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临床医学检验技术(士)：血液样本采集和血涂片制备考点1、单选正常人血液pH为（）A.7.05～7.15B.7.15～7.25C.7.25～7.35D.7.35～7.45E.7.45～7.55答案（江南博哥）：D参考解析：正常人血液pH值为7.35～7.45。
2、单选瑞氏染液中起固定作用的是（）A.伊红B.亚甲蓝C.甲醇D.沙黄E.甘油正确答案：C参考解析：瑞氏染料由酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝（M+）组成，将适量伊红、亚甲蓝（又名美蓝）溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。
甲醇的作用：一是溶解伊红和美蓝；二是固定细胞形态。
3、单选枸橼酸钠抗凝剂的原理是（）A.阻止凝血酶的形成B.阻止血小板的聚集C.除去球蛋白D.与血液中的钙离子形成螯合物E.除去纤维蛋白原正确答案：D参考解析：枸橼酸钠抗凝剂的原理是枸橼酸钠与血液中的钙离子形成螯合物阻止血液凝固。
4、单选网织红细胞计数灵敏的染色方法是（）A.煌焦油蓝染液B.碱性亚甲蓝染液C.墨汁负染色D.抗酸染色E.瑞氏染液正确答案：A参考解析：1.瑞氏染料由酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝（M+）组成，将适量伊红、亚甲蓝（又名美蓝）溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。
2.网织红细胞计数原理：经体外活体染色，网织红细胞内RNA的磷酸基带有负电荷，能与新亚甲蓝、灿烂甲酚兰（煌焦油蓝）、中性红等碱性染料带正电荷的有色反应基团结合，使RNA胶体间电荷减少，分子间斥力下降失去分散力，形成核酸与碱性染料复合物的多聚体，呈深染的颗粒状或网状结构。
凡含两个以上的深染颗粒或具有网状结构的无核红细胞，即为网织红细胞。
5、单选不适用于凝血象检查和血小板功能试验的抗凝剂是（）A.EDTA盐B.枸橼酸钠C.草酸盐D.双草酸盐E.肝素正确答案：A参考解析：肝素可以保持红细胞的自然形态，是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂；枸橼酸钠对凝血因子V有较好的保护作用，使其活性缓慢减低，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定，因毒性小，是输血保养液的成分之一；EDTA-K2对血细胞的影响最小，是全血细胞分析的理想抗凝剂，不适于凝血检查、血小板功能试验；草酸铵对红细胞破坏力较强，保持血小板形态完整适用于血小板计数；乙二胺四乙酸（EDTA）盐影响血小板聚集，不适合于做凝血象检查和血小板功能试验。
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液细胞的形态和数量。
通过制备血涂片，我们可以了解疾病的诊断和治疗过程中的重要信息。
本实验报告将介绍血涂片的制备过程和相关技术。
一、材料与设备：1. 血液样本：采集自健康人士或实验动物。
2. 血涂片玻片：具有一定的光学透明度和平整度。
3. 血涂片刮板：用于制备血涂片的工具。
4. 血涂片染色剂：如吉姆萨染色剂。
二、实验步骤：1. 准备工作：清洁实验台面，并确保材料和设备的无菌状态。
2. 血液采集：使用无菌针头采集血液样本，将血液缓慢抽入无菌注射器中。
3. 制备血涂片：a. 取一片无菌血涂片玻片，用无菌棉球蘸取适量的酒精擦拭玻片表面，使其干燥。
b. 用无菌血涂片刮板，将血液样本滴于血涂片玻片的一端。
c. 快速而均匀地将刮板从滴液处向另一端刮过，使血液在玻片上均匀分布。
d. 在刮板刮过的血液上方，迅速将另一片无菌玻片平放在上方，使血液与玻片接触。
e. 缓慢而均匀地将上方的玻片向下滑动，使血液在两片玻片之间形成薄膜。
f. 将制备好的血涂片放置在通风干燥的地方，待其完全干燥。
三、血涂片染色：1. 准备工作：将吉姆萨染色剂按照说明书的要求稀释至适当浓度。
2. 染色过程：a. 将制备好的血涂片放入染色盒中，使其与染色剂接触。
b. 根据需要，将血涂片浸泡在染色剂中的时间可调整为几分钟至几十分钟。
c. 取出血涂片，用清水轻轻冲洗，直至水清。
d. 将血涂片放置在通风处晾干。
四、结果与讨论：通过制备和染色的血涂片，我们可以观察到不同类型的血细胞，如红细胞、白细胞和血小板。
通过观察它们的数量、形状和结构，我们可以判断出是否存在异常情况，如贫血、感染或血液疾病等。
血涂片的制备和染色技术在临床诊断和科学研究中具有广泛的应用。
结论：通过本实验报告，我们了解了血涂片的制备过程和相关技术。
