Feb. 2022 CHINA FOOD SAFETY 115分析检测
乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌能力 验证结果与分析樊惠华，侯磊磊，方 莹，柴梅梅（榆林市食品检验检测中心，陕西榆林 719000）摘 要：为了提升食品检验检测机构对食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力，提高微生物实验室外部质量控制水平。本实验室参加中国检验检疫科学研究院测试评估中心组织的ACAS-PT1108（2021）乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证，参考参试指导书、《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》（GB 4789.30—2016）、海博单增李斯特氏菌成套生化鉴定管和MicroScan WalkAway 40 Plus全自动微生物生化鉴定仪。结果表明，参试样品编号21-T031为单核细胞增生李斯特氏菌，样品编号21-U887未检出单核细胞增生李斯特氏菌，经鉴定为伊氏李斯特氏菌，最终能力验证结果评价为满意，可见本实验室具有成熟的单核细胞增生李斯特氏菌检验能力。关键词：乳粉；单核细胞增生李斯特氏菌；能力验证Results and Analysis of the Proficiency Testing of Listeria Monocytogenes in Milk PowderFAN Huihua, HOU Leilei, FANG Ying, CHAI Meimei(Yulin Food Inspection and Testing Center, Yulin 719000, China)Abstract: In order to improve the ability of food inspection and testing institutions to detect Listeria monocytogenes in food and to improve the external quality control level of microbiology laboratory. The laboratory participated in the proficiency testing of Listeria monocytogenes in ACAS-PT1108 (2021) milk powder organized by the Testing and Evaluation Center of the Chinese Academy of Inspection and Quarantine Sciences. Reference was made to the test guidelines, the GB 4789.30—2016, the complete biochemical identification tubes of Listeria monocytogenes in Haibo and the MicroScan WalkAway 40 Plus automatic microbial biochemical identification instrument. The results showed that the sample number 21-T031 was detected as Listeria monocytogenes, and the sample number 21-U887 was not detected as Listeria monocytogenes, which was identified as Listeria.ivanovii. The final proficiency test results were satisfactory. It can be seen that the laboratory has a mature ability to test Listeria monocytogenes.Keywords: milk powder; Listeria monocytogenes; proficiency test李斯特菌属目前包括17种公认的短杆状革兰氏阳性菌，其中单核细胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌被认为是病原体[1]。单核细胞增生李斯特氏菌会感染人和动物，伊氏李斯特氏菌最初被认为仅感染反刍动物，GUILLET等报道伊氏李斯特氏菌可引起胃肠炎和菌血症，被认为是一种肠道机会性病原体[2]。单核细胞增生李斯特氏菌是一种主要的食源性致病菌，可引起李斯特菌病，表现为胃肠炎、败血症、中枢神经系统感染以及母儿感染，导致流产、死胎、早产或患有新生儿李斯特菌病[3-4]。其广泛存在于自然环境中，能够在低温、酸性pH、高盐浓度等恶劣条件下生存，其中凉拌菜、肉及肉制品、乳与乳制品、动物性水产品等更易受到单核细胞增生李斯特氏菌的污染[5]。作者简介：樊惠华（1984—），女，陕西榆林人，硕士，工程师。研究方向：食品微生物学检验。Copyright©博看网. All Rights Reserved.116 食品安全导刊 2022年2月分析检测
５８ 食品工程
Ｆ００Ｄ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ２０１０年第１期 ３月出版
冻水产品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验研究
Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ ｉｎ ｆｒｏｚｅｎ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
郑俏慧
（湛江出入境检验检疫局技术中心，湛江５２４０２２）
