维生素B6检验操作程序

1 感官要求取10g被测样品，置于洁净的白瓷盘中，用肉眼在自然光线下观察其色泽、组织形态、杂质，品尝其滋味，嗅其气味。

2一般规定本标准所用试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682—2008中规定的三级水。

未指明的溶液为水溶液。

试验中所用标准滴定溶液和其他所需溶液，在未注明其他要求时，均按 GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603之规定制备。

3 鉴别试验3鉴别试验3.1 试剂和材料3.1.1 乙酸钠溶液：200g/L。

3.1.2 硼酸溶液：40g/L。

3.1.3 氯亚胺基-2，6-二氯醌溶液：5g/L乙醇溶液。

3.1.4 二氧化锰。

3.1.5 硫酸。

3.1.6 淀粉-碘化钾试纸。

3.2 分析步骤3.2.1 显色反应取约 10 mg实验室样品，加 100 mL水溶解后，各取 1 mL，分别置甲、乙两个试管中，各加 2 mL乙酸钠溶液，甲管中加 1 mL水，乙管中加 1 mL硼酸溶液，混匀，各迅速加 1 mL氯亚胺基-2，6二氯醌溶液，甲管中显蓝色，几分钟后即消失，并转变为红色；乙管中不显蓝色。

3.2.2红外光吸收谱鉴别采用溴化钾压片法，实验室样品的红外光谱应与对照的图谱一致（对照图谱见附录B ）。

3.2.3 氯化物鉴别取约 0.5g 实验室样品，置试管中，加 0.5g 二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使用水湿润的淀粉-碘化钾试纸显蓝色。

4维生素 B6的测定 4.1 方法提要以结晶紫为指示剂，用高氯酸标准溶液滴定样品，根据用高氯酸标准滴定液的用量，计算以C8H11NO3·HCl 计的维生素 B6含量。

4.2 试剂和材料 4.2.1 冰乙酸。

4.2.2 乙酸汞溶液：取5 g 乙酸汞，研细，加温热的冰乙酸使溶解成100 mL 。

4.2.3 结晶紫指示液：5 g/L 冰乙酸。

4.2.4 高氯酸标准滴定溶液：c(HClO4)=0.1 mol/L 。

维生素b6的测定编写说明全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：维生素B6（又称吡哆醇或吡喃醇）是B族维生素中的一种，也被称为胱胺素，它在人体中具有重要的生物学功能。

维生素B6在维持神经系统正常运作、合成蛋白质、维持心血管系统健康等方面起着重要作用。

准确测定维生素B6的含量对于评估人体的健康状况，优化膳食结构等方面都具有重要意义。

维生素B6的测定可以通过多种方法来进行，例如高效液相色谱法、薄层色谱法、生化方法等。

高效液相色谱法是最常用的方法之一，它具有准确性高、灵敏度好的优点，能够快速、准确地测定维生素B6的含量。

接下来，我们将详细介绍维生素B6的高效液相色谱法测定方法。

一、仪器设备准备1. 高效液相色谱仪2. 注射器3. 色谱柱4. 电子天平5. 紫外-可见分光光度计6. 吸光度级联检测器二、试剂及溶液准备1. 维生素B6标准溶液2. 甲醇3. 乙腈4. 磷酸盐缓冲液三、样品处理及测定步骤1. 将待测样品加入适量的磷酸盐缓冲液中进行提取分离2. 采用高效液相色谱仪进行测定3. 通过色谱柱分离，利用甲醇和乙腈进行洗脱4. 利用紫外-可见分光光度计和吸光度级联检测器进行检测5. 根据维生素B6的标准曲线计算样品中维生素B6的含量四、结果分析1. 根据实验测得的数据，可以计算出样品中维生素B6的含量2. 通过对比标准曲线，评估维生素B6的含量是否符合正常范围3. 结合临床数据，分析维生素B6在人体中的代谢状况，评估人体健康状况通过以上步骤，我们可以利用高效液相色谱法准确地测定维生素B6的含量，为人体健康提供科学依据。