制备血涂片的步骤包括血液采集、血涂片制备和血涂片染色。
血涂片的制作流程
血涂片是一种常见的临床检查方法，用于观察血液中的细胞形态和数量，以帮助医生诊断疾病。
下面将介绍血涂片的制作流程。
1.采集血液样本
首先需要采集患者的血液样本。
通常采用的方法是在患者的手臂上绑上一条绷带，使血管充血，然后用一根针头穿刺血管，将血液采集到一根试管中。
2.制作血涂片
将采集到的血液样本滴在玻片上，然后用另一根玻片将其涂开，使血液均匀地分布在玻片上。
这个过程需要非常小心，以避免血液样本的污染或损坏。
3.固定血涂片
将制作好的血涂片放在一个固定剂中，通常使用的是甲醛或乙醇。
这个过程可以固定细胞的形态和结构，以便更好地观察。
4.染色
将固定好的血涂片放在染色剂中，通常使用的是伊红染或吉姆萨染。
这个过程可以使细胞更加清晰地显示出来，以便更好地观察和分析。
5.观察和分析
将染好色的血涂片放在显微镜下观察和分析。
医生可以通过观察细胞的形态、大小、数量和排列方式来判断患者的健康状况，例如是否存在贫血、感染或癌症等疾病。
血涂片制作流程需要非常小心和精确，以确保获得准确的结果。
这个过程需要专业的技能和经验，只有经过专业的培训和实践，才能够熟练掌握。
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液中的各种细胞和细胞形态。
本实验旨在探究血涂片的制备方法和技巧，以及观察和分析血涂片的步骤和注意事项。
材料与方法：1. 血液样本：采集新鲜的静脉血，使用无抗凝剂的试管收集。
2. 血涂片材料：玻璃片、洗净的玻璃滴管、无纺布、无纺布夹子、显微镜玻璃片、显微镜盖玻璃片。
3. 实验仪器：显微镜、离心机。
步骤：1. 准备工作：将玻璃片和显微镜玻璃片用去离子水和无纺布擦拭干净，保证表面无杂质。
2. 血液制备：使用无纺布夹子固定玻璃片，用洗净的玻璃滴管将血液滴在玻璃片上。
滴管与玻璃片的接触角度应适中，以保证血液均匀地分布在玻璃片上。
3. 血涂片制备：用另一块玻璃片将血液滴在玻璃片上的血液涂抹均匀，使血细胞分散均匀并形成单层。
4. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，或使用离心机低速离心，去除多余的液体。
5. 固定处理：将干燥的血涂片固定在95%乙醇中，浸泡2-3分钟，以保持细胞形态。
6. 染色处理：将固定的血涂片浸泡在Wright染料溶液中，浸泡时间根据染料浓度和需要的染色效果而定。
7. 清洗处理：用去离子水将染色过的血涂片洗净，去除多余的染料。
8. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，确保完全干燥。
9. 封片处理：将干燥的血涂片放在显微镜盖玻璃片上，用透明胶带固定。
结果与讨论：制备完毕的血涂片可用于显微镜观察。
通过血涂片，我们可以观察到血液中的各种细胞，如红细胞、白细胞和血小板，并且可以分析它们的数量、形态和结构。
在制备血涂片的过程中，有几个关键的步骤需要特别注意。
首先，血液的滴取和涂抹要均匀、细致，以避免细胞聚集和不均匀分布。
其次，血涂片在制备过程中要保持湿润，避免细胞干燥和变形。
此外，染色过程中的浸泡时间和染料浓度要控制好，以保证染色效果的准确性和清晰度。
血涂片的制备是一项基础实验技术，广泛应用于医学、生物学和病理学等领域。
血液样本采集和血涂片制备1、抽血时针栓只能外抽，不能内推，以免静脉内注入空气形成气栓，造成严重后果。
2、属于酸性染料的是：伊红属于酸性染料，通常为钠盐，有色部分为阴离子。
3、疟原虫检查常用的染色方法是：吉姆萨染液对细胞核、寄生虫（如疟原虫等）找色较好，结构更清晰，但对细胞质的着色能力略差。
4、手工推片法，推片与载玻片的夹角为25°～30°。
5、血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关，其中，血浆黏度受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响，它们的浓度越高，血浆黏度越高。
6、涂片瑞氏染色时，缓冲液常用的pH为6.4～6.8。
7、瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝（又名美蓝）组成。
染色原理既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。
血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染伊红结合，染粉红色；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料亚甲蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
