家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测
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氯化汞与家兔急性肾功能不全【摘要】目的学习用氯化汞复制急性肾功能不全的动物模型;观察急性肾功能不全时蛋白尿、血肌酐、肾酚红排泄率的变化,并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。
方法本次实验共分为两大组,肾衰组和对照组。
用分光光度计测量吸光度的方法算出血肌酐、尿肌酐和酚红排出量,然后再通过计算公式计算出肌酐清除率和酚红排泄率。
结果肾衰模型组家兔肾脏体积变大,颜色较浅,外表出现颗粒,体重比正常组重得多,血清肌酐41.7mg%,尿肌酐12.25mg%;对照组血清肌酐7.97mg%,尿肌酐2.25mg%,酚红排泄率50%。
结论急性肾功能不全会引肾小管上皮细胞受损,从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。
【实验原理】肾脏是一个多功能的器官,具有排泄、调节、内分泌等功能。
引起急性肾功能不全主要原因有肾前性、肾性、肾后性三种。
氯化汞是重金属盐,家兔皮下或肌肉注射10g/L氯化汞,可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。
急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种,前者多见。
少尿型一般出现少尿甚至无尿,等渗尿,尿钠浓度高,尿常规可发现血尿,镜检有多种细胞并有管型〔颗粒管型和细胞管型等〕。
血液尿素氮〔BUN〕和血浆肌酐进行性升高,肌酐从尿中排出障碍,尿肌酐/血肌酐<20,与功能性肾衰时>40有明显的区别。
急性肾功能不全评价的病理生理学指标有内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值、肾脏酚红排泄率、钠排泄分数等,本实验主要测定酚红排泄率、内生肌酐清除率、尿肌酐/血肌酐比值及肾形态学的改变。
【关键词】急性肾功能不全酚红排泄率血清肌酐尿肌酐【材料和方法】1、材料:家兔;分光光度计,离心机,恒温水浴箱;氯化汞,氨基甲酸乙酯,酚红,NaOH,醋酸,碱性苦味酸,肌酐标准应用液,生理盐水,葡萄糖。
2、方法2.1本组作为对照组兔则皮下或肌肉注射等量的生理盐水。
麻醉固定将氨基甲酸乙酯以5ml/kg 的体重剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入。
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测【实验目的】1、用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2、观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化。
肾功能评价指标:(1)测定血肌酐、尿肌酐,计算内生肌酐清除率(2)测定酚红排泄率(3)观察肾脏形态学改变。
【实验材料】器械家兔手术台、常用手术器械一套、止血钳、眼科剪、支架、照明灯、纱布、丝线、1ml、10ml、50ml注射器药品生理盐水、20% 氨基甲酸乙酯、0.6%酚红溶液、20%葡萄糖溶液对象家兔分组:1-4组——模型组(头部黄色标志 5-8组——对照组【实验方法】一、复制急性肾功能不全模型(已完成):实验前24小时,取家兔两组,称重。
模型组——皮下注射1%氯化汞溶液 0.8-1ml/Kg体重;对照组——皮下注射等计量生理盐水二、急性肾功能不全指标检测1、家兔称重、麻醉和固定:取家兔一只,称重:2.16kg;20%氨基甲酸乙酯:5ml/kg体重,耳缘静脉缓慢注射,共注射10.8ml至呼吸深而慢、反射迟钝(角膜反射、夹肢反射)为止。
背位固定。
2、心脏采血—测血肌酐(颈动脉)左侧第3-4肋间,靠近胸骨,心跳最明显处垂直进针穿刺,取血3 ml,推入干燥试管,静置,——备用测血肌酐。
3、膀胱插管术—测尿肌酐、收集尿液1)如何进行膀胱插管,请按实际操作详细描述。
2)先用注射器取尿液2 ml于试管中,——备用测尿肌酐。
3)然后在输尿管下方穿线结扎尿道,再行膀胱切口,插管固定,排空膀胱。
4)准备小烧杯,收集尿液。
4、酚红排泄率测定1)0.6%酚红溶液1 ml/Kg体重,耳缘静脉头皮针注射,总共注射2.16ml。
计时—开始收集尿液。
2)然后20%葡萄糖溶液30 ml/Kg体重,耳缘静脉缓慢推注。
3)从注射酚红溶液起收集15分钟(对照组)、30分钟(模型组)尿液。
