（1） 1克 Na2CO3和0. 5 标准 BSA（0. 6M HCl，1M HCl 5克硫酸铜（CuSO4•5H2O）溶解100毫升 1%酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O）中。量剩余上清液的体积，加入等体积预冷丙酮，先用6mol/L的HCl调pH至，再用1mol/L的HCl小心调pH至，于4000r/min离心15min，(留取沉淀物)，并用少量丙酮反复(至少两次)搅拌洗涤（在离心管中进行），加入丙酮后一定将沉淀搅拌充分，使沉淀脱水。

植物组织蛋白质提取方法汇总

用200毫摩每升的tris-cl 和62.5毫摩每升的tris-cl,我们研究室一般用１００毫摩每升的tris-cl，pH 8.0 ．另外，最好加１５０毫摩每升的ＮaCl，用来分离以弱电荷结合到多糖上的蛋白。

2我提的蛋白难溶，请问怎么解决？1、请问这是为什么呢？怎么解决？2、溶解时是先在100℃沸水浴后在涡旋吗？3、涡旋时产生大量泡沫，对蛋白有影响吗？4、是在常温溶解还是在4℃？或-20℃？5、一般溶解需要多长时间？怎样才算溶解充分了？我也是做植物叶片的，建议你可以用TCA-丙酮沉淀，方法如下：1、在液氮中研磨叶片30min，加PVP，和石英砂2、加入样品体积3倍的提取液(丙酮溶液1)在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃10000rpm以上1小时）弃上清。

3. 每份加入9ml丙酮溶液II，捣碎沉淀，常温振动混匀，-20℃沉淀1h；10000rpm，4℃离心15min，弃上清.4. 每份加入9ml丙酮溶液II，常温振动混匀，-20℃沉淀1h；10000rpm，4℃离心15min，弃上清.5. 每份加入9ml 80%丙酮溶液III, 常温振动混匀，-20℃沉淀1h, 10000rpm，4℃离心15min，弃上清6．干燥成硬块，磨成粉磨-20℃保存待用。

第二个问题：37度水浴第三个问题：涡旋时产生大量泡沫，没有影响第四个问题：37度溶解第五个问题1个小时，中间混匀数次出现这种情况是很正常的，要是全部都溶了倒是不太正常。

用沉淀法浓缩蛋白都存在一个变性的问题，在具体的操作过程中，有一部分蛋白变性了，所以会不溶解。

操作的时候尽量保持低温！溶解的时候可以在常温下，蛋白变成粉末后，立即加1*SDS上样缓冲液，用加样器吹打，大约5分钟就好，可以用来进行下一步的实验了。

也可以在4度溶解过夜。

涡旋时产生大量泡沫，个人认为影响不大一般溶解半个小时就很充分了，但仍会有很多不溶物！可以离心弃掉！丙酮沉淀之后要干燥，这个过程一定不要时间太长，不然样品干燥得过了，就很难溶了。

核蛋白提取方法

11. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 12. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。

参考文献：
● Guang Yu, Tonghai Yan et al.
Ser9 phosphorylation causes cytoplasmic detention of
2010 Volume 128, Issue 2, Pages 438-445 （IF=2.466）
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产品总蛋白提取试剂盒核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒细胞蛋白提取试剂盒组织蛋白提取试剂盒细菌蛋白提取试剂盒酵母蛋白提取试剂盒磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
I2PP2A/SET in Alzheimer disease
Neurobiology of Aging
2013 （IF=6.189）
● Xiaoling Ma et al.
Staphylococcal Panton-Valentine Leukocidin Induces
Pro-Inflammatory Cytokine Production and Nuclear Factor-Kappa B Activation in Neutrophils
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
产品磷酸化蛋白富集试剂盒膜蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒蛋白 Marker 细菌膜蛋白提取试剂盒植物总蛋白提取试剂盒植物膜蛋白提取试剂盒蛋白酶抑制剂混合物磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer

胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒说明书

胞浆蛋白—核蛋白抽提试剂盒产品编号产品名称包装SINP001 胞浆－核蛋白抽提试剂盒50×产品简介：细胞核和细胞浆目前成为研究细胞组分的两个热点，获得高浓度的细胞核蛋白和细胞浆蛋白成为得到好的研究结果的重要实验过程。

本试剂盒主要原理是在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，离心得到细胞核沉淀。

最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。

本试剂盒是本公司非放射性EMSA试剂盒（cat; SIDET001, SIDET003, SIDET004,）实验成功的重要部分，经BCA测定24cm2贴壁细胞(或50ml规格培养瓶养的悬浮细胞)抽提物，核蛋白浓度约为 2.5ug/ul或更高。

抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

本试剂盒可足够您进行50次抽提操作！包装清单：试剂包装总量5X Buffer A 1瓶35ml/瓶2X Buffer B1支 1.5ml/支Solution I（溶液I）1支 1.75ml/支Solution II（溶液II）1支 1.75ml/支Solution III（溶液III）1支 1.5ml/支PMSF Solution 1支0.85ml/支User Manual (说明书)1份1份/Kit保存温度： 4℃保存。

Ⅰ.准备抽提试剂：按照下列方法制备胞浆－核蛋白抽提液：1.制备3ml胞浆蛋白裂解液I ：试剂体积5X Buffer A0.6mlSolution I（溶液I）30ulSolution II（溶液II）30ulPMSF Solution 15uldd-H2O 2.325ml总体积 3.0ml注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。

2.制备1.02ml胞浆蛋白裂解液II：试剂体积Solution III（溶液III）20ul胞浆蛋白裂解液I 1.0ml总体积 1.02ml3.制备1ml核裂解液：试剂体积2X Buffer B25ulSolution I（溶液I）0.5ulSolution II（溶液II）0.5ulPMSF Solution0.25uldd-H2O23.75ul总体积 50ul注：PMSF Solution须在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入。

胞浆蛋白核蛋白膜蛋白抽提试剂盒(真核细胞)

胞浆蛋白/核蛋白/膜蛋白抽提试剂盒(真核细胞) (Catalog #DBI-1021 ; DBI-1022; Store kit at 4℃)描述:本试剂盒提供了蛋白抽提试剂A，蛋白抽提抽提试剂B，蛋白抽提试剂C三种具有独特组分的缓冲液。

所有试剂采用PIPES缓冲系统。

通过实验，可以得到：细胞胞浆蛋白（其中含有含有可溶性的骨架蛋白）；细胞膜蛋白（其中包含细胞质膜蛋白和细胞器膜蛋白）；细胞核蛋白；其最后剩余的沉淀为难溶性的胞质骨架和纤维蛋白。

提取方法简单，可靠，快速。

获得的各种部分蛋白纯度高，可用于PAGE 电泳、Western Blot、免疫共沉淀、EMSA等后续研究。

该试剂盒所得到的蛋白溶液适合用Bradeford法（DBI生物产品：DBI-1045,1046）蛋白定量和BCA方法（DBI生物产品：DBI-1047,1048）进行定量。

II 试剂盒组分:III.蛋白质抽提步骤:A. 注意事项和试剂准备:•打开试剂盒后，于4度保存蛋白抽提液；于-20度保存蛋白酶抑制剂，样品缓冲液（6×）。

•使用前, 加10ul的蛋白酶抑制剂于1ml蛋白抽提试剂A中，使成为蛋白抽提混合试剂(该混合物被称为Extraction Buffer Mix ——A)；加2ul的蛋白酶抑制剂于200ul蛋白抽提试剂B中，使成为蛋白抽提混合试剂(该混合物被称为Extraction Buffer Mix ——B)；加2ul的蛋白酶抑制剂于200ul蛋白抽提试剂C中，使成为蛋白抽提混合试剂(该混合物被称为Extraction Buffer Mix ——C)；试剂盒组分DBI-1021 DBI-1022 包装50 次100 次颜色蛋白抽提试剂A蛋白抽提试剂A-1蛋白抽提试剂B蛋白抽提试剂C混合型蛋白酶抑制剂(100×)SDS-PAGE 样品缓冲液(6×)50ml500ul50ml25ml1支5支100ml1000ul100ml50ml1支10支棕色棕色棕色棕色棕色绿色•在试验过程中确保抽提混合物始终保存在在碎冰中。