瑞氏染色法是最经典、最常用染色法。
8、瑞氏染料亚甲蓝容易氧化为一二三甲基硫堇等次级染料（即天青）。
将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料，由酸性染料伊红（E－）和碱性染料亚甲蓝（M＋）组成。
Ⅱ液磷酸盐缓冲液pH为6.4～6.8。
在偏碱性环境中负电荷增多，易与亚甲蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。
9、细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸环境中正电荷增多易与伊红结合染色偏红；在偏碱环境中负电荷增多易与亚甲蓝或天青结合偏蓝。
因此，细胞染色对氢离子浓度十分敏感，所以在瑞氏染色中缓冲液起到恒定pH作用。
血液样本采集和血涂片制备练习题一、A11、静脉采血标本溶血的原因不包括以下哪种情况A、组织液混入B、剧烈震荡C、容器不洁D、注入试管过快E、与水接触2、下列关于瑞氏染色的叙述，正确的是A、瑞氏染色的最适pH为6.4～6.8B、瑞氏染料中含碱性染料亚甲蓝和酸性染料伊红C、瑞氏染料易氧化为天青D、缓冲液pH偏高，血涂片颜色会偏蓝E、以上都是3、疟原虫检查常用的染色方法是A、瑞氏染色B、吉姆萨染色C、煌焦油蓝染液D、抗酸染色E、墨汁负染色4、关于全血、血浆和血清的概念叙述，错误的是A、血清是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分B、血浆是不含纤维蛋白原的抗凝血C、抗凝血一般是指血液加抗凝剂后的全血D、对少数检验项目，血浆与血清的测定是有差别的E、全血由血细胞和血浆组成5、下列说法错误的是A、采血前要仔细检查针头是否安装牢固B、采血前要仔细检查针筒内是否有空气和水分C、如患者静脉暴露不明显，可以用左手食指经消毒后在采血部位触摸D、抽血时针栓可以外抽和内推E、如果患者发生眩晕，应让其平卧休息6、血浆的黏滞性主要决定于A、红细胞数目B、血浆总蛋白含量C、血浆球蛋白含量D、血浆清蛋白含量E、血浆NaCl含量7、适用于红细胞沉降率和凝血检查的抗凝剂是A、乙二胺四乙酸（EDTA）盐B、草酸盐C、肝素D、枸橼酸盐E、以上都不是8、婴幼儿做血常规检查时，多使用的采血部位是A、颈外静脉B、耳垂毛细血管C、足跟毛细血管D、肘部静脉E、以上都是9、瑞氏染色法的染色原理A、物理吸附B、化学亲和C、物理吸附和化学亲和D、化学亲和E、物理性结合10、涂片的制备时，下列说法错误的是A、标本来源是EDTA抗凝血或外周血B、推片与玻片之间保持30°的平面夹角C、对红细胞比积高、血黏度高的病人应采用小血滴、小角度、慢推D、贫血患者应采用大血滴、大角度、快推E、疟原虫、微丝蚴检查，采用薄血膜涂片法11、EDTA抗凝剂对下列哪项检查最适用A、血小板功能检查B、血沉C、血小板计数D、白细胞吞噬功能测定E、凝血象检查12、静脉采血法通常使用的采血部位是A、肘部静脉B、手背静脉C、内踝静脉D、股静脉E、颈外静脉13、静脉采血时针头应A、锐利B、光滑C、通气D、针筒不漏气E、以上都是14、在静脉采血法时，为了避免血小板激活，常使用A、塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管B、塑料注射器和普通试管C、玻璃注射器和硅化处理后的试管D、玻璃注射器和玻璃试管E、玻璃注射器和塑料试管15、涂片瑞氏染色时，缓冲液常用的pH为A、5.5～6.0B、6.0～6.5C、6.4～6.8D、7.0～7.5E、7.5～8.016、下列静脉采血步骤中哪项是错误的A、选择适宜静脉，扎止血带B、消毒C、检查注射器有无阻塞和漏气D、穿刺时针头斜面向上抽血E、抽血完毕，立即将血液沿针头快速注入试管内17、属于酸性染料的是A、亚甲蓝B、天青C、伊红D、四甲基硫堇E、苏木精18、血清与血浆的区别是A、血清缺少某些凝血因子B、血浆缺少某些凝血因子C、血清缺少凝血酶D、血浆缺少凝血酶E、血清缺少纤维蛋白19、毛细血管采血常用的部位是A、手背B、肘部C、足跟D、手指E、耳垂20、影响血涂片时血膜厚度的因素有A、血滴大小B、血黏度高低C、推片角度D、推片速度E、以上都是21、枸橼酸钠抗凝血浆中不含有的凝血因子是A、Ⅰ因子B、Ⅱ因子C、Ⅴ因子D、Ⅷ因子E、钙离子22、瑞氏染色中起溶解作用的有机溶剂是A、无水乙醇B、甲醇C、氯仿D、二甲苯E、乙二醇23、载玻片的清洁是要保持载玻片的A、清洁B、干燥C、中性D、无油腻E、以上都是24、正常人血液pH值为A、7.05～7.15B、7.15～7.25C、7.25～7.35D、7.35～7.45E、7.45～7.5525、制备一张良好的血涂片应具备以下特点A、厚薄适宜B、头体尾分明C、细胞分布均匀D、血膜边缘整齐，并留有一定的空隙E、以上都是26、瑞氏染色法中缓冲液的最主要作用是A、稀释染液以防着色太深B、不改变细胞所带电荷，促进染色进行C、增加细胞对染料的亲和力D、保证细胞受色时恒定最佳的pH条件E、以上都是27、全血抗凝离心后除去血细胞成分即为A、全血B、血浆C、血清D、浓缩红细胞E、血清因子二、B1、A.巨幼细胞性贫血B.急性失血性贫血C.单纯杂合子珠蛋白生成障碍性贫血（轻型）D.骨髓增生异常综合征E.缺铁性贫血<1> 、MCV减少，RDW正常见于A B C D E<2> 、MCV正常，RDW正常见于A B C D E<3> 、MCV增大，RDW正常见于A B C D E。