5、生化检测——血肌酐、尿肌酐、酚红排泄率1)测酚红排泄率收集注射酚红后的全部尿液-→250 ml量筒内-→然后加入10% NaOH 5 ml-→再加自来水至250 ml混匀-→取适量混合液-→小试管中与标准比色管进行比较即为15分钟、30分钟酚红排泄率。
氯化汞与家兔急性肾功能不全摘要:【目的】复制急性中毒性肾衰动物模型,通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察,了解中毒家兔肾功能的改变。
判断、分析致病因素及导致急性肾衰的可能发病机制【方法】取家兔两只,分为实验组(急性肾功能不全)和对照组,分别对家兔行心脏采血和膀胱取尿,分别测定并比较两兔的血清肌酐和尿肌酐含量以及酚红排泄率,比较肾衰家兔和正常家兔的肾脏排泄功能,最后取两兔肾脏观察比较。
【结果】与正常家兔相比,急性肾衰家兔尿肌酐、尿/血肌酐比值(<10:1)、酚红排泄率均明显下降,血肌酐含量也有所下降,肾比重减小,肾脏外观苍白肿大,切面苍白,皮髓质分界不清。
【结论】氯化汞可直接损伤肾小球和肾小管引起器质性肾功能衰竭,引起肾小管上皮细胞变性坏死,肾血管收缩,肾血流减少,肾灌注压下降,肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
【关键词】氯化汞;急性肾功能不全;血肌酐;尿肌酐;尿肌酐/血肌酐;酚红排泄率【引言】肾脏是一个多功能器官,其主要功能之一是泌尿功能。
肾脏通过调节肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泌与重吸收以及排泄体内代谢物质以维持机体内环境的稳定。
当肾血流量减少,肾小球滤过率下降或肾小管排泌重吸收功能障碍时,肾的泌尿功能受到影响,从而导致肾功能不全。
[1]1、实验材料和方法1.实验材料1.1实验对象:家兔1.2药品和试剂:氨基甲酸乙酯、生理盐水、葡萄糖、酚红、NaOH、醋酸、碱性苦味酸、肌酐标准应用液1.3实验器材:手术器械一套、试管、分光光度计、水浴锅、离心机2.实验方法2.1复制肾功能衰竭模型:于实验前一天,取两只家兔,称重,一只皮下或肌肉注射1%HgCl2(o.8~1.0ml/kg)造成急性肾功能衰竭,为实验组兔;另一只皮下或肌肉注射等量的生理盐水(1.0ml/kg)作为对照组兔。
2.2麻醉手术:家兔称重,按5 ml/kg体重剂量于耳缘静脉缓慢注射200 g/L氨基甲酸乙酯麻醉。
3 急性中毒性肾功能不全3急性中毒性肾功能不全三、急性中毒性肾功能不全【实验目的】1.复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
2.观测急性肾功能不SIDI动物血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化,分析其出现机制。
【实验原理】使用肾毒物重金属hgcl2溶液导致家兔急性肾小管发炎,激活急性肾功能不全系列的动物模型,通过观察动物的血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化,自学急性肾衰时内环境的变化。
【实验动物】家兔,体重1.5~2.5kg。
【实验药品与器材】1%hgcl2溶液,3%戊巴比妥钠溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液,1%普鲁卡因溶液,生理盐水,1%肝素生理盐水溶液;兔台,手术器械,1ml和5ml注射器,试管,滴管,圆柱形,液体,试管夹,酒精灯,试管架,颈动脉插管,血气分析仪,生化分析仪,离心机,光电比色计,水浴锅。
【观察指标】全血:血气分析仪测量ph值、paco2、[hco3]、[k]、[na]和[cl];血清:生化分析仪测量bun;尿:尿量、尿蛋白定性和镜检;肾:大体、剖面。
-++-【实验方法与步骤】1.取家兔两只,一只为正常对照,一只为中毒实验兔。
于实验前一天称重后,实验兔皮下或肌肉注射1%hgcl2(按1.5~1.7ml/kg,一次注射),造成急性中毒性肾功能不全模型,对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水,作为对照。
将两只兔笼均置于大漏斗上,收集尿液,测量24h尿量。
2.实验已经开始,家兔称量后,20%氨基甲酸乙酯溶液(0.5~1g/kg体重)或3%戊巴比妥钠(30mg/kg体重)耳缘静脉转化成麻醉后,站立紧固于兔台。
下腹部剪毛,在耻骨联手上1.5cm处作长约4cm的正中切口,分离皮下组织,沿腹白线切开腹膜,暴露膀胱,穿刺取出全部尿液,供尿蛋白定性和尿液镜检。
3.颈部正中切口,拆分一侧颈总动脉,颈动脉插管内转化成肝素生理盐水溶液,展开颈动脉插管。