英文特生物技术（北京）有限公司-植物质膜蛋白提取试剂盒说明书

Minute TM 植物质膜蛋白提取试剂盒目录号：SM-005-P描述：植物膜蛋白占植物细胞总蛋白的很小一部分，但是在植物生理学中起着非常重要的作用。

传统的植物膜组分分离纯化方法是蔗糖密度梯度离心法和双液相法。

这些方法虽然比较有效，但是需要超高速离心和大量的起始原材料，操作过十分繁琐和费时。

为了克服植物膜组分提取中的缺点，我们特别开发了此款植物膜组分提取试剂盒。

植物组织首先通过缓冲液A中致敏，匀浆，然后通过一个特殊的离心管柱，在此过程中匀浆的组织通过柱子特有的Z字形通路后细胞膜被切割成大小相等的碎片，后续无需超高速离心，通过差速离心法和密度梯度离心法将天然的质膜组分从未破裂的细胞，细胞核，细胞浆和细胞器的混合物中分离出来。

在每次实验中仅需使用相同量的起始材料，离心力和离心时间，即可高度富集膜组分，并保证一致性良好。

整个操作过程大约1小时可以完成。

应用：试剂盒用于快速从植物组织中分离天然膜组分，可应用于SDS-PAGE，immunoblottings，ELISA，IP，膜蛋白质结构分析，2-D，酶活性测定及其他应用。

试剂盒组份（50次）：1. 25ml Buffer A2. 10ml Buffer B3. 50个离心管柱4. 50个收集管5. 2根塑料研磨棒6. 组织分离粉储存：Buffer A和Buffer B 需在-20℃储存所需附加材料1XPBS涡旋震荡仪台式离心机重要产品信息1.仔细阅读整个操作说明。

将缓冲液A和缓冲液B完全解冻后摇匀，放置于冰上。

将离心管柱和接收管套管放置于冰上预冷。

2.离心机请调整成RCF/Xg模式，按照离心力设置离心机，所有离心步骤都需要在4℃室温下或者低温离心机中进行。

3.研究蛋白磷酸化，磷酸酶抑制剂应在使用前加入缓冲液A中。

蛋白酶抑制剂可以选择添加或不添加，如添加在使用前加入缓冲液A中（请按照蛋白酶或磷酸酶抑制剂母液比例，例如母液是100x，添加时按照1：100添加，1ml缓冲液A添加10ul抑制剂）。

核-胞浆蛋白提取方法

产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
℃冰箱保存备用。 7. 沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在 4℃，16000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。 8. 在沉淀中加入 200μl②冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。 9. 置冰上 40 分钟，每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 10. 在 4℃，16000×g 条件下离心 10 分钟。 11. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 12. 将上述蛋白提取物定量③后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验④。
尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 4. 每 5-10×106 中加入 200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，置
冰上 15 分钟，中间每隔 5 分钟涡旋振荡或吹打混匀。 5. 再次高速涡旋振荡 5 秒，然后在 4℃，16000×g 条件下离心 5 分钟。 6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80
Journal of Ethnopharmacology
2010 Volume 128, Issue 2,
（IF=3.014）
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产品总蛋白提取试剂盒核蛋白提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒细胞蛋白提取试剂盒组织蛋白提取试剂盒细菌蛋白提取试剂盒酵母蛋白提取试剂盒磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
4. 每 20ul 细胞压积中加入 200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，

植物蛋白质组研究技术

植物蛋白质组研究技术（内部使用）一、蛋白质提取方法：直接研磨法：将植物材料剪碎于加有一定量的样品缓冲液（材料g：缓冲液ml＝1:4）的预冷的研钵中，冰上进行研磨至匀浆。