血液样本采集和血涂片制备习题1 静脉采血时，错误的操作是AA.未拔针头而直接将血液打入容器B.从内向外消毒穿刺部位皮肤C进针时使针头斜面和针筒刻度向上 D.见回血后松开压脉带E.如需抗凝应轻轻混匀2 EDTA盐抗凝剂不宜用于EA红细胞计数 B白细胞计数 C血小板计数D白细胞分类计数E凝血象检查和血小板功能试验3 成人静脉采血时，通常采血的部位是BA 手背静脉 B肘部静脉 C颈外静脉 D 内踝静脉 E 股静脉4 枸橼酸钠的抗凝原理是DA阻止凝血酶的形成 B阻止血小板聚集 C 除去球蛋白D与血液中的钙离子形成螯合物 E除去纤维蛋白原5关于耳垂采血的叙述,正确的是 BA.可获多量血液B.痛感较轻C.检查结果恒定D.适合婴幼儿E.检测结果与静脉血差异小6. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是DA.草酸铵可使血细胞膨胀B.双草酸盐可用于血细胞比容测定C.对因子保护差D.可用于凝血象检查E.可干扰血浆中钾、钠和氯的测定7.肝素的抗凝原理是AA、加强AT-Ⅲ灭活效应B、与血液中钙离子形成螫合物C、除去球蛋白D、除去纤维蛋白原E、除去白蛋白8. ICSH建议血细胞计数用抗凝剂是AA.EDTA-K2B.EDTA-Na2C.草酸钠D.肝素E.枸橼酸钠9. 关于抗凝剂，错误的叙述是AA EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物C肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定E枸橼酸钠可用于输血保养液10. 下列属于酸性染料的是DA亚甲蓝 B天青 C硫堇 D伊红 E苏木精11. 对瑞氏染色的介绍,正确的说法是 AA.偏碱性环境中染色偏蓝B.偏酸性环境中染色偏蓝C.偏碱性环境中正电荷增多D.偏酸性环境中负电荷增多E.偏碱性环境中易与伊红结合12.关于双草酸盐抗凝剂错误的说法是 CA草酸钾可使红细胞缩小 B草酸铵可使红细胞胀大 C不可用于血细胞比容测定 D可用于凝血象测定 E目前应用较少13. 肝素抗凝的主要作用机制是增强下列哪项的亲和力 DA．抗凝血酶I和因子I B．抗凝血酶Ⅱ和因子Ⅱ C．抗凝血酶Ⅱ和因子Ⅲ D．抗疑血酶Ⅲ和因子Ⅱ E．抗凝血酶Ⅲ和因子Ⅲ肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用 CA抗凝血酶Ⅰ B抗凝血酶Ⅱ C抗凝血酶Ⅲ D抗凝血酶Ⅳ E抗凝血酶Ⅴ14.凝血象检查时,抗凝剂最好用 CA、EDTA-K2B、38g/L枸橼酸钠C、109mmol/L枸橼酸钠D、肝素E、草酸钠15.可用于血液保养液的抗凝剂是BA.EDTA-K2B.枸橼酸钠C.草酸钠D.双草酸盐E.草酸钾16.关于细胞成分的特性,正确的说法是DA、嗜酸性颗粒为酸性物质B、中性颗粒为酸性物质C、细胞核蛋白为碱性物质D、Hb为碱性物质E、淋巴细胞胞质为嗜酸性物质17. 瑞氏染液的成熟指数(rA)下降到多少时方可使用CA.0.90±0.1B.1.1 ±0.1C.1.3±0.1D.1.5±0.1E.1.7±0.118.关于瑞氏染色,错误的说法是DA.室温越高，染色时间越短B.染液浓度越高，染色时间越短C.细胞数量越多，染色时间越长D.先倒去染液，再用流水冲洗E.用缓慢的流水冲去染液19. 关于瑞氏染色后细胞着色情况,错误的叙述是 CA中性颗粒为谈紫红色 B淋巴细胞胞质为蓝色 C嗜碱性颗粒为紫红色D嗜酸性颗粒为橘红色 E单核细胞胞质为灰蓝色20. 吉姆萨染色法较瑞氏染色法的优点在于DA.新配制的染液可立即使用B.标本染色艳丽C.染料渗透性强D.对细胞核着色较好E.对胞质和中性颗粒着色较好21. 关于血细胞染色,正确的叙述是BA.瑞氏染色法对细胞质染色的效果不及吉姆萨染色法B.瑞氏染色法是最常用的方法C.瑞氏染色液中的伊红为碱性染料，亚甲蓝为酸性染料D.吉姆萨染色法为最常用的染色方法E.吉姆萨染色法对细胞核和寄生虫着色较差22.关于真空采血法的叙述错误的是 EA根据实验要求选择相应的真空采血管 B采血量由真空负压严格控制 C为封闭式采血技术 D可避免对医护人员的感染 E容易发生溶血现象23.血细胞计数仪计数血细胞时,抗凝剂应选用A.草酸钠B.