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平面色谱法

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仪器分析--平面色谱法

仪器分析--平面色谱法

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50-17
氧化铝吸附活性：与含水量有关，水分增加， 等级增大，活性降低。
硅胶 含水量%
0 5 15
25 38
活性 等级
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
Ⅳ Ⅴ
氧化铝
含水量% 活化温度
0 3
300－400℃
6
150－300℃
10
15
100－150℃
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国药典》2010版中许多药物采用此法。
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50-12
一、薄层色谱的固定相
吸附剂，adsorbent 1. 硅胶 2. 氧化铝 3. 聚酰胺
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50-13
1. 硅胶（SiO2·H2O，silica gel）
结构：内部— 硅氧交联结构→多孔结构 表面— 硅醇基→氢键作用→吸附活性中心
适用范围：硅胶具有微酸性，适于分析酸性或中 性物质
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50-14
基本特性：
① 易形成氢键：与极性物质或不饱和化合物。物质 极性↑，吸附能力↑，不易洗脱。
② 吸附活性次序：活泼型>束缚型>游离型 ③ 吸附活性等级：与含水量有关，含水高，活性级
数高，吸附能力弱。
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50-2
二、平面色谱法参数
1、定性参数 ① 比移值（retardation foctor）
Rf = L / L0
可用范围：0.2～0.8 最佳范围：0.3～0.5
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50-3
② 相对比移值(relative Rf )： Rr＝Rf（i）/Rf（s）＝Li /Ls

平面色谱法-su

平面色谱法-su
平面色谱法
汇报人：XX
01 单 击 添 加 目 录 项 标 题 02 平 面 色 谱 法 的 概 述 03 平 面 色 谱 法 的 技 术 发 展 04 平 面 色 谱 法 的 实 验 操 作 05 平 面 色 谱 法 的 应 用 实 例 06 平 面 色 谱 法 的 未 来 展 望
目录
01 添加章节标题
实验步骤：样 品处理、色谱 展开、显色、
测量等
实验注意事项： 避免阳光直射、 保持色谱板平 整、防止样品
污染等
实验步骤
准备实验材料：色谱板、样品、溶剂、显色剂等 制作色谱板：在色谱板上均匀涂抹样品，晾干 展开色谱：将色谱板放入溶剂中，使样品在色谱板上展开 显色：在色谱板上喷洒显色剂，使样品显现出来 观察结果：在紫外线灯下观察色谱，分析样品的组成和含量
检测生物体内的有机污染 物
在其他领域的应用
医药领域：分 离药物中的有
效成分
食品领域：检 测食品中的添 加剂和污染物
环境领域：监 测环境中的污 染物和生态变
化
化工领域：分 离化工产品中 的杂质和副产
物
06 平面色谱法的未来 展望
技术创新和改进
提高分辨率：通过改进色谱仪和检测器，提高分辨率，使分析结果更加精确。
对未来科学发展的影响
平面色谱法在药 物分析中的应用
平面色谱法在环 境监测中的应用
平面色谱法在食 品分析中的应用
平面色谱法在生 物医学研究中的 应用
THNK YOU
汇报人：XX
加快分析速度：通过优化色谱条件，提高分析速度，缩短分析时间。
扩展应用范围：通过开发新的色谱模式和检测方法，扩展平面色谱法的应用范围，使其能 够应用于更多领域。
提高自动化程度：通过引入自动化设备和软件，提高平面色谱法的自动化程度，降低操作 难度，提高分析效率。

平面色谱法

平面色谱法
2014~2015学年
3.扫描方式 直线扫描和曲折扫描。 （二）定量分析法 常用外标一点法。
m样 A样 m标 A标
2014~2015学年
第三节 纸色谱法简介
以纸做载体进行的液-液分配色谱法


