单核细胞增生李斯特菌

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单核细胞增生李斯特菌

形态特征:

① 革兰氏阳性的类球形杆菌

② 大小约为0.4~0.5 v m x 0.5 〜2.0

③ 两端钝圆

④ 在有些培养基中稍弯,单个、成 V形或成对平行排列

⑤ 在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性

⑥ 兼性厌氧,无芽抱,一般不产生荚膜

⑦ 在20~25 C时以4根周毛运动,在37 C时只有较少的鞭毛或1

根鞭毛

培养特性:

① 需氧和兼性厌氧

② 生长范围为2-42 C

③ 最适温度为35-37 C

④ pH中性至弱碱性(pH9.6 )

⑤ 在6.5% NaCl肉汤中生长良好。

⑥ 在20-25 C培养有动力,穿刺培养2-5天可见倒立伞状生长,肉 汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。

⑦ 在固体培养基上,菌落初始很小,透明,边缘整齐,呈露滴状,但 随着菌落的增大,变得不透明。

⑧ 在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色,刺种血平板培养 后可产生窄小的(3-溶血环。

⑨ 在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)

琼脂上,用45角入射光照射菌落,通过解剖镜垂直观察,菌落呈兰 色、灰色或兰灰色。

生化特性:(甘露醇、木糖为阴性,其他为阳)

1. 该菌触酶阳性,氧化酶阴性。

2. 发酵多种糖类,产酸不产气。

发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶昔、蔗糖(迟发

酵)、山梨醇、海藻糖、果糖。

不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛

醇和纤维二糖。

3. 不利用枸椽酸盐,40%胆汁不溶解。

4』引噪、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均 阴性。

5.MR-VP试验和精氨酸水解阳性。

生化试验:

① 动力试验+

原理:有动力的细菌扩散生长,培养基浑浊,无动力的细菌培养基澄 清。(结果:有动力,呈伞状生长,底为弯月牙形)

② 过氧化氢酶试验(触酶试验)+

原理:具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,

继而形成分子氧出现气泡。(结果:汽包产生为+)

应用:葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶,而链球菌属为阴性,故 此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。

③ MR-VP试验+

原理:葡萄糖7丙酮酸7大量混合酸7 pH4以下7 (+甲基红指示剂) 7培养基变红

V-P试验:葡萄糖r丙酮酸(脱愈)7乙酰甲基甲醇(强碱+V-P试 剂)7二乙酰(月瓜基)7培养基变红

糖发酵试验

葡萄糖和麦芽糖发酵试验+

原理:有些细菌分解某些糖(醇、昔)产酸产气,培养基由紫(蓝)

变黄(指示剂漠甲酚紫或漠百里酚蓝由紫或蓝遇酸变黄的结果) ,并 有气泡;有些产酸,仅培养基变黄;有些不分解糖类(-),培养基 仍为紫(蓝)色。(结果:黄+ )

七叶昔水解试验+ 原理:某些细菌(如类肠球菌)可水解七叶昔,生成葡萄糖和七叶素。

七叶素可与培养基中的柠檬酸铁试剂的二价铁离子反应生成黑色化

合物沉淀,是培养基变黑。(结果:黑+,黄-)

甘露醇发酵试验-

原理:由于各种细菌含有发酵不同糖(醇、甘)类的酶,故分解糖类 的能力各不相同,有的能分解多种糖类,有的仅能分解1~2种糖类, 还有的不能分解。细菌分解糖类后的终末产物亦不一致,有的产酸、 产气,有的仅产酸,故可利用此特点鉴别细菌。 (结果:黄+ ,绿-)

木糖发酵试验-

原理:某些细菌能利用D-木糖作为碳源。木糖本身有抗细菌和霉菌 的功能,尤其是革兰氏阴性菌及白色念珠菌。(结果:黄+ )

鼠李糖发酵试验+

原理:鼠李糖在细菌中以多糖或脂多糖存在与细胞表面。 (结果:黄

+ )

土吕介基 形态

PALCAMC脂 典型菌落为小的圆形灰绿色菌 落,周围有棕黑色水解圈,有些 菌落有黑色凹陷 李斯特氏菌显色琼脂 蓝色菌落,菌落周围有一不透明

环(西尔李斯特氏菌-菌落周围没

有不透明环)

PALCAM琼脂 检 样

25g(ml)样品+LB1 土胴液225ml,均质

.30 ±1C, 24h

0.1ml+10mlLB2 增菌液

1 30 ±1C, 18~24h

李斯特氏菌显色培养基

36土 C, 24~48h