胡萝卜组织培养教学设计培训讲学
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胡萝卜组织培养教学设计背景介绍:胡萝卜组织是一种植物组织,富含丰富的维生素和营养物质,对人体健康具有重要作用。
为了提高学生对胡萝卜的了解和认识,培养学生的兴趣和爱好,我们设计了一堂胡萝卜组织培养的教学课程。
教学目标:1. 了解胡萝卜组织的结构和功能;2. 学习胡萝卜组织的培养方法;3. 培养学生的动手能力和科学实验观察能力;4. 培养学生对胡萝卜的兴趣和爱好。
教学内容:1. 胡萝卜组织的结构和功能通过讲解胡萝卜组织的细胞结构和功能,引导学生了解胡萝卜组织的基本构成和作用。
2. 胡萝卜组织的培养方法介绍胡萝卜组织培养的基本原理和方法,包括培养基的配制、种子的消毒处理、培养条件的控制等。
3. 胡萝卜组织培养实验学生将根据教师的指导,进行胡萝卜组织培养实验。
具体步骤包括:a. 准备培养基和胡萝卜种子;b. 对种子进行消毒处理;c. 将种子放入培养基中;d. 控制培养条件,如温度、光照等;e. 观察和记录培养过程中的变化。
4. 实验结果分析与讨论学生根据实验结果,进行数据分析和讨论。
通过对实验结果的分析,学生能够进一步了解胡萝卜组织培养的过程和影响因素。
教学方法:1. 讲授法通过课堂讲解,向学生介绍胡萝卜组织的结构、功能和培养方法。
教师可以使用图片、幻灯片等多媒体工具,生动形象地展示相关知识。
2. 实验操作法学生将亲自参与胡萝卜组织培养实验,通过实际操作,培养学生的动手能力和科学实验观察能力。
3. 讨论与互动法在实验结果分析与讨论环节,教师可以引导学生进行小组讨论,促进学生之间的互动和合作,培养学生的思辨能力和团队合作精神。
教学评估:1. 实验报告学生根据实验过程和结果,撰写实验报告。
报告应包括实验目的、方法、结果、分析与讨论等内容,要求学生能够清晰地表达实验过程和结论。
2. 实验成绩评定根据学生的实验操作技能、数据分析能力和实验报告质量等方面进行评定,以全面评估学生的实验能力和科学素养。
教学资源:1. 胡萝卜组织的图示和幻灯片2. 实验室设备和试剂3. 实验操作指导书4. 实验报告模板教学时长:本次教学课程预计为2个学时,每个学时为45分钟。
胡萝卜组织培养教学设计背景介绍:胡萝卜是一种常见的蔬菜,富含多种维生素和营养物质,对人体健康有益。
为了提高学生对胡萝卜的认识和了解,培养学生对胡萝卜的种植和养护技能,本次教学设计旨在通过胡萝卜组织培养的实践活动,引导学生了解胡萝卜的生长过程和培养技术。
教学目标:1. 知识目标:了解胡萝卜的生长过程和培养技术。
2. 技能目标:掌握胡萝卜组织培养的操作步骤和技巧。
3. 情感目标:培养学生对农业和植物生长的兴趣,增强学生的实践动手能力。
教学内容:1. 胡萝卜的生长过程介绍:播种、发芽、生长、收获。
2. 胡萝卜组织培养的原理和意义。
3. 胡萝卜组织培养的操作步骤和技巧。
教学步骤:步骤一:胡萝卜的生长过程介绍(10分钟)1. 教师通过图片或视频展示胡萝卜的生长过程,介绍播种、发芽、生长和收获的各个阶段。
2. 引导学生观察和描述胡萝卜在不同生长阶段的外观特征和变化。
步骤二:胡萝卜组织培养的原理和意义(15分钟)1. 教师简要介绍胡萝卜组织培养的原理,即通过培养胡萝卜的细胞和组织,在无土条件下实现胡萝卜的生长。
2. 引导学生思考和讨论胡萝卜组织培养的意义,如提高胡萝卜的产量和品质,减少土壤污染等。
