唾液腺染色体观察
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专业班级:14级生物1班学号:20140322142 姓名:王堽实验日期:2016年04月28日/05月05日室温:23.7℃大气压:83.4KPa实验四果蝇唾液腺染色体的观察及制备一、目的1.了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征;2.习分离果蝇幼虫唾液腺的技术;3.掌握唾液腺染色体制片方法。
二、原理蝇、摇蚊幼虫唾液腺细胞中的巨大染色体。
双翅目昆虫的唾液腺细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂,而永久停留在分裂间期。
但随着幼虫的生长,唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而且不分开,经过许多次的复制形成约1 000—4 000拷贝的染色体丝,合起来直径达5μm,长度达400μm,比普通细胞中期染色体约大100~150倍,所以又称为多线染色体(polytene chromosome)或巨大染色体(giant chromosome)。
1881年,意大利的细胞学家巴尔比尼(Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体,由于存在于唾腺细胞中,所以又称为唾腺染色体。
1933年,美国学者贝恩特(Painter)等又在果蝇核其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。
这种染色体宽约5μm,长400μm,相当于普通染色体的100-150倍,因而又称为巨大染色体。
特征:(1)染色体螺旋化程度不高。
(2)果蝇幼虫的唾腺细胞在发育过程中,细胞核内的DNA多次复制,但细胞、细胞核不分裂,复制后的染色单体DNA也不分开,形成了多线染色体。
(3)同源染色体相互靠拢在一起呈现一种联会状态,使其比一般的体细胞染色体粗大。
核内有丝分裂,不伴随核分裂和细胞分裂的染色体分裂。
核内复制,不伴随细胞内核分裂的染色体复制现象。
体联会,唾腺细胞中的染色体复制后,所有同源染色体一直处于紧密配对的前期状态,如同减数分裂的联会,这种现象称为体联会。
果蝇的染色体组成,由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒相互连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会,经碱性染料染色后,可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫,幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞,其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂,终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大,唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后,形成约1000~4000拷贝的染色体丝,比普通中期相染色体大得多(约100~500倍),因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8,存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心,由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
(如右图)染色体Ⅰ为端着丝粒染色体,所以它的一端在染色中心上,另一端游离;Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体,他们从染色中心呈V字形向外伸展,所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”;点状的第Ⅳ染色体很短小,为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中,唾腺染色体上不见Y染色体,他捕鱼X染色体联会,而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点:巨大,是多线染色体;有丝分裂停在间期,DNA不断复制,着丝点不分开;同源染色体紧密配对—体细胞联会,染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹,这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部,即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征,是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期,横纹会出现不连续的膨胀,称为疏松区(puff),目前认为这是该部分基因被激活的标志。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常见的模式生物,在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法,通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构,可以了解染色体的形态和数量变化,为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察,掌握染色体的基本结构和形态特征,为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料,成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法:(1)取一只成年果蝇,用镊子夹住果蝇的头部,将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