固定相：纸纤维吸附的水 流动相：与水不互溶的有机溶剂（饱和正丁醇） 分离机制：同液-液分配色谱 定性参数：
L 1 Rf L0 1 K VS Vm

讨论：Rf与组分性质、流动相及溶解度有关 极性组分→易保留，Rf 小（流动相极性↑， Rf ↑） 非极性组分→易流出，Rf大（流动相极性↑，Rf ↓）
2014~2015学年
（二） 相对比移值Rr
相对比移值：是在一定条件下，被测组分的比移值与参 考物质的比移值之比。
原点到组分斑点中心的距离 L1 Rr R f（参） 原点到参考物斑点中心的距离 L2
讨论
•
R f（组）
参考物与被测组分在完全相同条件下展开，可以消除系统 误差，大大提高重现性和可靠性. 参考物可以是后加入的纯物质，也可是样品中已知组分。 相对比移值Rr与组分、参考物性质及色谱条件有关，范围 可以大于或小于1.
吸附剂裝于柱中。都是经典液相色谱法的一种。
2014~2015学年
（四）薄层色谱操作方法
操作步骤:制板、点样、展开、斑点定位 1.制板 ⑴薄层板的选择：表面光滑、平整、洁净、厚度均匀
⑵薄层板的涂布： 软板（不加粘合剂)：干,湿法铺 硬板（加粘合剂）：湿法铺板(匀浆） 要求：涂布均匀 ，厚度0.25mm ~ 0.5mm 常用硅胶： 硅胶G——自含粘和剂 硅胶H——不含粘和剂，铺板时另加入CMC-Na 硅胶G254——含荧光剂，254nm紫外光照发绿光 硅胶HF356——含荧光剂，356nm紫外光照发光

第十八章 平面色谱法-分析化学

第十八章 平面色谱法-分析化学

d
28
5、显色
xe 仪 器 分 析
第 十 八 章 经 典 液 相 色 谱 法
日光下观察有色物质的色斑 紫外灯下观察荧光或无荧光色斑 通用显色剂：碘、硫酸、荧光黄
专用显色剂：茚三酮、三氯化铁
显色方法：直接喷雾法、浸渍法
d
29
四、定性与定量分析方法
xe 仪 器 分 析
第 十 八 章 经 典 液 相 色 谱 法
一般在105℃～110℃加热30分钟。但加热 温度不可太高，否则易使硅胶失活：
O H + Si O H Si O 5000C Si Si + H2O
d
硅胶具有微酸性，适用于分离酸性和中 性物质，如有机酸、氨基酸、甾体等
18
2、氧化铝
xe 仪 器 分 析
第 十 八 章 经 典 液 相 色 谱 法
目视法：直接比较样品斑点与对照 品斑点的颜色深度或面积大小； 薄层扫描法
d
32
五、高效薄层色谱法(HPTLC)
xe 仪 器 分 析
第 十 八 章 经 典 液 相 色 谱 法
1、高效薄层板
由较小颗粒的吸附剂(或其他固定相) 用喷雾法制备而成的均匀薄层。
2、点样 要求：原点直径小；铂-铱合金点 样毛细管、专用点样器
第 十 八 章 经 典 液 相 色 谱 法
被分离物质的结构和性质 薄层板的性质，固定相的粒度， 薄层的厚度，吸附剂的活度 温度（主要对分配层析）
d
展开室内的展开剂蒸气饱和程度
7
3、分离参数
xe 仪 器 分 析
第 十 八 章 经 典 液 相 色 谱 法
分离度
2d R W1 W2 R
d
12

