摇瓶与发酵(发酵人论坛)

摇瓶装液量对发酵的影响实验
摇瓶装液量对发酵的影响实验是研究在不同液量条件下，发酵过程的反应速率和产物得率等参数变化的实验。

这种实验可以有助于确定最佳的液量条件以优化产物得率和反应速率。

实验步骤：
1. 准备不同液量的摇瓶，并在每个摇瓶中加入固定量的发酵物；
2. 使用相同的条件下（如温度、氧气供应等），对每个摇瓶进行发酵操作，并记录反应过程中的反应速率、发酵时间和产物得率等参数；
3. 比较不同液量条件下反应速率和产物得率的变化，确定最优液量条件；
4. 通过分析实验结果，确定液体体积对反应速率和产物得率的影响机制。

需要注意的是，在实验中应控制其它影响因素的影响，例如氧气的供应、温度、菌种的产量和活性等，以确保实验结果准确可靠。

第一节：摇瓶与发酵之所以选择摇瓶作为第一节，主要原因是我对它有深厚的感情，本科时进行植物细胞培养时使用的是摇瓶，研究生课题设计多数时间也在使用摇瓶，进入企业种子培养，验证很多情况都是使用摇瓶。

虽然简单，但它的确是我们一个非常好用的工具，不仅研究过程要应用，生产过程也离不开，它的用途多种多样。

不仅用于种子制备，种子的测试，原料的测试，培养基的优化，发酵过程的优化，能够伴随整个发酵过程。

摇瓶虽然简单，但是要想得到有价值的结论，基本原则不能抛弃，细节也要掌握，毕竟细节决定成败。

首先我们讨论装量问题。

因为没有理论上的规定发酵时摇瓶的装量是多少，所以大家装得一定也不一样。

那么多少合适呢？我不知道有没有下限，但是肯定会有一个上限，总不能装满吧！因为装量越多，在一定转动的情况下，溶氧会越少，相对蒸发量就越低，出现异常的概率就会变大，而且单位发酵液分配的动力也可能会降低。

装量少也不行，因为放罐后要检测，体积总得要够各项检测用吧。

在这里我给一个提示：按照一般经验，发酵液和摇瓶的体积比例为10%-20%。

其实在这里强调了空气，其实也要考虑其他物质的混合，比如：摇床的作用也会使细胞分泌出来的成份快速在整个发酵液中混匀。

我们在摇瓶上进行研究的目的是为了未来能够在发酵罐上进行放大，那么摇瓶如何与发酵罐进行比较呢？现在比较流行计算流体力学，如果有人能够用计算流体力学模拟摇瓶和发酵罐空气，营养，动力等情况的分配，便可以优化摇瓶中培养基体积的多少，使摇瓶与发酵罐的参数更接近一些，为以后的放大提供更接近的数据。

提到装量，相信很多人做过试验进行过优化。

我自己也做过。

一开始没有仔细考虑，只是想优化一个最适的加量，能够使发酵单位最高。

开始的时候，由于没有考虑，挥发量的变化，所以最后得出装量越少发酵越好的结论。

显然与发酵罐是不相符合的，生产需要的是产量而不是发酵单位。

我们设计试验的目的不能够偏离实际。

做试验设计之前，我们一定要能够确定我们的试验目的是什么，我们需要的是一个稳定的菌种还是一个可能高产但是质量不稳定的菌种，我们是要筛选到发酵单位高还是产量高的工艺或培养基。

将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践
摇瓶是实验室中最常用的设备之一，它通常用于发酵，处理采样，液体冷冻，细胞培养等操作。