4.抽取0.5ml动脉血作血气分析,取3ml动脉血(滴入肝素数滴后)离心(1500转/分,5~10分钟),取血清供尿素氮测定用。
肾功能不全评估标准一、引言肾功能不全是一种常见的肾脏疾病,对患者的生活质量和健康状况产生严重影响。
为了更好地诊断、治疗和管理肾功能不全患者,建立一套科学、规范的评估标准至关重要。
本文将详细介绍肾功能不全评估标准的各个方面,包括评估指标、评估标准、评估流程以及结论等。
二、评估指标肾功能不全的评估指标主要包括肾小球滤过率(GFR)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)等。
这些指标可以反映肾脏的排泄功能和滤过功能,进而评估肾脏的整体功能状态。
1.GFR:肾小球滤过率是评估肾脏滤过功能的常用指标,单位为ml/min/1.73m2。
通过检测GFR,可以了解肾脏对毒素的清除能力,从而判断肾功能不全的程度。
2.Scr:血肌酐是一种代谢产物,主要由肌肉产生,经肾脏排泄。
血肌酐浓度的变化可以反映肾脏排泄功能的状态。
3.BUN:尿素氮是蛋白质代谢的产物,主要通过肾脏排泄。
尿素氮浓度的变化也可以反映肾脏排泄功能的状态。
三、评估标准根据不同的评估指标,可以将肾功能不全分为不同的等级。
目前常用的评估标准包括:1.慢性肾脏病分期标准(CKD):根据GFR和尿蛋白水平,将肾功能不全分为5期。
其中,1-3期为轻度肾功能不全,4期为中度肾功能不全,5期为重度肾功能不全。
2.终末期肾病(ESRD):当肾功能不全进展到严重阶段,导致GFR降至15ml/min以下时,称为终末期肾病。
此时需要进行肾脏替代治疗,如透析或肾移植。
四、评估流程肾功能不全的评估流程主要包括以下几个步骤:1.病史采集:了解患者的既往病史、家族史、用药情况等,以排除其他可能导致肾功能不全的原因。
2.体格检查:进行常规体格检查,包括血压、体重、身高、腰围等指标的测量,以及心肺听诊和腹部触诊等。
3.实验室检查:采集患者的血液和尿液样本进行实验室检查,包括肾功能指标(如GFR、Scr、BUN等)、尿蛋白定量、血常规、血脂等指标的检测。
4.影像学检查:根据需要,进行超声、CT、磁共振等影像学检查,以了解肾脏的形态和结构。
实验项目:肾前性及肾性因素导致家兔急性肾衰竭的比较。
实验目的:1、了解不同因素导致家兔急性肾衰竭的程度。
2、复制不同因素导致家兔急性肾衰竭的模型。
3、观察急性肾功能不全时动物血尿素氮、血肌酐、尿蛋白含量及肾形态等因素的变化,分析其发生机制。
实验原理:1、中毒导致肾衰竭(肾性急性肾功能衰竭):采用甘油160 mg/kg 体重造成家兔急性肾小管坏死坏死,复制急性肾功能不全的动物模型,通过观察动物血尿素氮、尿及肾形态的变化。
致病机制:小鼠肌肉注射甘油后, 由于禁水及甘油的高渗透压造成局部体液蓄积而引起血容量降低,肾血流量减少,血液粘度增加,肾血管阻抗增加,血管自身调节功能丧失,导致肾小球滤过率下降;另外,高渗透压造成肌肉及肌肉血管的溶解,肌红蛋白、血红蛋白及钾的释放,产生肾毒性最终造成肾小球及肾小管损伤,功能异常。
甘油引起的ARF 兼有肾缺血及内源性毒性物质对肾脏损伤的双重作用,类似于挤压综合征。
(我们不清楚是否需要禁水)2、缺血及施用血管收缩药物引起肾功能衰竭(肾前性急性肾功能衰竭):采用人工夹闭双侧肾动脉方法使肾脏缺血,引起肾灌注压下降,肾血管收缩等一系列变化,引起急性肾小管坏死。
实验器材和药品:手术器械,20%乌拉坦,50%甘油,普鲁卡因,生理盐水,肝素,插管,刻度试管。
注:50%甘油配制方法:量取甘油50mL用右旋糖酐-70稀释至100mL。
实验步骤:1、肾性急性肾功能衰竭模型:⑴提前将一只家兔限制饮水18h。
⑵提前24h肌肉注射50%甘油10ml/kg复制急性中毒性肾功能不全。
⑶24h后将家兔用20%乌拉坦麻醉3-4ml/kg、固定,对家兔进行肝素化。
⑷下腹部正中切口,膀胱穿刺取尿3ml,离心后做尿蛋白定性实验。
⑸做颈总动脉插管,取3ml动脉血,离心后做血清尿素氮和血肌酐含量的测定。
⑹处死动物,取肾,测定肾系数。
⑺剖开肾脏,观察肾皮质和肾髓质的变化。
2、肾前性急性肾功能衰竭模型⑴取一只正常家兔称重,20%乌拉坦麻醉3-4ml/kg麻醉,固定在兔台上,肝素化家兔。
一、实验背景肾脏作为人体的重要器官,负责调节水电解质平衡、排泄代谢废物、生成红细胞生成素等功能。
肾功能不全(肾衰)是指肾脏功能部分或完全丧失,导致代谢废物和多余水分不能正常排出体外,从而引起一系列生理和代谢紊乱。
本实验旨在通过模拟急性肾功能不全动物模型,观察肾脏形态学变化和肾功能指标检测,探讨肾衰的发生机制及其临床表现。
二、实验目的1. 复制急性中毒性肾衰动物模型。