平面色谱法

平面色谱法
一、概述
1．定义：
TLC
将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上，形 成薄层而进行色谱分离和分析的方法。
2．分离机制
吸附薄层色谱 分配薄层色谱
空间排阻薄层色谱
胶束薄层色谱
二、吸附薄层色谱材料 （一）固定相——吸附剂
氧化铝、硅胶 聚酰胺、纤维素
1.硅胶：最常用的吸附剂，SiO2· XH2O
点样量勿超载，防止拖尾 点样勿伤及薄层表面
四、薄层色谱操作过程
5、展开
展开原理：薄板一端浸入展开剂，点样点不可接触展开剂，展开剂
借助毛细作用上升，带动样品中组分的迁移。
（1）展开装置
常为圆形或方形玻璃缸，缸上具 有磨口玻璃盖，应能密闭。
立式
卧式
四、薄层色谱操作过程
5、展开
（2）展开方式
软板只能进行近水平展开 硬板可近水平、下行、上行、径向、双向、多次展开， 上行法展开最为常用
2、平面色谱分离评价参数
分离度：两相邻斑点中心距离与两斑点平均 宽度（直径）的比值
2d R W1 W2
相临两斑点间距离越大，斑点越 集中，分离度越大，分离效率越高 当R＞1.5时，相临斑点可达到基 线分离
TLC分离度与比移值的关系
Rf =0.3 时 分离度R最大
Rf = 0.2~0.5时
疏水改性硅胶（非极性键合相）
反相色谱采用高含水溶剂，需低疏水改性硅胶
亲水改性硅胶（极性键合相）
介于极性和疏水改性吸附剂间的色谱选择性
二、吸附薄层色谱材料
（二）载板
具一定机械强度，化学惰性，耐一定温度、表面 平整、厚度均匀、价格便宜
玻板： 5cm×10cm、10cm×20cm、20cm×20cm 光滑、平整、洗净后不附水珠、干燥

《仪器分析》——平面色谱法

《仪器分析》——平面色谱法

10
（三）高效薄层法（high performance thin layer chromatography；HPTLC）
• 在现代色谱理论指导下，以经典薄层色谱法为基 础发展起来的一种薄层色谱技术。
• 特点
分离效率高 分析速度快 检测灵敏度高等
高效薄层色谱法与经典薄层色谱法比较见表19-3
11
二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂
(2)吸附剂
不活泼
活泼
B’ B
非极性
A’ A
极性
(3)展开剂 C
C’
非极性
极性
(1)被分离物质
18
三、薄层色谱操作方法
（一）薄层板的制板 选择 5cm 20cm 、10cm 20cm、 20cm 20cm
涂布 活化
不加粘合剂 加粘合剂如5~15%石膏 或 0.25~0.75%CMC-Na
涂布
晾干
0.2～0.3mm
光物质；在254nm波长紫外光下呈强烈黄绿色荧光 背景
16
（二）展开剂
展开剂的选择
根据被分离物质的极性、吸附剂的活度和展开 剂的极性三者的相对关系进行选择
先用单一溶剂展开，然后根据分离效果进行调 整，经常使用混合展开剂
分离酸碱组分时，展开中加入少量酸、碱
常用混合展开剂 表19-3
17
化合物极性、吸附剂活度和展开剂极性间的 关系
2. 相对比移值（Rr）
R =R /R =L /L
r
f(i)
f(s)
is
定性参数
纯物质加入试样中
同样条件下测定
或试样中某已知组分
i
s
Li Ls
s＋i
在一定程度上消除系统误差

仪器分析—平面色谱法


~30
~12
点样数
10
18,36
展开距离/cm
10~15
3~6
展开时间/min
30~200
3~20
最小检测量:吸收/ng 荧光/pg
1~5 50~100
0.1~0.5 5~10
薄层扫描法
用一定波长、一定强度的光束照薄层上的色 点，用仪器测量照射前后光束强度的变化， 从而求得物质含量的方法
• 双波长扫描仪是较常用的仪器 • 特点是双波长 • 反射法和投射法。常用反射法，线性扫描和
• 常用的有硅胶、氧化铝、纤维素和化学键 合相
TLC与HPTLC的区别
参数
Hale Waihona Puke TLCHPTLC板尺寸/cm
20×20
10×10
颗粒直径/μm
10~40
5,10
颗粒分布
宽
窄
点样量/μL
1～5
0.1~0.2
原点直径/mm
3~6
1~1.5
展开后斑点的直径/mm
6~15
2~5
有效塔板数
<600
<5000
有效板高/μm
平面上、同一展开条件下所测得的Rf值 • 在完全相同的条件下展开，消除了系统误差，
Rr的重现性和可比性均比Rf要好 • Rr值可以大于1，也可以小于1
相平衡参数
• R’为单位时间内一个分子在流动相中出现的 几率。
• R’也可表示组分分子在平面上的移动速度
面效参数
分离参数
• 分离数
R 2(L2 L1) W2 W1
• 保留值
平面色谱法
是组分在色谱体系中的保留行为，反映组分
与固定相作用力的大小，是色谱过程热力 学的参数，也称为定性参数。