4o C下15000 rpm离心15 min，上清夜即为蛋白质抽提液。

电泳前将该提取液在相同条件下再离心一次即可。

该方法适用于极幼嫩的植物组织或幼苗以及白化、黄化苗等。

TCA/丙酮沉淀法：A）植物组织在液氮中研磨成精细的粉末后加入10％TCA（丙酮为溶剂）在－20o C下沉淀1 h以上（可以过夜）。

溶液在4o C下15000 rpm离心15 min。

沉淀用丙酮清洗三次（至丙酮为无色止），相同条件下离心后，沉淀真空干燥（约5 min 即可）。

真空干燥后所得的干粉按每30 mg加1ml样品缓冲液进行溶解（室温下1 h以上）。

可以进行振荡或超声波助溶。

溶解后的样品4o C下15000 rpm离心15 min后取上清液即为蛋白质提取液。

B）植物组织在匀浆缓冲液中4o C下研磨至匀浆【样品于缓冲液之比（g/ml）随样品的不同而有所不同，一般幼嫩或含水量比较丰富的组织为1：3－4，而生理年龄较老的组织约为1：8－10】。

匀浆液4o C下15000 rpm离心15 min后取上清液，往上清中加入50％TCA（水为溶剂）至TCA浓度为10％，冰上沉淀30 min，相同条件下离心，沉淀用丙酮清洗3次，离心后真空干燥即可得蛋白干粉。

将蛋白干粉按所需的比例溶于样品缓冲液中（振荡助溶1 h）即可。

酚抽提法：植物组织在匀浆缓冲液中4o C下研磨至匀浆【样品于缓冲液之比（g/ml）随样品的不同而有所不同，一般幼嫩或含水量比较丰富的组织为1：3－4，而生理年龄较老的组织约为1：8－10】。

匀浆液4o C下15000 rpm离心15 min后取上清液，往上清夜中加入相同体积的Tris饱和酚（pH 8.0）上下倒置充分混匀后15000 rpm离心5－10 min。

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PH1602 | 植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒
Plant Nuclear Protein and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
Catalog No：PH1602 Size： 50T | 100T Store at 2~8℃

简介
植物核蛋白和细胞质蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白和其它细胞质蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。特点： 1、使用方便。 2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。 3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。 5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重取液制备：每 500ul 预冷的蛋白提取液 A 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂；每 200ul 蛋白提取液 B 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。 2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 植物组织样本剪碎，采用以下一种方法处理：
A、加入 500ul 提取液 A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。 B、置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入 500μl 冷的提取液 A。 C、加入 500ul 提取液 A 直接置冰上研磨。
3. 高速涡旋振荡 5 秒，然后在 4℃，100×g 力条件下离心 1 分钟。 4. 收集上清，弃沉淀。 5. 将上清在 4℃，600×g 力条件下离心 1 分钟。 6. 收集沉淀，将上清移入另一干净的离心管。 7. 在沉淀中加入 100-200μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。 8. 置冰上 40 分钟，每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 9. 在 4℃，16000×g 条件下离心 10 分钟。 10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到核蛋白。 11. 在步骤 6 中的上清中加入 50ul 胞质提取液 C，高速涡旋振荡 15 秒，充分混匀。 12. 置冰上 40 分钟，每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 13. 在 4℃，16000×g 条件下离心 10 分钟。 14. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到细胞质蛋白。 15. 将上述蛋白提取物定量（建议用 BCA 法进行蛋白定量）后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验（蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染）。

注意事项
1. 本试剂盒仅供科学研究使用。 2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。 3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。 4. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。 5. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 6. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。 7. 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

组分
Component Extraction Reagent A（提取液 A） Plant Nuclear Protein Extraction Reagent B （植物细胞核蛋白提取液 B） Plant Cytoplasmic Protein Extraction Reagent C （植物胞质蛋白提取液 C） Phosphatase Inhibitor Cocktail （蛋白酶抑制剂混合物） 50 assay 25ML 10ML 100 assay 50ML 20ML
2.5ML
5ML
250ul
500ul
注意事项蛋白提取液：含多种有效成分，可以充分释放蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。蛋白酶抑制剂混合物：包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂。 1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。 2、如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。自备试剂和仪器：1)移液器、吸头；2)离心机及离心管；3)涡旋振荡器；4)冰箱，冰盒