2. 通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察,了解中毒动物肾功能的变化。
3. 判断和分析致病因素和可能的治疗方法。
三、实验材料与方法1. 实验动物:成年家兔3只,体重约2.5kg。
2. 实验试剂:氯化汞、生理盐水、肝素钠、EDTA-K2、0.9%氯化钠溶液、碱性苦味酸、硫酸铵、酚红、苯巴比妥钠等。
3. 实验仪器:手术显微镜、电子天平、离心机、生化分析仪、显微镜等。
4. 实验方法:(1)建立急性中毒性肾衰动物模型:将家兔随机分为实验组和对照组,实验组给予氯化汞灌胃,对照组给予等量生理盐水灌胃。
(2)检测肾功能指标:实验前后分别采集家兔血液,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿量、尿蛋白等指标。
(3)观察肾脏形态学变化:处死实验动物后,取肾脏进行常规石蜡切片,显微镜下观察肾脏组织形态学变化。
四、实验结果1. 实验组家兔在给予氯化汞灌胃后,Scr、BUN水平明显升高,尿量减少,尿蛋白阳性,表明实验动物出现急性肾功能不全。
2. 对照组家兔Scr、BUN水平及尿量、尿蛋白等指标无明显变化。
3. 显微镜下观察,实验组家兔肾脏出现肾小球肿胀、肾小管扩张、间质水肿等病理变化。
五、讨论与分析1. 急性肾功能不全的发生机制:氯化汞是一种重金属,具有肾毒性,可导致肾小管细胞损伤,从而引起肾功能不全。
本实验通过给予氯化汞灌胃建立急性中毒性肾衰动物模型,成功模拟了急性肾功能不全的临床表现。
2. 肾功能指标的检测:Scr、BUN是反映肾功能的重要指标,急性肾功能不全时,Scr、BUN水平明显升高。
两种家兔急性肾功能不全模型复制方法学比较设计者:###临床医学本科 2003级##班指导老师:###一、实验目的制备中毒性肾功能不全的家兔模型,比较高浓度甘油和氯化高汞两种方法复制动物模型的差异。
二、立题依据急性肾功能不全是由于肾小球滤过率急剧减少或肾小管发生变性坏死而引起的一种严重的急性病理过程,多数为少尿或者无尿型。
其中,肾性肾功能不全由肾实质器质性病变引起,临床上以肾缺血和肾毒物引发的急性肾小管坏死最多见。
常见的制备中毒性肾功能不全的动物模型有两种方法:肌注50%甘油和1%氯化高汞。
其中50%甘油由于能造成挤压综合症,产生大量坏死脱落的肌红蛋白,入血后形成肾小管腔内压、肾小球囊内压均升高,引发肾血流重布,肾皮质缺血,髓质淤血,造成肾小球滤过率降低而引起少尿。
1%氯化高汞在临床上可作为非金属器皿的消毒剂使用。
氯化高汞对人体组织有腐蚀作用,且其中的重金属Hg²+对各种动物均可造成“坏死性肾病”,故用来制备中毒性肾功能不全的动物模型,主要作用部位是肾脏近端小管。
临床上尿常规检验包括尿液的蛋白质定性检验和沉渣镜检两种。
正常情况下,尿液中蛋白质含量极微,不能用普通方法检出,在尿液沉渣中也只偶有少量白细胞,上皮细胞和个别红细胞。
如在尿液当中检出蛋白质,在尿液沉渣中发现有较多红细胞、白细胞、上皮细胞,特别是各种管型,即表示肾脏已有实质性损害。
肾功能发生障碍时,体内代谢产物尿素的排泄量减少,血浆中尿素氮含量升高。
因此,通过测定血浆中尿素氮的含量来反映肾的功能。
尿素与二乙酰肟在酸性溶液中经Fe³+的翠华发生缩合,并在氨基硫脲的存在下,生成3-羟基-5,6二甲基-1,2,4-三嗪,使溶液转为红色,利用比色法对血浆尿素氮进行定量测定。
参考文献[1] 赵自刚,牛春雨,侯亚利等. 甘油致家兔急性肾功能衰竭血黏度及凝血功能的变化.中国微循环,2004,8(3):146-148[2] 赵自刚,牛春雨,侯亚利等. 两种家兔急性肾功能衰竭模型复制方法的比较,河北北方学院学报,2004,21(5)三、实验方法及技术路线实验材料:家兔、兔手术台、手术器械、试管、试管夹、恒温水浴、注射器、玻璃分针、塑料插管、光学显微镜、载玻片、离心机、离心管、752型紫外分光光度计、50%甘油、1%Hgcl2 、生理盐水、1%普鲁卡因、50%葡萄糖溶液实验分组:甘油组:肌注50%甘油氯化高汞组:皮下注射1%HgCl2对照组:注射生理盐水观察指标:血浆尿素氮,尿液沉渣,尿蛋白实验方法与步骤:1、实验前24小时,分别为甘油组兔肌内注射50%甘油10.0ml/kg.bw,氯化高汞组兔皮下注射1%HgCl21.5ml/kg.bw,以制备急性中毒性肾功能不全模型。
急性肾功能不全【实验目的】学习用氯化汞复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
观察急性肾功能不全时动物尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化以及肾脏的形态改变,分析和讨论其致病因素及发生机制。
