姬菇液体菌种培养基及培养条件的优化

武汉工业学院硕士学位论文姬菇和双孢蘑菇液体菌种发酵及栽培效果的研究姓名：黄爱荣申请学位级别：硕士专业：应用化学指导教师：缪礼鸿20080501摘 要食用菌产业在我国农业生产中具有重要地位，生产方式正由传统的家庭作坊式操作、季节性生产模式，逐渐向设施化、工厂化、周年化、规模化、现代化生产模式发展。

深层发酵生产液体菌种是食用菌发展的方向，液体菌种的发展必将推动整个食用菌行业的发展。

食用菌种类众多，菌种生产方式不尽相同，更新换代较快，目前尚未见到有将液体菌种应用于大规模生产上。

为此，本试验在前人研究的基础上，采用单因素试验和正交试验，对影响姬菇和双孢蘑菇液体培养的各因素进行了研究，以确定最适合其生长的培养基组成和培养条件；进行了双孢蘑菇液体菌种栽培种的实际生产栽培和双孢蘑菇栽培料配方的改良；此外，充分利用农业废弃牛粪资源作为棉籽壳替代物栽培侧耳属食用菌。

主要研究结果如下：1．姬菇液体培养基最佳配方和最适培养条件为3%甘露醇，1%酵母膏，0.2%磷酸二氢钾，0.05%硫酸镁； 1%玉米粉作为增黏剂，摇瓶装液量90mL/250mL三角瓶，起始pH值为6.0, 摇床转速150r/min, 培养时间为6d。

在上述条件下于10L气升式发酵罐中培养得到符合生产要求的姬菇液体菌种；姬菇液体菌种在棉籽壳培养料上满瓶时间由固体菌种的28天缩短为16天，生长速度提高75%。

2．双孢蘑菇液体一级菌种优化后的配方和培养条件为3% 12Be麦芽汁，1%玉米粉，硫酸镁0.05%，磷酸二氢钾0.08%，少量VB，培养条件为初始pH值6.5，培养1温度25℃，状液量90mL/250mL三角瓶，摇床转速150r/min，培养时间6d；二级扩大液体菌种培养基优化配方为3%麸皮，1%玉米粉；双孢蘑菇1-5级液体菌种之间生长速度、生物学特性保持稳定，使用二级液体菌种进行10L发酵罐发酵培养。

3．双孢蘑菇栽培种麦粒培养基种加入9%左右的麸皮，可以减少麦粒培养基在接种液体菌种后水分过多现象；液体菌种生产固体栽培菌种接种量为1%(7.5mL/瓶)，双孢蘑菇液体菌种制备栽培种与传统固体菌种制备栽培种在相同放大倍数(240倍)时，二级、三级液体菌种制备的栽培种在麦粒培养基上生长速度提高25%；利用发酵牛粪的双孢蘑菇栽培料能够提高单位面积双孢蘑菇产量14.35%。

专利名称：一种培养真姬菇液体菌种的液体培养基及液体菌种的制备和栽培方法
专利类型：发明专利
发明人：杨仁智,程继红
申请号：CN201010503515.5
申请日：20100929
公开号：CN102432359A
公开日：
20120502
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种培养真姬菇液体菌种的液体培养基为红糖2％、蛋白胨0.2％、可溶性淀粉0.3％、马铃薯20％、pH自然、KHPO0.2％，MgSO0.1％，VB10mg/L。

还公开了液体菌种的制备和栽培方法。

本发明的培养基配方生产出来的菌球直径小、生长均匀、活性强，适宜做生产用液体菌种。

液体菌种的发菌时间只需22～26d，比固体菌种缩短了一半，可缩短栽培种培养时间10～
15d。

能有效减少培养时间、降低生产成本。

此外培养时间缩短，能降低污染概率。

申请人：上海丰科生物科技股份有限公司
地址：201401 上海市奉贤区现代农业园区高丰路968号
国籍：CN
代理机构：上海天翔知识产权代理有限公司
代理人：陈学雯
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液体菌种的优点及应注意的问题液体菌种的优点及应注意的问题近年来，“液体菌种”这个词越来越多的受到广大食用菌爱好者及食用菌种植者的青睐。

