2012 胡萝卜组织培养

高中生物实验：胡萝卜的组织培养一、实验目的：胡萝卜是细胞和组织培养中常用的经典材料，是教学实验的良好材料。

通过本实验实训，要求学生熟悉胡萝卜离体根培养的基本方法和步骤，掌握愈伤组织诱导的基本技能。

二、实验原理：植物体的茎，根，叶细胞一般都具有全能性，在一定条件的营养和激素等条件下，可以脱分化形成愈伤组织。

将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。

植物组织培养的全过程，证明了分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的全部基因。

三、实验用具：超净台解剖刀刮皮刀不锈钢打孔器培养皿温箱四、方法步骤：1. 将胡萝卜用自来水冲洗干净，用刮皮刀除去表皮1-2mm，横切成大约10mm厚的切片。

以下步骤均在无菌条件下进行。

2. 胡萝卜片经70%乙醇处理30秒钟后，用无菌水冲洗一遍，再用、2%的次氯酸钠溶液浸泡10分钟，无菌水冲洗3~4次。

3. 将胡萝卜片放入培养皿中，一手用镊子固定胡萝卜片，一手用打孔器垂直打孔，每个小孔打在靠近维管形成层的区域，务必打穿组织。

然后从组织片中抽出打孔器，将胡萝卜组织片收集在装有无菌水的培养皿。

重复打孔步骤，直至收集到足够数量的组织圆片。

4. 用镊子取出组织圆片，放入培养皿中，用刀片将组织圆片切成2mm长的小块，放入装有无菌水的培养皿中。

在整个操作过程中镊子和解剖刀要多次火焰消毒，冷却后再使用。

5、将胡萝卜组织小块放到灭过菌的滤纸上，吸干水分后接种到培养基表面。

注意接种时培养瓶要有一定倾斜度，接种过程中镊子不要直接在培养基上方完成，以减少污染机会。

6、将培养物一部分置于25。

C温箱中暗培养，另一部分到光照培养室中进行培养，以比较光照和暗培养对愈伤组织诱导的反应。

胡萝卜组织培养教学设计背景介绍：胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含多种维生素和营养物质，对人体健康有益。