【实验原理】采用肾毒物重金属氯化汞溶液造成家兔急性肾小管坏死,复制急性肾功能不全的动物模型,通过观察动物的尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化以及肾脏的形态改变,学习急性肾衰时内环境的变化。
1 材料家兔;分光光度计,光学显微镜,离心机,恒温水浴箱;1%氯化汞溶液,氨基甲酸乙酯溶液,生理盐水,酚红,NaOH,醋酸,碱性苦味酸,肌酐标准应用液,葡萄糖;兔台,手术器械,1ml和5ml注射器,试管,滴管,漏斗,吸管,试管夹,酒精灯,试管架,颈动脉插管。
2 方法2.1 急性肾功能不全模型复制(已完成):取家兔两组,于实验前24小时称重后,一组为正常对照组,一组为中毒实验组。
实验兔皮下或肌肉注射1%氯化汞(按0.8~1.0ml/kg),造成急性肾功能不全模型;对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水,作为对照。
2.2麻醉固定:用200g/L的氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉,将家兔仰卧位固定于固定架上。
2.3 心脏采血:先用手摸到第3、4肋间,心脏活动最为活跃处,垂直进针,有落空感,缓慢抽取血液约2ml于干燥试管中,作血肌酐检查。
2.4 采集尿液:下腹部剪毛,从耻骨联合向上沿中线作约4cmd切口,沿腹白线打开腹腔,暴露膀胱,用注射器抽取膀胱内尿液2ml于干燥试管中,作尿肌酐、尿常规检查。
2.5 输尿管插管:在膀胱底部仔细分离两侧输尿管。
用出线结扎近膀胱处的两侧输尿管,以阻断尿流,结扎固定。
将两侧导尿管外端用线扎在一起,用于收集尿液。
手术完毕后,用温热的生理盐水纱布覆盖腹部的创伤。
2.6 实验观察2.6.1血清和尿肌酐含量测定:将各组装有血液的试管放入离心机内,静置10min后,3000r/min离心15min。
一、实验目的本次实验旨在通过模拟内科肾衰竭的动物模型,探讨肾功能不全的病理生理机制,了解肾功能不全的临床表现、诊断方法及治疗方法,为临床诊断和治疗肾衰竭提供理论依据。
二、实验方法1. 实验动物选用健康成年家兔6只,体重2.5kg左右,随机分为实验组和对照组,每组3只。
2. 实验材料氯化汞、生理盐水、葡萄糖、氯化钠、肝素、试管、离心机、显微镜、离心管、移液器、肾小球滤过率(GFR)测定试剂盒、尿素氮(BUN)测定试剂盒、血肌酐(Scr)测定试剂盒等。
3. 实验步骤(1)实验组:将氯化汞溶液(1mg/mL)按0.1mL/kg体重经腹腔注射,造成急性肾功能不全动物模型。
(2)对照组:给予生理盐水按相同剂量和途径注射。
(3)实验动物注射后,分别于注射后0.5小时、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、120小时进行以下检测:① 血常规:包括红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC)等。
② 尿常规:包括尿量、尿比重、尿蛋白、尿糖等。
③ 肾功能指标:包括GFR、BUN、Scr等。
④ 肾脏形态学观察:取实验动物肾脏,进行HE染色,观察肾脏病理变化。
4. 数据处理采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析,实验数据以均数±标准差(±s)表示,组间比较采用t检验。
三、实验结果1. 血常规实验组动物注射氯化汞后,RBC、Hb、WBC均无明显变化。
2. 尿常规实验组动物注射氯化汞后,尿量逐渐减少,尿比重升高,尿蛋白、尿糖呈阳性。
3. 肾功能指标实验组动物注射氯化汞后,GFR、BUN、Scr均明显升高,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。
4. 肾脏形态学观察实验组动物肾脏HE染色结果显示,肾脏出现明显的肾小球病变,包括肾小球毛细血管扩张、红细胞外渗、肾小球囊壁增厚等。
四、讨论1. 急性肾功能不全的病理生理机制急性肾功能不全是指各种原因导致的肾脏功能急剧下降,导致机体内环境紊乱。