使用摇瓶可以有效地完成上述操作，但有些细节操作需要小心谨慎，以防止意外事故发生。

一般来说，摇瓶中的成果可以复杂地转移到发酵罐中。

在实际应用中，有许多不同的转移策略，以防止污染和损坏发酵罐内的物质。

本文将重点介绍如何将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践。

首先，在转移摇瓶成果到发酵罐之前，应该对摇瓶和发酵罐进行清洗，以确保它们不会受到污染。

在清洗时，应使用专门的清洗剂，并以正确的清洗步骤和正确的清洗时间进行清洗。

外，应确保发酵罐外表干燥，以避免样品与外部污染物混合。

其次，在将摇瓶成果转移到发酵罐中时，一定要注意转移的速度和量。

若过快，液体可能会受到空气中的污染，从而影响发酵的结果；若过多，发酵罐的容量可能不够，从而使样品受到污染。

此外，还需要注意转移液体的温度，以避免损坏发酵罐中的物质。

最后，在将摇瓶成果转移到发酵罐之后，应及时安装好发酵罐的盖子，以防止外部空气流入发酵罐，从而影响发酵罐内的物质。

此外，应着重关注发酵过程，及时调整发酵条件，以确保实验结果准确。

总之，将摇瓶成果转移到发酵罐是一项复杂的技术操作，在此过程中，需要注意清洗发酵罐，控制转移的速度和量，监控发酵过程以及注意发酵罐的封盖，以确保发酵成品的质量。

只有完成这些要求，才能帮助实验室获得可靠的成果。

摇瓶发酵实验的步骤
嘿，朋友们！今天咱来唠唠摇瓶发酵实验的那些事儿。

你想想啊，这摇瓶发酵就好比是一场微生物的大派对！咱就是那个派对组织者，得把一切都安排得妥妥当当的。

首先呢，咱得准备好摇瓶，这就像是给微生物们准备好的豪华房间。

摇瓶得干净、无杂质，不然微生物们可不乐意住呢！然后就是培养基啦，这可是微生物们的美食大餐呀，得精心调配，各种营养成分都不能少，就像咱做饭得有肉有菜有调料一样。

把培养基加到摇瓶里，这就相当于给房间摆上了美味佳肴。

接下来，就是接种啦！把咱精心挑选的微生物种子小心翼翼地放进去，就好像是邀请贵宾入场一样。

然后呢，把摇瓶放到摇床上，让它开始欢快地摇晃起来。

这摇床就像是微生物们的游乐场，它们在里面尽情地玩耍、生长。

在这个过程中，咱可不能掉以轻心啊！得时刻关注着微生物们的状态，看看它们是不是吃得饱饱的，玩得开开心心的。

要是发现有啥不对劲，咱可得赶紧想办法解决呀，不然这场派对可就搞砸了。

你说这微生物多神奇呀，就那么小小的一点，在咱给它们创造的环境里就能茁壮成长。

咱就像是它们的守护天使，看着它们一点点长大，心里是不是特有成就感？
有时候我就想，这微生物的世界咱人类还真得多研究研究。

它们虽然小，可作用大着呢！说不定哪天就能给咱带来大惊喜。

等发酵结束了，咱就可以收获成果啦！看看那些微生物们给咱带来了什么好东西。

这就像是打开一份神秘的礼物，充满了期待和惊喜。

总之呢，摇瓶发酵实验可有意思啦！只要咱用心去做，肯定能收获满满。

大家都来试试吧，让我们一起在微生物的世界里尽情探索！。

毕赤酵母的‎摇瓶发酵方‎法：一、摇瓶发酵方‎法:毕赤酵母摇‎瓶发酵方法‎分为两个阶‎段，1、酵母菌株生‎长阶段；2、脂肪酶诱导‎表达阶段。

1、酵母生长阶‎段。

准备试剂：1000m‎l BMGY培‎养基，1000m‎l BMMY培‎养基，10X的甲‎醇，摇瓶1L（灭菌），温控摇床，50ml离‎心管（灭菌）。

紫外分光光‎度计，石英比色皿‎。

以下所有操‎作均在超净‎台内或者无‎菌条件下完‎成。

（1）往灭好菌的‎IL摇瓶中‎加入100‎mlBMG‎Y培养基，然后加入约‎1ml 脂肪‎酶菌株（培养基：菌液=100：1），用透气膜封‎口（透气，但是细菌不‎能透过）。

置于温控摇‎床上，温度调至3‎00C，转速为25‎0-300rp‎m/min，使酵母生长‎，OD600‎=2.0-6.0，时间约为1‎5-24小时。

（2）将发酵液转‎入50ml‎离心管，1500g‎-3000g‎离心5mi‎n。

去掉上清，用BMMY‎培养基将菌‎体浓度稀释‎至OD60‎0=1.0，约有500‎ml左右。

将稀释后的‎发酵液分别‎加入到1L‎的药瓶中，每个摇瓶1‎50ml 发‎酵液（绝不能超过‎200ml‎）。

（3）将摇瓶置于‎温控摇床上‎，温度调至3‎00C，转速为25‎0-300rp‎m/min，使酵母表达‎脂肪酶，每24小时‎加入一次5‎%的甲醇，使甲醇的终‎浓度为0.5%。