其实早在20多年前，液体食用菌已经在欧美许多国家盛行。

近年来，日本、韩国等亚洲国家也对某些菌种进行了深入研究，那么液体菌种与传统工艺相比有哪些好处呢。

生产工艺简化，液体菌种没有母种与栽培种之分，可以接原种，也可以接栽培袋，工艺简单，不繁琐，节约时间成本。

菌种纯度更高，液体菌种实在密封的食用菌设备罐体内培养的，菌种所需氧气、养料等都经过严格控，且培育过程中，要经过筛选、提纯。

据悉，其纯度可高达99.999999%。

受杂菌污染小，液体菌种接种后，萌发点分散，比杂菌萌发速度快，环境适宜的情况下，一般24小时就能覆盖接种面。

而且，在培养液灌入过程中，要通过孔径为0.01微米的膜过滤材料，保证养料纯度，从而大大降低杂菌污染的几率。

接种速度快、成本低，一般一小时可以接种1500——4000袋，每袋菌种不过3分钱。

生长周期短，液体菌种萌发速度比传统工艺快一倍不止，生产周期变短，且出菇整齐，更容易抓住市场，受到广大消费者的喜爱。

适合规模化生产，无季节性限制。

液体菌种在密封的发酵罐内，人工控制菌种的最佳环境来生产，不受季节影响，而且操作简单，节约生产费用、人工成本等各项费用，形成规模效应，为生产者提供最大的利润空间。

方便更换品种，要换品种，提前10天生产菌种就可以了，方便、快捷、简单。

市场需求大，随着液体菌种的广泛推广，人们对液体菌种的了解越来越多，对液体菌种的需求也越来越大。

在培养液体菌种过程中应注意哪些问题呢？控制氧气含量，培养液中氧气的含量直接影响到菌种自身的新陈代谢，氧气在培养液中的容量与温度、接触面积、压力等都有很大关系，液体菌种培养设备一般都能很好的解决这个问题。

空气的纯净度，生产环境一定要保持整洁，选择过滤膜时一定要选择技术先进、孔径小的，保证进入的空气的无菌度。

培养液的配置，不同的菌种对营养的需求比例不同，配置过程中一定要了解菌种的属性，配置营养均衡，适宜其生长的营养液。

姬菇栽培技术姬菇（Hericium erinaceus）是一种珍贵的食用菌类，其外形独特，呈现出类似于猴子的头发样子，因此也被称为猴头菇。

姬菇不仅具有高营养价值，还有巨大的市场需求。

本文将介绍姬菇的栽培技术，希望对有意栽培姬菇的读者有所帮助。

一、选址与基础设施姬菇的栽培地点应选择在通风良好、日照充足的地方。

一般来说，温度在15℃-25℃之间，相对湿度在70%-80%之间的环境是最适宜姬菇生长的。

此外，栽培姬菇需要准备好相应的基础设施，如菇棚、种菇架等。

菇棚应保证密封性好，以防止外界的昆虫和病菌入侵。

种菇架要具备一定的承重能力，以承载菇体的生长。

二、培养基的制备姬菇的培养基一般采用丰富的有机物质，如玉米秸秆、木屑、棉秧等。

具体的配方可以根据实际情况进行调整。

制备培养基的过程中，需要进行杀菌处理，以防止培养基中的杂菌滋生。

可以选择蒸汽灭菌或高温烘干的方法进行处理。

处理后的培养基应保持适度的湿度，以利于菌丝的生长。

三、菌种接种姬菇的菌种一般通过培养瓶或培养袋进行扩繁。

培养瓶是一种常见的培养姬菇菌种的容器，它具备一定的透气性和保湿性，方便菌丝的生长。

将培养瓶中的菌种移植到预先准备好的培养基中，培养基应保持一定的湿度和温度，有利于菌丝的生长繁殖。

在培养过程中要保持环境的清洁，以防止杂菌感染。

四、培养管理姬菇的培养管理主要包括温湿度的控制、灌水、通风等。

在菇体生长的初期，温度应保持在20℃-22℃，相对湿度保持在80%-90%。

菇体生长到一定程度后，可以适度调低温度，控制在17℃-20℃之间。

同时要保持适度的湿度，定期进行灌水。

通风是保证姬菇生长最重要的因素之一。

适量空气流通可以提供充足的氧气，促进菇体的生长发育。

但通风时要注意控制湿度，避免过度干燥。

五、病虫害防治在姬菇的栽培过程中，病虫害是常见的问题。

常见的病虫害有炭疽病、蚜虫和螨虫等。

为了防止病虫害的发生，可采取以下措施：1. 菌棚的密封性要好，以减少外界昆虫的入侵。

真姬菇液体培养条件的优化及多糖提取与分析的开题报告一、研究背景和意义：真姬菇（Hericium erinaceus）是一种珍贵且有营养价值的菌类，广泛分布于我国南方山区及华北地区。