为了提高学生对胡萝卜的认识和了解，培养学生对胡萝卜的种植和养护技能，本次教学设计旨在通过胡萝卜组织培养的实践活动，引导学生了解胡萝卜的生长过程和培养技术。

教学目标：1. 知识目标：了解胡萝卜的生长过程和培养技术。

2. 技能目标：掌握胡萝卜组织培养的操作步骤和技巧。

3. 情感目标：培养学生对农业和植物生长的兴趣，增强学生的实践动手能力。

教学内容：1. 胡萝卜的生长过程介绍：播种、发芽、生长、收获。

2. 胡萝卜组织培养的原理和意义。

3. 胡萝卜组织培养的操作步骤和技巧。

教学步骤：步骤一：胡萝卜的生长过程介绍（10分钟）1. 教师通过图片或视频展示胡萝卜的生长过程，介绍播种、发芽、生长和收获的各个阶段。

2. 引导学生观察和描述胡萝卜在不同生长阶段的外观特征和变化。

步骤二：胡萝卜组织培养的原理和意义（15分钟）1. 教师简要介绍胡萝卜组织培养的原理，即通过培养胡萝卜的细胞和组织，在无土条件下实现胡萝卜的生长。

2. 引导学生思考和讨论胡萝卜组织培养的意义，如提高胡萝卜的产量和品质，减少土壤污染等。

步骤三：胡萝卜组织培养的操作步骤和技巧（40分钟）1. 教师向学生介绍胡萝卜组织培养的操作步骤，包括材料准备、组织分离、培养基配制、组织培养和转移等。

2. 演示胡萝卜组织培养的操作过程，并解释每个步骤的目的和注意事项。

3. 学生分组进行实践操作，按照教师的指导完成胡萝卜组织培养的实验。

4. 教师巡回指导学生操作，并及时纠正错误和解答疑惑。

步骤四：实验结果观察和总结（15分钟）1. 学生观察和记录胡萝卜组织培养的实验结果，包括组织生长情况和细胞形态等。

2. 学生根据观察结果，总结胡萝卜组织培养的效果和影响因素。

步骤五：教学反思和讨论（10分钟）1. 教师引导学生回顾整个教学过程，让学生表达对本次教学的感受和收获。

2. 学生提出问题和困惑，教师进行解答和讨论，帮助学生进一步理解和巩固所学知识。

胡萝卜组织培养教学设计一、背景介绍胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含维生素和纤维素，对人体健康有很多好处。

为了提高学生对胡萝卜的了解和培养他们的兴趣，本教学设计旨在通过多种教学方法和活动，帮助学生全面了解胡萝卜的生长过程和营养价值，并培养学生的观察力、思考能力和动手能力。

二、教学目标1. 知识目标：a. 了解胡萝卜的外观特征和生长环境。

b. 了解胡萝卜的营养成分和对人体健康的好处。

2. 能力目标：a. 培养学生的观察力和描述能力。

b. 培养学生的思考能力和问题解决能力。

c. 培养学生的动手能力和团队合作精神。

3. 情感目标：a. 培养学生对胡萝卜的兴趣和喜爱。

b. 培养学生的环保意识和对自然的敬畏心。

三、教学内容和步骤1. 教学内容：a. 胡萝卜的外观特征和生长环境。

b. 胡萝卜的营养成分和对人体健康的好处。

c. 胡萝卜的种植和生长过程。

2. 教学步骤：步骤一：导入通过展示一些胡萝卜的图片，引起学生对胡萝卜的兴趣，并提问学生对胡萝卜的了解程度。

步骤二：胡萝卜的外观特征和生长环境a. 教师通过图片和文字介绍胡萝卜的外观特征和生长环境。

b. 学生观察并描述胡萝卜的外观特征，教师引导学生进行讨论和总结。

步骤三：胡萝卜的营养成分和对人体健康的好处a. 教师通过图片和文字介绍胡萝卜的营养成分和对人体健康的好处。

b. 学生分组进行小组讨论，总结胡萝卜的营养成分和对人体健康的好处。

步骤四：胡萝卜的种植和生长过程a. 教师通过图片和文字介绍胡萝卜的种植和生长过程。

b. 学生观察并描述胡萝卜的种植和生长过程，教师引导学生进行讨论和总结。

步骤五：实践活动a. 学生分组进行胡萝卜的种植实验，每个小组负责一盆胡萝卜的种植。

b. 学生记录胡萝卜的生长过程，并定期观察和测量胡萝卜的生长情况。

步骤六：总结和展示a. 学生小组展示他们种植的胡萝卜，并分享他们的观察和体验。

b. 教师引导学生总结本次教学的重点和收获，鼓励学生提出问题和思考。

胡萝卜愈伤组织的诱导摘要:植物组织培养的基础是利用细胞的全能性即指已经分化了的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能，植物组织培养不仅能使处于分生状态的细胞继续保持分生能力,同时也可以使成熟组织中的细胞恢复分裂能力。

了解胡萝卜的植物组织培养的基本概念、基本原理和操作方法知道分化的植物细胞仍具有形成完整植株所需要的全部基因。

胡萝卜的植物组织培养主要研究不同的植物生长调节剂(2,4-D、6-BA)对胡萝卜脱分化形成愈伤组织速度的影响。

实验表明在母液中加入6-BA(0.5mg/L)+ 2,4-D(1.0mg/L)的不如单独加入2,4-D(2.2 mg/L)形成愈伤组织的速度快,效果好。

关键词：胡萝卜；分化；愈伤组织；诱导一、引言植物组织培养新技术在快繁脱毒、育种、种质资源保存、次生代谢物提取、基因转化等方面有着良好的前景以及研究热点。

在植物育种上的应用：单倍体育种，离体胚培养和体外受精，细胞融合，基因转化，培养细胞突变体、在植物脱毒和快速繁殖上、在人工种子和种质保存方面、在提取植物次生产物生产上、在植物免疫方面的皆能有其应用。