步骤三:胡萝卜组织培养的操作步骤和技巧(40分钟)1. 教师向学生介绍胡萝卜组织培养的操作步骤,包括材料准备、组织分离、培养基配制、组织培养和转移等。
2. 演示胡萝卜组织培养的操作过程,并解释每个步骤的目的和注意事项。
3. 学生分组进行实践操作,按照教师的指导完成胡萝卜组织培养的实验。
4. 教师巡回指导学生操作,并及时纠正错误和解答疑惑。
步骤四:实验结果观察和总结(15分钟)1. 学生观察和记录胡萝卜组织培养的实验结果,包括组织生长情况和细胞形态等。
2. 学生根据观察结果,总结胡萝卜组织培养的效果和影响因素。
步骤五:教学反思和讨论(10分钟)1. 教师引导学生回顾整个教学过程,让学生表达对本次教学的感受和收获。
2. 学生提出问题和困惑,教师进行解答和讨论,帮助学生进一步理解和巩固所学知识。
胡萝卜组织培养教学设计背景介绍:胡萝卜是一种常见的蔬菜,富含维生素和纤维素,具有丰富的营养价值。
为了提高学生对胡萝卜的了解,并培养他们对胡萝卜的种植和养护技能,我们设计了一套胡萝卜组织培养教学方案。
教学目标:1. 了解胡萝卜的特点、营养成份和种植环境要求。
2. 掌握胡萝卜组织培养的基本原理和方法。
3. 学会进行胡萝卜组织培养的实际操作,并能够观察和记录培养过程中的变化。
4. 培养学生的观察力、动手能力和团队合作精神。
教学准备:1. 胡萝卜种子2. 培养基(含有适当的营养物质和激素)3. 培养器具(培养皿、试管、移液器等)4. 显微镜和玻璃片5. 实验室设备和安全用品教学步骤:1. 胡萝卜的介绍(15分钟)- 讲解胡萝卜的起源、种类和营养成份。
- 引导学生思量胡萝卜对人体健康的重要性。
2. 胡萝卜组织培养原理和方法(20分钟)- 介绍胡萝卜组织培养的基本原理,包括植物组织的无菌培养和营养物质的提供。
- 演示培养基的制备和无菌操作的步骤。
- 指导学生进行无菌操作的实践练习。
3. 胡萝卜组织培养实验(60分钟)- 将学生分成小组,每组分配一定数量的胡萝卜种子和培养器具。
- 指导学生按照实验步骤进行胡萝卜组织培养。
- 强调实验过程中的安全操作和注意事项。
- 鼓励学生进行观察和记录,以便后续的数据分析和报告。
4. 实验结果分析和讨论(30分钟)- 引导学生观察和比较各组培养的胡萝卜组织的生长情况。
- 分析不同因素(如培养基配方、光照条件等)对胡萝卜组织生长的影响。
- 鼓励学生提出自己的观点和解释,并展开讨论。
5. 实验总结和展示(15分钟)- 每一个小组准备一份实验报告,包括实验目的、方法、结果和结论。
- 学生轮流进行实验结果的展示和分享。
- 教师进行总结和评价,对学生的表现赋予肯定和指导。
教学评估:1. 观察学生在实验中的表现,包括操作技能和实验记录的准确性。
2. 评估学生对胡萝卜组织培养原理和方法的理解程度,通过课堂讨论和小组报告进行评价。
胡萝卜组织培养教学设计一、背景介绍胡萝卜是一种常见的蔬菜,富含维生素和纤维素,对人体健康有不少好处。
为了提高人们对胡萝卜的认识和培养胡萝卜种植的技能,我们计划开展一项胡萝卜组织培养教学活动。
通过这项活动,学生将了解胡萝卜的生长过程和种植技巧,培养他们对胡萝卜的兴趣和爱护之心。
二、教学目标1. 了解胡萝卜的生长过程和种植要求。
2. 学会胡萝卜的组织培养技术。
3. 培养学生对胡萝卜的兴趣和爱护之心。
4. 培养学生的观察、分析和解决问题的能力。
三、教学内容和步骤1. 胡萝卜的生长过程介绍(30分钟)a. 胡萝卜的种子和幼苗阶段。
b. 胡萝卜的生长环境和生长要求。
c. 胡萝卜的生长周期和生长特点。