超声造影观察兔急性肾衰竭前后肾皮、髓质血流灌注变化蒋智;黄晓玲;杨红;张勇;张文芳【摘要】目的探讨超声造影(CEUS)在检测兔急性肾衰竭前后肾皮、髓质血流灌注变化中的应用.方法于家兔后腿肌注50%甘油(12~15 ml/kg),建立急性肾衰竭动物模型,分别于造模前、造模后1天行肾脏灰阶CEUS检查,并对造影的时间-强度曲线(TIC)进行分析,参数包括造影剂到达皮、髓质的时间(AT)、达峰时间(TTP)、峰值强度变化(A)、曲线下面积(AUC)及曲线上升支斜率(β).结果造模前肾皮质A [(17.36±13.73)dB]和β [(5.38±2.08)dB/s]值均明显高于造模后A[(6.59±4.25)dB]和β [(1.58±1.41)dB/s]值(P<0.05).造模前肾皮质TTP [(2.46±1.76)s]和AUC [(329.31±171.70)dBs]值均明显低于造模后TTP[(5.93±4.80)s]和AUC [(722.28±354.14)dBs]值(P<0.05).肾皮质AT,肾髓质AT、A、TTP、AUC及β,血肌酐、尿素氮在兔肾衰竭前、后差异均无统计学意义.结论 CEUS与血肌酐、尿素氮相比可更早地反映急性肾衰竭后肾皮质血流灌注的改变.【期刊名称】《中国介入影像与治疗学》【年(卷),期】2010(007)001【总页数】4页(P54-57)【关键词】超声检查;造影剂;兔;肾衰竭;急性;血液灌注【作者】蒋智;黄晓玲;杨红;张勇;张文芳【作者单位】重庆医科大学附属第一医院超声科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院超声科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院超声科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院超声科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院超声科,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R445.1;R-332肾脏的血液供应很丰富,相当于心输出量的1/5~1/4,其中约94%供应肾皮质层,约5%供应外髓,其余不到1%供应内髓。
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测姓名温正煌学号 201912200904011 专业临床医学班级本部 4 班实验目的1. 用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2. 观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化,从而探讨致病因素及急性肾功能不全的可能发病机制。
实验材料和方法实验仪器:分光光度计,离心机,恒温水浴锅,哺乳动物手术器械,注射器,试管架,试管,试管夹,微量移液器,量筒实验药品和试剂:20%氨基甲酰乙酯, 0. 6%酚红溶液, 20%葡萄糖溶液, 10%NaOH,12. 5%NaOH 溶液, 50%乙酸溶液, 1%氯化汞,碱性你苦味酸,生理盐水,肌酐标准应用液,蒸馏水实验动物家兔实验步骤 1.1 急性肾功能不全模型复制:于实验前 24h,取两只家兔,称重,一只作为实验兔,按0. 8~1. 0ml/kg 体重剂量皮下或肌肉注射 10g/L 氯化汞造成急性肾功能不全备用,另一只皮下注射或肌肉注射等量的生理盐水作为对照兔。
1. 2 麻醉固定:用 200g/L 氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 体重剂量注射耳缘静脉,缓慢注射。
1 / 10待兔麻醉后将其仰卧,先后固定四肢及兔头。
1. 3 心脏采血:剪去家兔胸前区部位的毛,在第 3~4 肋间靠近胸骨处,用左手食指摸到心跳最明显处,右手持注射器垂直刺入心脏,当针穿刺心脏时,血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器,取血 3ml,推入干燥试管,静置。
1. 4 膀胱插管术:从耻骨联合向上沿中线作约 3~4 厘米的切口,沿腹白线打开腹腔,将膀胱轻拉至腹壁外,先辨认清膀胱和输尿管的解剖部位,先用注射器取尿液 2ml 于试管中,然后在输尿管下方穿线结扎尿道,再用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分),选择血管较少处,切一纵行小口,插入插管后结扎,将膀胱插管平放于耻骨处,引流管自然下垂,管口低于膀胱水平,排空膀胱,术毕,用温热生理盐水纱布覆盖腹部切口。
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2. 观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化,从而探讨致病因素及急性肾功能不全的可能发病机制。
