微生实验报告 2012.10.10 实验一 细菌的简单染色和革兰氏染色

实验二：细菌的简单染色和革兰染色一、实验目的1.掌握细菌涂片的制备方法。

2.掌握细菌简单染色和革兰染色法的原理及操作步骤，识别细菌的革兰染色结果。

3.巩固显微镜油镜的使用方法。

4.学习无菌操作技术。

二、实验原理1、染色原理：细菌生长于酸性、中性和碱性溶液时常带负电荷，所以通常采用带正电荷的碱性染料（如美蓝、甲紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。

当细菌分解糖类产酸时，细菌所带正电荷增加易被带负电的酸性染料（如伊红、酸性复红或刚果红）着色。

2、革兰染色法原理：革兰染色法可根据细菌细胞壁结构和成分的不同，将其分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。

革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色；而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄，脂肪含量高，经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态，细胞壁孔径大，不能阻止溶剂透入，因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。

另外，革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别，也有物理结构不同的结果。

如酵母菌细胞壁的成份完全与细菌不同，但具有革兰染色阳性反应。

三、实验仪器，材料和用具1、仪器及用具：显微镜、酒精灯、火柴、接种环、载玻片、盖玻片、镊子、擦镜纸、镜油、无菌牙签2、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌、牙垢、未知菌S1和S33、试剂：结晶紫染液、革氏碘液、洗脱液（95%乙醇溶液）、番红染液四、实验步骤（1）简单染色1、载玻片的处理：用纱布将取出的载玻片擦干，把要涂菌的部位在火焰上烤一下，冷却待用。

2、涂片：左手持菌液试管，右手持接种环在火焰上烧灼灭菌，待接种环冷却后在火焰旁从试管中取一环菌液，在洁净无脂的载玻片上涂一直径约2mm的均匀薄膜。

3、干燥：涂片后待其自然干燥。

4、固定：将以干燥好的涂片标本朝上，在酒精灯火焰上通过2~3次，要求载玻片温度不能超过60度，以手背触载片不烫为宜。

5、染色：滴加一滴结晶紫染液，染色1min。

细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告实验三细菌的简单染色和革兰氏染色实验三细菌的简单染色和革兰氏染色一、目的与要求1、掌握细菌涂片标本的制备2、掌握革兰氏染色法的步骤和关键点3、识别细菌革兰氏染色结果二、实验原理：细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。

为什么要对细菌染色？细菌的细胞小而透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。

用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。

简单染色法可用以观察微生物的形状、大小及细胞排列状态，是微生物技术中应用广泛，操作简便的染色法。

革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G?)和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌学上最常用的鉴别性染色法。

其原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。

革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞壁内使细胞呈蓝紫色，而革兰氏阴性菌肽聚糖层薄，网状结构交联少，且类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，再经番红复染后细胞呈红色。

三、实验器材1、菌种牛肉膏琼脂斜面28℃培养24h的大肠杆菌(Escherichia coli)斜面菌种，牛肉膏琼脂斜面28℃培养16h的枯草杆菌(Bacillus subtilis)斜面菌种；2、仪器显微镜；3、材料载玻片，香柏油，二甲苯，擦镜纸，吸水纸，染色缸等。

4、染料草酸铵结晶紫染色液，路哥氏(Lugol)碘液，95%乙醇，0.5%番红染色液；细菌的简单染色步骤：细菌的革兰氏染色步骤：涂片,干燥,固定,结晶紫染色,水洗,碘液媒染,水洗,乙醇脱色,水洗,番红复染,水洗,干燥,镜检.五、实验关键步骤和注意点：1、玻片要洁净无油，否则菌液涂不开。

细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌是微生物中最常见的一类生物，它们广泛存在于自然界的各个角落，包括土壤、水体、空气等。