2. 胡萝卜的组织培养技术介绍(60分钟)a. 胡萝卜组织培养的原理和方法。
b. 胡萝卜组织培养的材料和设备准备。
c. 胡萝卜组织培养的步骤和注意事项。
d. 实际操作演示和学生亲自尝试。
3. 胡萝卜组织培养实验(120分钟)a. 学生分组进行胡萝卜组织培养实验。
b. 学生观察和记录胡萝卜组织培养的过程和结果。
c. 学生分析实验数据,总结子验结果。
4. 胡萝卜的栽培技巧介绍(30分钟)a. 胡萝卜的播种时间和方法。
b. 胡萝卜的土壤要求和灌溉管理。
c. 胡萝卜的病虫害防治措施。
5. 胡萝卜的品尝和评价(30分钟)a. 学生品尝新鲜的胡萝卜。
b. 学生评价胡萝卜的口感和营养价值。
c. 学生分享种植胡萝卜的心得和体味。
四、教学评估1. 学生的参预度和表现评估。
2. 学生对胡萝卜生长和组织培养的理解评估。
3. 学生对胡萝卜栽培技巧的掌握评估。
4. 学生对胡萝卜品尝和评价的表达评估。
五、教学资源和材料1. 胡萝卜的种子和幼苗。
2. 胡萝卜组织培养的试验器具和培养基。
3. 胡萝卜栽培的工具和土壤。
4. 胡萝卜的相关图片和视频资料。
5. 学生的观察记录表和实验报告模板。
六、教学反思通过这次胡萝卜组织培养教学活动,学生对胡萝卜的生长过程和种植技巧有了更深入的了解,培养了他们对胡萝卜的兴趣和爱护之心。
胡萝卜组织培养教学设计背景:胡萝卜是一种常见的蔬菜,富含丰富的营养物质,对人体健康有着重要的作用。
为了提高胡萝卜的种植效率和品质,需要对胡萝卜的组织培养进行教学设计,以培养学生对胡萝卜组织培养的理解和操作能力。
目标:本教学设计旨在匡助学生理解胡萝卜组织培养的原理和方法,培养学生的实验技能和科学思维能力。
具体目标包括:1. 理解胡萝卜组织培养的概念和意义;2. 掌握胡萝卜组织培养的基本步骤和操作技巧;3. 能够设计并进行胡萝卜组织培养实验;4. 分析实验结果,总结经验并提出改进意见。
教学内容:本教学设计包括以下几个部份:1. 胡萝卜组织培养的概念和意义:通过讲解和讨论,引导学生了解胡萝卜组织培养的定义、目的和应用领域,以及对胡萝卜产量和品质的影响。
2. 胡萝卜组织培养的基本步骤和操作技巧:通过实际操作演示和实验视频展示,教授学生胡萝卜组织培养的基本步骤,包括材料准备、无菌操作、培养基配制、组织切割和培养条件控制等。
3. 胡萝卜组织培养实验设计:学生根据所学知识,设计自己的胡萝卜组织培养实验,包括选择适当的胡萝卜组织样本、培养基配制和培养条件设置等。
4. 胡萝卜组织培养实验操作:学生按照实验设计,进行胡萝卜组织培养实验,注意无菌操作和培养条件的控制。
5. 实验结果分析和总结:学生根据实验结果,进行数据分析和总结,探讨实验中可能存在的问题和改进的方法。
教学方法:本教学设计采用多种教学方法,包括讲授、讨论、实验演示、实验操作和数据分析等。
通过多种教学方法的有机结合,提高学生的学习兴趣和参预度,培养学生的实践能力和创新思维。
教学评估:为了评估学生对胡萝卜组织培养教学的掌握程度,本教学设计将采用以下几种评估方法:1. 课堂讨论和提问:通过课堂讨论和提问,检查学生对胡萝卜组织培养的理解和掌握情况。
2. 实验操作评估:对学生的实验操作进行评估,检查学生的实验技能和无菌操作能力。
3. 实验报告评估:对学生的实验报告进行评估,检查学生对实验结果的分析和总结能力。
胡萝卜组织培养教学设计
引言概述:
胡萝卜组织培养是生物学实验中常见的实验项目之一,通过培养胡萝卜组织,
可以观察细胞的生长和分化过程,为学生深入了解植物细胞生物学提供了实践机会。
