定量校正因子

定量校正因子的测定【色谱世界】【本书目录】【引用网址】/books/C/71/0.html1. 绝对校正因子由此方法测定出的校正因子称为绝对校正因子，它只适用于这一个检测器。

因为即使是换一个同一类型的检测器，甚至是换一个同一厂家生产的同一型号检测器，由于两个检测器的灵敏度总是有些差异的，这就使等量的同一种物质在这两个检测器上的响应值有所不同，因此计算出的绝对校正因子也有所不同。

同一个检测器，随着使用时间和操作条件改变灵敏度也在改变。

这些都使绝对校正因子在色谱定量分析中的使用有很大的局限性，为此引出了相对校正因子的概念。

2. 相对校正因子常用的基准物质对不同检测器是不同的，热导检测器常用苯作基准物质，氢焰离子化检测器则常用正庚烷作基准物质。

通常人们将相对校正因子简称为校正因子，它是一个无因次量，数值与所用的计量单位有关。

根据物质量的表示方法不同，校正因子分为：3. 峰高定量校正因子在用峰高进行色谱定量时要使用峰高定量校正因子。

因为峰高定量校正因子受操作条件影响较大，因此一般不能直接引用文献值，必须在实际操作条件下，用标准纯物质测定。

对于同系物的峰高定量校正因子与峰面积定量校正因子间有如下的关系：即可得到a，b值。

此方法不适于保留时间过小和不对称的色谱峰。

4. 响应值与校正因子的关系响应值即为组分通过检测器时所产生的信号强度，可以用来表示检测器的灵敏度。

响应值与校正因子间有一定的关系。

即相对响应值为相对校正因子的倒数。

5. 校正因子的实验测量方法准确称取色谱纯（或已知准确含量）的被测组分和基准物质，配制成已知准确浓度的样品，在已定的色谱实验条件下，取准确体积的样品进样，这样可以准确知道进入检测器的组分和基准物质的质量或摩尔数或体积，然后准确测量所得组分和基准物质的色谱峰峰面积，根据式（2-3-6）、式（2-3-7）和式（2-3-8），就可以计算出质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子。

在没有合适的基准物质时，也可以测出绝对校正因子，利用绝对校正因子，在同一个检测器，相同的色谱实验条件下，也可作定量计算。

实验B-23 定量校正因子的测定实 验 目 的1.掌握色谱定量校正因子的测定方法。

2.进一步熟悉，了解色谱仪的操作和性能。

实 验 原 理在一定色谱操作条件下，被测组分i 的重量（W i ）与检测器的响应信号峰面积（A i ）,成正比，W i =f i ′²A i ，这就是色谱定量分析的依据，式中f i ′为比例常数，称为被测组分i 的绝对校正因子。

由于检测器对不同物质具有不同响应，就不能用峰面积来直接计算物质的含量，而需要对响应值进行校正，这就是校正因子的意义，即f i ′= W i / A i ,可见f i ′代表了单位面积物质的重量。

由于f i 值与色谱条件有密切关系，不易准确测定，因而常采用相对校正因子f i ,即被测物质i 与标准物质s 的绝对校正因子之比(通常把“相对”二字略去)：is si s s i s i i A W A W A W A W f f f i ∙∙===//'' 式中f s ′、 W s 、A s 分别为标准物质的绝对校正因子，重量及峰面积。

仪器与试剂1.仪 器岛津GC-14气相色谱仪 载气钢瓶H 2 色谱柱（参见前一实验） 微量注射器10μL2.试 剂101白色硅烷化担体（60－80目） 有机皂土34 邻苯二甲酸二壬酯 苯（分析纯） 甲苯（分析纯） 邻二甲苯（分析纯）实 验 步 骤1.实验条件：检测器：热导池检测器（TCD ） 桥电流100mA 温度：色谱柱 90°C 检测器 110°C 汽化室 150°C 载气： H 2纸速： 30 mm/min 进样量: 4μL2.色谱操作：(1) 准确称取苯0.4g(±0.0001g),甲苯0.4g(±0.0001g),邻二甲苯0.5g(±0.0001g)于具塞试管中，摇匀备用。