合理膳食结构、睡眠充足等方法也能有效提高维生素B6的吸收利用率，从而维持身体的健康状态。

希望这份关于维生素B6测定的编写说明能够为相关科研工作者和临床医生提供帮助，促进维生素B6的研究与应用。

第二篇示例：维生素B6是一种水溶性维生素，对人体健康起着重要作用。

它参与蛋白质合成、血红素生成、神经传导和免疫功能等多种生理过程。

一．概述1.维生素B6片有关物质测定：照高效液相色谱法（通则0512）测定。

1.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.04%戊烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调节pH值至3.0）-甲醇（85∶15）为流动相；检测波长为291nm。

理论板数按维生素B6峰计算不低于4000。

1.2测定法取本品细粉适量，加流动相适量，振摇使维生素B6溶解，用流动相制成每1ml中约含维生素B61mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液，精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

取对照溶液10μl注入液相色谱仪，精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。

1.3供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。

2. 维生素B6片含量测定：照高效液相色谱法（通则0512）测定。

3.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.04%戊烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调节pH值至3.0）-甲醇（85∶15）为流动相；检测波长为291nm。

理论板数按维生素B6峰计算不低于4000。

3.2测定法取本品30片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B6 0.1g）,置100ml量瓶中，加流动相适量，超声使维生素B6溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取维生素B6对照品，同法测定。

按外标法以峰面积计算，即得。

3.3本品含维生素B6计算，应为标示量的93.0% ～107.0%。

4.工艺处方组成5、仪器基本情况：6.相关术语：6.1准确度:系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。

一般用回收率（%）表示。

回收率限度应在98%～102%之间。

6.2精密度:系指在规定的条件下同一份均匀的供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。

食物中维生素B6的测定方法微生物法1.原理维生素B6在酸性介质中对热比较稳定，但在碱性介质中对热不稳定。

测量维生素B6比较经典的方法是"微生物法"它的优点是：1.特异性高、精密度好、操作简单（不需要特殊设备，易于推广，样品不需要进行一系列的提纯步骤）、准确度高。

它的缺点是：耗时长、必须经常保存菌种、试剂较贵。

2.适用范围GB/T 17407-1998，适用于药物、食物及饲料的检测3.仪器电热恒温培养箱电热手提式压力蒸汽消毒器液体快速混合器离心机722光栅分光光度计硬质玻璃试管4.试剂（1） 0.22mol/L硫酸：于2000ml烧杯中加入700ml水，加入12.32ml H2SO4，用水稀释至1000ml。

（2） 0.5mol/L硫酸：于2000ml烧杯中加入700ml水，加入28ml H2SO4，用水稀释至1000ml。

（3） 10mol/L氢氧化钠：溶200g NaOH于水中，稀释至500ml。

（4） 0.1mol/L氢氧化钠：取10ml 10mol/L NaOH，用水稀释至1000ml。

（5）溴甲酚绿：0.04%溶液，称取0.1g溴甲酚绿于研钵中，加1.4ml 0.1mol/L NaOH研磨，加少许水继续研磨，直至完全溶解，用水稀释到250ml。

（6）培养基：称取吡哆醇Y培养基5.3g，溶解于100ml蒸馏水中。

（7） 100ug/ml吡哆醇标准储备液：称取122mg盐酸吡哆醇标准溶于1L25%乙醇中，保存于4℃冰箱中，稳定1个月。

（8） 1ug/ml吡哆醇标准中间液：，取1ml吡哆醇标准储备液，稀释至100ml。

（9）琼脂培养基：吡哆醇Y培养基5.3g，琼脂1.2g，稀释至100ml。

（10） 1.5MOL/l生理盐水：取9gNaCl溶于1000ml水中。

5.菌种的制备与保存5.1储备菌种的制备与保存：以卡尔斯伯酵母菌�Saccharomyces Carlsbergensis ATCC No.9080 简称SC?纯菌种接入2个或多个琼脂培养基管中，在30±0.5℃恒温箱中培养18-20小时，取出后置于冰箱中保存，至多不超过两星期。