连续诱导表‎达48小时‎。

（4）将发酵液进‎行1200‎0rpm/min离心‎5min，取上清（若上清仍混‎浊，可反复离心‎）；进行酶活分‎析和蛋白含‎量分析。

BMGY培‎养基的配制‎（1000m‎l）：20g蛋白‎胨（pepto‎ne）,10g酵母‎提取物（Yeast‎ Extra‎ct）,加水至70‎0ml；1210C‎高温灭菌2‎0min。

然后分别在‎无菌条件下‎加入10X‎ YNB 100ml‎，10X 磷酸钾缓冲‎液（PH6.0）100ml‎，10X甘油‎ 100ml‎。

将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践
将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践
科学研究表明，将摇瓶成果转移到发酵罐有助于达到更优质的发酵度。

因此，在将摇瓶成果转移到发酵罐时，应该把握好以下策略和实践，以确保收获更优质的发酵度。

首先，在将摇瓶成果转移到发酵罐之前，应该确保摇瓶中的成果已发酵出来，不能太多也不能太少，收获出来的摇瓶成果应该具有适度的发酵程度。

这一步是很重要的，是开始将摇瓶成果转移到发酵罐的前提，只有在摇瓶中的成果完全发酵出来，质量稳定才能放心的将摇瓶成果转移到发酵罐。

其次，将摇瓶成果转移到发酵罐时，应该注意选择适当的转移工具。

因为摇瓶成果和发酵罐的液体密度大小不同，因此应该选择有适度倾覆角的滴管将摇瓶中的成果转移到发酵罐中。

这样既可以有效避免成果沉淀，也可以避免由于转移过快而把致菌细菌带入发酵罐中。

此外，在将摇瓶成果转移到发酵罐时，还应该注意环境卫生和控制温度。

环境卫生对于液体发酵是至关重要的，转移摇瓶成果时一定要保持室内洁净，确保发酵不受到外界的干扰。

另外，温度的控制也很重要，将摇瓶成果转移到发酵罐的过程中，温度应当以常温为主，注意控制发酵过程中的温度变化。

以上就是本文针对将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践的探讨，正确把握这些内容，不仅可以有效确保收获更优质的发酵度，还可以避免由于不当操作而带来的后果，确保摇瓶成果安全转移到发酵罐。