肝素C.EDT A-K2D.草酸钾E.枸橼酸钠24. 关于草酸钠抗凝剂的叙述不正确的是BA.与血液中的钙离子形成草酸钙沉淀B.通常与血液按1:4比例使用C.对自动凝血仪的使用有影响D.对凝血因子Ⅴ保护功能差E.目前凝血象检查不宜选用.25. 对瑞氏染色的介绍,正确的说法是 BA.偏碱性环境中染色偏红B.偏酸性环境中染色偏红C.偏碱性环境中正电荷增多D.偏酸性环境中负电荷增多E.偏碱性环境中易与伊红结合26. 儿童血容量约占体重的 CA. 5％B. 6％～8％C. 8％～10％D. 15％E. 20％正常成年人血液总量约占体重的 CA 6%-10%B 8%-10%C 6%-8%D 4%-6% E4%-8%27. 血液有形成分是指CA.血液所有成分B.血清C.细胞D.纤维蛋白原E.纤维蛋白28. 用自动血液分析仪,首选的抗凝剂是EA.肝素B.枸橼酸钠C.草酸盐D.双草抗凝剂E. EDTA-K229. 血清与血浆的区别是 AA.血清缺少某些凝血因子B.血浆缺少某些凝血因子C.血清缺少凝血酶D.血浆缺少凝血酶E.血清缺少纤维蛋白30.有关静脉采血步骤中,下列哪项是错误的CA穿刺时针头斜面和针筒刻度向上 B扎止血带→穿刺→抽血→解除止血带 C抽血完毕后,立即将血液通过针头沿管壁缓缓注入容器中 D.注射器中最后带有血泡的血不宜进入 E.肘正中静脉采血时,肘关节应伸直31.标本溶血可使下列哪些指标的测定结果偏高EA.乳酸脱氢酶B.血钾C.ASTD.ALTE.以上均是不受标本溶血影响的是EA.血清钾浓度B.红细胞计数C.血细胞比容D.平均红细胞血红蛋白含量E.白细胞计数32.抑制凝血酶作用的抗凝剂是AA.肝素B.枸橼酸钠C.EDTA-K2D.草酸盐 E .EDTA-Na233. 血液的生理功能是EA 维护机体内环境B 防御功能C 协调功能D 运输功能E 以上都是34 血液粘度与下列哪种有关EA.血细胞比容B.血浆中纤维蛋白原C.血浆中球蛋白D.血管内壁和血液动力学因素E.以上都是35.毛细血管和静脉血之间无论细胞成分或化学组成都存在CA.无明显差异B.明显差异C.程度不同差异D.完全相同E.基本相同36.新生儿作血常规检查,多在下列哪个部位采血CA.颈静脉B.耳垂C.足跟D.头皮血管 E肘部静脉37.静脉采血法时,为了避免血小板激活,常使用AA.塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管B.塑料注射器和普通试管C.玻璃注射器和硅化处理后的试管D.玻璃注射器和玻璃试管E.玻璃注射器和塑料试管38. 标本溶血可使下列哪些指标的测定结果偏低DA.ASTB.ALTC.KD.葡萄糖E.胆红素39．用于红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂是 CA.乙二胺四乙酸(EDT盐B.草酸盐C.肝素D.枸橼酸盐E.以上都不是40.适用于血细胞比容、网织红细胞计数,不适用于血小板计数和白细胞分类计数检查的抗凝剂是BA.乙二胺四乙酸盐B.双草酸盐C.肝素D.E.以上都不是41. 下列关于瑞氏染色的叙述，正确的是EA．瑞氏染色的最适pH值为6.4～6.8B．瑞氏染料中含碱性染料亚甲蓝和酸性染料伊红C．染液配制后须在室温或37℃贮存一定时间，待亚甲蓝逐渐转化为天青B后方能使用D．缓冲液pH偏高，血涂片颜色会偏蓝E．以上都是42瑞氏染色中缓冲液的最主要作用是EA稀释染液以防着色过深 B不改变细胞所带电荷,促进染色进行 C增加细胞对染料的亲和力 D保证细胞受色时恒定最佳的pH条件E以上都是43瑞氏染色时,如果pH偏碱,红细胞将会出现BA.粉红色B.蓝色C.橙色D.黄色E.棕色44. 关于全血、血浆和血清的概念叙述,错误的是 CA.血清是血液离体后血液自然凝固所分离出的淡黄色透明液体B.抗凝血一般是指血液加抗凝剂后的全血C.血浆是不含纤维蛋白原的抗凝血.D血清不含纤维蛋白原E。
临床医学检验技术(师)：血液样本采集和血涂片制备测试题一1、单选瑞氏染液的成熟指数（rA）下降到多少时方可使用（）。
A.0.9±0.1B.1.1±0.1C.1.3±0.1D.1.5±0.1E.1.7（江南博哥）±0.1正确答案：C2、单选一张良好血涂片的标准不包括（）。
A.厚薄适宜B.头体尾分明C.细胞分布均匀D .血膜边缘要整齐E.血膜长度占载玻片长度的3/4左右正确答案：E参考解析：一张好的血涂片应是：厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、两侧留有空隙、血膜边缘整齐。
3、单选正常参考范围的血液的比密（比重）是（）。
A.1.020~1.030B.1.030~1.040C.1.040~1.050D.1.050~1.060E.1.010~1.020正确答案：D参考解析：血液的比密（比重）正常参考范围是1.050~1.060，当血液中含有的有形成分等改变时人体血液的比密常会发生改变。