本文将介绍胡萝卜组织培养教学设计的相关内容,包括实验目的、实验材料、实验步骤、实验结果分析和实验注意事项。
一、实验目的
1.1 观察植物细胞的生长和分化过程。
1.2 理解植物细胞培养的原理和方法。
1.3 学习细胞培养技术的操作步骤。
二、实验材料
2.1 需要准备的材料包括:胡萝卜、琼脂培养基、生长激素等。
2.2 实验器材包括培养皿、移液器、显微镜等。
2.3 实验环境要求无菌条件,确保实验结果的准确性。
三、实验步骤
3.1 从胡萝卜中取出组织样本,进行消毒处理。
3.2 将组织样本切割成小块,放入含有生长激素的琼脂培养基中。
3.3 将培养皿放置在恒温箱中,定期观察组织的生长情况。
四、实验结果分析
4.1 观察胡萝卜组织在培养基中的生长情况。
4.2 分析细胞的分化和增殖情况。
4.3 结合显微镜观察细胞的形态和结构,进行实验结果的定量分析。
五、实验注意事项
5.1 实验过程中要注意无菌操作,避免细菌污染。
5.2 实验结束后要及时清理实验器材,保持实验室整洁。
5.3 学生在进行实验时要注意安全,避免发生意外情况。
结语:
通过胡萝卜组织培养教学设计,学生可以深入了解植物细胞的生长和分化过程,提高实验操作能力和科学素养。
希望本文的介绍可以帮助教师更好地设计和开展胡萝卜组织培养实验,为学生的学习提供更多的实践机会。
胡萝卜组织培养教学设计引言概述:胡萝卜是一种常见的蔬菜,富含维生素和纤维,对人体健康非常有益。
为了更好地了解胡萝卜的组织培养方法,本文将介绍一种胡萝卜组织培养的教学设计。
通过这个教学设计,学生将学习到如何培养胡萝卜的组织,培养技巧以及相关的实验操作。
一、培养基的准备1.1 了解培养基的组成胡萝卜组织培养所需的培养基是由多种营养物质组成的。
学生需要了解培养基中的主要成分,如无机盐、有机物质、植物激素等。
同时,还需要了解培养基的pH值和浓度等参数对培养效果的影响。
1.2 制备培养基学生需要学习如何准备胡萝卜组织培养所需的培养基。
制备培养基的过程包括称量和溶解培养基的各种成分,调节pH值和浓度,最终得到适合胡萝卜组织培养的培养基。
1.3 灭菌和保存在进行组织培养实验之前,培养基需要进行灭菌处理,以避免细菌和真菌的污染。
学生需要学习灭菌的方法,如高温灭菌和化学灭菌。
此外,学生还需要学习如何保存培养基,以便后续的实验使用。
二、胡萝卜种子的处理2.1 种子的消毒在进行组织培养之前,胡萝卜种子需要进行消毒处理,以杀灭种子表面的细菌和真菌。
学生需要学习消毒的方法,如用酒精或漂白粉处理种子。
2.2 种子的激素处理为了促进种子的萌发和胡萝卜组织的生长,学生需要学习如何使用植物激素处理种子。
植物激素的浓度和处理时间对种子的生长和组织的培养有重要影响,学生需要学会合理调节激素的浓度和处理时间。
2.3 种子的萌发和筛选经过激素处理后,胡萝卜种子将在培养基上迅速萌发。
学生需要学习如何观察和筛选萌发的种子,选择生长良好的幼苗作为后续组织培养的材料。
三、组织的切割和培养3.1 组织的切割学生需要学习如何从胡萝卜幼苗中切割出适合组织培养的部分。
切割时需要注意操作的卫生和准确性,以避免细菌和真菌的污染。
3.2 组织的培养切割下来的胡萝卜组织需要在培养基上进行培养。
学生需要学习如何将组织放置在培养基上,以及如何调节培养基的条件,如温度、光照和湿度等。
胡萝卜组织培养教学设计引言概述:胡萝卜是一种常见的蔬菜,其组织培养在生物学教学中具有重要意义。
通过胡萝卜组织培养实验,学生可以了解植物生长发育的基本原理,培养实验操作能力和科学研究精神。