在组织培养过程中，常会遇到一些问题使实验无法进行下去，甚至导致整个实验的失败，给科研和生产造成损失。

如培养过程中的污染，褐变和玻璃化是组织培养中公认的三大难题。

胡萝卜营养价值高,及其适于生食、加工、烹调等多种用途,在世界范围内广泛栽培。

从20世纪初到近几年，胡萝卜一直是科研人员的主要研究对象。

20世纪50年代末Saward等人从胡萝卜根的韧皮部取下一块组织，并将它置于液体培养基中进行培养，使它分化出愈伤组织，然后把从愈伤组织所得到的胚状体转移到固体培养基上继续培养，获得了完整的胡萝卜试管植株。

同一基因型的不同外植体其愈伤组织的发生能力有明显差异，这与不同外植体的分化程度和脱分化能力不同有关。

近年来的研究表明，以胡萝卜下胚轴为外植体出愈率要高于子叶和贮藏根。

培养方法:1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙子培养基上进行培养，利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。

胡萝卜的组织培养（一）组织培养1．准备（1）器具准备：①高压蒸汽灭菌锅：培养基，接种工具，蒸馏水的消毒。

手持喷雾器：装70%的酒精，用于外植体，接种工具，操作人员的消毒。

②超净工作台：用于无菌操作。

③设备：培养架，温度控制器，摇床，光照培养箱，烘干器，蒸馏水器，冰箱，电炉，天平，温度计，酸度计，显微镜，分注器，移液器，磁力搅拌器，④常用玻璃器具：量筒，培养皿，烧杯，50ml锥形瓶，容量瓶，广口瓶，滴管，移液管，试管，酒精灯，玻璃棒，⑤常用金属仪器：镊子，剪刀，解剖刀，解剖针，接种针，刀架⑥其他用品：滤纸，标签，消毒酒精棉球，封口用品（2）试剂：MS基本培养基2,4-D：生长素类似物NAA：生长素类似物6-BA：细胞分裂素类似物酒精（体积分数70%）：消毒次氯酸钠（体积分数20%）：消毒无菌水A.MS基本培养基配方：上述4种储备液+30g蔗糖+8g琼脂+蒸馏水定容至1000mL（pH5.6~5.8）B.分别向MS基本培养基中加入植物激素：（pH5.6~5.8）诱导愈伤组织形成培养基：MS+0.5mg/L 6-BA+0.125 mg/L2,4-D诱导分化芽的培养基：MS+1.0mg/L 6-BA + 0.1 mg/LNAA诱导生根的培养基：MS+0.1 mg/L NAA3.灭菌：灭菌后冷却置于常温下观察3天，检查灭菌是否彻底。