4、单选100ml双草酸盐抗凝剂含有的成分是（）。
A.草酸钠0.8g，草酸钾1.2gB.草酸铵0.8g，草酸钾1.2gC.草酸钾0.8g，草酸铵1.2gD.草酸钾1.2g，草酸钠0.8gE.草酸钠0.7g，草酸钾1.2g正确答案：C参考解析：100ml双草酸盐抗凝剂含有草酸钾0.8g，草酸铵1.2g。
5、单选封闭式采血法时，紫色的负压采血管常用于（）A.血清分离B.测血沉C.血液分析D.血库用血E.血凝用血正确答案：C参考解析：封闭式采血法的特点是试管的橡皮塞采用不同的颜色标明，不同的颜色代表不同的用途，其中，紫色管内的抗凝剂是EDTA，主要用于血液分析用。
6、单选关于抗凝剂，错误的叙述是（）。
A.EDTA-Na2溶解度大于EDTA-K2B.EDTA盐与血浆中钙离子形成螯合物C.肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而发挥抗凝作用D.枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定E.枸橼酸钠可用于血液保养液正确答案：A7、单选下列哪项不是血液的生理功能（）。
2020厦门卫生事业单位备考：血液标本的采集和血涂片的制备采集血液和制备血涂片是我们日常检验工作中做的最多的事，拥有一个好的操作手法以及检验标准才能便于我们的临床工作，这部分内容在考试当中也有所体现，通常是考察一些细微的知识点，所以对于这部分内容，我们更加应该去仔细学习，如何去采集血液以及制备血涂片，就是我们今天所要探究的问题。
首先我们得先了解采集血液的手段以及其中的注意事项。
就目前而言，临床中采集血液的方法有三种：皮肤采血法、静脉采血法、真空采血法。
那么我们根据这三类方法来具体学习。
1.皮肤采血法：我们又称之为毛细血管采血法，通常取成人无名指指端内侧或者耳垂；婴幼儿取大拇指或者足跟内外侧缘。
2.静脉采血法：通常取成人手臂肘正中静脉；婴幼儿取颈外静脉。
3.真空采血法：此法是目前我们临床应用最广泛的方法，因为它能够有效的避免污染并且将检测项目进行分类，方便了我们临床运送和检查。
大家都在实习中接触过这些彩色采血管，我们会发现不同采血管的盖帽颜色不同代表着他们的检测项目不同，并且每个采血管都会与病人相对应，可实现临床自动化操作，大大减少了检验科人员的工作强度。
那么对于不同颜色采血管所对应的检测项目和注意事项我们可以参考下表：盖子颜色添加剂注意事项应用范围促凝管（分离出来的是血清）红色无凝块形成需30-60min化学、血清学、血库黄色多聚茴香脑膜酸钠摇匀血培养灰色（血糖专用管）草酸盐/氟化钠摇匀葡萄糖，糖耐量试验抗凝管（分离出来的是血浆）绿色肝素摇匀化学蓝色枸橼酸钠1:9（枸橼酸钠：血）凝血检查紫色（血常规乙二胺四乙酸摇匀全血细胞计数根据上述内容我们已经对与采血方法及注意事项有了一个清晰的认知，那么在历年的试卷考察当中，多是以选择题的形式进行提问，那么我们重点掌握了关于采血部位以及不同真空采血管所对应的添加剂这些内容后，就可以轻松应对考试。
接下来我们就进入下个部分，关于血涂片的制备。
我们提到的血涂片，多见于我们临检和微生物对于细胞形态以及寄生虫的检查。
血液样本采集和血涂片制备一、血液生理概要1.血液组成2.血液理化性质①血量：正常人血量约为（70±10）ml/kg体重，成人约4～5L，约占体重的6%～8%。
小儿血量与体重之比略高于成人，男性比女性血量稍多，但女性妊娠期间血量可增加23%～25%。
颜色：血液的红色来自红细胞内血红蛋白。
动脉血氧合血红蛋白含量较高，呈鲜红色；静脉血还原血红蛋白含量高，呈暗红色。
严重贫血者血液红色变浅。
严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色。
②酸碱度：pH 7.35～7.45。
比密和渗透量①血液比密：正常男性约为1.055～1.063，女性约为1.051～1.060，相对黏度为4～5；血浆比密约为1.025～1.030；血细胞比密约为1.090。
血液比密与红细胞含量、红细胞内血红蛋白含量有关：血浆比密和血浆内蛋白浓度有关。
②血浆渗透量：正常人约为290～310mOsm/（kg·H20）。
3.血液特性：悬浮稳定性、黏滞性（纤维蛋白原、球蛋白）、凝固性。
4.血液生理功能：具有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。
血液标本类型①全血适用于临床血液学检查。
②血浆全血+抗凝剂+离心适用于内分泌激素、血栓与止血检查。
③血清全血+离心（静置）适用于临床化学和免疫学检测。
不加抗凝剂，血清缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等。