因此,设计一套科学合理的胡萝卜组织培养教学方案至关重要。
一、实验目的1.1 匡助学生了解植物细胞培养的基本原理和技术。
1.2 培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
1.3 培养学生的科学研究意识和团队协作能力。
二、实验材料和仪器2.1 胡萝卜组织样本:新鲜胡萝卜块或者悬浮液。
2.2 培养基:含有适当营养物质和植物激素的培养基。
2.3 实验器材:培养皿、移液器、显微镜等。
三、实验步骤3.1 准备工作:将胡萝卜组织样本切割成小块,消毒处理。
3.2 培养基配置:根据实验要求配置含有适当植物激素的培养基。
3.3 培养操作:将胡萝卜组织样本置于培养基中,定期观察生长情况。
四、实验观察和分析4.1 观察胡萝卜组织的生长情况:记录组织的颜色、形态和大小变化。
4.2 分析培养结果:根据观察结果分析植物细胞的分化和增殖情况。
4.3 讨论实验意义:与学生一起讨论实验结果,引导学生总结子验经验。
五、实验总结与展望5.1 总结子验成果:总结子验过程中遇到的问题和解决方法,总结子验结果。
5.2 展望未来研究:探讨胡萝卜组织培养在生物学研究中的应用前景。
5.3 提出改进建议:根据实验过程中的经验,提出改进教学设计的建议。
通过以上胡萝卜组织培养教学设计方案,可以匡助学生深入了解植物细胞培养的原理和技术,培养他们的实验操作能力和科学研究意识,为未来的科学研究打下坚实基础。
同时,教师在实施教学过程中也要根据学生的实际情况进行调整和改进,不断提高教学质量和教学效果。
胡萝卜组织培养教学设计教学设计:胡萝卜组织培养背景介绍:胡萝卜是一种常见的蔬菜,富含维生素A、维生素C、钾等营养物质,对人体健康具有重要作用。
为了培养学生对胡萝卜组织培养的基本知识和技能,本教学设计旨在通过实践活动,让学生了解胡萝卜组织培养的原理、步骤和应用。
教学目标:1. 了解胡萝卜组织培养的概念和意义;2. 掌握胡萝卜组织培养的基本步骤;3. 能够观察和描述胡萝卜组织培养的过程;4. 培养学生的动手实践能力和科学思维能力。
教学准备:1. 胡萝卜;2. 培养基(含有适当的营养物质);3. 培养瓶或培养皿;4. 细胞培养箱或温室;5. 显微镜;6. 实验报告表格。
教学过程:引入:1. 引导学生回顾胡萝卜的营养价值,并提出胡萝卜组织培养的概念和意义。
实验操作:2. 将胡萝卜均匀切成薄片,放入含有培养基的培养瓶或培养皿中。
3. 将培养瓶或培养皿放入细胞培养箱或温室中,保持适宜的温度和湿度。
4. 观察胡萝卜组织的生长情况,记录观察结果。
讨论与总结:5. 引导学生通过观察和讨论,总结胡萝卜组织培养的基本步骤和注意事项。
6. 让学生就胡萝卜组织培养的应用领域展开讨论,如植物生理研究、植物育种等。
实验报告:7. 要求学生根据实验结果和讨论内容,撰写实验报告。
8. 实验报告包括实验目的、材料与方法、观察结果、讨论与总结等部分。
评价与展望:9. 对学生的实验报告进行评价,包括实验操作的准确性、观察结果的描述准确性、讨论与总结的深度等。
10. 展望胡萝卜组织培养的未来发展,并鼓励学生继续探索与研究。
教学延伸:11. 鼓励有兴趣的学生开展相关的科学研究项目,如探究不同培养基对胡萝卜组织生长的影响等。
教学反思:12. 教师对本次教学活动进行反思,总结教学过程中的优点和不足,为今后的教学改进提供参考。
通过本次教学设计,学生可以通过实践活动了解胡萝卜组织培养的基本知识和技能,培养他们的动手实践能力和科学思维能力。
