实验二 革兰氏染色及真菌结构讲义教材
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实验二-细菌的革兰氏染色摘要在本实验中,我们学习了细菌的革兰氏染色方法,它是一种常用的细菌分类技术。
通过革兰氏染色,可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
在实验中,我们将细菌样本进行了革兰氏染色,并观察了染色后不同类型菌落的变化。
背景细菌的革兰氏染色是细菌学中常用的分类技术,它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
革兰氏染色的原理是利用不同类型菌壁对染色剂的染色特性。
革兰氏阳性菌具有较厚的层状菌壁,菌壁数量较多且含有高量的肽聚糖和穿孔蛋白,故在革兰氏染色中易被靛基紫染色,即为紫色。
而革兰氏阴性菌菌壁较少,含有脂质多糖结构,靛基紫容易被脱色,失去颜色,再染上对比色——碘液后,在有机溶剂乙醇中去除结晶紫染料,洗净后再用第二种常规染色溶液(抗色素溶液)染色,为粉红色。
实验方法和步骤1.将郑重筛选发酵技术及纯化分离后的细菌分别进行涂片。
2.在涂片上滴上靛基紫染剂,静置1分钟,然后用水冲洗。
3.在涂片上滴上碘液,静置1分钟,然后再次用水冲洗。
4.滴上有机溶剂乙醇将片洗去结晶紫染料,然后再滴抗色素溶液在片上静置1~2分钟。
5.用水冲洗干净,然后把涂片放到显微镜下观察即可。
结果与分析在此次实验中,我们观察到了不同类型菌落的变化。
在涂片上的细菌,经过靛基紫的染色后,革兰氏阳性菌的细胞呈现出紫色颜色,而革兰氏阴性菌的细胞颜色并没有明显变化。
在加上碘液后,革兰氏阴性菌的细胞依旧没有变化,而革兰氏阳性菌的细胞则变得更加明显,呈现更深的紫色。
在使用有机溶剂乙醇将片洗去结晶紫染料后,再加上抗色素溶液,革兰氏阳性菌的细胞会继续呈现紫色,而革兰氏阴性菌的细胞则变成粉红色。
据此可知,我们通过革兰氏染色的方法,有效地将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
此外,我们还观察到不同类型菌落的变化,这对于后续实验中判断细菌种类及其特性非常有帮助。
细菌的革兰氏染色是一种常用的细菌分类技术,在本实验中我们成功地实现了对不同细菌样本的革兰氏染色及观察。
精华资料实验二普通光学显微镜的使用及细菌的简单染色和革兰氏染色实验二普通光学显微镜的使用及细菌的简单染色和革兰氏染色普通光学显微镜的使用一、实验目的以染色玻片及活菌为例,熟练掌握显微镜油镜的使用方法。
二、显微镜油镜使用的原理1 普通光学显微镜的基本构造(1)光学部分: 接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等)。
它使检视物放大, 造成物象。
(2)机械部分: 镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件。
它起着支持、调节、固定等作用。
2 显微镜的放大倍数和分辨率(1)放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数(2)显微镜的分辨率:表示显微镜辨析物体(两端)两点之间距离的能力,可用公式表示为:D=λ/2n?sin(α/2 )式中D:物镜分辨出物体两点间的最短距离。
λ:可见光的波长(平均0.55μm)n: 物镜和被检标本间介质的折射率。
a:镜口角(即入射角)。
3 油镜使用的原理油镜,即油浸接物镜。
当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,降低了视野的照明度。
若中间的介质是一层油(其折射率与玻片的相近),则几乎不发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。
三、实验材料1 显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、盖玻片、接种环、酒精灯等。
2 细菌三种形态的玻片染色标本。
3 培养12-18h的枯草芽孢杆菌。
四、实验方法与步骤1 染色细菌玻片的油镜观查(1)用前检查:零件是否齐全,镜头是否清洁。
(2)调节光亮度。
(3)低倍镜观察:先粗调再微调至物象清晰。
(4)转入中倍、高倍观察,每一不只需调微调旋纽即可看到清晰的物象。
(5)油镜观察:高倍镜下找到清晰的物象后,旋转转换器,在标本中央滴一滴香柏油,使油镜镜头浸入香柏油中,细调至看清物象为止。
6)绘出所观察到的细菌形态图像。
((7)、换片:另换新片观察,必须从(3)步开始操作。