ＺＨＥＮＧ Ｑｉａｏ—ｈｕｉ （ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｅｎｔｅｒ，ｚｈａｎｊｉａｎｇＥｎｆｒｙ—ＥｘｉｔＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎａｎｄＱｕａｒａｎｔｉｎｅＢｕｒｅａｕ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ ５２４０２２，Ｃｈｉｎａ）
摘要对从湛江地区进出口水产品加工厂抽取的
１１５８份冻水产品进行单核细胞增生李斯特氏茵分
析，实验采用了全自动酶联荧光免疫分析仪筛选法
进行了初步筛选，对分离菌株用ＡＰＩ Ｌｉｓｔｅｒｉａ试剂盒
进行鉴定。经检验，１１５８个样品中有７个样品
（０．６Ｏ％）为单核细胞增生李斯特氏菌阳性，另有４
个（０．３５％）为Ｌ．ｉｎｎｏｃｕａ．Ｌ．ｗｅｌｓｃｈｉｍｅｒｉ和Ｌ．ｇｒａｙｉ
阳性。实验中ＶＩＤＡＳ ＬＭＯ检测试剂条呈现４个假
阳性，经鉴定为李斯特氏菌属中Ｌ．ｉｎｎｏｃｕａ、Ｌ．
ｗｅｌｓｃｈｉｍｅｒｉ和Ｌ．ｇｒａｙｉ，表明Ｖｉｄａｓ ＬＭＯ检测试剂条
存在一定的假阳性率。
关键词单核细胞增生李斯特氏菌；冻水产品；检
验：污染
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｓｔｕｄｉｅｓ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｓｔｅｒｉａ
ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ（ＬＭＯ ｆｏｒ ｓｈｏｒｔ）ｉｎ １ １５８ ｅｘｐｏｌｔ ａｎｄ ｉｍｐｏ￣
ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｒｏｍ Ｚｈａｎｊｉａｎｇ ｄｉｓｔｒｉｃｔ．Ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｂｙ
ＶＩＴＥＫ ｉｍｍｕｎｅ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ（ＶＩＤＡＳ），ｔｈｅ
ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定
引言
单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）是一种常见的食源性致病菌，可引起严重的食物中毒和感染疾病。为了及时诊断和控制该菌的传播，对其进行准确的生化鉴定非常重要。本文将介绍单核细胞增生李斯特氏菌的生化鉴定方法及相关实验步骤。
实验材料与方法
实验材料
• 单核细胞增生李斯特氏菌培养基
• Listeria Enrichment Broth（LEB）
• Listeria Agar Base（LAB）
• 乳清素蛋白水解物培养基（Trypticase Soy Broth，TSB）
• 乳清素蛋白水解物琼脂培养基（Trypticase Soy Agar，TSA）
• 碱性亮绿液
实验方法
1. 取一份食物样品，如肉类、奶制品等，加入适量LEB中，并在37℃孵育24小时。
2. 取0.1ml培养液，在TSB中进行预培养，37℃孵育24小时。
3. 从TSB中取出适量菌液，用胶体金法进行菌落计数，并将菌液稀释至10-4倍。
4. 取适量的稀释液分别接种于LAB和TSA琼脂培养基上，并在37℃孵育24小时。
5. 观察菌落形态、颜色等特征，并记录下来。
生化鉴定实验
单核细胞增生李斯特氏菌生化鉴定步骤如下：
1. 琼脂凝胶双扩散试验：将单核细胞增生李斯特氏菌抗原与相应的抗血清共同扩散于琼脂凝胶板上，观察是否发生免疫反应。若有明显的线条或沉淀形成，则说明存在抗原-抗体反应，可以初步判断为单核细胞增生李斯特氏菌。
2. 碱性亮绿液试验：将培养基中的单核细胞增生李斯特氏菌与碱性亮绿液接触，观察是否产生绿色荧光。若产生绿色荧光，则说明菌株具有单核细胞增生李斯特氏菌的特性。
3. 单核细胞增生李斯特氏菌脂多糖（LPS）鉴定：采用酚-硫酸法或酚-硝基苯法，将培养基中的单核细胞增生李斯特氏菌进行LPS提取，然后进行比色反应。若出现红色或紫色沉淀，则说明存在LPS，可以进一步确认为单核细胞增生李斯特氏菌。
DBS22
DBS22/019—2012
吉林省食品安全地方标准
食品中单核细胞增生李斯特菌的定量检测
2013年 发布 2013年 实施
吉林省卫生厅 发布
前 言
本标准根据GB/T1。1—2000《标准化工作导则 第1部分:标准的结构和编写规则》的要求编写.
本标准分为两种检测方法：
第一法:单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法；
第二法：MPN计数法 。
其中第一法适用于污染较严重的食品，第二法适用于单核细胞增生李斯特氏菌含量较低而杂菌含量较高的食品。
本标准负责起草单位：吉林省疾病预防控制中心、长春市疾病预防控制中心.
本标准负责起草人: 刘桂华、龚云伟、李月婷、赵薇 1
吉林省食品安全地方标准
食品中单核细胞增生李斯特菌的定量检测
1 范围
本操作程序规定了食品中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)的定量检验方法.
本操作程序适用于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的定量检验。
2 设备和材料
除微生物实验室常规无菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
2。1 冰箱：2℃～5℃和—18℃.
2.2 恒温培养箱：30℃±1℃、36℃±1℃.
2.3 均质器。
2.4 显微镜:10×～100×.
2。5 电子天平:感量0。1 g。
2.6 锥形瓶:100 mL、500 mL。
2。7 无菌吸管:1 mL（具0。01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）。
2.8 无菌平皿:直径90 mm。
2。9 无菌试管：16 mm×160 mm.。
2。10 离心管:30 mm×100 mm.
2。11 无菌注射器:1 mL。