(2)将果蝇头部置于盐酸乙醇中,浸泡5分钟,然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中,浸泡5分钟。
(3)将处理后的果蝇头部转移到苏木精中,浸泡5分钟,然后用酒精逐级脱水,最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
(4)将果蝇头部转移到甲醛中,固定30分钟,然后用苏木素染色,再经过酒精逐级脱水,最后转移到石蜡中浸泡。
(5)将处理后的果蝇头部置于石蜡中,浸泡30分钟,然后取出制作切片,用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作,观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构,可以看到染色体呈现出条状的形态,其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计,一般情况下,果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验,我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构,了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持,也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法,通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构,可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行,为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持,也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察一.实验目的通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法,了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二.实验原理唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。
果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体,它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。
由于其染色体DNA经过多次复制(可达210~215次),但并未发生细胞核分裂,同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会,重复复制后的染色体聚集在一起,所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多,又称多线染色体。
三.实验用品1.实验材料:普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水2.实验器材和试剂:双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI四.实验方法和步骤1. 幼虫的培养为了在解剖镜下便于操作,使用的幼虫应发育充分而且个体较大。
在实验中,人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养,因此在培养瓶内放置的亲本不易过多,否则将产生过多的卵而造成养分不足。
B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些,一般可控制在16~20℃范围内,低温下生长的果蝇个体较大。
果蝇属于完全变态的昆虫,成虫交尾后将卵产在培养基内。
在适宜的温度下,卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后,三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹,为了能够在实验时获得较多的幼虫,可以分批将亲本放入培养瓶。
实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2. 剖取唾腺用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上,并滴加1滴生理盐水。
将载片放在载物台上,用解剖镜进行观察。
首先将幼虫的头尾分清,果蝇的头部有一黑点(口器),头部不断作伸缩状。
解剖时,双手各持一个解剖针,一支针先压在幼虫身体的前1/3处,另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动,即可将头部与身体拉开,仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。