食品安全国家标准食品中维生素B6的测定1 范围本标准规定了食品中维生素B6的测定方法。

本标准第一法为高效液相色谱法，第二法为微生物法，适用于食品中维生素B6的测定。

第一法高效液相色谱法2 原理试样在稀酸环境中高温水解，定容过滤后经反相色谱柱分离样液中维生素B6的三种衍生物（吡哆醇、吡哆胺、吡哆醛），高效液相色谱-荧光检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。

3 试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂3.1.1庚烷磺酸钠（C7H15NaO3S）。

3.1.2冰乙酸（C2H4O2）。

3.1.3三乙胺（C6H15N）：色谱纯。

3.1.4 甲醇（CH3OH）：色谱纯。

3.1.5 盐酸（HCl）。

3.1.6硫酸（H2SO4）。

3.1.7氢氧化钠（NaOH）。

3.2 试剂配制3.2.1盐酸溶液（0.1 mol/L）：量取9 mL盐酸，用水稀释并定容至1000 mL。

3.2.2硫酸溶液（0.2 mol/L）：于2000 mL烧杯中加入700 mL水，11.2 mL硫酸，用水稀释至1000 mL。

3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：于2000 mL烧杯中加入700 mL水，28 mL硫酸，用水稀释至1000 mL。

3.2.4氢氧化钠溶液（10 mol/L）：准确称取200 g氢氧化钠，加400 mL水溶解后，用水定容至500 mL。

3.3 标准品3.3.1 盐酸吡哆醇（C8H12ClNO3, CAS: 58-56-0）标准品：纯度≥99%。

3.3.2 盐酸吡哆醛（C8H10ClNO3, CAS: 65-22-5）标准品：纯度≥99%。

3.3.3 双盐酸吡哆胺（C8H14Cl2N2O3, CAS: 524-36-7）标准品：纯度≥99%。

3.4 标准溶液配制3.4.1 吡哆醇标准储备液（1 mg/mL）：准确称取60.8 mg盐酸吡哆醇标准品，用0.1 mol/L盐酸溶液溶解后定容到50 mL，在-20 ℃冰箱中避光贮存，保存期1个月。

紫外分光光度法测定维生素B6维生素B6（pyridoxine），又称抗皮肤炎素，是维生素B族中重要的一种营养物质。

它在许多生物化学反应中充当辅酶的角色。

维生素B6是一种水溶性维生素，需要通过食物摄入。

为了检测维生素B6的含量，我们可以采用紫外分光光度法。

紫外分光光度法是分析化学中常用的一种定量分析方法，能够快速准确地测定目标物质的浓度。

下面我们将介绍如何使用紫外分光光度法测定维生素B6的含量。

实验步骤：1.准备样品：将维生素B6的标准品溶解于甲醇中，制备一系列不同浓度的标液。

将不同加入的量的标液分别加入超纯水中制备不同浓度的样品。

2.进样检测：将制备好的样品取5ml，加入装有石英比色皿中并置于紫外分光光度计上，选择270nm处进行分析。

3.测量：开始测量前，需要在此λ波长下对水进行基线校正。

将样品装入石英比色皿中，置于光束中，确定所选取光路下的透过率，而透过率的单位要符合光度计的操作规程。

测量记录后，读取相应的吸收光谱值，进行光谱绘制和数据处理。

4.计算：根据样品的吸收峰值大小及标准曲线，计算出样品中维生素B6的浓度。

标准曲线的制作：1.取50mg维生素B6的标准品，溶解于100ml甲醇中。

2.将标准品溶液分别取出1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，并加入足量的甲醇，制备出不同浓度的标准品液体。

当然，在实验操作中，我们还需要注意以下几点：1.在实验过程中，要确保石英比色皿、移液管和搅拌棒等器材清洁干燥，以保证实验的准确度。

2.样品要与标准品的状态一致，如若样品需要稀释还需确保稀释的比例。

3.光度计只测量样品与标准品以外溶液的吸光度，需保证移取样品精确，环境干燥。

综上所述，通过紫外分光光度法，我们可以准确地测定维生素B6的含量，为人们摄入足够的该营养物质提供了可靠依据。

验证报告编号：2305·429-00注射用维生素B6工艺验证方案起草人：日期：年月日审核人：日期：年月日批准人：日期：年月日×××药业有限公司注射用维生素B6（0.2g规格）生产工艺验证方案目录1.概述2.验证目的3.验证范围4. 验证小组成员及职责范围4.1 验证小组成员4.2 验证小组成员职责范围5．验证进度计划6．粉针主要生产设备一览表7．生产洁净区的划分及工艺流程8．生产和检验标准文件的引用9．产品生产工艺过程综合指标确认10.验证内容11. 验证条件监控12．拟订验证周期13. 验证结果评价和结论14.验证会签1 概述:本公司生产的注射用维生素B6，其规格为0.2/瓶。