4.取材接种：a．将萝卜洗净削皮切段，擦手消毒。

b．在超净工作台上将萝卜用酒精消毒30秒，用无菌水清洗两到三次，用次氯酸钠溶液处理30min，用无菌水清洗两到三次。

c．用无菌滤纸吸取水分，在培养皿上用无菌刀将萝卜切成1cm厚的横切片，选取有形成层的部位，切取1cm2的小块。

d．将组织块接种到培养基上，封口。

贴上标签，写明材料、日期、编号。

e．将培养基放在23-26°C的恒温箱培养。

4天后观察材料污染情况，14天后，观察愈伤组织生长情况。

5观察记录：每天观察外植体的生长情况，记录愈伤组织的大小、质地、颜色等情况。

本科学生综合性实验报告
学号：104120265 姓名：段昌福
学院：生命科学学院专业、班级：10应用生物教育B班实验课程名称：胡萝卜肉质根愈伤组织诱导、继代增殖、细胞悬浮及体细胞胚胎发生培养实验
教师：杨世忠
开课学期：2013 至2014 学年第二学期填报时间：2013 年 6 月日
云南师范大学教务处编印
）无菌操作流程：
二．实验报告
书中横卧着整个过去的灵魂——卡莱尔
人的影响短暂而微弱，书的影响则广泛而深远——普希金
人离开了书，如同离开空气一样不能生活——科洛廖夫
书不仅是生活，而且是现在、过去和未来文化生活的源泉——库法耶夫
书籍把我们引入最美好的社会，使我们认识各个时代的伟大智者———史美尔斯
书籍便是这种改造灵魂的工具。

人类所需要的，是富有启发性的养料。

而阅读，则正是这种养料———雨果。

胡萝卜组织培养教学设计背景介绍：胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含多种维生素和矿物质，对人体健康非常有益。

为了促进胡萝卜的种植和消费，我们计划开展一项胡萝卜组织培养教学活动。

通过该活动，我们希望能够向学生们介绍胡萝卜的生长过程和培养技术，提高他们对胡萝卜的认识和兴趣。

活动目标：1. 了解胡萝卜的生长过程和培养技术。

2. 培养学生对胡萝卜的兴趣和意识。

3. 培养学生的观察、实验和团队合作能力。

活动内容：1. 胡萝卜生长过程介绍：通过幻灯片或视频展示，向学生们介绍胡萝卜的生长过程，包括种子发芽、幼苗生长、根茎形成等。

2. 胡萝卜培养实验：将学生分成小组，每个小组提供一盆胡萝卜种子和土壤。

指导学生按照正确的方法进行胡萝卜的种植和培养，包括选择适宜的土壤、浇水、施肥等。

3. 观察和记录：学生们每天观察胡萝卜的生长情况，并记录下来。

可以使用相机或绘图的方式记录胡萝卜的不同生长阶段。

4. 团队合作：学生们在小组中共同合作，分工合作，互相帮助，共同完成胡萝卜的培养过程。

鼓励学生们分享经验和交流学习成果。

5. 结果展示：活动结束后，学生们将展示他们培养的胡萝卜植株，并分享他们的观察和记录。

可以组织一个胡萝卜品尝会，让学生们亲自品尝自己培养的胡萝卜。

活动时间安排：1. 第一周：介绍胡萝卜的生长过程和培养技术，并分组进行胡萝卜种植。

2. 第二周至第六周：学生们观察和记录胡萝卜的生长情况，并进行必要的护理工作。

3. 第七周：学生们展示他们培养的胡萝卜植株，并进行品尝会。

活动评估：1. 观察记录评估：根据学生们的观察记录，评估他们对胡萝卜生长过程的理解和观察能力。

2. 团队合作评估：评估学生们在小组合作中的表现，包括分工合作、互相帮助等。

3. 结果展示评估：评估学生们对胡萝卜培养结果的展示和分享能力。

活动资源准备：1. 幻灯片或视频介绍胡萝卜的生长过程。

2. 胡萝卜种子和土壤。

3. 相机或绘图工具用于记录胡萝卜的生长情况。

4. 活动展示和品尝会所需的场地和设备。

胡萝卜组织培养教学设计背景介绍：胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含多种维生素和矿物质，对人体健康具有重要的保健作用。