在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。
实验二:果蝇唾液腺染色体的制备与观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫(果蝇)幼虫期的唾液腺细胞很大,其中的染色体称唾液腺染色体,相当于一般普通染色体的100-150倍,又称巨大染色体。
2、在幼虫发育过程中,唾液腺染色体仍进行复制,但细胞只生长不分裂,从而产生多线染色体。
多线染色体经染色后,出现深浅不一、宽窄不同的横纹,这些横纹的数目和位置是恒定的,代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时,很容易在唾腺染色体上识别出来。
3、多线染色体的特征:a 巨大;b体细胞配对,所以染色体只有半数(n=4);c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心;d 横纹有深浅、疏密的不同,各自相应排列,这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品实验材料:黑腹果蝇的三龄幼虫(选择行动迟缓、肥大、爬上管壁、就要化蛹了的三龄幼虫观察最佳)实验用品:显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。
0.9%生理盐水、1%醋酸洋红。
四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下,上面滴加一滴生理盐水,放上果蝇幼虫(有一钝尾和带黑色口器的尖头,可根据其在盐水中爬行方向确定头部),两手各拿一枚解剖针,左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉,把头部从身体拉出,唾液腺随之而出。
(一对双叉形透明的囊状腺体)。
2、除去幼虫其他组织部分,把唾液腺周围脂肪组织(不透明)剥离干净,然后将多余生理盐水吸走,滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3、染色10 分钟,盖上盖玻片,用滤纸轻压一下吸去多余的染色液,然后平放在桌子上,用大拇指适当均匀用力压住,并横向揉几次(勿使盖玻片移动,用力和揉动是一个方向,不能来回揉!)。
4、显微镜观察,先在低倍镜下观察,找到分散好的染色体图像,再高倍镜观察。
用显微镜可以看到四对染色体,第一对染色体(X-)组成一个长条,第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对,它们都以中部的着丝区聚集,而第四对染色体很小,分布在着丝区呈点状或盘状。
实验三果蝇唾腺染色体制片观察
一、实验目的
1.练习分离果蝇幼虫唾腺的技术,学习唾腺染色体的制片方法
2.观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征
二、实验原理
双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细胞,其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
这是由于细胞停止分裂,而染色体仍不断地进行复制而不分开,形成一千个拷贝以上的染色体丝复合体,称为多线染色体。
这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征,为遗传学研究的许多方面,如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
三、实验材料
1. 黑腹果蝇三龄幼虫
2. 显微镜、解剖镜、载玻片、盖玻片、解剖针、小烧杯
3. 0.7%生理盐水1N盐酸1%醋酸洋红
四、实验步骤
1. 取肥大的三龄幼虫在载玻片上
2. 解剖唾腺:滴加1滴生理盐水,在解剖镜下,左手针按住幼虫后1/3处,右手持针压
住头部向外拉,可将一对半透明的袋状唾腺拉出
3. 酸处理:剥离脂肪体,加1滴1N盐酸1分钟
4. 染色:吸掉盐酸,用水洗净后滴加染料,10分钟后盖片、压片(用力适当)
5. 显微观察(5条长臂+1条短臂)拍照、画图
X,2L,2R,3L,3R
参考照片:。
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺的分离技术;2、学习制作唾腺染色体标本的方法;3、观察、识别果蝇唾腺染色体的特征。
二、实验原理果蝇幼虫唾腺的细胞核非常大,唾腺染色体比其他细胞染色体大200多倍。
由于重复复制后的众多染色线没有分开,一条染色体内含有染色体线多达千条以上,是通过核内有丝分裂形成的多线染色体。
一般来说,多线染色体是处于永久性前期中的一种体细胞染色体配对形式,普遍存在于双翅目昆虫某些物种的幼虫唾腺细胞内。
唾腺染色体的特征:巨大;体细胞配对,染色体只有半数(n);各染色体着丝粒部分互相靠拢形成染色中心;有深浅不同、疏密各别的横纹。
唾腺染色体经染色后出现的横纹的数目和位置常常恒定,标志着物种的特征。
当染色体上有结构变异,如缺失、重复、倒位、易位等,很容易在唾腺染色体上鉴别。
例如:果蝇Ⅰ号染色体上16A区中有六条横纹的是正常复眼,有12条横纹的是棒状眼,有18条横纹的是加倍棒状复眼。
三、实验材料果蝇三龄幼虫;解剖镜,显微镜,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片,吸水纸,生理盐水,醋酸洋红四、实验步骤1、幼虫培养置于16-18℃下饲养,当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前,即为三龄幼虫,此时虫体肥大,便于解剖,是制备唾腺染色体的最理想时期。