同时,通过讨论和实验报告的撰写,培养学生的表达能力和科学研究能力。
胡萝卜组织培养教学设计引言概述:胡萝卜组织培养是生物学实验课程中常见的实验项目之一,通过培养胡萝卜组织,学生可以了解植物的生长过程和组织培养技术。
本文将介绍一套胡萝卜组织培养的教学设计,帮助教师更好地进行实验教学。
一、实验目的1.1 帮助学生了解植物胡萝卜的生长过程和组织培养技术。
1.2 培养学生的实验操作能力和观察分析能力。
1.3 培养学生的团队合作意识和科学研究精神。
二、实验材料准备2.1 胡萝卜:选择新鲜的胡萝卜,去皮切成小段备用。
2.2 培养基:准备含有适当植物激素的培养基,促进组织生长。
2.3 实验器材:包括培养皿、移液器、显微镜等实验器材。
三、实验步骤3.1 培养基制备:将培养基倒入培养皿中,待凝固。
3.2 组织培养:将胡萝卜组织放入培养基中,放置在适当的温度和光照条件下。
3.3 观察记录:定期观察胡萝卜组织的生长情况,记录生长速度和形态变化。
四、实验结果分析4.1 生长速度:观察不同培养条件下胡萝卜组织的生长速度,比较结果。
4.2 形态变化:观察胡萝卜组织的形态变化,分析植物生长的规律。
4.3 实验效果评价:评价实验结果的可靠性和教学效果,总结实验经验。
五、实验拓展5.1 实验设计:根据胡萝卜组织培养实验结果,设计相关实验课题。
5.2 实验研究:开展更深入的植物组织培养研究,探索新的实验方向。
5.3 实验应用:将胡萝卜组织培养技术应用于其他植物的组织培养实验中,拓展实验内容。
结语:通过以上教学设计,胡萝卜组织培养实验可以更好地帮助学生理解植物生长过程和培养技术,培养他们的实验操作能力和科学研究精神。
教师可以根据实际情况进行适当调整,提高实验教学的效果和趣味性。
希望本文的内容对胡萝卜组织培养教学设计有所帮助。
胡萝卜组织培养教学设计
小组成员:何家会、宋亚伟、冯海艳、尹化、黄洁、牛伟坤
一、教学目标
1、知识目标:
说明植物组织培养的基本原理,学习植物组织培养的基本技术,进行胡萝卜的组织培养。
2、能力目标:
掌握培养基制备、外植体消毒、接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术。
3、情感目标:
关注植物组织培养技术在实践生活中的运用,养成严谨的科学素养。
二、实验目的
1、掌握植物组织培养过程中的愈伤组织诱导和生根培养技术。
2、掌握植物组织培养过程中使用的无菌技术。
三、实验原理
植物组织培养:
指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体explant),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。
植物细胞全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞,都拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
•外植体:从植物体上分离下来的用于离体培养的那部分材料。
•愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则薄壁
细胞,多在植物体切面上产生。
•脱分化:已分化好的组织细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分生组织状态的过程。
或者说是由高度分化的植物组织或器官产生