为了更好地了解细菌的形态和结构，科学家们开展了许多实验，其中包括细菌的简单染色和革兰氏染色。

一、细菌的简单染色实验细菌的简单染色是一种常用的染色方法，通过给细菌染色，可以使其在显微镜下更加清晰可见。

这种染色方法主要使用了一种叫做甲基蓝的染料。

在实验中，首先需要制备好细菌的涂片。

将一根无菌的钢丝棒蘸取一小滴细菌悬液，然后将其均匀地涂抹在玻璃片上。

待涂片干燥后，将其固定在火焰上加热的玻璃柱上，以使细菌附着在玻璃片上。

接下来，将制备好的涂片放入染色盒中，加入适量的甲基蓝染料，浸泡片刻。

然后，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，直至水洗液不再有颜色流出。

最后，用纸巾轻轻吸干涂片上的水分，将其放入显微镜下观察。

在显微镜下观察，我们可以清楚地看到细菌的形态和结构。

不同种类的细菌可能会呈现出不同的形状，例如球状、杆状、螺旋状等。

通过简单染色，我们可以更好地观察和研究细菌的特征。

二、革兰氏染色实验革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。

这种染色方法主要使用了紫晶染料和碘酒。

在实验中，首先需要制备好细菌的涂片，方法与简单染色相同。

然后，将涂片放入染色盒中，加入适量的紫晶染料，浸泡片刻。

接着，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，直至水洗液不再有颜色流出。

接下来，将碘酒滴在涂片上，使其浸润全片，然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。

随后，滴入乙醇或酒精醛溶液，使其浸润全片，然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。

最后，滴入蓝色染料，浸泡片刻后用蒸馏水冲洗涂片。

在显微镜下观察，我们可以看到细菌的染色效果。

革兰氏阳性菌会呈现紫色或蓝色，而革兰氏阴性菌则呈现红色或粉色。

这是因为革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胆固醇，可以吸附紫晶染料和碘酒，而革兰氏阴性菌的细胞壁则较薄，无法吸附这些染料。

微生物的革兰氏染色实验报告
摘要：
本实验旨在通过革兰氏染色方法来区分微生物的细胞壁类型，
进一步了解微生物的结构与分类。

首先，通过培养革兰氏阳性菌和
革兰氏阴性菌，获得纯净的微生物样本。

然后，按照革兰氏染色的
步骤进行染色，观察并比较两种类型的细菌在显微镜下的颜色和形
态特征。

实验结果显示，革兰氏阳性菌显示出紫色到紫蓝色，而革
兰氏阴性菌则呈现红色到粉色。

实验表明革兰氏染色是一种简单有
效的方法，可用于初步鉴定微生物的革兰氏阴性或阳性特征，对微
生物的分类和鉴定具有重要意义。

引言：
微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌和病毒等。

通过
研究微生物可以深入了解它们的结构、生长特性以及与人类或环境
的相互作用。

微生物的分类与鉴定是微生物学研究的重要内容之一，而革兰氏染色则是微生物分类与鉴定中常用的方法之一。

革兰氏染色是以丹宁紫和碘为染料，通过染色剂与细菌细胞壁的反应来区分细菌的细胞壁类型。

革兰氏阳性菌的细胞壁由多层厚的胞外网状结构组成，可以保留紫色的染料，形成紫色。

而革兰氏阴性菌的细胞壁相对较薄，不能保留紫色的染料，在洗净后体现为红色。

实验方法：
1. 准备革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌培养物。

2. 从培养物中取一小片菌落，加入一滴蒸馏水，用炉架加热一段时间，接种于两片玻璃片上。

3. 将两片玻璃片依次在蒸馏水、丹高威液、碘酒、乙醇和伊红中浸泡。

4. 用水洗净，倒置晾干。

5. 在显微镜下观察细菌的颜色和形态特征。

实验结果：。

细菌的简单染色和革兰染色实验三细菌的简单染色和革兰染色一．实验目的1．学习并熟练局部无菌操作2. 学习细菌涂片的制法，掌握细菌简单染色和革兰氏染色的方法3. 进一步熟悉显微镜的使用。

二．实验原理细菌生长时常带负电，所以常用带正电的碱性染料染色。

简单染色就是用一种染料染色的方法。

革兰氏染色可把细菌根据细胞壁成分和结构分为阳性和阴性，阳性菌细胞壁中脂类物质多，染色为紫色；阴性菌细胞壁中脂类物质少，染色为红色。

三．实验材料、仪器与试剂1.菌种：金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，大肠杆菌、未知菌，酵母。