(2) 吸取混合试样4μL 进样，得到各组分的色谱图，出峰顺序为苯，甲苯，邻二甲苯。

液相色谱法定量分析与案例分享
定量分析是在定性分析的基础上，需要纯物质作为标准样品。

液相色谱的定量是相对的定量方法，即：由已知的标准样品推算出被测样品的量。

液相色谱法定量的依据
被测组分的量(W)与响应值(A)（峰高或峰面积）成正比,W=f×A。

定量校正因子(f)：是定量计算公式的比例常数，其物理意义时单位响应值（峰面积）所代表的被测组分的量。

由已知标准样品的量和其响应值可以求得定量校正因子。

测定未知组分的响应值，通过定量校正因子即可求得该组分的量。

定量分析常用术语：
样品（sample）：含有带测物，供色谱分析的溶液。

分为标样和未知样。

标样（standard）：浓度已知的纯品。

未知样（unknow）：浓度待测的混合物。

样品量（sampleweight）：待测样品的原始称样量。

稀释度（dilution）：未知样的稀释倍数。

组分（componance）：欲做定量分析的色谱峰，即含量未知的被测物。

组分的量（amount）：被测物质的含量（或浓度）。

积分（integerity）：由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程。

校正曲线（calibrationcurve）：组分含量对响应值的线性曲线，由已知量的标准物建立，用于测定待测物的未知含量。

常用的定量方法
1外标法
标准曲线法，分为外标法和内标法。

外标法在液相色谱中用的最多。

内标法准确但是麻烦，在标准方法中用的最多。

色谱定量分析色谱分析的重要作用之一是对样品定量。

色谱法定量的依据是：组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。

在此，响应信号指峰面积或峰高，表示为：i i i A f w =，其中：w i 为欲测组分i 的量，A i 为组分i 的峰面积，f i 为比例系数，在此称为校正因子。

由此可见，要准确定量，首先要准确测出峰面积与定量校正因子。

一、峰面积的测量1. 对称峰面积的测量对称色谱峰近似地看作一个等腰三角形，按照三角形求面积的方法，峰面积为i w h A h i i 2=，经验证明该方法计算的面积只有实际面积的0.94倍，故再乘一系数1.065，i w h A h i i 2065.1=，这是目前应用较广的计算法。

2. 不对称峰面积的测量在色谱分析中，经常会遇到不对称峰，多数不对称峰为拖尾峰，峰面积的计算方法为：取峰高0.15倍处和0.85倍处峰宽的平均值，乘峰高：h W W A h h ⨯+=)(2185.015.0 3. 大色谱峰尾部的小峰面积的测量分析某主成分中痕量组分时，常会遇到主峰未到基线，杂质峰开始馏出的情况。