发酵罐（5天）与摇瓶（5天、7天）发酵产物对比分析
以上二者均为摇瓶发酵7天产物。

结论：
1号、2号发酵罐，及对照组药瓶均发酵5天。

之前实验摇瓶发酵均发酵7天，本来计划上罐发酵也采用6或7天，但是在发酵至第五天时，罐内物质已变得非常稠，所以第五天下罐。

一、1号发酵罐代谢产物基本与2号罐产物类似，前者产物稍微多些。

可能原因，2号罐染少量杆菌，影响发酵结果。

二、此两号罐的代谢产物与摇瓶对照组（5天）相比有很大区别。

其中发酵罐进行发酵至第五天的时候，原本总体积为
4.375L的发酵液，剩余约为3L-3.2L。

水分蒸发较严重，可能通气量较大。

为了避免这次蒸发，计划下次采用发酵罐发酵的时候减少通气量，并在发酵液中加入少量水。

三、此两号罐（5天）的代谢产物与摇瓶对照组（5天）分别与摇瓶发酵（7天）代谢产物均有区别。

下次计划适当延长发酵时间至6天左右。

摇瓶发酵名词解释《摇瓶发酵那些事儿》嘿，朋友们！今天咱来聊聊摇瓶发酵。

你可别小瞧这玩意儿，它在好多领域那可都是大功臣呢！摇瓶发酵啊，就像是一个小小的魔法世界。

想象一下，一个瓶子里装着各种神奇的微生物，它们在里面欢快地生长、繁殖、工作着。

就好像一群小精灵在瓶子里开派对，热热闹闹的。

这些微生物啊，在摇瓶这个特殊的“舞台”上尽情施展它们的本领。

它们会把我们加进去的原料一点点地转化、加工，变成我们想要的东西。

比如说，一些能让我们身体更健康的药物，或者是让我们生活更美好的其他物质。

你看啊，这摇瓶就像是微生物们的家。

我们得给它们提供一个舒适的环境，温度啊、湿度啊都得合适。

不然它们可不高兴，工作起来也不卖力啦。

就像我们人一样，要是住在一个又冷又潮的地方，肯定也不舒服，啥都不想干。

而且啊，摇瓶发酵可不是随随便便就能成功的。

这就像是做饭一样，得掌握好火候、调料啥的。

我们得时刻关注着这些微生物的状态，看看它们长得好不好，有没有什么问题。

要是发现不对劲，就得赶紧想办法调整。

有时候，这个过程还挺让人头疼的。

就像你养了一群调皮的小孩子，得时刻看着他们，生怕他们捣乱。

但当你看到最终的成果，那种满足感可真是没法形容。

我记得有一次，我做一个摇瓶发酵的实验。

一开始怎么都不成功，微生物就是不按我想的那样生长。

我那个着急啊，觉都睡不好。

后来我仔细研究了一下，发现是温度出了问题。

我赶紧调整，嘿，还真就成功了。

那时候我高兴得差点跳起来。

总的来说呢，摇瓶发酵是个很有趣也很有意义的事情。

它让那些小小的微生物发挥出大大的作用，为我们的生活带来了很多好处。

虽然过程中可能会遇到一些困难和挑战，但只要我们用心去对待，就一定能收获满意的结果。

它就像是一个隐藏在实验室里的宝藏，等待着我们去挖掘，去发现它的美妙之处。

所以啊，让我们一起好好探索这个神奇的摇瓶发酵世界吧！。

从摇瓶到发酵罐的发酵放大问题发酵发酵罐重复性标题:从摇瓶到发酵罐的发酵放大问题摘要:从摇瓶到发酵罐的发酵放大问题我在实验室50ml 250ml三角瓶做，37℃150rpm；放大到300L发酵罐，转速180rpm（不能调），风量要控制在多少合适啊？这个细菌是微好氧的。

有一次，溶氧都降到2%了，反而结果还比前几次好。

但是产物也只有摇瓶做的50%。

怎么优化啊？回复：溶氧控制在转速180rpm时，是比较扯淡的，因为转速不足以把微量空气氧打散到促进气液两相的传质程度！！（我在10L罐上……关键词:发酵发酵罐重复性回复：优化大罐需要考虑：罐压，接种量，pH范围，通气量范围，起使转速，温度，DO范围。

这些都是必须考虑的，你可以适当固定1到2个条件，看看生长怎么样。

穷孩子，发酵罐和摇瓶相差太大，因为整体的机制不甚相同，我觉得最大的区别在于1 摇瓶靠的是离心力，而发酵罐是真正的剪切，有些菌种在摇瓶中生长良好，但到发酵罐上由于剪切作用而无法结团，所以很多时候两者是不一样的。

2 溶氧问题：上面几位说得很全了，我就不多说了:P流加式的，你在摇瓶上无法实现持续流加吧，但是发酵罐是可以的。

测到（但是现在已经出现直接跟着检测系统的摇瓶系统），所以你无法维持一个恒定的pH。

发酵罐可以通过在线控制pH值恒定5 数据：你做发酵，最重要的是得到合适的配方与工艺吧，往往在发酵罐上可以比较全地反映出你的整个发酵状态，什么时间菌体疯狂生长，什么时间进入产素阶段，根据一些指标可以看得出来，所以摇瓶只是表层，发酵罐才是深层，总之吧，摇瓶肯定是基础，只有在摇瓶的基础上进行系统的发酵罐的研究才能真正适合生产。

再者，你就是由小罐到大罐的工艺操作还是不尽相同。

仅供参考，大家多交流！微生物发酵的放大实验，要注意反应罐的培养温度，培养基浓度，PH值，搅拌转速，还要不断的反应罐增加补料。

温度好控制pH上罐子是可以调节的，在摇床上你只能定时取样检测溶氧就差的很大了，摇床上基本就是缺氧的，上罐子因为有通气所以在一定条件下能确保溶氧，这样会导致用摇床摇菌的时间远远大于上罐子的时间，我现在做的菌，在摇床上基本是16小时左右吧，上罐子就6、7个小时不锈钢最怕氯离子了,特别是盐酸.酸的种类多了,看你需要补课的多,还是自己先学一阵子先吧.回复选择硫酸或磷酸即可不知楼主为何选盐酸:sweat:回复不锈钢最怕氯离子啦，尤其是盐酸，有些用自来水的厂子都要严格控制水中氯的含量！你们做多久啦？多大的罐子呀？发酵罐是压力容器，先停下来检修吧，不然出了事就是人命关天的大事:cat3:回复主要看HCl在发酵过程中起什么作用，是否可以替换。