第十八章平面色谱法五版


• 纸质的松紧适宜。
• 纸质纯，无明显的荧光斑点。
39
2. 点样方法： 同薄层色谱法 3. 展开剂：水饱和的正丁醇、正戊醇、
酚等。
40
5. 定位方法：同薄层。 但不能用硫酸
6. 定性方法：同薄层。 7. 定量方法：同薄层。
41
17
（三）展开
展开剂：由一种或多种 溶剂按一定比例组成。
•上行法：用于硬板 •多次展开：用于硬板 •径向展开：纸色谱 •下行法：纸色谱
18
注意：
•点样线不能浸入展开剂中； •展开时要恒温、恒湿度； •展开槽和薄板须用展开剂蒸气饱和后再展开。
目的：消除边缘效应
19
边缘效应： 同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比
（一）定性分析方法 定性分析的依据： 在固定的色谱条件下， 相同物质的Rf值 相同。
23
已知物对照法:样品与已知物对照品在同一薄
层上展开，比较组分与对照品的Rf值。
24
（二）定量分析
1. 洗脱测定法： 斑点定位斑点取下洗脱适当方法测定。
2. 直接测定法： •目视比较法: 比较样品斑点与对照品斑点的 颜色深度或面积大小 •薄层扫描法: 测量斑点的面积大小。
29
• 测光方式 a. 透射法： 只适用于透明薄板。 b. 反射法：
30
31
外标两点法：
m样 = a + b A样
b = (m1 - m2) / (A1- A2) a = m1 - b A1
32
七、薄层色谱法的应用
• 合成药物反应速度或反应完成程度的监控； • 药物的杂质检查； • 天然药物有效成分的分离、鉴定、含量测定； • 少量物质的制备、提纯等。
被分离物质的极性 小 大

平面色谱法全解课件


土壤污染物检测案例展示
1 2
案例一
某农田土壤中农药残留的分离与测定
采样方法
使用不锈钢钻头采集农田土壤
分离方法
3
硅胶柱色谱分离
土壤污染物检测案例展示
01
测定方法
GC-MS检测
02
结果
成功分离和测定了农田土壤中的农药残留，包括有机氯农药、有机磷农
药等
03
案例二
某工业区土壤中重金属的分离与测定
土壤污染物检测案例展示
点样、展开与显色
点样
用毛细管或点样器将样品开剂进行展开，使各组分分离 。
显色
对于需要显色的组分，可以采用显 色剂进行显色，以便观察和测量。
03
平面色谱法分离原理与影响
因素
分离原理介绍
平面色谱法是一种基于不同物质在固 定相和流动相之间分配平衡的差异， 实现物质分离的物理化学方法。
药物杂质检查案例展示
案例一
采用薄层色谱法对某中成药中的有关 物质进行检查。通过制备薄层板、点 样、展开、显色等步骤，对有关物质 进行定性鉴别和限量检查，从而对该 中成药的质量进行控制。
案例二
采用高效液相色谱法对某化学药中的 有关物质进行检查。通过色谱柱分离 、检测器检测等步骤，对有关物质进 行定性鉴别和限量检查，从而对该化 学药的质量进行控制。
原理
基于不同物质在固定相和流动相 之间的分配平衡，在流动相推动 下，不同物质在固定相上的移动 速度不同，从而实现分离。
发展历程与现状
发展历程
平面色谱法自20世纪初诞生以来， 经历了近百年的发展，逐渐成为一种 成熟的分离技术。
现状
目前，平面色谱法在多个领域得到广 泛应用，如医药、食品、环保等。随 着科技的不断进步，平面色谱法也在 不断创新和完善。