此时，杂质峰面积计算法如下：沿主峰尾部划出杂质峰的基线，由峰顶作主峰基线的垂线。

峰顶为A ，垂线与主峰尾部交点为B ，峰高一半处峰宽为b ，则A=AB·b 。

4. 基线漂移时峰面积的测量基线漂移时的峰面积，形状与大峰后面拖尾的小峰的峰缝相似，计算方法相同。

5. 重合峰面积的测量在色谱分析中，常会遇到分离不完全的重合峰，峰面积可如下计算：两峰重合，如果交点位于小峰半高以下，可由峰高乘半高峰宽法计算两峰面积。

如果两峰交点位于小峰半高以上，通常是由交点作基线的垂线，再用剪纸称重法计算。

6. 峰高乘保留时间法同系物间，半高峰宽与保留时间呈线形关系：a bt W R h +=2，对于填充柱0≈a 。

当色谱峰很尖、很窄、半高峰宽不易测准时，可用保留时间代替半高峰宽R bt h A ⋅=065.1。

气相色谱定量校正因子的计算
气相色谱定量校正因子的计算是一项非常重要的分析工作，在化学和生物领域中广泛应用。

下面将为大家介绍一下气相色谱定量校正因子的计算方法和步骤。

一、计算步骤
1. 样品制备
首先需要将待检测物质进行样品制备。

将样品溶解在适当的溶剂中，并进行预处理和预处理，以便于后续的测试。

2. 标准品制备
接下来需要制备标准样品，以便于后续进行测量和计算。

在此过程中需要确保标准样品的纯度和浓度准确度。

3. 气相色谱测量
进行气相色谱检测，并生成相应的数据。

然后在计算机上输入数据。

4. 计算校正因子
根据标准样品的浓度值和气相色谱峰面积的数据值，计算出标准样品的峰高和样品的峰高之比。

5. 计算待检测物的浓度
根据样品的峰高和计算出的校正因子，计算出待检测物的浓度，并进
行检查和修正。

二、计算公式
气相色谱定量校正因子的计算公式如下：
校正因子 = 标准样品的浓度值 / 标准样品的峰面积值
待测样品的浓度值 = 样品的峰面积值 ×校正因子
三、注意事项
在进行气相色谱定量校正因子的计算过程中，需要注意以下几点：
1. 样品制备的过程要严格控制，确保实验数据的准确性。

2. 制备标准样品时需要准确控制其纯度和浓度。

3. 在进行气相色谱测量时，需要确保此过程中温度和压力的稳定性，以减小误差。

4. 在计算校正因子和待检测物浓度时需进行检查和修正，确保数据的准确性。

以上就是气相色谱定量校正因子的计算方法和注意事项。

希望对大家有所帮助。

色谱定量分析中校正因子的使用在药物研发和QC岗位工作的人员在进行杂质定量时会经常遇到校正因子。

那么定量过程中为什么要使用校正因子、校正因子该怎么计算、得到的校正因子结果该怎么进行使用以及验证呢？下面小编将和大家一一进行分析这些问题，让大家透彻的了解校正因子。

1、为什么要使用校正因子？问题1：在做有关物质质量研究控制时，获得杂质是最让人头疼的一个问题，因有些杂质很难制备、稳定性差或者价格昂贵，难以长期提供杂质进行后续检测。

解决办法：因物质通过检测器时会有一个响应值，所以使用峰面积进行反应待测组分的含量就是一个很好的方法。

问题2：由于同一检测器对不同物质的响应值不同，所以当相同浓度的不同物质通过检测器时，产生的峰面积不一定相等，这种情况下使用峰面积进行反映待测组分的含量就会出现误差。

解决办法：为了消除这个误差，需要加入一个校正值，使得相同浓度的不同物质通过检测器时，产生的峰面积相等，以达到使用峰面积准确反映待测组分的含量，这个校正值就是我们常提到的校正因子。

举例如下：0.1mg/ml API的峰面积5000.1mg/ml 杂质峰面积是250测定某样品时检出API峰面积为500，待测组分为5。

当使用峰面积（面积归一化法）计算杂质的含量：5/500*100=1%当使用外标法进行计算杂质的含量：5*0.1/250/0.1*100=2%这样使用面积归一化法和外标法计算杂质结果就出现了误差。

当引入校正因子：500/250=2，进行计算杂质的含量：5*2/500*100=2%此时计算的结果就相吻合了。

以上就是我们在样品杂质定量时需要使用校正因子的原因。

2、校正因子的含义校正因子分为绝对校正因子和相对校正因子。

绝对校正因子：物质的检测量W与色谱响应值（峰面积等）A之间的比值相对校正因子：某物质i与所选定的参照物质s的绝对校正因子之比通常我们在实验过程中使用的就是相对校正因子，经常查阅USP药典的朋友会发现USP质量标准中使用的是响应因子，它是校正因子的倒数。