为了提高人们对胡萝卜的认识和培养胡萝卜的种植技能，我们计划开展一项胡萝卜组织培养教学活动。

活动目标：1. 培养学生对胡萝卜的兴趣和认识；2. 培养学生的观察和实践能力；3. 培养学生的合作意识和团队精神；4. 培养学生的种植技能和绿色环保意识。

活动内容：1. 胡萝卜的介绍：通过讲解胡萝卜的起源、营养价值、种类等方面的知识，引发学生对胡萝卜的兴趣和好奇心。

2. 胡萝卜的观察：组织学生观察不同种类的胡萝卜，了解其形状、颜色、大小等特点，并让学生用手触摸胡萝卜的表面，感受其质地。

3. 胡萝卜的种植：向学生介绍胡萝卜的种植方法和技巧，包括土壤准备、播种、浇水、施肥等环节。

然后，分成小组，每个小组分配一块土地，让学生亲自动手进行胡萝卜的种植实践。

4. 胡萝卜的生长观察：学生定期观察胡萝卜的生长情况，记录胡萝卜的高度、叶子的颜色、根部的形状等信息，并与其他小组的观察结果进行比较，探讨影响胡萝卜生长的因素。

5. 胡萝卜的采摘和品尝：当胡萝卜生长到一定程度时，学生可以亲自采摘胡萝卜，并进行清洗和处理。

然后，组织学生品尝胡萝卜，了解其口感和味道，并讨论胡萝卜对健康的益处。

6. 胡萝卜的创意应用：鼓励学生发挥创造力，将胡萝卜应用于烹饪、制作美食或制作手工艺品等方面，展示胡萝卜的多样性和可塑性。

活动评估：1. 观察记录：通过学生的观察记录，评估学生对胡萝卜的观察能力和记录能力。

2. 口头表达：组织学生进行小组讨论，让学生分享自己的观察结果和体会，评估学生的口头表达能力和团队合作能力。

3. 作品展示：学生可以展示自己制作的胡萝卜相关作品，如烹饪成果、手工艺品等，评估学生的创意能力和实践能力。

活动时间安排：本次活动预计在一个月内完成，具体时间安排如下：- 第一周：胡萝卜的介绍和观察；- 第二周：胡萝卜的种植和生长观察；- 第三周：胡萝卜的采摘和品尝；- 第四周：胡萝卜的创意应用和活动总结。

北京师范大学珠海分校实验报告姓名：实验名称：胡萝卜愈伤组织的诱导学院（系、所）：工程技术学院学科专业：生物技术导师姓名：报告时间：2012.2.15—2012.3.20实验序号01实验名称胡萝卜愈伤组织的诱导实验时间2012.2.15—2012.3.20实验室工程技术学院1206 1209 1．研究背景1.1 胡萝卜胡萝卜（Daucus carrot），属于十字花科植物，是一种十分重要的蔬菜植物。

由于其营养价值高,及其适于生食、加工、烹调等多种用途,在世界范围内广泛栽培。

中国是农业大国,胡萝卜作为蔬菜作物在人们生活中起着重要的作用.因此,加快我国胡萝卜育种研究以成为迫切需要。

近些年来,随着生物技术与分子生物学技术的快速发展，作为生物技术研究的理想材料，许多国家对胡萝卜体细胞杂交技术、遗传转化与再生技术、分子标记与基因克隆技术进行了广泛深入的研究。

我国科研工作者在胡萝卜的生物技术与分子生物学研究上也取得了一定进展，特别是在组织培养、原生质体融合、遗传转化及再生等方面。

但是在胡萝卜细胞培养方面并不是太多。

因此继续深入研究还是很有必要的。

此外，由于市面上的胡萝卜价格比较便宜，材料易得，而且在组织培养方面容易诱导发生，我们可以通过这个实验熟悉植物组培。

1.2 组织培养植物组织培养概念（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织。

器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层。

薄壁组织。

叶肉组织。

胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

2．实验设备与材料2.1 实验设备冰箱、普通天平、分子天平、试剂瓶（棕色和白色）、量筒、烧杯、容量瓶、药勺、称量纸、玻棒、标签纸、三角瓶、吸管、玻璃棒、精密pH试纸（5.4～7.0）、PH试纸（5.4～7.0）、封口膜、橡皮筋、微波炉、高压蒸汽灭菌锅、已灭菌滤纸、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、大烧杯、小烧杯、50ml三角瓶、50ml 量筒、100ml量筒、10ml和5ml还有2ml吸管、200ml定容瓶。