2.仪器用品：显微镜、载玻片，盖玻片，擦镜纸，接种环，酒精灯，火柴，镊子，擦镜液，吸水纸，牙签3.试剂：简单染液：草酸铵甲紫染液，蕃红染液革兰氏染液：1) 草酸铵甲紫染液；2) 革氏碘液；3) 脱色液；4) 蕃红染液实验前准备（助教完成）将菌种培育24h。

四．实验步骤（一）简单染色1.取载玻片用纱布擦干，在涂菌面反面画直径2mm左右的小圈，把涂菌部位在火焰上烤一下，除去油脂。

2.涂片：左手持菌液试管，右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从EP管中沾取菌液一滴，在洁净无脂的载玻片上涂涂膜。

取菌过程要在酒精灯附近的无菌环境中进行。

3.晾干：让涂片自然晾干。

4.固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。

5.染色：将固定过的涂片放吸水纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。

6.水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液7.镜检。

（二）革兰染色。

1.制片：取菌液制成涂片：干燥，固定。

2.初染：滴加1滴结晶紫色染液，1min，水洗。

3.媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。

4.脱色：吸去残留水，滴加脱色液至流出液无紫色，立即水洗。

5.复染：滴加蕃红复染3min，水洗。

6.镜检：用吸水纸吸干，盖上盖玻片，从低倍镜到油镜依次观察。

注意细菌形态、大小、排列、颜色。

7.拍照。

（三）选做实验往干净的载波片上滴加半滴水，用无菌牙签取一点牙垢，涂抹在水滴上，制成涂片，革兰染色。

细菌的简单染色实验报告细菌的简单染色实验报告细菌是一类微小的生物体，常常存在于我们周围的环境中。

为了更好地研究和了解细菌的结构和特性，科学家们发展了各种实验方法。

其中，染色实验是一种常用的技术，可以通过染色剂使细菌在显微镜下更加清晰可见。

本文将介绍一种简单的染色实验方法，并分享实验结果。

实验目的：通过染色实验，观察并分析细菌的形态、结构和数量。

实验材料：1. 细菌培养物：我们选择了一种常见的大肠杆菌作为实验对象。

2. 染色剂：我们使用了靛洁液作为染色剂。

实验步骤：1. 准备培养基：将适量的培养基倒入培养皿中，确保培养基的均匀分布。

2. 接种细菌：用无菌的匀菌棒，从细菌培养物中取出一小部分，均匀地划过培养基表面。

3. 培养：将接种好的培养皿放入恒温培养箱中，在适当的温度和湿度条件下培养细菌，一般为37摄氏度。

4. 准备染色液：将适量的靛洁液加入一定体积的蒸馏水中，混合均匀。

5. 染色：将培养好的细菌样本取出，滴加染色液，静置片刻，然后用酒精洗去多余的染色液。

6. 水洗：用蒸馏水轻轻冲洗细菌样本，去除残留的染色剂。

7. 干燥：将洗净的细菌样本晾干，避免在显微镜下观察时出现水珠。

实验结果：在显微镜下观察，我们可以看到细菌样本呈现出不同的形态和结构。

大肠杆菌是一种革兰氏阴性菌，染色后呈现出粉红色或红色的颜色。

通过放大镜头，我们可以看到大肠杆菌呈现出长条状的形态，有些细菌还具有鞭毛或纤毛结构。

此外，我们还观察到细菌的数量较多，呈现出集群或链状排列的特点。

讨论与分析：通过染色实验，我们可以更加清晰地观察和研究细菌的形态和结构。

大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，对人类健康具有重要意义。

通过染色实验，我们可以更好地了解大肠杆菌的特征和数量，为进一步研究其生物学功能提供基础数据。

然而，需要注意的是，染色实验只是细菌研究的初步手段之一。

在实际研究中，还需要结合其他技术和方法，如电镜观察、分子生物学技术等，来进一步深入了解细菌的结构和功能。

细菌的简单染色与革兰氏染色实验报告(共4篇)细菌的简单染色和革兰氏染色实验细菌的简单染色和革兰氏染色实验实验目的1. 学习微生物涂片，染色的基本技术，掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术。