实验材料和方法实验仪器:分光光度计,离心机,恒温水浴锅,哺乳动物手术器械,注射器,试管架,试管,试管夹,微量移液器,量筒实验药品和试剂:20%氨基甲酰乙酯, 0. 6%酚红溶液, 20%葡萄糖溶液, 10%NaOH,12. 5%NaOH 溶液, 50%乙酸溶液, 1%氯化汞,碱性你苦味酸,生理盐水,肌酐标准应用液,蒸馏水实验动物家兔实验步骤 1.1 急性肾功能不全模型复制:于实验前 24h,取两只家兔,称重,一只作为实验兔,按0. 8~1. 0ml/kg 体重剂量皮下或肌肉注射 10g/L 氯化汞造成急性肾功能不全备用,另一只皮下注射或肌肉注射等量的生理盐水作为对照兔。
1. 2 麻醉固定:用 200g/L 氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 体重剂量注射耳缘静脉,缓慢注射。
1 / 10待兔麻醉后将其仰卧,先后固定四肢及兔头。
1. 3 心脏采血:剪去家兔胸前区部位的毛,在第 3~4 肋间靠近胸骨处,用左手食指摸到心跳最明显处,右手持注射器垂直刺入心脏,当针穿刺心脏时,血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器,取血 3ml,推入干燥试管,静置。
1. 4 膀胱插管术:从耻骨联合向上沿中线作约 3~4 厘米的切口,沿腹白线打开腹腔,将膀胱轻拉至腹壁外,先辨认清膀胱和输尿管的解剖部位,先用注射器取尿液 2ml 于试管中,然后在输尿管下方穿线结扎尿道,再用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分),选择血管较少处,切一纵行小口,插入插管后结扎,将膀胱插管平放于耻骨处,引流管自然下垂,管口低于膀胱水平,排空膀胱,术毕,用温热生理盐水纱布覆盖腹部切口。
然后准备小烧杯,收集尿液。
1. 5 酚红排泄试验:按 1ml/kg 耳缘静脉注射 0. 6%酚红溶液, 开始计时,再按30ml/kg 耳缘静脉缓慢注射 20%葡萄糖溶液。
从注射酚红溶液起收集 15 分钟(对照组), 30 分钟(模型组)尿液。
1. 6 生化检测 1. 6. 1 测酚红排泄率 a. 收集注射酚红后的全部尿液移入 500ml 量筒内,加入 10%NaOH10ml,使之显色,---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------再加入自来水至 500ml 摇匀。
b. 从量筒中吸出尿液置于试管中,与标准管比色管进行比较,即为 15min、 30min 酚红排泄率。
1. 6. 2 测血肌酐将静置后心脏采血的血用离心机 2019r/min 离心 5 分钟,小心吸取血清置于另一干燥试管中,测血肌酐用。
取硬质试管 3 支编号,分别为空白管、标准管及测定管。
按表 1 加样,混匀,37℃水浴 30min,用分光光度计以波长510nm,空白调零,读 OD 值。
然后各管液体倒回试管,加 50%乙酸溶液两滴,静置 6min 后,再测 OD 值。
按公式 Cr(mg%)=(OD 测-OD测) /(OD 标-OD标) 0. 01/0. 2100(正常值=0. 7~0. 8mg%)表 1 血清肌酐测定单位/ml 空白管标准管测定管肌酐标准应用液/(0. 05mg/ml) 0. 2 血清0. 2 蒸馏水 0. 2 碱性苦味酸 2. 0 2. 0 2. 0 1. 6. 3 测尿肌酐 a. 按表 2 中步骤操作 b. 混匀,放 10min 后加蒸馏水6. 0ml,摇匀,用分光光度计以波长 530nm,空白调零,读取 OD 值,按公式计算尿肌酐值[Cr]p(mg%) =OD 测/OD 标0. 05mg100ml/0. 1ml 表 2 尿肌酐测定单位/ml 空白管标准管测定管尿液(原尿或 1: 50 稀释) 0. 1 尿肌酐标准应用液 0. 1 蒸馏水 0. 1 碱性苦味酸 2. 0 2. 0 2. 0 12. 5%NaOH 溶液 0. 5 0. 5 0. 5 1. 6. 4 内生肌酐清除率内生肌酐清除率=尿中肌酐3 / 10含量/血中肌酐含量尿量(ml/min) 1. 7 肾形态学观察:于耳缘静脉注射 10ml 空气处死家兔,解剖取出肾脏,沉重,计算肾脏与体重之比(即肾系数),并观察肾外形、质地,包膜,最大径纵向剖开肾脏,观察肾切面包膜、肾实质色泽、皮髓质结构改变。
实验结果:家兔的血肌酐、尿肌酐数据表管号对照组模型组血肌酐尿肌酐血肌酐尿肌酐加乙酸前加乙酸后加乙酸前加乙酸后标准管 0. 423 0. 052 0. 461 0. 051 0. 016 0. 181 测定管 0. 056 0. 049 0. 157 0. 150 0. 040 0. 086 对照组和模型组家兔各项生化指标血清肌酐[Cr]p(mg%)尿肌酐[Cr]u(mg%)尿肌酐/血肌酐酚红排泄率(%)肾比重(g/kg) 内生肌酐清除率对照组模型组 9. 4 15. 7 7. 85 4. 3 0. 83 0. 27 45 5 8. 79 7. 33 0. 0835 0. 0054 不同浓度标准比色液分光光度值排泄率(%) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 OD 值 0. 01 0. 034 0. 065 0. 1130. 1340. 1640. 1780. 272 0. 284 0. 312 结果说明:与正常组的家兔对比,急性肾功能不全的家兔血清肌酐升高,尿肌酐明显降低,每分钟的尿量减少,内生肌酐清除率明显下降,酚红排泄率下降,肾系数降低(由于实验中结扎尿道时不慎将输尿管结扎,造成尿路梗阻,肾脏积水,以致对照组肾系数大于模型组)。