2、幼虫的解剖将载玻片置于解剖镜下,滴一滴生理盐水,将幼虫置于其中,左手持解剖针按住幼虫前端1/3处,固定幼虫。
右手持针按住幼虫头部正中,快速用力向右拉,把头部从身体拉开,腺体即随之而出。
唾腺为半透明小囊状,其上附有脂肪带,食道两侧各一个。
找到唾腺后尽可能把腺体上的脂肪剔除。
3、染色前处理清除残体,使载片上只留下唾腺。
4、酸解:把腺体放入1N HCl中浸泡2-3分钟,dH2O洗3次。
5、染色滴上几滴醋酸洋红于唾腺上,染色30分钟,染色时用镊子将唾腺稍捣碎。
6、压片在载片上加盖玻片,盖片上覆盖一吸水纸,然后以拇指适当用力压片,将唾腺细胞核压破,以染色体伸展而不破碎为好。
果蝇唾液腺染色体的制片与观察一、实验目的学会果蝇幼虫的解剖技术学习唾腺染色体的染色制片方法观察唾腺染色体了解染色体横纹的特点二、实验原理黑腹果蝇幼虫期的唾腺细胞核非常大,唾腺染色体比其它细胞染色体大200多倍并且总是处于前期状态。
这是由于染色体复制而分不开,纵向并列形成像电缆那样的巨大染色体,这样的染色体称为多线染色体,染色体上的染色粒排列在成横带在染色体的部位是一定的。
从唾腺染色体的制片中可以看到五条长臂,好似从一共同的中心发射出来的,这个中心叫做染色中心。
它是由于所有染色体在刚一接近其纺锤丝附着点时,即被相互吸引及紧密结合而成,这五条臂分别称为X、2L、2R(第二染色体的左右臂),3L及3R(第三染色体的左右臂),还有一小段用4来表示(第四染色体),每一条臂都含有二条紧密聚合的同源染色体,一条是母本的,来自卵核,一条是父本的,来自精子。
在雄体的唾腺中,Y染色体大大的萎缩,X染色体则呈现不配对而成细长的一条。
因为,每一条臂都含有二条紧密聚合的同源染色体,所以,当它们有相同的构造时,没有办法从两条紧密配对的双股的染色体复合体来彼此区分它们。
但两条同源染色体之间有差别时,则很容易看出来。
例如,当一条染色体缺失一个片段时,它的同源染色体,在这一段不能配对,就会拱起来,形成了一弧状结构,此外重复、倒位、易位等染色体畸变也可以看到。
所以,果蝇唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料,制备唾腺染色体标本,可以用果蝇3令幼虫,越肥越好,(温度在15℃左右,能使幼虫长得肥而大),果蝇的幼虫呈半透明状,有黑点的一端是头部,黑点是它的神经节,唾腺在神经节下面,呈两个半透明的棒状物,中间有一个细丝相连。
三、 实验材料及器材解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、醋酸洋红、85%的生理盐水、1NHCl 的盐酸,以及果蝇幼虫(3令的越肥越好的果蝇幼虫)。
四、 实验步骤1、从果蝇的培养瓶中的找出一只又大又肥的果蝇幼虫,用解剖针将其挑出放在载玻片上,滴两滴85%的生理盐水在果蝇的幼虫上。
实验五果蝇唾液腺染色体的观察及制备一.目的1.了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征。
2.习分离果蝇幼虫唾液腺的技术。
3.掌握唾液腺染色体制片方法。
二、原理蝇、摇蚊幼虫唾液腺细胞中的巨大染色体。
双翅目昆虫的唾液腺细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂,而永久停留在分裂间期。
但随着幼虫的生长,唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而且不分开,经过许多次的复制形成约 1 000— 4 000拷贝的染色体丝,合起来直径达5μm ,长度达400μm ,比普通细胞中期染色体约大 100~150倍,所以又称为多线染色体(polytene chromosome或巨大染色体 (giant chromosome。
唾液腺染色体的另一特点是体细胞中同源染色体处于紧密配对状态,这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开,由此成千上万条核蛋白纤维丝唾液腺染色体(salivary gland chromosome是一类存在于双翅目昆虫,如果结合在一起,紧密盘绕。
所以细胞中染色体只呈单倍数。
黑腹果蝇的染色体数目 2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染色体为中部着丝粒染色体,第Ⅳ染色体和第 IX 染色体为端着丝粒染色体。
唾液腺染色体形成时,染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起形成一个染色中心(chromo-center ,所以在光学显微镜下可见从染色中心处伸出 6条配对的染色体臂,其中 5条为长臂, l 条为紧靠染色中心的很短的臂。
唾液腺染色体经染色后,呈现深浅不同,疏密各异的横纹 (band 。
这些横纹的数目,位置,宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。
研究认为这些横纹与染色体的基因是有一定关系的。