分析化学-平面色谱法

通过平面色谱法可检测水体中 的有害物质，如重金属离子、
有机污染物和农药残留。Fra bibliotek土壤污染物分析
平面色谱法可用于分析土壤中 的有害物质，如农药残留、重
金属和多环芳烃。
在其他领域的应用
生物样品分析
平面色谱法可用于分离和检测生物样品中的化合物，如氨基酸、肽类和蛋白质。
化妆品成分分析
通过平面色谱法可分析化妆品中的成分，以确保产品的安全性和有效性。
药物成分分离
平面色谱法可用于分离药物中的 不同成分，如有效成分、杂质和 降解产物。
药物质量控制
通过平面色谱法对药物进行定性、 定量分析，可确保药物的质量和 安全性。
药物代谢研究
平面色谱法可用于研究药物的代 谢过程，了解药物在体内的变化 和转化。
在食品分析中的应用
食品添加剂检测
01
平面色谱法可用于检测食品中的添加剂，如防腐剂、色素和抗
在1903年和1944年被发明。
发展历程
随着材料科学和制备技术的进步， 平面色谱法的固定相和分离介质不 断得到改进和发展，提高了分离效 果和灵敏度。
未来展望
随着分析化学和生命科学领域的需 求不断增长，平面色谱法在微型化、 自动化和智能化方面仍有很大的发 展空间。
02 平面色谱法的原理
分离原理
分配原理
自动化进样系统
开发自动化的进样装置，实现平面色谱法的连续进样和自动检测， 提高分析通量和效率。
在线样品处理与进样
将样品预处理与平面色谱法联用，简化样品前处理过程，降低人为误 差和提高分析结果的可靠性。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
快速色谱
通过优化分离介质和流动相，缩短分离时间和提高分离效率，适 用于对时间敏感的样品分析。
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Rf值越小。
固定相：烷基化学键合相 流动相：水或水-有机溶剂的混合溶剂
22
（三）高效薄层色谱法（HPLC）
参 数
板尺寸(cm) 颗粒直径(μm) 颗粒分布 点样量(μl) 原点直径(mm) 展开后斑点直径(mm) 展开距离(cm) 展开时间(min) 精密度RSD(%) 最小检测量：吸收(ng) 荧光(pg)
14
2. 分离数(SN)
在相邻两斑点分离度为1.177时，
在Rf=0和Rf=1两组分斑点之间所能容纳的色谱斑点
数
L0 SN 1 (W1/ 2 )0 (W1/ 2 )1
（W1/2）0、（W1/2）1：薄层扫描所得的Rf=0和Rf=1 的组分的半峰宽
经典薄层板的分离数为7～10，高效薄层板的分离数在 10～20范围内。
Rf为0 的组分，K与k为，表示该组分停留在原
点，完全被固定相所保留。
12
（三）面效参数
1．理论塔板数（n）：反映组分在固定相和流动相 中动力学特性的色谱技术参数。 代表色谱分离效能的指标，主要取决于色谱系 统的物理特性。 n=16（L/W）2 L：原点到斑点中心的距离 W：斑点的宽度
2．塔板高度（H）：
高、使用方便，但不能用浓硫酸作显色剂。
34
(二)点样 1.样品溶液的制备 一般选用易挥发，与展开剂极性相似的有机溶剂， 如甲醇、丙酮、乙醇等。配制样品液浓度为 0.01% ～ 0.1%。 目的：使点样后溶剂能迅速挥发，减少色斑的扩散。 2.点样工具: •手动点样：点样毛细管，微量注射器。 •自动点样：半自动点样仪或全自动点 样仪
开多个试样；
分离能力较强，分析结果直观； 试样预处理简单，对被分离组分性质没有限制； 上样量较大； 仪器简单，操作方便。
18
一、薄层色谱法的主要类型和原理
（一）吸附薄层色谱法
分离原理：将A、B两组分的混合溶液点在薄层板的 一端，在密闭的容器中用适当的溶剂展开。 吸附剂 展开剂溶解 A,B两组分 A，B移动 吸附 解吸附 新的吸附剂 展开剂 薄层板上 吸附 解吸 吸附，解吸附，再吸附 A ,B得以分离 KA＞KB, RfA＜RfB 再解吸，反复多次