正常肾脏颜色为红褐色,切面色泽鲜艳,皮髓质分界清晰。
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 模型组的家兔肾脏重量增加,肾脏颜色苍白,表面肿胀,切面为苍白色,皮髓质分界不清,偶有淤血。
实验讨论:1. 氯化汞是一类具有较强毒性的重金属盐,溶于水,其中的汞离子可使含巯基的酶丧失活性,失去功能;还能与酶中的氨基、二巯基、羧基、羟基以及细胞内的磷酰基结合,引起相应的损害。
家兔皮下或肌肉注射 1%氯化汞,可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。
急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种,前者多见。
少尿型一般表现少尿甚至无尿、等渗尿。
血浆肌酐进行性升高,肌酐从尿中排出障碍,尿肌酐/血肌酐20,与功能性肾衰时40有明显区别. 2. 氯化汞引起家兔急性肾功能不全的机制:(1)管内的 NaCl 增加,刺激致密斑使肾素分泌增加,肾素-血管紧张素系统激活,血管紧张素Ⅱ 增加,从而使入球小动脉收缩,肾小球毛细血管血压下降,肾小球有效滤过压下降,肾小球滤过率下降,导致少尿。
(2)肾小管阻塞:当 HgCl2 引起急性肾小管上皮细胞坏死时,管型、细胞碎片或细胞肿胀等阻塞肾小管,直接引起少尿;另一方面,近端肾小管阻塞,肾小囊内压升高,有效滤过压下降,肾小球滤过率降低,5 / 10尿量减少。
(3)原尿回漏和肾间质水肿:肾小管上皮细胞受损,基膜断裂,原尿到达肾小管时便回漏到肾间质,而后进入肾血管,直接使尿量减少。
肾间质水肿和间质压增高,一方面使有效滤过压下降,导致肾小球滤过率降低,尿量减少;另一方面,压迫肾血管,妨碍尿液流入肾小管,压迫肾周围毛细血管,导致肾缺血,进一步引起少尿。
3. 急性肾功能衰竭时的功能代谢变化:(本实验中毒家兔处于少尿期)(1)尿变化:①少尿或无尿;②低比重尿;③尿钠高;④血尿、蛋白尿、管型尿。
(2)水中毒:ARF 时,因少尿、分解代谢所致内生水增多、摄入水过多等原因,导致体内水潴留、稀释性低钠血症和细胞水肿。
严重时可出现心功能不全、肺水肿和脑水肿。
(3)高钾血症:①尿量减少使钾随尿排出减少;②组织损伤和分解代谢增强,使钾大量释放到细胞外液;③酸中毒时,细胞内钾离子外溢;④低钠血症,使远端小管的钾钠交换减少。
(4)代谢性酸中毒:①GFR 降低,使酸性代谢产物在体内蓄积;②肾小管分泌 H+和 NH3 能力降低,使 NaHCO3 重吸收减少;③分解代谢增强,固---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 定酸产生增多。
(5)氮质血症:血中尿素、肌酐、尿酸等非蛋白氮含量显著增高,称氮质血症,其发生主要是由于肾脏排泄功能障碍和体内蛋白质分解增加所致,少尿期,氮质血症进行性加重,严重时可出现尿毒症。
4. 内生肌酐清除率(80~120ml/min)测定的临床意义:肌酐是肌酸代谢的最终产物,体内的肌酸大部分与磷酸结合生成磷酸肌酸,磷酸肌酸与能量代谢有关。
在体外肌酐与肌酸可以互变,在酸性溶液中,肌酸及易脱水而变成肌酐,在碱性溶液中,肌酐则可变回肌酸。
但是,在体内肌酸脱水生成肌酐是一种不可逆反应。
(1)判断肾小球损害的敏感指标:多数急性肾小球肾炎内生肌酐清除率低到正常值的 80%以下,但血清尿素氮、肌酐测定仍在正常范围,故是较早的反映肾小球滤过功能的敏感指标。
(2)初步估价肾脏的损害程度:轻度损害 Ccr 在 70~51ml/min;中度损害在 50~30ml/min;小于 30ml/min 为重度损害;慢性肾功能衰竭病人若清除率在 20~11ml/min 为早期肾功能衰竭; 10~6ml/min 为晚期肾功能衰竭;小于 5ml/min 为终末期肾功能衰竭。
(3)指导治疗:7 / 10内生肌酐清除率为 30~40ml/min,应限制蛋白质摄入;小于30ml/min 噻嗪类利尿剂治疗常无效;小于 10ml/min 应结合临床进行透析治疗,对袢利尿剂(如速尿、利尿酸钠)的反应也已极差。