通过一定的实验方法使果蝇唾液腺染色体各臂分散开, 并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显示出来, 是进行果蝇遗传学研究的很重要的一个环节.果蝇唾液腺染色体在不同种间的共同点是染色体的着丝点位于一个染色区域,但不同的种类往往其染色体臂数目不同.每条染色体臂上分布着染色深浅不同、粗细各异的磺纹 (band, 这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数目又都有种的特异性和种内的差异. 由此, 果蝇唾液腺染色体近几十年来, 已广泛用于种内系统发生和种间亲缘关系的研究中, 因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染色体的不联会、形成泡 (puff、缢虞 (constriction和间带区的伸缩性以及顶体 (telomere的形态等多方面的差异,而特别重要的是研究它的基因序列的差异 (观察是否产生了例位以及染色体的断裂、融合和重排 . 因此,无论从细胞遗传学的角度研究基因与突变性状之间的联系,还是从进化遗传遗传学方面研究染色体的系统发生,探讨种间以及近缘种间的遗传差异和生殖隔离的机制等,唾液腺染色体的分析研究都是十分重要的.从其横纹分布特征可对物种的进化特征进行比较分析,而一旦染色体上发生了缺失,重复, 倒位。
果蝇唾腺染色体的压片及其观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、学会制作唾腺染色体压片3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫,活跃的,雌性幼虫。
盖玻片、载玻片、解剖针、解剖镜、45%醋酸溶液、卡宝—品红染液、盐酸、乳酸醋酸溶液三、实验原理唾腺染色体的特点:大、粗。
唾腺细胞是一个处于间期的细胞,染色体处于一个伸展的状态,所以特别长,因为这个唾腺细胞是一个多倍体的细胞,每条染色体的话有1000到4000条核蛋白纤维丝(包括DNA和蛋白质)。
唾腺染色体的所有的着丝粒聚在一起形成了一个染色中心,伸开五条臂。
X染色体体联会在一起。
果蝇染色体分区:果蝇染色体一共分为120个区,从端部开始1-20为x染色体,21-40在第二染色体的左臂,61-80在第三染色体的左臂,101—102位于点状染色体。
右臂是从基部开始分区,41-60在第二染色体的右臂, 81-100位于第三染色体的右臂。
每一个分区里边又分成段这个段,用A、B、C、D来表示。
四、实验步骤唾液腺制片:1、取一张载玻片,擦干净表面的酒精,放在解剖镜的载物台上。
2、打开解剖镜,使用上光源。
并在载玻片上滴一滴生理盐水。
3、用解剖针取一只黑腹果蝇的三龄幼虫。
4、用一支解剖针固定幼虫头部,另外一支解剖针压入口沟的位置,将其拉断。
找到口沟附近的一对透明的唾液腺,将唾液腺留在中间,用吸水纸将其他的部分擦去。
5、加入45%的醋酸溶液固定,时间为 5—7秒。
让唾液腺离开原来的位置,时间到了之后将多余的液体吸掉。
6、加一滴盐酸起软化作用,再加一滴蒸馏水洗去多余的盐酸,时间大概1—2秒。
让唾液腺离开原来的位置。
7、滴加染液,染色三十分钟。
8、重新做一张制片9、吸掉多余的染液,加一滴乳酸醋酸溶液,将唾液腺充分的洗涤。
吸去多余的溶液。
10、盖上盖玻片,用两层滤纸,中间打折压住盖玻片手点住盖玻片的两个角轻轻的按抚,吸去多余的溶液。
11、压片显微镜观察:先在低倍镜下观察,找到分散好的染色体图像,再高倍镜观察。
实验报告课程名称遗传学实验实验名称果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验原理果蝇唾腺染色体是永久间期染色体,只发生DNA复制,不发生有丝分裂。
在幼虫唾腺细胞内,每条染色体进行了10次左右的复制,形成了约210=1024条染色体拷贝,再结合同源染色体的配对,共用约2048条同源染色体拷贝进行体细胞联会,形成比正常有丝分裂中期的染色体大200倍的、巨大的多线染色体。
这些染色体的着丝点聚集在一起,形成染色中心,同源染色体的两臂向外伸展。
经过染色,唾腺染色体的显示出独具本染色体特色的带和间带模式。
这个模式是恒定的,可用用于基因的定位,如果发生染色体的结构变异,则可以通过模式的改变而发现出来。
不同的染色体,其端部不同,可以用于鉴别染色体。
在观察唾腺染色体时,会发现膨胀泡结构,这是强烈的基因转录迹象。
二、实验结果图一:果蝇幼虫解剖针分离后效果图图二:剥离的腺体一共分离了3条果蝇幼虫才分离出较清晰的唾液腺体,在分离出带腺管的2侧腺体时,上面还有其他东西,因为想剥离的干净一点,所以没急着拍照,结果分离到一半时,一条腺体丢失,所以照片仅显示剥离中期时剩的一条腺体。
图三:唾腺染色体(借用)图四:唾腺染色体——图片放大(借用)带与间带、染色中心、膨胀泡、3R端部(僧帽)特点如上图标示。
三、总结反思从挑取果蝇幼虫,到幼虫的头身分离和剥离腺体,再到染色,这些操作的较为顺畅,并没有出现大的失误。
虽然刚开始分离的两条幼虫因为手法生疏,并没有分离出完整的腺体,但是第三次尝试时就分离出带腺管的2侧腺体,剥离后还剩一条较为完整的腺体。
染色时操作也较为小心,并未让腺体随水流被滤纸吸走。
就剥离腺体这个操作而言,我觉得这是一个需要耐心、眼力和方向感的事情,可以在剥离的时候将载玻片放在显微镜下,同时2根解剖针也进入显微镜的视野内的两侧,用解剖针判断该划掉哪个方向的一部分,一点点去掉不要的东西,最后就可以留下需要的腺体了。
但是操作一定要细心,腺体特别小,划的时候如果一不小心粘到解剖针上也弄不下来,那条腺体也就没用了。
果蝇唾液腺染色体观察一、实验目的﹙1﹚练习剖取果蝇三龄幼虫唾液腺的方法。
﹙2﹚掌握制作果蝇唾液腺染色体标本的技术。
﹙3﹚观察果蝇唾液腺染色体的形态特征,了解染色体横纹的特点。
﹙4﹚了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的意义。
二、实验原理1881年意大利的细胞学家巴尔比尼(Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊(chironmus)幼虫的唾液腺细胞间期核中发现了一种巨大染色体。