线性范围：18.28 ng329.04 ng 回归方程：IF=720.146+34.942m r=0.998
中药品种的鉴定：例北柴胡与其它同属近缘植物的鉴别
可见光谱
UV366nm 荧光光谱
第一节
平面色谱法的分类和原理
一、平面色谱法的分类 1．薄层色谱法：将固定相均匀地涂布在玻璃板、塑 料板或铝箔上形成厚薄均匀的薄层，在此薄层上进 行混合组分分离的色谱法。 按分离机制分： 吸附薄层色谱法
石油醚等)，以降低极性。
可加入一定比例的酸或碱,使斑点集中。
30
练习：某物质用氯仿展开时，⑴ Rf值太小，甚至停
留在原点，该如何调整展开剂？ ⑵若Rf值太大，斑
点在前沿附近，又该如何调整展开剂？
解：
⑴Rf值太小，说明流动相极性太小，应该加大流动
相的极性。在氯仿中加入一定量的甲醇或丙酮。
⑵若Rf值太大，说明流动相极性太大，应加入一定 量的烷烃或石油醚。
如生物碱、脂溶性维生素等； 中性氧化铝(pH7.5)——分离酸性及对碱不稳定的 化合物； 酸性氧化铝(pH4.0)——酸性化合物的分离。
Hale Waihona Puke 26硅胶与氧化铝的活度与含水量的关系
硅胶含水量% 活 性 级 氧化铝含水量%
0 5 15 25 38
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
0 3 6 10 15
含水量越高，活性越弱。
度。（注意温度不可过高）
活度与含水量的关系：含水量高，级数越高，吸
附能力越弱，同一组分在此硅胶上的Rf值越大。
分离效率：与其粒度、孔径及表面积等有关。
常用硅胶
硅胶H、硅胶G、硅胶GF254、硅胶HF254、硅胶
HF254+366
25
2. 氧化铝
碱性氧化铝(pH9.0)——分离中性或碱性化合物，
6
二. 平面色谱法参数
※（一）定性参数 1．比移值(retardation factor Rf) 溶质移动距离与流动相移动距 离之比。
L0
La
Rf =La/L0
La为原点（origin）至斑 点中心的距离； L0为原点至溶剂前沿 （solvent front）的距离
Lb
7
在实际工作中，Rf值适宜范围是0.2-0.8，最佳范
（一）吸附剂
1. 硅胶：硅胶为多孔性无定形粉末
表面带有硅醇基(silanol)呈弱酸性 通过硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键而表现 其吸附性能，由于各组分的极性基团与硅醇基形成 氢键的能力不同，而各组分被分离。
应用：酸性和中性物质的分离，如有机酸、酚类、 醛类等
24
活化：加热至105~110℃左右，除去吸附水提高活
31
※三、薄层色谱操作方法
一般操作程序：
制板 点样 展开
均匀 集中 (多种方式) 预饱和
斑点定位
32
（一）薄层板的制备
1.薄层板的选择：表面光滑、平整、洁净，厚度一
致的玻璃板、塑料板或铝箔。
2.薄层的涂布：一般厚度250μm
3.薄层板的活化：涂铺的薄层板自然晾干后，在105110℃活化0.5-1h，取出，冷却至室温,存放在干
TLC
20×20 10 ~ 40 宽 1 ~ 5 3 ~ 6 6 ~ 15 10 ~ 15 30 ~ 200 ±10 1~5 50 ~ 100
HPTLC
10×10 5,10 窄 0.1~0.2 1 ~ 1.5 2 ~ 5 3~6 3 ~ 20 ±5 0.1 ~ 0.5 5 ~ 10
23
二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂
燥器中.
33
黏结剂
无机黏结剂——石膏（硫酸钙），添加石膏的吸
附剂以字母“G”表示。没有黏结剂的吸附剂以字 母“H”表示。无机黏结剂的优点是：耐高温，耐 酸碱，但涂铺薄板动作要快，否则匀浆易凝固。 薄层强度差。