、2. 巩固显微镜的使用方法。

基本原理1. 简单染色法:用单一染料对细菌进行染色的方法。

此法操作简单，适用于一般形态的观察。

在中性，碱性或酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以用碱性染料进行染色。

碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而是细菌着色。

带正电的染料离子可使细菌细胞染成蓝色。

通常的碱性染料除了美蓝外，还有结晶紫，碱性复红，番红等。

细菌体积较小，较透明，如未经染色常不易识别，而经染色后与背景形成鲜明的对比，是易于在显微镜下观察。

2. 革兰氏染色法:将所有的细菌分成革兰氏阳性菌G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌上最常用的鉴别染色法。

该染色法所以将细菌分为G+和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同决定的。

G-菌的细胞壁中含有较多易被乙酸溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄，交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使染色的结晶紫和碘的复合物易于渗透，结果细菌被脱色，在经复红染色后就成了红色。

G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时颜色。

革兰氏染色需要四种不同的溶液，碱性染料初染液，煤染剂，脱色剂和复染液。

碱性染料初染液的作用像在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫。

媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或付着力，即已某种方式帮助染料固定在细胞上，是不易脱落，碘是常用的媒染剂。

脱色剂是被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95%的酒精。

复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染剂，复染的目的是使被脱落的细胞染上不同于初染液的颜色，从而将细胞区分成G+和G-两大类群，常用的染色液是复红。

普通光学显微镜的使用及简单染色、革兰氏染色郑小煜201100140069生命科学学院生科3班同组者:赵莉、高瑞、刘梦迪2012年10月10日一、实验目的和要求1、学习显微镜的使用方法。

微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌单染色。

2、学习3、初步认识细菌的显微形态特征。

4、学习并掌握细菌革兰氏染色，了解革兰氏染色在细菌分类鉴定中的重要性。

二、实验原理1、细菌的细胞小而透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对他们进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而更能清楚的观察到其形态和结构。

2、油镜:油镜的放大倍数可达100倍，焦距很短，直径很小，但所需的光照度却很大。

为了不使通过的光线有所损失，在使用油镜时须在油镜与玻片之间加入与玻璃折射率相仿的镜油(通常用香柏油)。

且油镜分辨率很高，可达0.2微米左右。

3、通常采用碱性染料进行简单染色，原因在于微生物细胞在碱性、中性及酸性溶液中通常带负电荷，而染料电离后染色部分带正电荷，很容易与细胞结合使其着色;当细胞处于碱性条件下所带正电荷增加时，可采用碱性染料染色。

4、革兰氏染色革兰氏染色法可将细菌分成革兰氏阳性(G?)和革兰氏阴性(G?)两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构和组成的差异所决定的。

首先利用草酸铵结晶紫初染，所有细菌都会着上结晶紫的蓝紫色。

然后利用卢戈氏碘液作为媒染剂处理，由于碘与结晶紫形成碘-结晶紫复合物，增强了染料在菌体中的滞留能力。

之后用95%乙醇作为脱色剂进行处理时，两种细菌的脱色效果不同。

革兰氏阳性细菌细胞壁肽聚糖含量高，壁厚且脂质含量低，肽聚糖本身并不结合染料，但其所具有的网孔结构可以滞留碘-结晶紫复合物，现在一般认为乙醇处理可以使肽聚糖网孔收缩而使碘-结晶紫复合物滞留在细胞壁，菌体保持原有的蓝紫色。

而革兰氏阴性细菌细胞壁肽聚糖含量低，交联度低，壁薄且脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，细胞壁通透性增加，原先滞留在细胞壁中的碘-结晶紫复合物容易被洗脱下来，菌体变为无色，用复染剂染色后又变为复染剂颜色。

实验一细菌的简单染色法和革兰氏染色法一、目的要求1.学习微生物涂片、染色的基本技术，并掌握革兰氏染色的方法。

2.初步认识细菌的形态特征，掌握无菌操作技术。

3.了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。

二、基本原理1. 简单染色法：用单一染料进行细菌染色，操作简便，适于菌体一般形状和细菌排列的观察。

常用碱性染料进行简单染色，这是因为：在中性、碱性或弱碱性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷（酸性染料电离时，其分子的染色部分带正电荷），因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下易于识别。

常用作简单染色的染料有：美蓝、结晶紫、碱性复红等。

2. 革兰氏染色法革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。

它是1884年由丹麦医生Gram创立的。

革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态特征而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏染色阴性细菌，用G-表示。