由于存在于唾液腺细胞,所以又称为唾液腺染色体。
1933年美国学者贝特恩(Painter)等又在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾液腺细胞间朋核中发现了巨大染色体。
本世纪初,D. Kastoffs用压片法首先在D. melanogaster 果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体(salivary gland chromosome)。
事实上,双翅目昆虫(如摇蚊、果蝇等)的幼虫期都具有很大的唾腺细胞,其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征,为遗传学研究的许多方面,如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞处于永久早期,染色体解旋呈伸展状态.在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制,但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开,这种现象叫做核内有丝分裂,从而形成了多线染色体。
加之唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态,而使其比一般体细胞中的染色体粗1000—2000倍,长100-200倍。
由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会,经碱性染料染色后,可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同,被称做明带、暗带的横纹,这些横纹的位置,宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种,不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察
一、实验目的
1、练习果蝇幼虫唾腺的分离技术;
2、学习制作唾腺染色体标本的方法;
3、观察、识别果蝇唾腺染色体的特征。
二、实验原理
果蝇幼虫唾腺的细胞核非常大,唾腺染色体比其他细胞染色体大200多倍。
由于重复复制后的众多染色线没有分开,一条染色体内含有染色体线多达千条以上,是通过核内有丝分裂形成的多线染色体。
一般来说,多线染色体是处于永久性前期中的一种体细胞染色体配对形式,普遍存在于双翅目昆虫某些物种的幼虫唾腺细胞内。
唾腺染色体的特征:巨大;体细胞配对,染色体只有半数(n);各染色体着丝粒部分互相靠拢形成染色中心;有深浅不同、疏密各别的横纹。
唾腺染色体经染色后出现的横纹的数目和位置常常恒定,标志着物种的特征。
当染色体上有结构变异,如缺失、重复、倒位、易位等,很容易在唾腺染色体上鉴别。
例如:果蝇Ⅰ号染色体上16A区中有六条横纹的是正常复眼,有12条横纹的是棒状眼,有18条横纹的是加倍棒状复眼。
三、实验材料
果蝇三龄幼虫;解剖镜,显微镜,镊子,解剖针,载玻片,盖玻片,吸水纸,生理盐水,醋酸洋红
四、实验步骤
1、幼虫培养
置于16-18℃下饲养,当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前,即为三龄幼虫,此时虫体肥大,便于解剖,是制备唾腺染色体的最理想时期。
2、幼虫的解剖
将载玻片置于解剖镜下,滴一滴生理盐水,将幼虫置于其中,左手持解剖针按住幼虫前端1/3处,固定幼虫。
右手持针按住幼虫头部正中,快速用力向右拉,把头部从身体拉开,腺体即随之而出。
唾腺为半透明小囊状,其上附有脂肪带,食道两侧各一个。
找到唾腺后尽可能把腺体上的脂肪剔除。
3、染色前处理
清除残体,使载片上只留下唾腺。
4、酸解:
把腺体放入1N HCl中浸泡2-3分钟,dH2O洗3次。
5、染色
滴上几滴醋酸洋红于唾腺上,染色30分钟,染色时用镊子将唾腺稍捣碎。
6、压片
在载片上加盖玻片,盖片上覆盖一吸水纸,然后以拇指适当用力压片,将唾腺细胞核压破,以染色体伸展而不破碎为好。
7、显微镜下观察
五、实验结果
从图中能明显观察到:唾腺染色体上巨大,具有深浅不一和疏密相间的横纹及条带,也大致能将各对染色体分开(但无法具体辨别是哪一条对染色体)。
六、分析与讨论
1、本次实验关键操作有以下几步:
1)从果蝇幼虫中拉出唾液腺。
解剖针的位置一定要找准,然后迅速将幼虫头部与身体分离,这样才能完整清晰的分离出人字形的唾液腺,而且这样分离出的唾液腺上不带或很少带脂肪袋。
若不幸将唾液腺与肠道、头部其他组织混在一起,掌握以下技巧也能成功将唾液腺找出来:唾液腺与肠道的颜色不同,肠道更偏黄,
而唾液腺是白色并更加透明。
唾液腺上带的脂肪袋也是很好的判断依据。
2)解离、染色。
解离及染色的过程中一定要注意滴加液体时小心唾液腺被洗跑或者被吸水纸吸走。
染色时间要视染色剂的质量来定,若染色剂颜色浅,应染30min以上。
注意染色剂中是否有残渣,若残渣太多应用吸水纸吸去。
3)压片。
这是最容易出错的一步。
压片时应滴加一小滴水,将盖玻片轻轻放在载玻片上,其上盖一张吸水纸。
用手固定住盖玻片边缘使其不会移动,找准唾液腺所在位置后果断用力地用解剖针针柄向下压或者敲击,才能压出云雾状的效果。
4)观察。
由于这次染色不是很深,在显微镜下难以将没有染太深的染色体与背景中大量破碎的细胞(爆浆)区分开,如果不仔细观察寻找,很容易错误地以为视野里没有压好的染色体。
2、总结
本次实验中最关键的还是基本操作的熟练度。
拉唾液腺和压片的技能都是可以在反复练习中掌握的,需要充分运用前几次实验中学习的技能,这也正是这次实验所检验的。