血浆与血清的区别血浆抗凝出凝血血清清白缺因子二、采血方法（一）静脉采血法1.概述通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉。
小儿可采颈外静脉血液。
为避免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管。
2.操作方法和注意事项准备→检查→选择→消毒→扎压脉带→穿刺→抽血→放血与混匀（二）皮肤采血法（毛细血管采血法）皮肤采血法曾称为毛细血管采血法，是采集微动脉、微静脉和毛细血管的混合血，同时含细胞间质和细胞内液。
1.概述部位→手指（WHO推荐左手无名指指端内侧）和耳垂。
耳垂采血痛感较轻，操作方便，但血循环较差，受气温影响较大，检查结果不够恒定（如红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容等测定结果比手指血或静脉血高），一般情况下不宜使用。
手指采血操作方便，检查结果比较恒定。
2.操作方法（1）准备：取合适试管，加适量稀释液。
取微量吸管和乳胶吸头相连，检查连接处是否漏气，或取一次性微量吸管备用。
（2）按摩：轻轻按摩左手中指或无名指指端内侧，使局部组织自然充血。
（3）消毒：用75%乙醇棉签擦拭采血部位，待干。
（4）针刺：用左手拇指和食指固定采血部位使皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针自指端腹内侧刺入，深度2～3mm，立即出针。
（5）拭血：待血液自然流出后，用无菌干棉球擦去第1滴血。
（6）吸血：用一次性微量吸管吸血，然后用无菌干棉球压住伤口止血。
如血流不畅，可用左手自采血部位远端向指端稍施压使血液流出。
（7）稀释：用无菌干棉球擦净微量吸管外部，将吸管伸入装有稀释液的试管底部，慢慢排出吸管内的血液，并用上清液冲洗管内余血2～3次，最后将试管内的液体混匀。
3.注意事项●所选择采血部位无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。
●本试验具有创伤性，必须严格按无菌技术操作，防止采血部位感染，做到一人一针一管，避免交叉感染，最好用一次性器材。
●皮肤消毒后，应待75%乙醇挥发后采血，否则流出的血液扩散而不成滴。
●因第1滴血混有组织液，应擦去。
如血流不畅切勿用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果的准确性。
●进行多项检查时，采血的顺序依次为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数等。
（三）真空采血法真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。
真空定量采血容器，根据需要标有不同的色码，适于不同检验项目。
质量控制1.患者：患者活动情况、精神状态、药物、年龄、性别、种族、样本采集时间、吸烟、季节等都会影响检测结果。
2.采血：止血带结扎时间应小于1分钟，如超过2分钟，大静脉血流受阻而使毛细血管内压增高，使分子质量＜5000的物质逸入组织液，或缺氧引起血液成分的变化，使检查结果增高或减低。
3.溶血：因容器不洁、接触水、强力振荡、操作不慎等可引起溶血，使红细胞计数、血细胞比容、血浆或血清化学成分（如钾、镁、转氨酶、胆红素）等多项指标检验结果发生变化。
4.样本处理：血液样本采集后应立即送检，并尽快进行检查，样本保存不当直接影响实验结果。
5.实验结果分析：分析结果时，应考虑药物、饮食等因素对结果的影响。
同时，应密切结合临床。
三、抗凝剂选择1.乙二胺四乙酸（EDTA）盐常用有钠盐（EDTA-Na2·H2O）或钾盐（EDTA-K2·2H2O）。
①抗凝原理：螯合钙离子。
②使用方法：量为1.5～2.2mg/ml血液。
③适用范围：对血细胞形态、血小板计数影响很小。
适用于血液学检查，尤其是血小板计数。
但钠盐溶解度低于钾盐，有时影响抗凝效果。
根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2·2H2O。
不适于凝血检查、血小板功能试验。
2.草酸盐①抗凝原理：草酸钙沉淀。
②适用范围：双草酸盐。
血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等检查，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
草酸盐对凝血因子V的保护作用差，影响凝血酶原时间测定，而且草酸盐与钙结合后形成的沉淀物，影响自动凝血仪检测结果，因此，草酸盐不适于凝血检查。
双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积。