为了证明在执行SP-MF-000-000-00注射用维生素B6生产工艺规程的情况下，能稳定地生产出符合质量标准的产品。

在这之前验证小组已对空调净化系统、纯化水和注射用水系统，以及在线设备分别进行了验证合格,同时对生产线也进行了验证合格,所以本方案主要就该产品生产工艺规程及其生产过程和最终产品质量等进行验证并作出评价。

2目的：为了证明在执行SP-MF-000-000-00注射用维生素B6生产工艺规程的情况下,连续生产三批,最终产品稳定性、可靠性并符合标准要求。

3 范围: 本验证方案适用于冻干车间的厂房、设施、设备、工艺条件下注射用维生素B6（0.2g规格）的生产，当上述条件发生改变时，应重新验证。

4 验证小组成员及职责范围：4.1验证小组成员：部门职务姓名生产技术部组长质量部组员QA 组员QC 组员设备部组员物控部组员岗位操作组员4.2.1制造部：负责起草验证方案和有关规程，按批准的验证方案起草验证方案，组织培训考核人员，组织实施验证并同时收集验证资料，会签验证报告。

4.2.2 质量部：检验方法验证、取样、检验、结果评价，结果评价方案，验证文件的文件管理，对供应商的确认。

QA：负责悬浮粒子、沉降菌主要工序温度、相对湿度及压差检查、及设备、设施的无菌、原辅料、内外包材、中间产品、成品取样。

目的：规范维生素B6片检验的操作。

责任：检验室检验员工对本规程的实施负责，检验室主任对本规程的有效执行承担监督检查责任。

本品含维生素B6（C8H U NC ）3・HC1）应为标示量的93.0〜107.0%。

1 .性状：本品为白色片。

2.鉴别1.1 仪器及用具：天平、试管、研钵、刻度吸管、量筒、滤纸等。

2.2试剂及试液：纯化水、20%醋酸钠溶液、4%硼酸溶液、氯亚胺基-2,6-二氯醍试液、 AgNCh 试液。

2.3测定法 2.3.1鉴别（1）取本品的细粉适量（约相当于维生素B 610mg ）,力口20%醋酸钠溶液5ml,振摇使维生素B6溶解，滤过，滤液加水使成100mL 取溶液各1ml,分别置甲、乙两个试管中，各加20%醋酸钠溶液2mL 甲管中加水1mL 乙管中加4%硼酸溶液1ml,混匀，各迅速加氯亚胺基-2,6-二氯醍试液1ml ；甲管中显蓝色，几分钟后即消失，并转变为红色，乙管中不显蓝色。

鉴别⑵取本品的细粉适量，加水振摇，滤过，滤液显氯化物的鉴别反应，按《氯化物鉴别反应标准操作规程》（SOP-QC-088-00）试验。

3.检查3.1 仪器及用具：天平、脆碎度测定仪、崩解仪、镶子等。

3.2 试剂及试液：纯化水。

适用范维生素B6片成品的检验。

2.3.23.3检查3.3.1其他：应符合片剂项下有关的各项规定(附录IA)4.含量测定4.1仪器及用具：天平、紫外分光光度计、研钵、量瓶、烧杯等。

4.2试剂及试液：盐酸溶液(9-1000)。

4.3测定法431供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称出适量(约相当于维生素B625mg),置研钵中，加盐酸溶液(9-1000)数滴，研磨成糊状后，用盐酸溶液(9^1000)50ml移至100ml量瓶中，时时振摇30分钟使维生素1%溶解，加盐酸溶液(9-1000)稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液(9-1000)稀释至刻度，摇匀，即得。