细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同造成的。

革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫－碘复合物被保留在细胞内而不易着色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫－碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。

革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic dye）初染液；媒染剂（mordant）；脱色剂（decolorising agent）和复染液(counterstain) 。

碱性染料的作用象在细菌的简单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫(crystal violet)。

微生实验报告姓名:王晶晖专业年级：2011级生物技术学号:040312011032实验二细菌的简单染色和革兰氏染色一、实验目的学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法的实验原理和实验操作。

二、实验原理用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。

碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。

因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色.酸性染料的离子带负电何，能与带正电荷的物质结合。

当细菌分解糖类产酸使培养基pH值下降时，细菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红、或刚果红等酸性染料着色。

中性染料是前两者的结合物，又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等。

简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法，简单染色一般难于辨别细菌细胞的构造。

革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C。

Gram所创立的。

革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。

该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的.G-菌的细胞壁中含有较多的易被乙醇溶解的类脂质,增加了细胞壁的通透性，使处染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色,再经番红复染后就成红色。

G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，草酸铵结晶紫与碘的复合物不易被脱掉，因此细菌仍保留处染时的紫色。

三、实验器材1、菌种:金色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌。

2、染色剂和试剂：草酸铵结晶紫染液,卢哥氏碘液,95%酒精，番红复染液，复红染液,吕氏美蓝染液，显微镜擦拭液(乙醚:乙醇=7：3）,香柏油.3、器材：废液缸,洗瓶，载玻片，接种环，酒精灯，擦镜纸，双层瓶，显微镜。

四、实验方法（一）简单染色1．涂片：取干净载玻片一片，在载玻片的左右各加一滴生理盐水,按无菌操作法取菌涂片，左边涂金黄色葡萄球菌，右边涂大肠杆菌，做成浓菌悬液。

实验一：环境中微生物的检测，细菌的简单染色，细菌的革兰氏染色作业题：1、为什么在培养过程中要将培养基平板倒置答：倒置的原因为1、防止培养基水汽凝结后流下到培养基上，从而冲散菌落并造成多菌落的污染串染，不利于细菌菌落的计数统计；2、同时培养基倒置后，可以有效防止外部空气进入，防止杂菌污染培养基2、为什么在实验中要留空白对照答：预留空白对照组，可以通过观察空白对照组中菌落生长情况，排除可能的因操作原因造成的无关杂菌、无关变量的污染干扰。

同时可以验证菌落生长长势不因为培养基制备的原因而产生误差。

3、比较测试培养皿和对照培养皿中的菌落数说明什么问题答：测试培养皿和对照培养皿同时进行操作，可以通过观察对照空白培养皿中的菌落数，对照排除测试培养皿中因培养基制作或培养皿自身灭菌等操作误差引起的染菌因素。

便于判定测试培养皿中哪些是来自环境中的微生物，哪些是来自于培养皿本身所携带微生物。

4、通过实验谈谈你对无菌操作的认识答：通过第一次的实验，我们已经认识到环境中的微生物是无处不在的。

在微生物实验中，只要不注意，就很有可能造成杂菌的污染而影响到正常实验。

在实验课上我们学到的是最基本的无菌操作技术，而更重要的是树立无菌操作的意识，比如在操作的时候尽量不说话、不用手去触碰非无菌区域，对菌落进行接种时应该靠近火焰，操作完后再次在火焰上方灼烧消毒等等。

5、制片时为什么要固定？固定时应该注意什么事项？答：制片时固定的意义在于防止后期在染色和冲洗玻片时细菌会随着流水冲散甚至冲走，造成制片失败。

固定时应注意不应直接将玻片放于酒精灯外焰灼烧，否则会造成细菌因迅速脱水而无法顺利固定在玻片上。

同时不能灼烧过度否则会造成细菌缩水变形。

6、在使用和清理油镜过程中应注意哪些过程？答：油镜属精密仪器，需轻拿轻放并不能将镜子反向放置。

在使用前，需对油镜用擦镜纸的光面蘸取少量松柏油擦拭油镜镜头，同时在样品玻片上样品处滴加少量松柏油。

放置好后调至油镜，先调节粗准焦螺旋待其离样本距离很近时，换用细准焦螺旋调节，待其与样本上松柏油接触形成一条油线。