真姬菇不仅味美，而且具有多种药用价值。

目前已发现真姬菇的多糖及其生理活性成分对癌症、心脑血管及消化系统疾病等均具有显著的疗效，是一种重要的活性多糖资源。

液体发酵是生产活性多糖的一种重要手段。

因此，优化真姬菇的液体培养条件，提高重要活性多糖的产量和品质，具有重要的研究和应用价值。

二、研究内容和技术路线：本研究将采用真姬菇液体培养的方法，通过单因素和正交试验的方法，优化液体培养的各项条件，包括菌种预处理、培养基组成、培养时间、温度、初始pH值等影响因素。

同时，对优化后的真姬菇液体培养条件进行多糖提取与分析。

三、研究特色和创新点：1.本研究首次对真姬菇液体培养条件进行深入优化，提高活性多糖的产量和品质。

2.本研究将使用正交试验法多因素综合考察液体培养条件，提高实验精度和数据可靠性。

3.本研究将进行多糖提取与分析，探究真姬菇活性多糖的性质和结构特征，为进一步开发利用真姬菇多糖提供理论和实验基础。

四、预期目标和成果：1.优化真姬菇液体培养条件，提高活性多糖的产量和品质。

2.通过多糖提取与分析，探究真姬菇活性多糖的性质和结构特征，并与已有研究对比，证明本研究的创新点和科研价值。

3.实验结果可为真姬菇液体培养及多糖提取的工业应用提供参考依据和技术支持。

五、研究难点和解决方案：难点：如何综合考虑不同因素对真姬菇液体培养的影响，并确定适宜的培养条件。

解决方案：采用正交试验法，根据试验结果和数理模型，确定影响真姬菇液体培养的关键因素，从而优化液体培养条件。

六、研究计划和进度安排：1.前期研究准备（1个月）：准备实验设备和试剂，建立实验室所需的实验流程。

2.单因素试验（2个月）：根据已有文献和实验经验，确定液体培养的基本条件，并根据单因素试验的结果确定关键参数。

姬松茸液体菌种制备初探通过正交试验筛选出适宜培养姬松茸液体菌种的合成培养基（N 6Ⅰ20.0%，N 6 Ⅱ30.0%，蔗糖5.0%，酵母粉0.3%），以此制备的一级摇瓶种和二级摇瓶种，其菌丝体生物量分别为1.48±0.06 g/100 mL和2.64±0.05 g/100 mL。

栽培试验表明，液体菌种的发菌时间比固体菌种缩短13 d。

姬松茸；N 6培养基；摇瓶培养；液体菌种S646.150.4A姬松茸（Agaricus blazeiMurrill）又名巴西蘑菇、小松菇，属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、蘑菇科、蘑菇属，是一种很有开发前途的食药用真菌。

其子实体含有多糖、核酸和甾醇类等多种生物活性物质以及人体必需的多种氨基酸等成分，经常食用，可以降低血压和胆固醇，且对肿瘤、痔疮和神经痛等具有一定疗效[1]。

我国于20世纪90年代初从日本引进姬松茸菌种，近年来在福建、四川和湖北等地有一定规模的栽培，其生产用种多为麦粒种。

1997年以来，有关姬松茸深层发酵的研究较多［2-7]，然而在姬松茸液体菌种制作的过程中，常出现一级摇瓶种子生物量较低，二级摇瓶种子菌丝球数量少、生长速度慢、菌丝球个体大和接种固体培养基萌发慢、生长无优势等问题，制约了姬松茸液体菌种在实际生产中的应用。

因此，我们在以前姬松茸发酵研究的基础上，探索了姬松茸液体菌种的制作工艺，以适应工厂化制种及栽培的需要。

1 材料与方法1.1材料1.1.1供试菌种姬松茸ABM-3号试管保藏种引自华中农业大学菌种实验中心。

1.1.2母种活化培养基①PDA培养基：马铃薯200 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂20 g/L；②麸皮加富PDA培养基：麸皮100 g煮沸30 min,浸提，取汁加入PDA中；③加盐PDA培养基：PDA中加入MgSO 4·7H2O 0.5 g/L，CaCl 20.1 g/L，KH2PO 41.0 g/L，FeSO 4 0.1 g/L，（NH 4） 2SO 43.0 g/L。

