粗脂肪的提取和定量测定--索氏提取法

粗脂肪的测定方法（索氏抽提法）一、原理将样品包浸入脂肪溶剂（乙醚）中，借助索氏抽提器进行循环抽提，样品包在抽提前后的重量差即为样品的粗脂肪含量值。

二、试剂与仪器（1）乙醚（2）索氏抽提器（3）脱脂滤纸（4）恒温水槽（5）冷凝管三、操作规程1、样品预处理：将待测物质烘至恒温（70℃条件下）、磨碎均匀，再烘至恒重制成样品装人广口瓶保存于干燥器中以备测定。

2、取样：（1）将脱脂滤纸折包放入称量瓶中（纸包和量瓶上标上同样的编号），烘干至恒重（70℃条件下10小时）。

冷却、称量滤纸包重量。

（2）准确称取样品2克放入脱脂滤纸包内，放入称量瓶中，再将样品包连同称量瓶仪器烘至恒重（70℃条件下约2小时），记下重量值。

3、抽提：（1）将索氏抽提器，冷凝管洗净、烘干至无水，不必称重。

（2）将已烘至恒重的样品包放入抽提器的提取管中，注意样品包的高度不得高于虹吸管的高度。

（3）在提取瓶中加入无水乙醚至提取瓶容积的2/3-3/4处。

（4）将提取瓶、提取管、冷凝管组装为抽提装置。

（5）将索氏抽提器的提取管置于电热恒温水浴中（温度约55-60℃）进行抽提。

抽提约进行8小时。

（6）抽提结束后，将样品滤纸包取出，放入原用称量瓶中置于烘箱至恒重（70℃条件下约10小时），记下重量值。

（7）乙醚的回收：抽提结束后，取出样品包。

用索氏抽提器将乙醚蒸馏出，保存以备下一次使用。

四、结果计算公式：粗脂肪的重量（M）=A-B粗脂肪的百分含量（%）=M/（A-C）*100%A：加样滤包重，B：抽提后滤纸包的重量，C：空滤纸包重脂肪含量测定记录表。

实验三粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法一、实验目的1、掌握粗脂肪的提取方法，熟悉索氏提取法的操作。