愈伤组织的过程。
•再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程,重新形成各类组织和器官的过程。
或者说是由愈伤组织再生出小植株的过程。
•植物体的任何一个细胞都具有全能性。
分化了的植物根、茎、叶等组织器官在一定的条件下进行离体培养,给于一定的营养和激素,可以脱分化为愈伤组织。
愈伤组织在不同的营养和激素的作用下,又可以再生出完整的小植株。
植物的脱分化和再分化培养,证明分化了的植物细胞仍具有形成完整植株所需要的全套基因。
四、实验材料与方法
实验材料
•胡萝卜(新鲜幼嫩)
•MS培养基+2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA
•70%酒精2.5%NaCLO无菌水超净工作台、光照培养架、高压蒸汽灭菌锅、恒温振荡器、打孔器、小刀、培养皿、解剖刀、镊子、植物组培试剂盒。
实验方法
•培养基的配制。
•小麦籽粒用无菌水浸泡10小时。
•取材、消毒和接种。
五、实验过程
胡萝卜愈伤组织的诱导
1、外植体消毒
用清水洗干净胡萝卜直根,用小刀给其削去表皮,并切成小段放入烧杯中。
先用70%酒精对胡萝卜直根消毒5min,用无菌吸水纸吸干,再用10%的次氯酸钠溶液消毒10min(或用0.1%的升汞消毒10min,接着用无菌水漂洗一遍,再用无菌水浸泡30min),放入无菌水中漂洗2~3次,用无菌吸水纸吸干待用。
2、外植体接种
把消毒好的胡萝卜直根放入无菌培养皿中,用消毒好的小刀沿截面将其横切成厚度1mm左右的小圆片,然后将小圆片的韧皮部和木质部切去,留下形成层,
再将形成层切成大约长5mm、宽5mm、高1mm的小长块。
为了操作简便、快速,外植体美观,建议使用打孔器切取胡萝卜外植体。
具体操作方法: 把消毒好的胡萝卜直根放于无菌培养皿中(建议使用一次性塑料培养皿),用小刀将其切成2-3cm的小段,用灭过菌的打孔器沿着形成层穿入胡萝卜中,取得一段含有形成层的2-3cm的圆柱体,然后用无菌解剖刀片将其切成厚1mm的小薄片。
左手持锥形瓶,右手拉开捆扎锥形瓶的绳子,并将封口膜攥于右手手心以避免封口膜接触瓶口的一面被污染,左手持瓶,使瓶口旋转通过火焰,右手用镊子夹取胡罗卜直根,插入培养基中,插入时应注意方向不要倒插,每瓶接种6-8块外植体,接种后将封口膜重新扎好。
3、培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒放于黑暗处25℃条件下进行暗培养,50d后长出淡黄色愈伤。
4、愈伤组织转移到生根培养基
将愈伤组织转移到生根培养基,长出根后,壮苗,等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
六、注意事项
1、培养基消毒、外植体消毒、超净台消毒和操作者无菌操作是否符合规范,是防止菌类污染的关键;
2、每剥离接种完一个胚,接种工具均要在点燃的酒精灯上进行烧灼消毒。
3、每一步操作都不要远离酒精灯火焰无菌区。
4、注意防火(盛有酒精用于浸泡接种工具的器皿要远离酒精灯)。
5、接种结束后,清理和关闭超净工作台。
七、预期实验结果
胡萝卜的离体组织经植物组织培养技术长成完整植株。
八、结果分析与评价
1、接种3-4天后,观察外植体的生长情况,统计有多少外植体被污染,有多少能正常生长。
分析外植体被污染的原因。
2、一周后观察愈伤组织的分化情况,填好实验记录表,并及时分析结果。
3、幼苗移栽到露地后,能够正常生长吗?。