斑玉蕈液体菌种培养条件及搔菌时间的筛选斑玉蕈（真姬菇）；液体菌种；最佳培养基；摇瓶培养；搔菌斑玉蕈（Hypsizigus marmoreus）又名真姬菇、蟹味菇、海鲜菇，隶属于伞菌目（Agaricales），白蘑科（Tricholomataceae），玉蕈属（Hypsizigus），是一种极具发展前景的珍稀食用菌[1]。

它含有丰富的蛋白质、氨基酸和维生素，具有高蛋白、低脂肪、低热量的特点，近年来深受消费者青睐[2]。

斑玉蕈是目前生长周期最长的工厂化食用菌品种，利用传统的固体菌种生产工艺，生产周期长，生产环节多，周期长、污染不易控制[3]。

在香菇、黑木耳、金针菇、糙皮侧耳的工厂化生产中已有有采用液体菌种接种的报道[4]，液体菌种接种，菌丝球数量多、萌发点多、生长速度快、不宜污染、周期短、成本低、适宜工厂化栽培[5]。

目前已有一些关于斑玉蕈液体菌种培养基筛选的相关报道[59]，在这些研究基础上笔者通过摇瓶培养，探寻斑玉蕈液体菌种培养的最佳条件，并通过栽培试验考察了不同搔菌时间对子实体产量的影响，以期为采用液体菌种工厂化栽培斑玉蕈提供理论依据。

1材料与方法1.1菌种斑玉蕈菌种（H. marmoreus）XF1由上海丰科生物科技股份有限公司提供。

1.2培养基母种培养基：PDA培养基。

摇瓶培养基配方1：2%蔗糖，0.2%麸皮，0.15% KH ？PO4，0.05% MgSO4；配方2：2%蔗糖，0.2%酵母膏，0.20% KH2PO4，0.10% MgSO4；配方3：2%蔗糖，0.2%蛋白胨，0.30% KH2PO4，0.10% MgSO4；配方4：2%红糖，0.2%麸皮，0.20% KH2PO4，0.10% MgSO4；配方5∶2%红糖，0.2%酵母膏，0.30% KH2PO4，0.10% MgSO4；配方6：2%红糖，0.2%蛋白胨，0.15% KH2PO4，0.05% MgSO4；配方7：2%葡萄糖，0.2%麸皮，0.30% KH2PO4，0.10% MgSO4；配方8：2%葡萄糖，0.2%酵母膏，0.15% KH2PO4，0.05% MgSO4；配方9：2%葡萄糖，0.2%蛋白胨，0.20% KH2PO4，0.10% MgSO4。

真姬菇液体培养用菌种及其营养因子筛选
王萍;师俊玲
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2008(034)003
【摘要】以菌体生长速度和多糖产量为依据,从5株真姬菇菌种中筛选出1株在液体培养中生长良好、多糖产量高的菌株,用于营养条件优化,并分析了各菌株在液体培养中的生长与多糖产生特点.采用Plackett-Burman试验设计,对影响真姬菇生长及产多糖的相关因子进行了筛选.在培养过程中,所有菌株均呈Logistic生长,胞内多糖和胞外多糖均呈先上升后下降的趋势,在菌体的对数生长期达到蜂值.菌株ZJ-029的生长速度和多糖产量最大.在11种营养因子中,葡萄糖、麦芽糖、玉米淀粉和豆粕粉对真姬菇菌丝生长有显著影响;葡萄糖、麦芽糖和MgSO4对胞外多糖产量有显著影响;葡萄糖、玉米淀粉和MgSO4对胞内多糖产量有显著影响.在PB设计的水平范围内,各因子对各指标的影响均为正效应.
【总页数】4页(P70-73)
【作者】王萍;师俊玲
【作者单位】西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌,712100
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.真姬菇液体菌种培养基筛选和摇瓶发酵条件的研究 [J], 王丽娟;刘林德;卜庆梅;王爱云;王淑芳
2.红菇菌丝体液体培养营养因子的筛选 [J], 张斌;周再知;陈羽;梁坤南;余雪标
3.香菇液体菌种培养基筛选及适宜接种期试验初报 [J], 陈文杰
4.野生鸡腿菇固体与液体菌种培养基筛选试验 [J], 张秀伟;曹家洪;蔡甫格;杨建华
5.杏鲍菇液体菌种培养基的筛选及培养条件的探讨 [J], 马瑞霞;刘慧
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