2、学习如何测定样品的粗脂肪含量。

3、加深对生物大分子的认识，了解脂肪在生物体中的重要性。

二、实验原理1、粗脂肪提取脂肪具有亲油性，可以被有机溶剂提取。

索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法。

在索氏提取法中，采用乙醚/醋酸乙酯（1：1）的溶液作为提取剂。

样品加入一定量提取剂中，经过适当的震荡、离心、蒸发浓缩和干燥等步骤，得到脂肪提取物。

将脂肪提取物加入硫酸中，经过酸解、加热、冷却和干燥等步骤后，得到脂肪酸甲酯。

通过气相色谱仪测定脂肪酸甲酯的含量，进而计算出样品中粗脂肪的含量。

三、实验操作（1）取适量已干燥样品，称重，记录质量。

（2）将样品放入索氏提取器的提取篮中，加入10mL乙醚/醋酸乙酯（1：1）溶液。

（3）起动提取器，以回流的方式进行提取，搅拌速度要适中，避免溅出溶液。

（4）提取30分钟后关闭提取器，将提取篮取出，用5mL提取液将其冲洗，并将提取篮放置于洗涤瓶上，使其流干。

（5）将提取篮置于已预热至100℃的蒸发皿内，用热风器将乙醚/醋酸乙酯挥发干燥。

（6）将蒸发皿置于70℃恒温箱中干燥至常重，取出，并记录质量。

（2）将粗脂肪提取物转移到20mL玻璃瓶中，加入2mL浓硫酸。

（3）在冷水浴上，加热约2小时，待样品变成棕色液体后取出，冷却。

（4）加入1mL冰醋酸冷却，混匀。

（5）加入0.2g氯化钠，混匀。

（6）转移待测样品到10mL移液管中。

（7）在10mL皮囊中，加入4mL正己烷，混匀。

（8）离心5分钟，取上层正己烷，并转移到气相色谱管中。

（9）气相色谱条件：柱：DB-23；FID检测器；柱温：120℃；检测器温：250℃。

（10）记录脂肪酸甲酯的含量，并计算出样品中粗脂肪的含量。

四、实验注意事项1、进行实验前，将索氏提取器和蒸发皿等器皿用乙醚或甲醇洗涤，并在烘箱中干燥。

2、在进行气相色谱柱装载前，必须将固定相和管柱内壁进行彻底清洗，以免污染样品。

粗脂肪的提取和定量测定一、目的1．学习和掌握用索氏（Soxhlet）提取器提取脂肪的原理和方法。

2．学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。

二、原理利用脂类物质溶于有机溶剂的特性。

在索氏提取器中用有机溶剂（本实验用石油醚，沸程为30～60℃）对样品中的脂类物质进行提取。

因提取的物质是脂类物质的混合物，故称其为粗脂肪。

索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的（图9-1），提取管两侧分别有虹吸管和连接管。

各部分连接处要严密不能漏气。

提取时，将待测样品包在脱脂滤纸包内，放入提取管内。

提取瓶内加入石油醚。

加热提取瓶，石油醚气化，由连接管上升进入冷凝器，凝成液体滴入提取管内，浸提样品中的脂类物质。

待提取管内石油醚液面达到一定高度，溶有粗脂肪的石油醚经虹吸管流入提取瓶。

流入提取瓶内的石油醚继续被加热气化、上升、冷凝，滴入提取管内，如此循环往复，直到抽提完全为止。

本法为重量法，将由样品抽提出的粗脂肪，蒸去溶剂，干燥，称重，按后面给的公式计算，求出样品中粗脂肪的百分含量。

三、器材四、试剂和材料1．样品芝麻种籽将洗净、晾干的芝麻种籽放在80～100℃烘箱中烘4小时。

待冷却后，准确地称取2～4g，置于研钵中研磨细，将研碎的样品及擦净研钵的脱脂棉一并用脱脂滤纸包住用丝线扎好，勿让样品漏出。

或用特制的滤纸斗装样品后，斗口用脱脂棉塞好。

放入索氏提取器的提取管内，最后再用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。

2．石油醚（化学纯，沸程30～60℃）。

五、操作洗净索氏提取瓶，在105℃烘箱内烘干至恒重，记录重量。

将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积的1/2～2/3。

将样品包放入提取管内。

把提取器各部分连接后，接口处不能漏气。

用70～ 80℃恒温水浴加热提取瓶，使抽提进行16小时左右，直至抽提管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止。

此时表示提取完全。

提取完毕，取出滤纸包，再回馏一次，洗涤提取管。

再继续蒸馏，当提取管中的石油醚液面接近虹吸管口而未流入提取瓶时，倒出石油醚。

粗脂肪Soxhlet 提取法及含量测定——学习指南
l 学习重点 1. 学习索氏提取器的使用。

2. 掌握油重法提取粗脂肪的操作。

l 知识要点
1. 粗脂肪：脂肪、游离脂肪酸、磷脂、蜡、固醇及色素等脂溶性物质的总称。

2. 索氏抽提法：残余法和油重法两种方法。

残余法：用低沸点有机溶剂如石油醚回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。

油重法：溶剂回流抽提后，除去溶剂，以增加的油重来计算粗脂肪含量。

3. 本实验采用油重法。

l 试剂
石油醚（沸程30-60℃）
l 材料
市售奶粉
l 仪器 烘箱、干燥器、索氏脂肪抽提器、电子分析天平、脱脂棉线、脱脂滤纸、脱脂棉、称量瓶、恒温水浴锅、铁架台、自由夹、镊子、电吹风。

l 操作
l 注意事项
1. 测定用样品、抽提器、抽提用溶剂都需要进行脱水处理。

2. 试样粗细度要适宜。

试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。

3. 进行本实验时应切实注意防火，石油醚为易燃品，切忌明火加热，同时要注意提取器各连接处有
否漏气，以及冷凝管冷凝效果是否良好，以免大量石油醚蒸气外逸。

食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法）、目的与要求1、学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法2、掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素 、原理利用脂肪能溶于有机溶剂的性质， 在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂 ，所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。