有机黏结剂——羧甲基纤维素钠（CMC）、淀粉、
聚乙烯醇、高分子聚合物等。其特点是薄层强度
3.点样量
点样量一般以几微升为宜，毛细管大约2～
3cm左右。若进行薄层定量或薄层制备，可多至
几百微升。
点样斑点直径以2～4mm为宜。
溶液宜少量多次点样。
4.点样方法 吸取一定量的样液，轻轻接触于薄层的点样 线上，点样线一般距薄层底边1.5～2cm,点间距 约0.8～1.5cm,根据板的宽度而定，点样后形成 的原点面积越小越好，一般原点直径不超过2～ 4mm为宜。
薄层定量精确的关键：原点直径的一致，点样
间距的精确。
37
（三）展开 选择大小适合的展开容器，将点有样品的薄层板放
入容器内的展开剂中，浸入深度以展开剂液面距点样
基线5mm为宜，密闭，展开。一般上行展开8-15cm，
高效薄层板上行展开5-8cm。在溶剂前沿达到预定展
距后，取出薄层板，晾干，待检测。
展开方式主要有上行展开、下行展开、双向展开、
一般的极性大的组分用 极性大的展开剂，极性小 的组分用极性小的展开剂， 即“相似相溶原则” Stahl简图：极性物质— 活度低（活性级大）的吸 附剂--极性展开剂
29
混合溶剂
先用单一溶剂展开，若Rf值太小，则加入一定量极
性强的溶剂，如乙醇、丙酮等，
如果Rf值太大，则加入适量极性弱的溶剂(如环己烷、
水平展开、环形展开等。
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边缘效应:薄层展开后，位于
薄层板边缘的样品斑点比移 值较处于中间的斑点大的现 象。边缘效应会使斑点扩散 变形，从而影响样品定性结 果的判断。
预饱和是减少边缘效应的有
效办法。
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预饱和:
展开前，将薄层板臵于盛
有展开剂的色谱缸内饱和
15～30min,此时薄板不与 展开剂直接接触，当色谱 缸内展开剂蒸汽、薄层与 缸内大气达到动态平衡时， 即饱和时，再将薄层板浸 入展开剂中，称预饱和。
L0
La和Lb分别为组分i和参考物
质s在平面色谱上的移动距离。
Lb
9
重现性和可比性均比Rf值好，能消除系统误差
（参考物质与组分在完全相同的条件下展开）
Rr值可以大于1，也可以小于1。
影响Rr的因素
被测组分 色谱条件 参考物质
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（二）相平衡参数
1.分配系数（distribution coefficient；K）
分配薄层色谱法
分子排阻薄层色谱法
5
2．纸色谱法:以纸为载体，纸纤维上吸附的水为固 定相，有机溶剂为流动相，根据被分离组分在水 和有机溶剂中的溶解能力不同，在色谱纸上产生 差速迁移而得到分离的方法。分离原理属于分配 色谱。 3．薄层电泳法:是指带电荷的被分离物质在纸、醋 酸纤维素、琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶等惰性 支持介质上，以不同速度向其相反的电极方向泳 动,产生差速迁移而得到分离的方法。
围0.3-0.5 影响比移值的因素
被分离物质的结构和性质
固定相的种类和性质
展开剂的种类和性质
温度 展开剂蒸气饱和度
2．相对比移值(relative
retardation factor；Rr)
Rr = Rf
(i)/Rf (s)=La/Lb
Rf（i）和Rf（s）：组分i和参考
物质s在相同条件下的比移值。 La
3.聚酰胺
聚酰胺是由酰胺聚合而成的高分子聚合物，薄层
色谱中常用的是聚己内酰胺。
白色多孔的非晶型粉末，不溶于水和一般有机溶
剂。
与化合物质子给予体形成氢键而对该类化合物产
生吸附。
用于酚、酸、硝基、醌类等化合物的分离。