3.肝素①抗凝原理：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。
②使用方法：每毫升血液肝素用量为（15±2.5）U，多为肝素钠盐或钾盐。
③适用范围：红细胞渗透脆性试验，肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。
4.枸橼酸盐①抗凝原理：能与血液中钙离子结合形成螯合物。
②使用方法：配成109mmol/L的浓度。
1:9------凝血1:4------红细胞沉降率③适用范围：凝血、红细胞沉降率、输血保养液。
四、血液涂片制备新载玻片常带有游离碱质，必须用约1mol/L HCl浸泡24h，清水冲洗，干燥后备用。
要保持载玻片的清洁、干燥、中性、无油腻。
一张良好的血片：①厚薄适宜②头体尾明显③细胞分布均匀④血膜边缘整齐⑤并留有一定空隙血涂片的制备①手工推片法25°～30°夹角、血滴大小、推片与载玻片间夹角、推片速度、血细胞比容。
②厚血膜涂片法：疟原虫、微丝蚴等。
五、血液细胞染色瑞氏染色法1.染料组成酸性染料伊红（E-）钠盐阴离子碱性染料亚甲蓝（M＋）氯盐阳离子将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中。
甲醇的作用：一是溶解亚甲蓝和伊红；二是固定细胞形态。
2.染色原理既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。
各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。
3.pH值的影响细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红，细胞核呈淡蓝色或不染色；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸性颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。
①pH＜pI→Pr带正电荷多→易与E-结合→染色偏红②pH＞pI→Pr带负电荷多→易与M+结合→染色偏蓝磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8），保证细胞受色时恒定最佳pH条件4.注意事项（1）血涂片面积太小会影响结果观察，故应在距载玻片另一端2cm处结束涂抹为宜。
（2）血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。
（3）加染液应适量，过少易蒸发形成沉淀，使细胞不易检查。
（4）冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。
冲洗时间不能过久，以防脱色。
如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。
（5）染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。
染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。
【方法学评价】1.血涂片制备用血量少、操作简单，是应用最广泛的方法。
疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。
2.血液细胞染色瑞氏染色法：最经典、最常用。
对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。
吉姆萨染色法：对细胞核、寄生虫（如疟原虫等）着色较好，结构更清晰，但对细胞质成分的着色能力略差。
瑞-吉姆萨复合染色：使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。
瑞氏染料的质量规格用吸光度比值（rA）来评价。
新配置rA接近2，降到（1.3±0.1）染料即可使用。
新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是37℃下贮存一定时间，待亚甲蓝逐渐变为天青B，贮存时间愈久，染色效果愈好。
在贮存过程中，必须加塞，以防甲醇挥发和氧化成甲酸，所用甲醇须为AR级，若其中含过多丙酮，会使染色偏酸，白细胞着色不良。
【质量控制】1.血涂片制备血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快，血膜愈厚，反之则愈薄。
血细胞比容增高、血液黏度较高时，应采用小血滴、小角度、慢推；血细胞比容减低、血液较稀时，应采用大血滴、大角度、快推。
2.血液细胞染色染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH值密切相关。