三、仪器与试剂 1、 仪器（1 ）、索氏提取器 如图3-3所示 （2 ）、电热恒温鼓风干燥箱 （3 ）、干燥器 （4 ）、恒温水浴箱 2、 试剂（1 ）无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程 30-60 ° C ） （2）滤纸筒 四、测定步骤 1、 样品处理⑴固体样品：准确称取均匀样品 2-5g （精确至0.01mg ），装入 滤纸筒内。

（2）液体或半固体：准确称取均匀样品 5-10g （精确至0.01mg ）， 置于蒸发皿中，加入海砂约20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干，然 后在95-105 ° C 下干燥。

研细后全部转入滤纸筒内，用沾有 乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。

2、 索氏提取器的清洗将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。

脂肪烧瓶在103° C ± 2° C 的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过 2mg ）o3、 样品测定（1）将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内， 连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶， 由抽提器 冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的 2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加 热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。

（2）抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每 6-8min 回流一次为宜。

（3）抽提时间的控制：抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6-12h ，坚 果样品提取约16h o 提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。

（4）提取完毕。

取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。

待烧瓶内乙醚仅剩下1— 2mL 时,在水浴上赶尽残留的溶剂， 于95— 105° C 下干燥2h 后，置于干燥器中冷却至室温， 称量。

实验二粗脂肪的定量测定—索氏抽提法一、实验目的1.学习和掌握粗脂肪提取的原理和测定方法。

2.熟悉和掌握重量分析的基本操作。

二、实验原理脂肪不溶于水，易溶于乙醚、石油醚和氯仿等有机溶剂。

根据这一特性，选用低沸点的乙醚(沸点35℃)作溶剂，用索氏提取器可对样品中的脂肪进行提取。

索氏抽提器由浸提管、抽提瓶和冷凝管三部分连接而成，如图3—6。

浸提管两侧有虹吸管及通气管，装有样品的滤纸包放在浸提管内，溶剂加入抽提瓶中。

当加热时，溶剂蒸气经通气管至冷凝管，冷凝后的溶剂滴入浸提管对样品进行浸提。

当浸提管中溶剂高度超过虹吸管高度时，浸提管内溶有脂肪的溶剂即从虹吸管流入抽提瓶。

如此经过多次反复抽提，样品中脂肪逐渐全部浓集在抽提瓶中。

抽提完毕，利用样品滤纸包脱脂前后减少的重量来计算样品的脂肪含量。

由于有机溶剂从样品中抽提出的不单纯为脂肪，还含有其他脂溶性成分，因此本实验测定的结果应为粗脂肪的含量。

三、仪器、原料和试剂仪器索氏提取器、恒温水浴锅、烘箱、脱脂滤纸、脱脂棉、脱脂线等。

原料谷物油料种籽或其他样品试剂无水乙醚四、操作步骤(一)样品预处理称取2g左右的样品原料，用滤纸包好(不可扎得太紧，以样品不散漏为宜)，在烘箱100~105℃条件下烘干至恒重，准确称重。

（今天我们实验的材料由于时间问题不再进行干燥处理，称取2g左右材料放入研钵中研碎后尽量不损失的转入滤纸中包好或扎好）(二)抽提将烘干称重的滤纸包放入干燥的浸提管内，滤纸的高度不能超过虹吸管顶部。

浸提管上部连接冷凝管，并用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口；浸提管下部连接抽提瓶，抽提瓶中加入约瓶体1/2的无水乙醚，连接好后用铁架台和烧瓶夹将装置固定好。

并置于恒温水浴锅中。

冷凝管的进水和出水要用水管连接好，打开冷却水，开始加热抽提。

加热的水浴锅温度控制在55℃左右。

抽提时间为6~10小时（由于时间问题我们抽提时间为2小时左右），以浸提管内乙醚滴在滤纸上不显油迹为止。

抽提完毕，移去上部冷凝管，取出滤纸包。